专利名称：：一种中药组合物及其制备方法
技术领域：
：本发明属于中药制药领域，具体涉及一种中药组合物及其制备方法。该中药组合物具有消炎、镇痛或抗血栓作用。
背景技术：
：黄芪最早为豆科植物膜荚黄"^^yfr"ga/"swew6m"acew(Fisch.)Bge.和蒙古黄l^4wrag"/wwew6r""a"wj(Fisch.)Bge.var.wo"g/2o//cws(Bge.)Hsiao的干燥根，是健脾益气、固表利尿、脱毒排脓、敛疮生肌的要药，其主要活性成分是黄芪皂苷和多糖，黄芪皂苷具有消炎、降血压、抗心肌缺血、中枢镇痛、镇静的作用；黄芪多糖具有增强机体免疫力、提高人体抗应激反应能力的作用。重楼为百合禾斗云南重楼户anipo(y-p/2少〃aSmithvar.yw"wa"e"5^(Franch.)Hand.-Mazz.和七叶一枝花尸arhpofy-p/^/aSmithvar.c/j/wew&(Franch.)Hara的干燥根茎。具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊之功效，其主要活性成分为薯蕷皂苷元，具有抗肿瘤、消炎、镇静、镇痛、止血等作用。三七为五加科植物尸fl"ox朋tog!Twe"g(Burk.)F.H.Chen的干燥根及根茎，具有镇痛、抗炎、滋补强壮等功效，其主要活性成分为三七皂苷、三七素等，为贵重药材。生品重于散瘀止血，熟品重于补血。老鹳草为牦牛儿科植物牦牛儿苗五ra^wmw印附/W、老鹳草Gemm'wmw7/or必Maxim.或野老鹳草Gemw'wwcara//"a""wL.的干燥地上部分，具有祛风除湿、通经络、清热解毒之功效，其主要活性成分为鞣质、黄酮类化合物。鞣质为一种具有沉淀蛋白质特性的水溶性多元酚类化合物，不仅具有常见的收敛、抗菌消炎、止血、驱虫、止泻、抗多种病原虫感染性疾病的作用，还具有抗肿瘤、抗突变、抗脂质过氧化、抗变态反应，抑制胃蛋白酶，预防应激性胃肠损伤，降压、降脂，改善肝肾功能等功用，并对中枢神经系统有镇静作用。发明人经长期探索研究，将黄芪、三七、老鹳草和重楼组合，制备得到本发明中药组合物，该组合用于消炎、镇痛或抗血栓具有显著的疗效。
发明内容本发明的目的是提供一种具有消炎、镇痛或抗血栓作用的中药组合物。本发明的另一目的是提供上述中药组合物的制备方法。本发明的目的是通过以下措施实现的一种中药组合物，其特征在于该组合物选用黄芪2-3重量份、三七1-2重量份、老鹳草0.8-1.2重量份和重楼1-2重量份。上述组合物优选采用黄芪2.0-2.5重量份、三七1.0-1.5重量份、老鹳草l重量份-、重楼1.5-2.0重量份。上述中药组合物的制备方法包括以下步骤a、将重楼、黄芪、三七用质量百分比浓度为70-卯％的乙醇提取；b、将上述醇提后所得药渣和老鹳草进行水提；c、将重楼、黄芪、三七醇提液浓縮成浸膏后干燥、粉碎成醇提取物干粉；水提液浓缩成浸膏后干燥，粉碎成水提物干粉；d、将水提物干粉、醇提取物干粉混合后即得本发明组合物。上述制备方法可具体按照以下步骤制备a、将重楼、黄芪、三七用质量百分比浓度为80%的乙醇8倍量提取2次，每次2h;b、醇提后所得药渣和老鹳草采用10倍量水提取2次，每次lh;c、将重楼、黄芪、三七醇提液浓縮成浸膏后干燥、粉碎成醇提取物干粉；水提液浓縮成浸膏后干燥，粉碎成水提物干粉；d、将水提物干粉、醇提取物千粉混合后即得本发明组合物。上述组合物可加入常规辅料制成药学上可接受的各种剂型。所述的组合物在制备消炎、镇痛或抗血栓药物中的应用。本发明中药组合物具体制备工艺流程如图1所示。本发明的有益效果本发明组合物，经过醇提、水提等工艺条件的优选，确定了其最佳工艺参数，找到了其有效部位，并且经过药效学实验，证明了其镇痛、抗炎等方面的有效部位，保证了所述的组合物在制备消炎、镇痛或抗血栓药物中的应用。