专利名称：一种抗大肠癌的复方三根提取物口服靶向制剂及制备方法
技术领域：
本发明涉及医药制造领域，具体涉及一种复方中药提取物抗大肠癌口服靶向制剂及其制备方法。
背景技术：
大肠癌是高危害的消化道恶性肿瘤，发病率已占到常见肿瘤的第四位。在北京、上海等大城市的大肠癌年发病率已达到或超过了西方发达国家的平均水平，大肠癌成为仅次于肺癌的第二位高发恶性肿瘤。近年来，大肠癌发病率上升趋势十分明显，据统计，我国发病的上升速度远远超过2 %的国际水平，年发病增长率达到4. 2 %，直逼5 %，每年新发病例高达40万，这其中很多都是30 40岁的中年人。手术治疗是经典有效的治疗方法，但手术造成患者生活质量的严重降低。化疗药物毒副作用十分显著，中药治疗大肠癌具有独特的优势。中医认为大肠癌多属“肠覃”、“肠癖”等范畴，其病因多为饮食不节，恣食肥甘、燥热或不洁之物，导致脾不健运，湿热蕴毒下迫大肠，热伤肠络，毒邪成痈而逐渐发生癌瘤。病因病机与“脾虚”、“湿毒内阻”关系最大，故抓住疾病本质，采用清热利湿、解毒化瘀、健脾益肾治疗方法，具有明显治疗效果。复方三根方剂是由虎杖根、藤梨根、水杨梅根组成的方剂， 主治大肠癌、胃癌等消化道肿瘤。CN1679795A专利报道了复方三根有效组分的制备工艺。中药有效组分多为多酚类、糖苷类，在口服后易分解破坏。复方三根的有效组分为大黄素、多酚类(叶勇等，水杨梅根提取物的体外抗肿瘤活性，浙江中医药大学学报，2007， 31 (3) :372-373)，易被酶解，或在碱性条件下氧化。在口服给药后作用时间短，达不到靶位即失效。中药提取物的靶向制剂只有较少报道，一些专利如公开号CN148019;3B， CN1634^9B，CN101991720A只是采用靶向材料包衣形成片剂、丸剂或胶囊，尚无脂质体外再进行靶向材料包衣的报道，也无复方中药提取物靶向制剂报道。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种复方中药提取物的口服大肠癌靶向制剂及其制备方法。该方法是针对复方中药三根提取物，提出先行制备脂质体， 再进行多种靶向材料包衣，可实现肠组织部位释放，并被大肠癌细胞直接摄取，发挥更好的作用效果。本发明的目的通过下述技术方案实现一种抗大肠癌的复方三根提取物口服靶向制剂的制备方法，包括如下步骤(1)将复方三根提取物与磷脂按重量比1 1 3混合，加入到乙酸乙酯或氯仿或正丁醇或乙醇中，60 80°C加热回流1 2小时，至溶液澄清；再将溶液60 80°C真空浓缩并干燥1 5小时，即得复方三根提取物磷脂复合物；(2)将步骤(1)制得的复方三根提取物磷脂复合物，与磷脂、胆固醇分别按重量比10 35%，30 65%，15 40%混合后，加入到乙酸乙酯或氯仿或正丁醇或乙醇中，30 60°C加热搅拌，至溶液澄清透明；再将溶液30 60°C真空浓缩至胶状物，加入pH4 10的磷酸缓冲液，充分水化后得初步脂质体；(3)向步骤( 制得的初步脂质体中按重量比加入5 20%的甘露醇或海藻酸或葡萄糖，充分溶解后，冷冻干燥，即得复方三根提取物脂质体；(4)将包衣材料、增塑剂、溶剂按重量百分比1 10%、0. 5 5%、85 98. 5%混合溶解制成流动性良好的包衣液；采用上述包衣液对复方三根提取物脂质体进行包衣，包衣增重10 20%，即制得靶向制剂。该靶向制剂是由内层脂质体结构与外层靶向包衣材料组成的双层结构。步骤(4)所述包衣材料为Eudragit S100、丙烯酸树脂III、羟丙甲基纤维素、乙基纤维素、果胶、瓜耳胶中的一种或几种。