专利名称：天然植物中一个活性新成分的制备方法
技术领域：
本发明属于新化合物及其制备方法技术领域，具体为从红花芒毛苣苔中分离纯化的新化合物的制备方法。
背景技术：
天然药物是指自然界中存在的有药理活性的天然产物。随着社会的发展，人们越来越关注化学药品给人类自身健康及生活环境带来的负面影响；回归自然、保护环境已成为一种处理人类和环境关系的潮流思想。对天然药物的研究和开发顺势大力发展，天然药物成为极为重要的药物开发资源。我国拥有丰富的中药材资源，中医药发展前景仍然非常广阔，应大力发展中医药产业。当前，由于从化学合成物中筛选新药的难度越来越大、时间越来越长、投入越来越高，并且化学药物对人体的毒副作用，易产生抗药性和药源性疾病等弱点越来越明显，因此，许多国家转向了天然药物的研究、开发和利用，使其成为继化学药物、生物制剂、基因工程类药品之后最具发展前景的特色产业，中药产业也将成为世界医药产业的重要发展方向之一。世界许多国家在新药开发方面都寄托于天然药物。中国具有世界上最丰富的天然药物资源，据全国中药材资源调查表明，目前我国现有的中药资源种类为12807种，有着广阔的发展前景。随着近年天然药物有效成分提取、分离、纯化及结构研究技术的不断发展和应用，使得天然药物获得更为快速的增长。天然药物作为来自植物的 “绿色药品”已受到越来越多消费者的青睐，随着全球崇尚自然热潮的兴起，天然药物必将成为21世纪最受欢迎的药物之一。红花芒毛苣苔为苦苣苔科芒毛苣苔属植物Aeschynanthus moningeriae (Merr.), 生于山谷林中或溪边石上，海拔800-1200米，为野生海南植物。据文献报道，苦苣苔科植物在全世界有120 140个属，在我国有54个属，其中药用植物有100多种。该科植物中所含的化学成分主要为黄酮类、苯乙醇类、醌类和萜类等，具有显著的抑菌、抗氧化、、抗病毒、 抗炎、祛痰止咳等作用。经文献检索，尚未见有对红花芒毛苣苔化学成分进行研究的报道。
发明内容
针对现有技术中存在的上述问题，本发明的目的在于设计提供一种从红花芒毛苣苔中分离制备的新化合物的技术方案，其制备工艺简单，加工制备的成本低、纯度好、收得率高。制得的单体化合物具有较强的抑菌活性和抗氧化活性。所述的从红花芒毛苣苔中分离纯化的新成分，其特征在于包括以下步骤I)原料的处理取干燥的红花芒毛苣苔，粉碎成粗粉，备用；2)冷浸提取将干燥的红花芒毛苣苔用折合红花芒毛苣苔药材干重8倍量的 50% 80%含水乙醇进行冷浸提取3次，每次提取12 20小时，合并提取液。3)闪蒸浓缩将提取液在水浴温度60 70°C下采用真空薄膜浓缩装置进行闪蒸浓缩，得到折合每毫升浓缩液含0. 5 I. 0克原药材的浓缩液；4)萃取粗分得到的浓缩液分散到适量的水中，分别用乙酸乙酯、正丁醇萃取。萃取溶剂的用量为浓缩液与萃取溶剂的体积比为I : 1-3，萃取3 5次。分别得到乙酸乙酯、正丁醇萃取部位。将各萃取部位在水浴温度60 70°C下采用真空薄膜浓缩装置进行闪蒸浓缩，得到各部位的浓缩液；5)大孔树脂纯化得到的正丁醇浓缩液通过Diaion HP-20大孔吸附树脂分离富集，先用H2O洗脱，再依次用10% 70%含水乙醇进行梯度洗脱，最后用70%丙酮洗脱，分别收集3倍柱体积的各部位洗脱液。将各含水乙醇部位的洗脱液在60 70°C以下真空闪蒸浓缩、干燥得粉末；6)柱色谱分离纯化将上述50%含水乙醇洗脱部位的浓缩干粉溶于少量的水中， 通过S印hadex LH-20和MCI-gelCHP_20柱色谱，用水、10%含水乙醇、20%含水乙醇、40% 含水乙醇、60%含水乙醇进行梯度洗脱，最后用70%丙酮洗脱，TLC检识，相同流分合并，从中分离得到为白色粉末的新成分；所述的从红花芒毛苣苔中分离纯化的新成分，其特征在于所述的新成分为5， 7- 二羟基-8-C- ^ -D-葡萄糖色酮碳苷，其结构式为
权利要求