本工艺中针对不同的原料采用不同的制备工艺，使各原料的有效成分充分提取出来，增加了药效，具体体现在以下几个方面(一)醇提工艺研究1、正交试验安排与结果通过预实验确定提取因素水平，采用L9(3"正交试验安排表，进行正交试验并测定结果，以干膏得率、黄芪甲苷含量、重楼皂苷I含量及三七皂苷R!含量为指标，以综合评分为评价指标确定最佳工艺。表l醇提正交实验因素水平表<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>2、结果分析以干膏重、黄芪甲苷含量、重楼皂苷I含量、三七皂苷R!含量为指标，分别选取最高者作为100分，其余按公式计算得分yi'=100—最高值+》，然后对三个指标赋与不同的权重。结合生产实际要求分别赋予干膏重、重楼皂苷I、三七皂苷R,权重系数分别为0.2，黄芪甲甘权重系数为0.4，由极差分析可知，各因素对该指标的影响大小排列为D〉C〉B〉A，均无显著性差异，D因素的水平优劣排列如下3>2>1，其中1和3水平具显著性差异，1和2，2和3水平无显著性差异。C因素的水平优劣排列如下2>3>1,各水平间均无显著性差异。B因素的水平优劣排列如下2>3>1，各水平间均无显著性差异。A因素的水平优劣排列如下2>1>3,各水平间均无显著性差异。以综合评分为指标的工艺为A2B2C2D3，从生产成本耗时等方面考虑，确定最佳工艺条件为A2B2C3D2，g卩乙醇质量百分浓度80%,重楼、黄芪和三七药材重量的8倍量，提取2次，每次2h。(二)水提工艺研究1、正交实验设计与结果采用L9(3"正交试验安排表，进行正交试验并测定结果，以所得干膏得率、氨基酸含量(相对于牛磺酸的含量)为指标，以综合评分为评价指标确定最佳工艺。表2正交试验因素水平表因素水平加水倍量提取时间提取次数(A)(B)(c)18倍lh1次210倍1.5h2次312倍2h3次52、正交实验结果优化所得的最佳工艺A2B,C2。醇提后所得药渣和老鹳草药材重量的IO倍量水，提取2次，每次lh。(三)药效实验研究研究处方镇痛、抗炎和抗凝血几个方面的作用，验证其与临床主治有关的药效学作用，并验证新工艺制剂的有效性。1、实验动物昆明种小鼠(中国人民解放军第二军医大学实验动物中心，雌雄各半)。2、试验药物本发明组合物(按照实施例1方法制备得到)(南京中山制药有限公司，各味药材系列提取物(南京中山制药有限公司自制，批号、代号见表3.1);羧甲基纤维素钠(中国医药集团上海化学试剂公司，批号F20020928);角叉菜胶(sigma公司，批号122kl444);氯化钠注射液(南京小营制药厂，批号:2004102603);阿司匹林(南京白敬宇制药有限责任公司，批号050611);芬必得(中美天津史克制药有限公司，批号05040122);其他试剂为分析纯。表3各味药材系列提取物药物名称代号性状三七醇提浸膏粉A组浅黄色粉末三七超细粉B组乳白色粉末老鹳草水提浸膏粉C组褐色粉末老鹳草醇提浸膏粉D组褐色粉末重楼+黄芪水提浸膏粉E组褐色粉末重楼+黄芪醇提药渣水提浸膏粉F组褐色粉末3、动物模型的建立与实验方法1)动物分组各药效实验根据受试药物分组，分别为对照组(0.5y。CMC-Na)、阳性药组(阿司匹林)、受试药物组(本发明组合物)。动物所用药物临床等效剂量以mg/kg-mg/i^转换因子换算，结合实际，人、小鼠体重分别以50kg、20g计，按体表面积折算成小鼠等效用量为1.27g/kg。2)小鼠醋酸扭体法镇痛试验取健康昆明小鼠，按体重随机分组，根据本发明组合物临床生药用量，分别按组给予阳性药(布洛芬，给药量:100mg/kg)、空白(0.5。/。CMC-Na,给药量为0.3ml/10g)、各味药材系列提取物、本发明组合物(给药量为1.27g/kg),每天给药一次，连续给药12天。