步骤(4)所述增塑剂为聚乙二醇，邻苯二甲酸二乙酯、柠檬酸三乙酯中的一种或几种。步骤(4)所述溶剂为丙酮、乙醇、异丙醇中的一种或几种。步骤(1)所述复方三根提取物的有效成分包括虎杖根、藤梨根和水杨梅根混合提取的大黄素及多酚化合物。所述复方三根提取物的制备方法取虎杖根、藤梨根、水杨梅根药材，按1 :1:1 质量混合，加入混合药材10倍量80%乙醇80°C加热回流提取2小时，过滤，滤渣加入混合药材5倍量80%乙醇80°C加热回流提取1小时，过滤，合并滤液60°C真空浓缩至原体积的 1/2，加入大孔树脂DlOl吸附12小时；取出大孔树脂用50%乙醇洗脱，洗脱液60°C真空浓缩并干燥3小时，得复方三根提取物。本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果(1)本发明以复方中药有效组分或成分为药物原料，制成靶向制剂，可以对靶位肿瘤实现多途径、多机理治疗作用。(2)本发明的靶向制剂，由内层脂质体和外层生物降解材料或时滞型包衣材料或 PH敏感材料包被而成，可在大肠部位释放，并被大肠癌细胞摄取。实现了特定组织和特定细胞双重靶向作用。(3)本发明的靶向制剂，克服中药成分不稳定、短效、弱效的缺点，增加了易受破坏的中药成分的稳定性和靶位浓度，直接发挥抗大肠癌的作用，提高了中药作用效果。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。复方三根提取物的制备取虎杖根、藤梨根、水杨梅根药材，按1 1 1称量 900g，加入^ig 80%乙醇80°C加热回流提取2小时，过滤，滤渣加入4. ^g 80%乙醇80°C 加热回流提取1小时，过滤，合并滤液60°C真空浓缩至原体积的1/2，加入Ikg大孔树脂 DlOl吸附12小时。取出大孔树脂用50%乙醇洗脱，洗脱液60°C真空浓缩并干燥3小时，得复方三根提取物130g。实施例1(1)复方三根提取物Ig与磷脂3g混合，加入乙酸乙酯50ml，60°C加热回流1小时，至溶液澄清。再将溶液60°C真空浓缩并干燥1小时，即得复方三根提取物磷脂复合物粉末 3. 8g。(2)将复方三根提取物磷脂复合物lg，与磷脂2. 5g、胆固醇1. 5g混合，加入乙酸乙酯50ml，40°C加热搅拌，至溶液澄清透明。再将溶液60°C真空浓缩至胶状物，加入pH4的磷酸缓冲液10ml，充分水化后得初步脂质体。(3)取初步脂质体10g，向其中加入Ig甘露醇，充分溶解后，冷冻干燥，得复方三根提取物脂质体冻干粉5. 7g。(4)取2g Eudragit S100、Ig聚乙二醇加入丙酮IOOg混合充分搅拌制得包衣液， 然后对复方三根提取物脂质体进行包衣，包衣增重20%。实施例2(1)复方三根提取物Ig与磷脂Ig混合，加入氯仿50ml，60°C加热回流2小时，至溶液澄清。再将溶液60°C真空浓缩并干燥3小时，即得复方三根提取物磷脂复合物粉末1. 7g。(2)将复方三根提取物磷脂复合物lg，与磷脂5g、胆固醇2g混合，加入氯仿50ml， 30°C搅拌，至溶液澄清透明。再将溶液50°C真空浓缩至胶状物，加入pHIO的磷酸缓冲液 50ml，充分水化后得初步脂质体。(3)向初步脂质体50g中加入2. 5g海藻酸，充分溶解后，冷冻干燥，得复方三根提取物脂质体冻干粉log。(4)取5g羟丙甲基纤维素、Ig邻苯二甲酸二乙酯加入乙醇IOOg混合充分搅拌。