1.天然植物中一个活性新成分的制备方法，其特征在于包括以下步骤1)原料的处理取干燥的红花芒毛苣苔，粉碎成粗粉，备用；2)冷浸提取将干燥的红花芒毛苣苔用折合红花芒毛苣苔药材干重8倍量的50% 80%含水乙醇进行冷浸提取3次，每次提取12 20小时，合并提取液；3)闪蒸浓缩将提取液在水浴温度60 70°C下采用真空薄膜浓缩装置进行闪蒸浓缩， 得到折合每毫升浓缩液含O. 5 I. O克原药材的浓缩液；4)萃取粗分得到的浓缩液分散到适量的水中，分别用乙酸乙酯、正丁醇萃取，萃取溶剂的用量为浓缩液与萃取溶剂的体积比为I : 1-3，萃取3 5次，分别得到乙酸乙酯、正丁醇萃取部位，将各萃取部位在水浴温度60 70°C下采用真空薄膜浓缩装置进行闪蒸浓缩， 得到各部位的浓缩液；5)大孔树脂纯化得到的正丁醇浓缩液通过DiaionHP-20大孔吸附树脂分离富集，先用H2O洗脱，再依次用10% 70%含水乙醇进行梯度洗脱，最后用70%丙酮洗脱，分别收集 3倍柱体积的各部位洗脱液，将各含水乙醇部位的洗脱液在60 70°C以下真空闪蒸浓缩、 干燥得粉末；6)柱色谱分离纯化将上述50%含水乙醇洗脱部位的浓缩干粉溶于少量的水中，通过 Sephadex LH-20和MCI_ge 1CHP-20柱色谱，用水、10 %含水乙醇、20 %含水乙醇、40 %含水乙醇、60%含水乙醇进行梯度洗脱，最后用70%丙酮洗脱，TLC检识，相同流分合并，从中分离得到为白色粉末的新成分；
2.如权利要求I所述的红花芒毛苣苔中的活性新成分的制备方法，其特征在所述的化合物为5，7- 二羟基-8-C- β -D-葡萄糖色酮碳苷，其结构式为
3.如权利要求I所述的一个活性新成分的制备方法，其特征在于步骤2)中冷浸所用含水乙醇的浓度为55% 70%，优选65% 70% ;每次提取时间为15 20小时，优选 16 18小时。
4.如权利要求I所述的一个活性新成分的制备方法，其特征在于步骤4)中萃取溶剂的用量为浓缩液与萃取溶剂的体积比为I : 1-2。
5.如权利要求I所述的一个活性新成分的制备方法，其特征在于步骤5)中先用H2O 洗脱，再依次用10 %含水乙醇、20 %含水乙醇、40 %含水乙醇、60 %含水乙醇、70 %含水乙醇进行梯度洗脱，最后用70%丙酮洗脱，分别收集3倍柱体积的各部位洗脱液，合并20%含水乙醇、40 %含水乙醇、60 %含水乙醇部位的洗脱液。
6.如权利要求I所述的一个活性新成分的制备方法，其特征在于步骤5)中先用H2O洗脱，再依次用10 %含水乙醇、25 %含水乙醇、45 %含水乙醇、65 %含水乙醇、70 %含水乙醇进行梯度洗脱，最后用70%丙酮洗脱，分别收集3倍柱体积的各部位洗脱液，合并25%含水乙醇、50 %含水乙醇、65 %含水乙醇部位的洗脱液。
7.如权利要求I所述的一个活性新成分的制备方法，其特征在于步骤5)中先用H2O 洗脱，再依次用15 %含水乙醇、30 %含水乙醇、40 %含水乙醇、55 %含水甲乙醇、70 %含水乙醇进行梯度洗脱，最后用70%丙酮洗脱，分别收集3倍柱体积的各部位洗脱液，合并15%含水乙醇、30 %含水乙醇、45 %含水乙醇、55 %含水乙醇部位的洗脱液。
8.如权利要求I所述的一个活性新成分在防氧化、抑菌方面的应用。
全文摘要
本发明提供了一种从天然植物红花芒毛苣苔中分离纯化活性新成分的制备方法。本发明的特点是采用传统提取及色谱分离技术从红花芒毛苣苔中分离纯化新新化合物，包括冷浸提取、闪蒸浓缩、柱色谱分离等，从红花芒毛苣苔中分离得到1个新化合物5，7-二羟基-8-C-β-D-葡萄糖色酮碳苷。该化合物的提取率为1.1％，纯度达96％以上。本发明具有制备工艺较简单、经济、安全，得率高。无污染等特点。经初步活性研究表明，所制备的该化合物具有一定的抑菌和抗氧化作用，具有很好的开发应用前景。
文档编号A61K31/352GK102584805SQ20111041217
公开日2012年7月18日 申请日期2011年12月7日 优先权日2011年12月7日
发明者刘辉鑫, 袁珂 申请人:浙江农林大学