末次给药前禁食12小时，然后给药45min后，腹腔注射0.6%醋酸溶液，0.2mL/只，观察小鼠15min内的扭体次数。3)角叉菜胶致大鼠足趾肿胀的抑制作用试验取健康昆明小鼠，按体重随机分组，根据本发明组合物临床生药用量，分别按组给予阳性药(阿司匹林，给药量200mg/kg)、空白(CMC-Na给药量2.5g/kg)、各味药材系列提取物、本发明组合物(给药量为1.27g/kg),每天给药一次，连续给药12天。末次给药前禁食12小时，给药1小时后，在小鼠的右后足皮下注射in/。角叉菜胶0.03mL,4h后分别剪下左右足称重，计算肿胀度。然后致炎足充分剪碎,于2mL生理盐水中浸泡12小时，3000r/min离心5min，取上清液以备测定前列腺素2(PGE2)含量(PGE2含量以吸光度表示，并换算为单位足重的含量)。肿胀度=(致炎足重-正常足重^100%+正常足重4)二甲苯致小鼠耳肿胀的抑制作用试验取健康昆明小鼠，按体重随机分组，连续灌胃给药6天，禁食12小时过夜，第7天再给药一次，l小时后，在小鼠右耳的前后两面均匀涂布二甲苯0.05mL，左耳不做任何处理。各组分别于致炎后60分钟脱颈椎处死小鼠，剪下双耳用7mm直径打孔器分别在双耳相同部位打下圆耳片,电子天平称质量。计算肿胀度及肿胀抑制率，比较给药组与对照组差异情况，进行t检验。计算公式为肿胀度(11^)=右耳片质量(mg)-左耳片质量(mg)肿胀抑制率=(对照组肿胀度-给药组肿胀度)+对照组肿胀度乂100%。5)毛细管法测定小鼠凝血时间试验取健康昆明小鼠，按体重随机分组，根据本发明组合物临床生药用量，分别按组给予阳性药(阿司匹林，给药量36mg/kg)、空白(0.5。/。CMC-Na,给药量为0.3mL/10g)、各味药材系列提取物、本发明组合物(给药量为1.27g/kg),每天给药一次，连续给药12天。末次给药前禁食12小时，然后给药后50分钟眼球取血，用毛细管法测量凝血时间。4、预试验结果及分析1)各味药材系列提取物的醋酸扭体镇痛试验实验结果试验结果以15min内扭体反应次数表示，统计学检验采用组间t检验，结果见表4。表4各味药材系列提取物醋酸扭体镇痛试验实验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注**:PO.01;与对照组比较(t检验)。实验结果表明，D组小鼠扭体反应数与对照组比较无显著差异(P>0.05);其余各组均与对照组比较有极显著差异(PO.Ol)。2)各味药材系列提取物的角叉菜胶致小鼠足趾肿胀的抑制作用试验结果试验结果以肿胀度(％)表示，统计学检验采用组间t检验，结果见表5。表5各味药材系列提取物的角叉菜胶致小鼠足趾肿胀的抑制作用试验结果(生药量g/kg)Jf土sz)注*:<0.05**:P<0.01;与对照组比较(t检验)。试验结果表明，B组的角叉菜胶足趾肿胀的抑制作用与对照组比较有极显著差异(PO.Ol)，C组、D组、E组、F组的角叉菜胶足趾肿胀的抑制作用与对照组比较有显著差异(P<0.05)，A组的角叉菜胶足趾肿胀的抑制作用与对照组比较无显著差异。3)各味药材系列提取物的二甲苯致小鼠耳肿胀的抑制作用试验试验结果以肿胀度(％)表示，统计学检验采用组间t检验，结果见表6。