专利名称：Hdac抑制剂的药物制剂的制作方法
技术领域：
广义上讲，本发明涉及药物制剂和药学领域，更具体地讲，涉及药物组合物，该药物组合物包含某些氨基甲酸化合物(例如抑制组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)活性的)以及一种或多种选自环糊精、精氨酸和葡甲胺的另外的成分。本发明还涉及这些组合物的用途，例如，在抑制HDAC和治疗由HDAC介导的病症中的用途。
背景技术：
组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)真核细胞中的DNA与蛋白质(组蛋白)紧密复合形成染色质。组蛋白是小的、带正电荷的蛋白质，其富含碱性氨基酸(在生理pH下带正电荷)，这些氨基酸与DNA的磷酸基团(在生理pH下带负电荷)相互作用。组蛋白有五种主要类型H1、H2A、H2B、H3和H4。 组蛋白H2A、H2B、H3和H4的氨基酸序列显示在种属间有显著的保守性，然而Hl有一些不同，在一些情况下可被另一组蛋白所代替，例如H5。由H2A、H2B、H3和H4中的各个组成的4 对一起形成盘状十面(octomeric)蛋白核心,在该蛋白核心附近,DNA(大约140个碱基对) 缠绕形成核小体。与另一组蛋白分子(例如Hl或在某些情况中，H5)连接的连接区DNA的一段短序列将单独的核小体连接起来，形成类似珠串的结构，其自身排列成螺旋状堆积，称为螺线管。大多数组蛋白在细胞周期的S期合成，并且新合成的组蛋白很快进入细胞核，与 DNA连接。在其合成的几分钟内，新的DNA即与核小体结构中的组蛋白发生连接。组蛋白的一小部分，特别是，它们的氨基酸侧链可被酶修饰，这是通过翻译后添加甲基、乙酰基或磷酸根基团(中和侧链的正电荷或将其转变为负电荷)来实现的。例如，赖氨酸和精氨酸基团可以被甲基化，赖氨酸基团可以被乙酰化，而丝氨酸基团可以被磷酸化。 就赖氨酸而言，-(CH2)4-NH2侧链可以例如被乙酰转移酶乙酰化，得到酰胺-(CH2)4-NHC(= O) CH3。从核小体中心延伸的组蛋白的氨基端的甲基化、乙酰化和磷酸化，影响染色质结构和基因表达。(参见，例如 Spencer, V. A.和 Davie, J. R.，1999，基因(Gene)，Vol. 240 (I)， pp. 1-12)。组蛋白的乙酰化和脱乙酰化与导致细胞增殖和/或分化的转录事件 (transcriptional events)有关。通过乙酰化还介导转录因子功能的调节。最近的组蛋白脱乙酰作用化的综述包括Kouzarides，T.，1999，“在细胞增殖中的组蛋白乙酰化酶和脱乙酉先基酶(Histone acetylases and deacetylases in cell proliferation)，，遗传学与发育新观点(Curr. Opin. Genet. Dev.), Vol. 9,No. I,pp. 40-48 ；Pazin,M. J.等人，1997, “组蛋白的脱乙酸和转录的作用是什么(What，s up and down with histone deacetylation and transcription) ” 细胞(Cell)，Vol. 89，No. 3，pp. 325-328。组蛋白的乙酰化状态和基因转录之间的相互关系成为公知已超过30年(参见，例如 Howe, L.等人，1999, Crit. Rev. Eukaryot. Gene Expr. , Vol. 9 (3-4), pp. 231-243) 可调节组蛋白乙酰化状态的某些酶，特别是乙酰基转移酶(例如组蛋白乙酰转移酶，HAT)和脱乙酰基酶(例如组蛋白脱乙酰基酶，HDAC)，已经在许多有机体中被鉴定，并且它们与许多基因的调节有关，从而证实了乙酰化和转录之间的联系。参见，例如Davie，J R.，1998，“组蛋白共价键改性由染色质模版表达”遗传学与发育新观点，Vol. 8, pp. 173-178。通常来讲，组蛋白乙酰化与转录激活相关，但组蛋白脱乙酰化却与基因阻遏相关。已对越来越多的组蛋白脱乙酰基酶(HDACs)(包括HDACl到HDAC11)进行了鉴定(参见，例如 Ng, H. H.和 Bird, A.，2000，生物化学科学动态(Trends Biochem. Sci.)， Vol. 25 (3), pp. 121-126)。许多酵母组蛋白脱乙酰基酶和植物组蛋白脱乙酰基酶也已被鉴定。在1996年鉴定了第一个脱乙酰基酶(HDACl)(参见，例如Taunton，J.等人，1996， 科学(Science), Vol. 272, pp. 408-411)。后来，发现了另外两种核的(nuclear)哺乳动物脱乙酰基酶，即 HDAC2 和 HDAC3。参见，例如Yang, ff. Μ.等人，1996，Proc. Natl. Acad. Sci. USA, Vol. 93，pp. 12845-12850 ；Yang, ff. M.