专利名称：一种从蜂花粉中提取辅酶q10的方法及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及化合物提取纯化领域，具体地说，涉及一种从蜂花粉中提取辅酶QlO 的方法及其应用。
背景技术：
蜂花粉，是工蜂采集花粉时加上自己特殊的腺体分泌物、唾液和花蜜初步加工而成的花粉球，呈淡黄色或粟色，味微甜或微苦，略带腥味，被誉为“全能的营养食品”、“浓缩的天然药库”、“全能的营养库”、“内服的化妆品”、“浓缩的氨基酸”等，是“人类天然食品中的瑰宝”。作为重要的农产品，蜂花粉一直是保健品及化妆品的重要原料。对于蜂花粉中的活性成分的分析、研究、制备与提取，对于蜂产品的深加工，提高蜂产品的附加值，有着重要的意义。辅酶QlO是一种脂溶性抗氧化剂，辅酶QlO是人类生命不可缺少的重要元素之一， 能激活人体细胞和细胞能量的营养，具有提高人体免疫力、增强抗氧化、延缓衰老和增强人体活力等功能，医学上广泛用于心血管系统疾病。近年来，国内外广泛将其用于营养保健品及食品添加剂。尽管已经用化学合成法合成了辅酶Q10，已实现了工业化，产品成本低，价格适中。 但是使用半化学合成法生产的产品虽然在价格上有优势，但在使用上比用生物提取法生产的产品有较大的差距。原因在于生物提取法生产的是天然的、无机的产品，易于被人体吸收转化，而化学合成法生产的是人工化学合成的有机产品，生物活性极差，不易被人体吸收， 难以充分必挥辅酶QlO的药理作用。
发明内容
本发明的目的是提供一种从蜂花粉中提取辅酶QlO的方法。为了实现本发明目的，本发明的一种从蜂花粉中提取辅酶QlO的方法，其包括如下步骤将蜂花粉原料与有机溶剂按照质量体积比1 4 1 50混合；将混合液置于 60 80摄氏度的水浴中，并放在暗处，用超声波提取，所用超声频率为20 100kHz，超声功率大于等于300W ；随后将提取液浓缩至近固体物状，得蜂花粉辅酶QlO的粗提物。其中，所述超声频率优选为40kHz，功率优选为400W。其中，所述蜂花粉为新鲜的杏花花粉、油菜花粉、茶花花粉或其他杂花花粉。优选杏花花粉。辐照或热加工后的蜂花粉辅酶QlO的含量很低。所述有机溶剂为对辅酶QlO溶解良好的有机溶剂，优选无水乙醇。无水乙醇与传统的提取溶剂异丙醇、正己烷、甲醇等比，毒性低，成本小。所述超声次数为1次以上，每次不少于30min。优选1_2次，每次30-50min。所述蜂花粉原料在使用前需要研成粉末。所述提取液浓缩之前，加第一次有机溶剂1/3 2倍体积的相同有机溶剂重复提取一次。
所述粗提物还包括用氧化铝粉净化，其具体包括用有机溶剂溶解粗提物，之后将氧化铝粉平铺于滤纸中，过滤净化脂肪及色素。所用有机溶剂优选无水乙醇，用量为能够溶出粗提物即可。所用有机溶剂与氧化铝粉的比例为1 5 1 10 (v/m)，优选为有机溶剂 20ml需要加入氧化铝粉100g。净化后的混合液经旋转蒸发提取并浓缩后得到蜂花粉辅酶 QlO浓度大于30%的蜂花粉提取物。此物经制备液相净化，可以得到纯度大于96%天然辅酶 Q10。用上述方法提取的辅酶QlO也属于本发明的保护范围。所述蜂花粉辅酶QlO的粗提取物可以直接作为蜂花粉辅酶QlO胶囊的原料，与其他物质配伍制成相关的蜂产品保健品。本发明还提供了一种从蜂花粉中提取辅酶QlO的方法在制备含辅酶QlO的药品或保健品中的应用。本发明的效果本发明用简单的提取方法从自然物中提取辅酶Q10，建立了一种简单易行的提取方法，该方法快速，简单，无毒便于工业使用。该方法属于天然提取，完全保留天然辅酶QlO 生物活性，易被人体吸收，而且提取物中辅酶QlO的含量大于30%。提取的辅酶QlO可以作为化妆品的原料及保健食品的原料。由此外该方法也提高了蜂花粉的附加价值。
具体实施例方式下面结合实施例，对本发明的具体实施方式
作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。实施例1新鲜杏花花粉经冷冻研磨机快速研磨成细粉，称取IOOOg到烧杯中，加4000ml无水乙醇溶解；之后将混合液置于暗处，在70度的水浴中用超声波提取30min，超声频率为 40kHz，功率为400W;静止后，取上层乙醇溶液，加入2000ml无水乙醇重复提取一次，合并提取液，避光，减压蒸干，得到杏花花粉辅酶QlO的粗提物。分别取相同质量新鲜油菜花粉与茶花花粉经冷冻研磨机快速研磨成细粉，与上述提取方法相同，分别得到油菜与茶花花粉辅酶QlO的粗提物。用液相色谱测定，通过与辅酶QlO标准品比较，测定出杏花花粉粗提物辅酶QlO的含量为33. 3% (质量百分数)，油菜花粉粗提物辅酶QlO的含量为10.2%。茶花花粉的粗提物辅酶QlO的含量为9. 4%。相比之下，杏花花粉比油菜，茶花花粉的辅酶QlO要高出约 3倍。杏花花粉粗提物辅酶QlO经干燥与淀粉混合，作为原料，制成蜂花粉辅酶QlO软胶囊。此胶囊辅酶QlO的含量，每粒含有辅酶Q1025mg。实施例2新鲜杏花花粉经冷冻研磨机快速研磨成细粉，称取IOOOg到烧杯中，加4000ml无水乙醇溶解，置于暗处，在70度得水浴中用超声波提取30min，超声频率为40kHz，功率为 400W ；静止后，取上层乙醇溶液，加入2000ml无水乙醇重复提取一次，合并提取液，避光，减压蒸干，得到辅酶QlO的粗提取物；用适量50ml (能够溶出粗提物即可)无水乙醇溶解粗提物，之后将氧化铝粉500g置于滤纸中，将混合液流过，净化脂肪及色素，如果没有氧化铝