表6各味药材系列提取物对二甲苯致小鼠耳肿胀的抑制作用试验结果(生药量g/kg)义土SZ)注*:P<0.05，**:P<0.01;与对照组比较(t检验)104.9±1.7**1011.5±3.8**1012.1±2.4**1020.1±5.1109.2±2.2**108.3±1.9**对照组——1022.3±7.60.421019.6±5.30.421010.2±2.4**0.341016.3±4.5*0.341015.9±3.7*0.51016.0±3.9*0.51015.6±5.1*对照组——10125.6±48.30.421098.6±35.20.421035.2±21.0**0.341078.2±29.5*0.3410112.3±26.70.51035.1±13.8**0.51048.8±22.4**2244cicJcJo5<doi组组组组组组ABcDEF组组组组组组ABcDEF组组组组组组ABcDEF结果表明，B组、E组和F组的耳肿胀度与对照组比较有极显著差异(PO.Ol)，C组的耳肿胀度与对照组比较有显著差异(PO.05),A组和D组的耳肿胀度与对照组比较无显著差异(P>0.05)。4)各味药材系列提取物的毛细管法测定小鼠凝血时间试验结果实验结果以凝血时间表示，结果见表7。表7各味药材系列提取物毛细管法测定小鼠凝血时间试验结果组别给药量(生药量动物数__'g/kg)_凝血时间s1±幼对照组——10.0.42100.42100.34100.34100.5100.51047.6±19.560.8±34.776.8±27.1*112.1±37.2**56.8±26.4143.2±40.3**101.2±37.5**注*:PO.05,**:PO.01;与对照组比较(t检验)结果表明，C组、E组和F组的凝血时间与对照组比较有极显著差异(PO.Ol)，B组的凝血时间与对照组比较有显著差异(P<0.05)，而其余各组的凝血时间与对照组比较无显著差异(P>0.05)。5、本发明组合物药效验证实验结果1)醋酸扭体法小鼠镇痛试验试验结果以15min内扭体反应次数为指标，统计学采用组间t检验，结果见表8。表8本发明组合物醋酸扭体法小鼠镇痛试验实验结果组别给药量(生药量g/kg)动物数扭体反应次数对照组1022.1±2.3布洛芬组0.11010.2±4.3**本发明组合物组4.651015.6±3.5**注:**:PO.01,与对照组比较(t检验)；结果表明，布洛芬、本发明组合物的小鼠扭体反应数与对照组比较均有显著差异(PO.Ol)。)角叉菜胶致小鼠足趾肿胀的抑制作用试验结果实验结果以肿胀度表示，结果见表9。表9本发明组合物对角叉菜胶致小鼠足趾肿胀的抑制作用实验结果组组组组组组ABcDEF药物(生药量g/kg)动物数-角叉菜胶致炎试验(7±5￡))足肿胀度(％)PGE2(A/g)1.125±0.1670.745±0.129"0.712±0.058**对照组一1021.4±5.1阿司匹林0.21010.1士3.4**本发明组合物组4.651011.2±1.3**注**:PO.01;与对照组比较(t检验)；结果表明，阿司匹林、本发明组合物的角叉菜胶足趾肿胀的抑制作用与对照组比较有极显著差异(P<0.01)。3)毛细管法测定小鼠凝血时间试验结果实验结果以凝血时间表示，结果见表IO。一表10本发明组合物毛细管法测定小鼠凝血时间试验结果药物给药剂量(生药量g/kg)动物数凝血时间(s)I士SD凝血时间延长率(％)对照组—1071.3±25.2一阿司匹林组0.03610139.7±38.7**96.5本发明组合物组4.651052.4±16.5**109.3注"PO.Ol，与对照组比较(t检验)；药效筛选实验结果表明，重楼黄芪醇提物及其药渣的水提物、三七超细粉、老鹳草水提物在抗炎、镇痛、抗凝血方面均有显著效果；三七醇提物有镇痛作用；老鹳草醇提物在脚叉菜胶致炎试验上有明显效果。通过药效筛选试验，明确或验证了黄芪、重楼、三七、老鹳草的药用部位及药理作用，可用于制备消炎、镇痛或抗血栓的药物，具有显著疗效。图1为本发明组合物制备工艺流程图。