对复方三根提取物脂质体进行包衣，包衣增重15%。实施例3(1)复方三根提取物Ig与磷脂2g混合，加入正丁醇50ml，80°C加热回流2小时， 至溶液澄清。再将溶液80°C真空浓缩并干燥5小时，即得复方三根提取物磷脂复合物粉末 2. 5go(2)将复方三根提取物磷脂复合物lg，与磷脂2g、胆固醇2g混合，加入正丁醇 50ml，60°C搅拌，至溶液澄清透明。再将溶液60°C真空浓缩至胶状物，加入pH6的磷酸缓冲液10ml，充分水化后得初步脂质体。(3)向初步脂质体IOg中加入2g葡萄糖，充分溶解后，冷冻干燥，得复方三根提取物脂质体冻干粉6. 5g。(4)取IOg果胶、5g柠檬酸三乙酯加入异丙醇IOOg混合充分搅拌。对复方三根提取物脂质体进行包衣，包衣增重18%。实施例4(1)复方三根提取物Ig与磷脂1. 5g混合，加入乙醇50ml，70°C加热回流1小时， 至溶液澄清。再将溶液70°C真空浓缩并干燥2小时，即得复方三根提取物磷脂复合物粉末 2. 2go(2)将复方三根提取物磷脂复合物lg，与磷脂lg、胆固醇Ig混合，加入乙醇50ml， 50°C加热搅拌，至溶液澄清透明。再将溶液60°C真空浓缩至胶状物，加入pH7的磷酸缓冲液 10ml，充分水化后得初步脂质体。(3)向初步脂质体IOg中加入2g甘露醇，充分溶解后，冷冻干燥，得复方三根提取物脂质体冻干粉4. 6g。
(4)取8g丙烯酸树脂III、2g邻苯二甲酸二乙酯加入丙酮IOOg混合充分搅拌。对复方三根提取物脂质体进行包衣，包衣增重16%。实施例5(1)复方三根提取物Ig与磷脂2. 5g混合，加入氯仿50ml，60°C加热回流2小时， 至溶液澄清。再将溶液60°C真空浓缩并干燥3小时，即得复方三根提取物磷脂复合物粉末 3. 3g。(2)将复方三根提取物磷脂复合物lg，与磷脂3g、胆固醇Ig混合，加入氯仿50ml， 30°C搅拌，至溶液澄清透明。再将溶液50°C真空浓缩至胶状物，加入pH8的磷酸缓冲液 10ml，充分水化后得初步脂质体。(3)向初步脂质体IOg中加入1. 5g海藻酸，充分溶解后，冷冻干燥，得复方三根提取物脂质体冻干粉6. 2g。(4)取4g乙基纤维素、1. 5g聚乙二醇加入异丙醇IOOg混合充分搅拌。对复方三根提取物脂质体进行包衣，包衣增重13%。实施例6(1)复方三根提取物Ig与磷脂Ig混合，加入乙酸乙酯50ml，60°C加热回流1小时， 至溶液澄清。再将溶液60°C真空浓缩并干燥1小时，即得复方三根提取物磷脂复合物粉末 1. 5g。(2)将复方三根提取物磷脂复合物lg，与磷脂1. 5g、胆固醇0. 5g混合，加入乙酸乙酯50ml，40°C加热搅拌，至溶液澄清透明。再将溶液60°C真空浓缩至胶状物，加入pH5的磷酸缓冲液10ml，充分水化后得初步脂质体。(3)向初步脂质体IOg中加入2g葡萄糖，充分溶解后，冷冻干燥，得复方三根提取物脂质体冻干粉4. 5g。(4)取Ig瓜耳胶、Ig柠檬酸三乙酯加入乙醇IOOg混合充分搅拌。对复方三根提取物脂质体进行包衣，包衣增重10%。实施例7实施例1-6制得的复方三根提取物靶向制剂的释放度实验方法按照中国药典2010版二部附录》)释放度测定法，考察靶向制剂在人工胃液和肠液中的释放量，以溶出液中固形物量计。结果靶向制剂在人工胃液中2小时不释放，在pH7. 0人工肠液中2 3小时开始释放，5小时溶出度可达80 87%。结果见表一。这表明该制剂具有在大肠部位靶向释放的效果。表一复方三根提取物靶向制剂在人工肠液中的溶出度
权利要求