4粉，将得到粘性的溶液，色素及脂肪直接影响制备分析。接流出混合液；之后将混合液浓缩至20ml，用制备液相净化。提取条件，C18柱，流动相100%无水乙醇，波长275nm，流速 20ml/min,取8_10钟馏分，将馏分在暗处挥发，将样品在冷冻干燥机进一步干燥得到辅酶 QlO的参考物质，液相和质谱测定，该物质的辅酶QlO的含量大于96%，可以作为相关的标准品，或是纯度较高的辅酶QlO保健品原料。实施例3新鲜杏花花粉经冷冻研磨机快速研磨成细粉，称取IOOOg到烧杯中，加50L无水乙醇溶解；之后将混合液置于暗处，在80度的水浴中用超声波提取30min，超声频率为40kHz， 功率为400W ；静止后，取上层乙醇溶液，加入2000ml无水乙醇重复提取一次，合并提取液， 避光，减压蒸干，得到辅酶QlO的粗提物。用液相色谱测定，通过与辅酶QlO标准品比较，测定出粗提物辅酶QlO的含量为 32.8% (质量百分数)。实施例4 新鲜杏花花粉经冷冻研磨机快速研磨成细粉，称取IOOOg到烧杯中，加30L无水乙醇溶解；之后将混合液置于暗处，在60度的水浴中用超声波提取30min，超声频率为40kHz， 功率为300W ；静止后，取上层乙醇溶液，加入2000ml无水乙醇重复提取一次，合并提取液， 避光，减压蒸干，得到辅酶QlO的粗提物。用液相色谱测定，通过与辅酶QlO标准品比较，测定出粗提物辅酶QlO的含量为 29.2% (质量百分比)。实施例5实验方法同实施例1，用高效液相色谱分析分析20个不同种类的新鲜花粉，其中杏花花粉5个，油菜8个，茶花3个，杂花4个，辅酶QlO的平均含量，杏花花粉为162mg/kg， 油菜 45mg/kg，茶花 ^mg/kg，杂花 31mg/kg。其证明用该方法提取杏花花粉的辅酶QlO的含量明显高于其他油菜、茶花等花粉辅酶QlO的含量。实施例6用实验例1的方法，用10公斤杏花花粉作为原料，提取到含有32. 的辅酶QlO 的粗提物，冻干，得到原料。用橄榄油为溶剂，按1 4的比例，辅酶QlO原料80mg，橄榄油为320mg，用明胶制成蜂花粉辅酶QlO胶囊，每粒胶囊辅酶QlO的含量约为25mg。该产品保持了蜂花粉天然辅酶Q10，与橄榄油配伍可以进一步提高保健功效。虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
权利要求
1.一种从蜂花粉中提取辅酶Qio的方法，其包括如下步骤将蜂花粉原料与有机溶剂按照质量体积比1 4 1 50混合；将混合液置于60 80摄氏度的水浴中，并放在暗处，用超声波提取，所用超声频率为20 100kHz，超声功率大于等于300W ；随后将提取液浓缩至近固体物状，得蜂花粉辅酶QlO的粗提物。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述蜂花粉为新鲜的杏花花粉、油菜花粉、 茶花花粉或其他杂花花粉。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述有机溶剂为对辅酶QlO溶解良好的有机溶剂。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述有机溶剂为无水乙醇。
5.如权利要求1所述方法，其特征在于，所述超声次数为1次以上，每次不少于30min。
6.如权利要求1所述方法，其特征在于，所述蜂花粉原料在使用前需要研成粉末。
7.如权利要求1所述方法，其特征在于，所述提取液浓缩之前，加第一次有机溶剂 1/3 2倍体积的相同有机溶剂重复提取一次。
8.如权利要求1所述方法，其特征在于，所述粗提物还包括用氧化铝粉净化。
9.用权利要求1-8任意一项所述方法提取的辅酶Q10。
10.权利要求1-8任意一项所述方法在制备含辅酶QlO的药品或保健品中的应用。
全文摘要
本发明提供了一种从蜂花粉中提取辅酶Q10的方法，其包括如下步骤将蜂花粉原料与有机溶剂按照质量体积比1∶4～1∶50混合；将混合液置于60～80摄氏度的水浴中，并放在暗处，用超声波提取，所用超声频率为20～100kHz，超声功率大于等于300W；随后将提取液浓缩至近固体物状，得蜂花粉辅酶Q10的粗提物。本发明建立了一种简单易行的提取方法，该方法快速，简单，无毒便于工业使用。该方法属于天然提取，完全保留天然辅酶Q10生物活性，易被人体吸收，而且提取物中辅酶Q10的含量大于30％。提取的辅酶Q10可以作为化妆品的原料及保健食品的原料。由此外该方法也提高了蜂花粉的附加价值。
文档编号A61P39/06GK102503798SQ20111036432
公开日2012年6月20日 申请日期2011年11月16日 优先权日2011年11月16日
发明者吴黎明, 薛晓锋, 赵静, 陈本晶 申请人:中国农业科学院蜜蜂研究所