专利名称：静脉注射用aca亚微乳剂及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种抗癌药物静脉注射用ACA亚微乳剂的制备方法及其质量标准的建立和体内外抗肿瘤作用。
背景技术：
1，-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯(1，-Acetoxychavicol acetate，ACA)是一种从姜科植物大高良姜的根茎中提取分离而得到的小分子化合物。是一种具有独特辛辣感觉的物质， 有抗肿瘤、抗炎、抗氧化、治疗胃溃疡、抗菌和抗艾滋病毒等生物活性。ACA作为一种食品添加剂，最近已经被应用在饮食和护理品行业中。因此，具有很高的药用价值，但是它在水溶液中不能稳定存在，会发生水解和异构化反应，使其应用受到限制。国内对ACA研究仅见少数有关其提取及结构确证、活性初筛、以及抗艾滋病作用方面的研究报道，鲜有体内外抗肿瘤作用的研究报道。国外研究中，Ito K等发现， ACA通过Caspase-8活化、NF-κ B失活和下调抗凋亡蛋白诱导相关的凋亡，显著抑制体内和体外多发性骨髓瘤细胞的生长(Ito K, NakazatoT, MurakamiA, etal. Induction of apoptosis in human myeloid leukemic cells by 1 ' -acetoxychavicol acetate through a mitochondrial and Fas-mediated dual mechanism[J]. Clin CancerRes, 2004，10 (6): 2120-2130)。Cheryl T. Campbell 等研究发现 ACA 体外诱导人乳腺癌细胞凋亡，然抗氧化剂可阻断ACA诱导的细胞凋亡，由此提示ACA具有以细胞凋亡通路为分子靶点的抗肿瘤作用(Cheryl T Campbell, Misty Prince, Greg M Landry, etal. Pro-apoptotic effects of 1 ' -acetoxychavicol acetate in human breast carcinoma cells [J], Toxicology Letters, 2007，3 (28) : 151-160)。ACA 对多种肿瘤的增殖和生长有明显的抑制作用，具有广谱抗肿瘤效果且没有明显的副作用。但其在水溶液中不稳定， 易发生水解和异构化反应生成另外三种产物，导致疗效下降，因而限制了它的使用。ACA的制剂尤其是其静脉用亚微乳剂及抗肿瘤作用的研究国内外尚无任何报道。亚微乳作为一种新型药物传递系统，具有保护脂溶性药物、提高药物稳定性、延长药物作用时间、靶向性好、副作用少等特点，具有较好的应用前景。
发明内容
本发明的目的在于克服现有的ACA水溶液不稳定，限制其制剂发展的问题，提供一种新的静脉注射用ACA亚微乳剂，该亚微乳剂可直接用于静脉注射，具有良好的药物稳定性及器官靶向性和缓控释特性。提供一种静脉注射用ACA亚微乳剂及其制备方法和应用。本发明的目的是通过以下技术方案实现的
本发明的静脉注射用ACA亚微乳剂，每毫升亚微乳中含有ACA 0. 8^5. 5mg，注射用植物油5(T250mg,乳化剂8 2%ig，助乳化剂l(T30mg，稳定剂0^3mg,维生素Elmg,甘油22. 5mg， 无水乙醇0. 8-2mL。
本发明的亚微乳分散相的平均粒径为16(Tl80nm。所述注射用植物油为选自大豆油、蓖麻油、茶油、麻油、红花油、棉籽油、橄榄油中的一种或多种的组合。所述的乳化剂选自蛋黄卵磷脂、大豆磷脂、氢化大豆磷脂、合成磷脂中的一种或多种的组合。所述的助乳化剂选自泊洛沙姆、聚乙二醇硬脂酸酯、胆固醇、壳聚糖中的一种或多种组合。所述的稳定剂为油酸或油酸钠或它们的混合物。本发明的的静脉注射用ACA亚微乳剂的制备方法，该方法包括以下步骤
①油相的制备按处方量称取ACA、乳化剂、稳定剂、维生素E以及必要的注射用油，用适量的乙醇溶解，混合后在3(T45° C减压旋转蒸发除去有机溶剂，加热到55、5° C，搅拌均勻，制成油相；
②水相的制备在55、5°C条件下，将助乳化剂、甘油加入到注射用水中，搅拌均勻， 制成水相；
、ACA初乳的制备保证在不断搅拌的前提下，将制得的油相和水相在55、5° C下混合，并快速搅拌，定容，在勻质速度600(Tl2000rpm下勻质2 15min，制得ACA初乳；
*夂夂乳的制备将初乳经探头超声乳化或高压微射乳化，调节PH值Γ9，制得ACA终
乳；