等人，1997，生物化学杂志(J. Biol. Chem.)， Vol. 272，pp. 28001-28007 ；Emiliani, S.等人，1998，Proc. Natl. Acad. Sci. USA, Vol. 95， p. 2795-2800 ；Grozinger 等人，1999，Proc. Natl. Acad. Sci. USA, Vol. 96，pp. 4868-4873 ； Kao 等人，2000,基因和发育(Genes & Dev·), Vol. 14, p. 55-66 ；Van den Wyngaert 等人， 2000，FEBS, Vol. 478，pp. 77-83。HDACs作为连接到启动子并阻遏转录的巨大多蛋白复合物的部分起作用。被充分鉴定的转录抑制物，例如 Mad(Laherty，C. D.等人，1997，细胞，Vol. 89 (3), pp. 349-356)、 pRb(Brehm,A.等人，1998，自然(Nature)，1998，Vol. 391，ρρ· 597-601)、细胞核受体(Wong, J.等人，1998，EMBO J.，Vol. 17 (2)，pp. 520-534)和 YYl (Yang, ff. M.等人，1997，生物化学杂志，Vol. 272，pp. 28001-28007)，与HDAC复合物联合，发挥它们的阻抑功能。HDAC在细胞增殖中的作用对组蛋白脱乙酰基酶抑制剂的研究表明，这些酶在细胞增殖和分化中起重要作用。抑制剂曲古菌素六0^)(￥081^(1&，^等人，1990，生物化学杂志，Vol. 265(28)， pp. 17174-17179)导致细胞周期停滞在Gl和G2期(Yoshida，M. , Beppu, T.，1988，实验细胞研究(Exp. Cell. Res. )，Vol. 177，pp. 122-131)，恢复转化的不同细胞系表型，并且诱导弗罗德(Friend)白血病细胞和其它细胞的分化(Yoshida，Μ.，等人，1990，抗生素杂志(东京) (J. Antibiot. (Tokyo)), Vol. 43(9), pp. 1101-1106) 据报道 TSA(和 SAHA)在小鼠中抑制细胞生长，诱导末端分化，并且预防肿瘤形成(Finnin等人，1999,自然(Nature) ,Vol. 401, PP. 188-193)。由TSA引起的细胞周期停滞与凝溶胶蛋白表达增加有关(Hoshikawa, Y.， 等人，1994，实验细胞研究，Vol. 214(1)，pp. 189-197)，凝溶胶蛋白为在恶性乳腺癌中向下调节的肌动蛋白调节蛋白(Mielnicki, L. M.等人，1999,实验细胞研究，Vol. 249 (I), PP. 161-176)。已观察到许多脱乙酰基酶抑制剂对细胞周期和分化有相似的作用(Kim等
6人，1999，致癌基因(Oncogene)，Vol. 18 (15)，pp. 2461-2470)。HDACs与控制细胞增殖和分化明确相关，表明异常的HDAC活性可能在癌症中起作用。脱乙酰基酶促进癌症发展的最直接证据来自对不同急性早幼粒细胞白血病(APL)的分析。在大多数APL患者中，染色体15和17的易位(t (15 ; 17))导致融合蛋白的表达，该融合蛋白包含连接到大多数RARa (视黄酸受体)的PML基因产物的N-端部分。在一些情况下， 不同的易位(t(ll;17))引起锌指蛋白PLZF和RARa之间的融合。在没有配体存在时，野生型RAR a通过将HDAC阻抑复合物连接到启动子DNA上，从而阻抑靶基因。在正常血细胞生成期间，视黄酸(RA)与RARa结合，并替换阻抑复合物，从而使与髓细胞样分化(myeloid differentiation)有关的基因表达。在APL患者中存在的RARα融合蛋白不再响应生理学水平的RA，并且它们干扰促进髓细胞样分化的RA-诱导基因的表达。这导致了早幼粒细胞的克隆扩增和白血病的发展。体外实验显示TSA能够恢复RA对融合RARa蛋白的应答性，并且使髓细胞样分化能够进行。这些结果确立了 HDACs和肿瘤生成之间的联系，说明在 APL患者中HDACs是药物干预的潜在靶点。(参见，例如Kitamura，K.等人，2000，英国血液病学杂志(Br. J. Haematol.) ,Vol. 108(4)，pp. 696-702 ；David,G.等人，1998，致癌基因， Vol. 16(19)，pp. 2549-2556 ；Lin, R. J.等人，1998，自然，Vol. 391 (6669)，pp. 811-814)。此外，不同证据链表明HDACs可能是其它类型的癌症中的重要治疗靶点。HDAC抑制剂诱导衍生自许多不同癌症(前列腺的、结直肠的、乳腺的、神经元的、肝的)的细胞株分化(Yoshida, Μ.和 Horinouchi, S.，1999, Ann. N. Y. Acad. Sci.