专利名称：聚乙二醇单甲醚-聚己内酯-聚磷酸酯共聚物及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种聚乙ニ醇单甲醚-聚己内酷-聚磷酸酯共聚物及其应用。
背景技术：
利用RNA干扰技术通过SiRNA给药能特异性抑制致病基因的表达，高效性和多祥化的特征使其在神经退行性疾病、传染性疾病、癌症在内的人类疾病治疗中极具潜力。尽管目前在大多数細胞培养和体外应用研究中，SiRNA显示出沉默目的基因表达的良好潜质，体外siRNA的传输结果也比较满意，但由于siRNA分子本身穿透細胞膜的能力差、血浆中半衰期短、生理环境中极不稳定、并且缺少靶向性，因此在以治疗人类疾病为目的的体内siRNA传输方面面临着巨大挑战。为了克服这些体内传输的障碍，基于siRNA传输的药物载体被广泛的开发，包括阳离子脂质体体系、阳离子聚合物体系、多肽类键合物体系以及单链片段抗体融合蛋白传输体系等等。这些siRNA载体可以有效保护siRNA分子不被核酸酶降解，并且增强细胞对siRNA分子的吸收，在体内实验中也显示出良好的基因沉默效果。两亲性的阳离子聚合物是阳离子聚合物体系中的ー个重要分支，其在水相环境中可以自组装形成具有核-壳结构的阳离子纳米颗粒。这ー类阳离子纳米颗粒生物相容性好，具有靶向传递的潜能，在质粒DNA、反义寡聚核苷酸以及siRNA的传输中均显示出良好的传递能力。它们通过电荷相互作用载入siRNA，可以増加细胞对siRNA的吸收并且保护其不被核酸酶所降解。特别值得指出的是高分子自组装的纳米颗粒具有EI^R效应(Enhanced permeability and retention)，可促进药物在肿瘤组织的富集，井能有效地被肿瘤部位细胞吸收，进入细胞质和各种细胞器。因此此类纳米颗粒是极具潜能的体内siRNA传递系统的候选者。
发明内容
本发明的目的是提供ー种聚乙ニ醇单甲醚-聚己内酷-聚磷酸酯共聚物及其应用。本发明提供了一种聚乙ニ醇单甲醚-聚己内酷-聚磷酸酯三嵌段共聚物 (mPEG45-PCL20_40-PPEEA5_20)；所述三嵌段共聚物中，中间嵌段是所述聚己内酯(PCL)，ー个末端嵌段是聚乙ニ醇单甲醚(mPEG)，另ー个末端嵌段是所述聚磷酸酯(PPEEA)；所述聚乙ニ醇单甲醚嵌段中聚乙ニ醇的聚合度为45 ；所述聚己内酯嵌段中聚己内酯的聚合度为 20-40 ；所述聚磷酸酯嵌段中聚磷酸酯的聚合度为5-20。所述聚己内酯嵌段中聚己内酯的聚合度可为20、30或40。所述聚磷酸酯嵌段中聚磷酸酯的聚合度可为5、15或20。所述三嵌段共聚物可为式(II)所示的聚合物；
权利要求
1.式(II)所示的聚合物；
2.如权利要求1所述的聚合物，其特征在于所述b为20、30或40，所述c为5、15或20。
3.—种核酸的药物载体，它的活性成分为权利要求1或2所述聚合物形成的纳米颗粒。
4.如权利要求3所述的药物载体，其特征在于所述药物为治疗癌症的药物，优选为治疗乳腺癌的药物；所述治疗乳腺癌的药物更优选为抑制乳腺癌細胞生长相关基因表达的核酸；所述核酸最优选为如下(1)或( 所述的双链核酸(1)一条链如序列表的序列1自5’末端第1至21位核苷酸所示，另一条链如序列表的序列2自5’末端第1至21位核苷酸所示；(2)一条链如序列表的序列1所示，另一条链如序列表的序列2所示。
5.权利要求1或2所述聚合物在制备核酸的药物载体中的应用。
6.在权利要求1或2所述聚合物的纳米颗粒上负载特异核酸得到的复合物；所述特异核酸优选为如下(1)或( 所述的双链核酸(1)一条链如序列表的序列1自5’末端第1至21位核苷酸所示，另一条链如序列表的序列2自5’末端第1至21位核苷酸所示；(2)一条链如序列表的序列1所示，另一条链如序列表的序列2所示。
7.具有如下(a)和/或(b)和/或(c)和/或(d)和/或(e)作用的产品，它的活性成分为权利要求6所述的复合物(a)治疗乳腺癌；(b)抑制乳腺癌細胞増殖；(c)促进乳腺癌細胞凋亡；(d)抑制乳腺癌肿瘤生长；(e)降低乳腺癌細胞中酸性神经酰胺酶和/或Caspase-9前体和/或Bcl_2表达量。
8.权利要求6所述的复合物在制备具有如下(a)和/或(b)和/或(c)和/或(d)和 /或(e)作用的产品中的应用(a)治疗乳腺癌；(b)抑制乳腺癌細胞増殖；(c)促进乳腺癌細胞凋亡；(d)抑制乳腺癌肿瘤生长；(e)降低乳腺癌細胞中酸性神经酰胺酶和/或Caspase-9前体和/或Bcl_2表达量。
9.如权利要求7所述的产品或如权利要求8所述的应用，其特征在干所述(a)中所述乳腺癌是由BT474細胞引起的；所述(b)中所述乳腺癌細胞为BT474細胞；所述(c)中所述乳腺癌細胞为BT474細胞；所述(d)中所述乳腺癌肿瘤是由BT474細胞引起的；所述(e) 中所述乳腺癌細胞为BT474細胞。
10.核酸，为如下①至④中任一所述的双链核酸①一条链如序列表的序列1自5’末端第1至21位核苷酸所示，另一条链如序列表的序列2自5’末端第1至21位核苷酸所示；②一条链如序列表的序列1所示，另一条链如序列表的序列2所示；③一条链如序列表的序列3自5’末端第1至21位核苷酸所示，另一条链如序列表的序列4自5’末端第1至21位核苷酸所示；④一条链如序列表的序列3所示，另一条链如序列表的序列4所示。
全文摘要
本发明公开了一种聚乙二醇单甲醚-聚己内酯-聚磷酸酯共聚物及其应用。本发明提供了式(II)所示的聚合物；b为20至40中的任一自然数；c为5至20中的任一自然数。本发明还提供了聚乙二醇-聚己内酯-聚磷酸酯聚合物胶束与针对酸性神经酰胺酶siRNA形成的纳米给药系统，用于乳腺癌的治疗。该纳米给药系统有效抑制乳腺癌细胞中酸性神经酰胺酶基因的表达，通过系统给药的方式，有效抑制乳腺癌的生长，具有良好的治疗乳腺癌的效果。式(II)
文档编号A61K48/00GK102558565SQ20111044982
公开日2012年7月11日 申请日期2011年12月29日 优先权日2010年12月30日
发明者张佩琢, 杜金志, 毛成琼, 王均 申请人:中国科学技术大学, 苏州吉玛基因药物科技有限公司