Φ终乳经过0. 22 μ m微孔滤膜过滤除菌得到静脉注射用ACA亚微乳剂。步骤(1)减压旋转蒸发除去有机溶剂步骤中，压力在O.Tlkpa之间，减压蒸发的时间控制在0. 5^2h之间。所述探头超声乳化步骤中功率为20(T400w，超声514次；所述高压微射乳化步骤中，压力300(Tl8000PSI，勻质6 20次。静脉注射用ACA亚微乳剂在抗肿瘤方面的应用。由于采用上述技术方案，本发明提供的静脉注射用ACA亚微乳剂载药量大、稳定性好、可制备成含有不同ACA含量的乳剂；同时建立的ACA含量测定方法灵敏度高、专属性强，可有效分离ACA及其降解产物；拟定了该药物制剂的质量标准草案。该乳剂为血管内给药制剂，与原料药比较未见毒性的增加，提高了生物利用度，具有明显的缓释作用；与原料药比较体内外抗肿瘤作用得到明显的增强。该乳剂制备工艺简单易行、质量可控，适用于放大制备和工业化生产。通过上述技术方案的实施为抗肿瘤创新药临床前研究奠定了基础，也可利用该技术为其他创新药研究提供思路。
图1 ACA亚微乳和ACA原料药溶液的肿瘤抑制率(％)。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明作详细说明，但本发明的保护范围不局限于此。实施例11. 1制备静脉注射用ACA亚微乳的主要原料
权利要求
1.一种静脉注射用ACA亚微乳剂，其特征在于每毫升亚微乳中含有ACA 0. 8^5. 5mg, 注射用植物油5(T250mg，乳化剂8 2%ig，助乳化剂l(T30mg，稳定剂Olmg，维生素Elmg，甘油22. 5mg，无水乙醇0. 8-2mL。
2.根据权利要求1所述的静脉注射用ACA亚微乳，其特征在于亚微乳分散相的平均粒径160 180nm。
3.根据权利要求1或2所述的静脉注射用ACA亚微乳剂，其特征在于所述注射用植物油为选自大豆油、蓖麻油、茶油、麻油、红花油、棉籽油、橄榄油中的一种或多种的组合。
4.根据权利3所述的静脉注射用ACA亚微乳剂，其特征在于所述的乳化剂选自蛋黄卵磷脂、大豆磷脂、氢化大豆磷脂、合成磷脂中的一种或多种的组合。
5.根据权利要求1或2或4所述的静脉注射用ACA亚微乳剂，其特征在于所述的助乳化剂选自泊洛沙姆、聚乙二醇硬脂酸酯、胆固醇、壳聚糖中的一种或多种组合。
6.根据权利要求5所述的静脉注射用ACA亚微乳，其特征在于所述的稳定剂为油酸或油酸钠或它们的混合物。
7.权利要求1所述的静脉注射用ACA亚微乳剂的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤①油相的制备按处方量称取ACA、乳化剂、稳定剂、维生素E以及必要的注射用油，用适量的乙醇溶解，混合后在3(T45° C减压旋转蒸发除去有机溶剂，加热到55、5° C，搅拌均勻，制成油相；②水相的制备在55、5°C条件下，将助乳化剂、甘油加入到注射用水中，搅拌均勻， 制成水相；③ACA初乳的制备保证在不断搅拌的前提下，将制得的油相和水相在55、5°C下混合，并快速搅拌，定容，在勻质速度600(Tl2000rpm下勻质2 15min，制得ACA初乳；④终乳的制备将初乳经探头超声乳化或高压微射乳化，调节PH值Γ9，制得ACA终乳；⑤终乳经过0.22 μ m微孔滤膜过滤除菌得到静脉注射用ACA亚微乳剂。
8.根据权利要求7所述的静脉注射用ACA亚微乳剂的制备方法，其特征在于步骤(1) 减压旋转蒸发除去有机溶剂步骤中，压力在0. rikpa之间，减压蒸发的时间控制在0. 5^2h 之间。
9.根据权利要求7所述的静脉注射用ACA亚微乳剂的制备方法，其特征在于所述探头超声乳化步骤中功率为20(T400w，超声514次；所述高压微射乳化步骤中，压力 3000 18000PSI，勻质 6 20 次。
10.权利要求1所述的静脉注射用ACA亚微乳剂在抗肿瘤方面的应用。
全文摘要
本发明涉及一种静脉注射用ACA亚微乳剂及其制备方法和应用，属于医药技术领域。该亚微乳是用注射用油、乳化剂、助乳化剂、稳定剂、抗氧剂、等渗调节剂ACA制备的亚微乳。ACA的重量体积浓度范围为0.8~5.5mg/mL。本亚微乳剂粒径均匀，平均粒径为160~180nm。并对其稳定性进行了考察；拟定了质量标准草案；对药物制剂进行了与原料药比较的体内外药效学研究。本发明具有制备工艺简单、载药量和稳定性高、质量可控、适合工业化生产等优点。制备的静脉注射用ACA亚微乳可较好的提高药物溶解性，与原料药比较具有明显的缓控释和增强的抗肿瘤作用，并未见到毒性作用增加。
文档编号A61P35/00GK102198096SQ20111014034
公开日2011年9月28日 申请日期2011年5月27日 优先权日2011年5月27日
发明者何美霞, 华海婴, 叶启霞, 姜玉军, 杨婷, 赵永星, 赵阳 申请人:河南省医药科学研究院