具体实施例方式实施例l配方-黄芪200g、三七100g、老鹳草100g、重楼150g;制备工艺1、醇提将重楼、黄芪、三七加入质量百分比浓度为80%乙醇，用量为重楼、黄芪、三七重量的8倍量，提取2次，每次2h;2、水提醇提后所得药渣和老鹳草采用药渣和老鹳草重量的10倍量水提取2次，每10次lh;3、混合、干燥、粉碎将重楼、黄芪、三七醇提液浓缩成浸膏后60'C真空干燥、粉碎成120目干粉；水提液浓縮成浸膏后60'C真空干燥，粉碎成120目干粉，备用；4、制粒将水提物干粉、醇提取物干粉混合后制成颗粒，再填充胶囊。实施例2配方-黄芪250g、三七150g、老鹳草100g、重楼200g;制备方法'1、醇提将重楼、黄芪、三七加入70%乙醇6倍量提取3次，每次1.5h;2、水提醇提后所得药渣和老鹳草采用8倍量水提取3次，每次1.5h;3、混合、干燥、粉碎将重楼、黄芪、三七醇提液浓縮成浸膏后6(TC真空干燥、粉碎成120目干粉；水提液浓缩成浸膏后60'C真空干燥，粉碎成120目干粉，备用；4、制粒将水提物干粉和醇提取物干粉混合后制成颗粒，再压片。实施例3配方黄芪225g、三七125g、老鹳草80g、重楼175g;制备方法1、醇提将重楼、黄芪、三七加入卯％乙醇10倍量提取1次，每次lh;2、水提醇提后所得药渣和老鹳草采用12倍量水提取1次，每次lh;3、混合、干燥、粉碎将重楼、黄芪、三七醇提液浓縮成浸膏后60'C真空干燥、粉碎成120目干粉；水提液浓缩成浸膏后6(TC真空干燥，粉碎成120目干粉，备用；4、将水提物干粉、醇提取物干粉混合后制成口服液。本发明组合物在制备消炎、镇痛或抗血栓药物中应用。权利要求1、一种中药组合物，其特征在于该组合物选用黄芪2-3重量份、三七1-2重量份、老鹳草0.8-1.2重量份和重楼1-2重量份。2、根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于该组合物选用黄芪2.0-2.5重量份、三七1.0-1.5重量份、老鹳草1重量份和重楼1.5-2.0重量份。3、一种中药组合物的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤a、将重楼、黄芪、三七用质量百分比浓度为70-90%的乙醇提取；b、将上述醇提后所得药渣和老鹳草进行水提；c、将重楼、黄芪、三七醇提液浓縮成浸膏后干燥、粉碎成醇提取物干粉水提液浓縮成浸膏后干燥，粉碎成水提物干粉；d、将水提物干粉、醇提取物干粉混合即得本发明组合物。4、根据权利要求3所述的中药组合物的制备方法，其特征在于该方法具体按照以下步骤制备a、将重楼、黄芪、三七用质量百分比浓度为80%的乙醇8倍量提取2次，每次2h;b、醇提后所得药渣和老鹳草采用10倍量水提取2次，每次lh:c、将重楼、黄芪、三七醇提液浓縮成浸膏后干燥、粉碎成醇提取物干粉；水提液浓縮成浸膏后干燥，粉碎成水提物干粉；d、将水提物干粉、醇提取物干粉混合即得本发明组合物。5、权利要求1所述的组合物在制备消炎、镇痛或抗血栓药物中的应用。全文摘要本发明公开了一种中药组合物，该组合物选用黄芪2-3重量份、三七1-2重量份、老鹳草0.8-1.2重量份和重楼1-2重量份组成。该组合物的制备方法是将重楼、黄芪、三七用质量百分比浓度为70-90％的乙醇提取后，将醇提后所得药渣和老鹳草进行水提，再将重楼、黄芪、三七醇提液浓缩成浸膏后干燥、粉碎成醇提取物干粉，水提液浓缩成浸膏后干燥、粉碎成水提物干粉，最后将水提物干粉、醇提取物干粉混合即得。本发明组合物可用于制备消炎、镇痛或抗血栓的药物，该药物具有显著疗效。文档编号A61K36/896GK101642522SQ20091018453公开日2010年2月10日申请日期2009年8月28日优先权日2009年8月28日发明者付宝慧,徐云辉,濮存海,波王,赵开军,磊陈申请人:南京中山制药有限公司