1.一种抗大肠癌的复方三根提取物口服靶向制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤(1)将复方三根提取物与磷脂按重量比1 1 3混合，加入到乙酸乙酯或氯仿或正丁醇或乙醇中，60 80°C加热回流1 2小时，至溶液澄清；再将溶液60 80°C真空浓缩并干燥1 5小时，即得复方三根提取物磷脂复合物；(2)将步骤(1)制得的复方三根提取物磷脂复合物，与磷脂、胆固醇分别按重量比10 ；35%，30 65%，15 40%混合后，加入到乙酸乙酯或氯仿或正丁醇或乙醇中，30 60°C 加热搅拌，至溶液澄清透明；再将溶液30 60°C真空浓缩至胶状物，加入pH4 10的磷酸缓冲液，充分水化后得初步脂质体；(3)向步骤( 制得的初步脂质体中按重量比加入5 20%的甘露醇或海藻酸或葡萄糖，充分溶解后，冷冻干燥，即得复方三根提取物脂质体；(4)将包衣材料、增塑剂、溶剂按重量百分比1 10%、0.5 5%、85 98. 5%混合溶解制成包衣液；采用上述包衣液对复方三根提取物脂质体进行包衣，包衣增重10 20%， 即制得靶向制剂。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述包衣材料为Eudragit S100、丙烯酸树脂III、羟丙甲基纤维素、乙基纤维素、果胶、瓜耳胶中的一种或几种。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述增塑剂为聚乙二醇，邻苯二甲酸二乙酯、柠檬酸三乙酯中的一种或几种。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述溶剂为丙酮、乙醇、异丙醇中的一种或几种。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述复方三根提取物的有效成分包括虎杖根、藤梨根和水杨梅根混合提取的大黄素及多酚化合物。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述复方三根提取物的制备方法 取虎杖根、藤梨根、水杨梅根药材，按1 1 1质量混合，加入混合药材10倍量80%乙醇 80°C加热回流提取2小时，过滤，滤渣加入混合药材5倍量80%乙醇80°C加热回流提取1 小时，过滤，合并滤液60°C真空浓缩至原体积的1/2，加入大孔树脂DlOl吸附12小时；取出大孔树脂用50%乙醇洗脱，洗脱液60°C真空浓缩并干燥3小时，得复方三根提取物。
7.根据权利要求1 6任意一项所述方法制备的靶向制剂，其特征在于，它是由内层脂质体结构与外层靶向包衣材料组成的双层结构。
全文摘要
本发明公开了一种抗大肠癌的复方三根提取物口服靶向制剂及其制备方法，即先将药物与磷脂复合形成脂质体，再采用大肠菌群生物降解材料，或时滞型包衣材料，或pH敏感型包衣材料，对含药脂质体包衣，即制得靶向制剂。该制剂在大肠部位释放脂质体，再被大肠癌细胞吸收，产生直接杀伤肿瘤作用。本发明采用特定组织和细胞双重定位靶向，提高了中药成分的靶位浓度和作用效果；该发明同时适用于易破坏的中药成分，提高其稳定性，克服其短效、弱效的缺点。
文档编号A61K9/127GK102335252SQ20111029649
公开日2012年2月1日 申请日期2011年9月28日 优先权日2011年9月28日
发明者叶勇, 罗月婷 申请人:华南理工大学