，Vol. 886, pp. 23-36)。在癌症动物模型中已经对许多HDAC抑制剂进行了研究。它们减少肿瘤的生长并延长患有不同类型移植肿瘤的小鼠的寿命，所述肿瘤包括黑素瘤、白血病、结肠癌、肺癌和胃癌等。(Ueda， H.等人，1994，抗生素杂志(东京)，Vol. 47 (3), pp. 315-323 ;Kim等人，1999，致癌基因， Vol. 18(15)，pp. 2461-2470)。银屑病是一种毁损面容的普通慢性皮肤疾病，其特征为界限清楚的、红色、硬鳞状斑块，这些斑块可以是有限分布的或者广布的。银屑病的流行率大约为2%，例如在三个国家(美国/欧洲/日本)中有1250万患者。虽然这种疾病很少致命，但很显然，它对大多数患者的生活质量具有严重有害影响，另外对其还缺乏有效的治疗方法。目前的治疗或者是无效的、就美容而言是不可接受的，或者有不希望的副作用。因此针对这种病症有效且安全的HDAC抑制剂有着大量的未被满足的临床需要。银屑病是一种病因学复杂的疾病。尽管很清楚病因与遗传分(与很多基因位点相关)有关，但是还与不确定的环境触发物有关。无论引起银屑病的根本原因是什么，在细胞水平，它的特征为局部T细胞介导的炎症、角质化细胞增殖以及局限性血管生成。这些都是与组蛋白脱乙酰基酶有关的过程(参见，例如，Saunders, N.等人，1999,癌症研究(Cancer Res.)，Vol. 59，No. 2pp. 399-404 ；Bernhard, D.等人，1999，FASEB J.，Vol. 13，No. 14， pp. 1991-2001 ;Takahashi 等人，1996，抗生素杂志(东京),Vol. 49，No. 5,pp. 453-457 ；Kim 等人，2001，天然药物(Nature Medicine)，Vol. 7，No. 4，pp. 437-443)。因此，HDAC 抑制剂可以用于治疗银屑病。可以对HDAC抑制剂候选物进行筛选，例如，采用使用T-细胞和/或角质化细胞的增殖实验。HDAC 抑制剂一类重要的HDAC抑制剂是包含氨磺酰键的氨基甲酸化合物，如在Watkins，C.等人，2002年公开的申请号为WO 02/30879的国际(PCT)专利申请中所描述的。一个尤其有前途的化合物是N-羟基-3- (3-苯基氨磺酰基-苯基)-丙烯酰胺(文中称为PXD-101)。
权利要求
1.药物组合物，该药物组合物包含(a) HDAC抑制剂，其中所述HDAC抑制剂为下式的化合物或其药学上可接受的盐
2.根据权利要求I的药物组合物，该药物组合物包含 (a) HDAC抑制剂，其中所述HDAC抑制剂为下式的化合物
3.根据权利要求2的药物组合物，该药物组合物包含(a)所述HDAC抑制剂；和(b)环糊精。
4.根据权利要求2的药物组合物，该药物组合物包含(a)所述HDAC抑制剂；和(b)葡甲胺。
5.根据权利要求2的药物组合物，该药物组合物包含(a)所述HDAC抑制剂；和(b)环糊精和葡甲胺。
6.根据权利要求3的药物组合物，其中所述环糊精选自α-环糊精、β-环糊精、Y-环糊精、(Cu烧基)-α -环糊精、(Cu烧基)-β -环糊精、((V4烧基)-Y -环糊精、(轻基-(V4 烧基)-α-环糊精、(轻基-Cp4烧基)_β -环糊精、(轻基-Cp4烧基)_ Y -环糊精、(羧基-(V4烧基)-α -环糊精、(羧基-Cp4烧基)-β -环糊精、(羧基-Cp4烧基)-Y -环糊精、 α-环糊精的糖类醚、环糊精的糖类醚、Y-环糊精的糖类醚、α-环糊精的磺丁基醚、 β-环糊精的磺丁基醚和Y-环糊精的磺丁基醚。
7.权利要求3的药物组合物，其中所述环糊精为羟丙基-β-环糊精。
8.权利要求3的药物组合物，其中所述环糊精与所述HDAC抑制剂的摩尔比至少为O. 5。
9.权利要求3的药物组合物，其中所述环糊精与所述HDAC抑制剂的摩尔比为O.5-5。
10.权利要求4的药物组合物，其中所述葡甲胺与所述HDAC抑制剂的摩尔比至少为O. 5。
11.权利要求4的药物组合物，其中所述葡甲胺与所述HDAC抑制剂的摩尔比为O.5-5。
12.权利要求I的药物组合物，该药物组合物还包括一种或多种其它药学上可接受的成分。
13.权利要求I的药物组合物，该药物组合物为无菌的或无热原的。
14.权利要求1-13中任一项的药物组合物，该药物组合物为液体形式。
15.权利要求1-13中任一项的药物组合物，该药物组合物为含水溶液形式。
16.权利要求1-13中任一项的药物组合物，该药物组合物为固体形式。
17.权利要求1-13中任一项的药物组合物，该药物组合物为粉末、颗粒、片剂或冻干粉形式。
18.权利要求1-13中任一项的药物组合物，该药物组合物还含有注射用水、盐水溶液、 葡萄糖水溶液、注射/输注用盐水、注射/输注用葡萄糖、林格氏溶液或含有乳酸盐的林格氏溶液。
19.根据权利要求1-13中任一项的药物组合物，该药物组合物另外包含盐水溶液或葡萄糖水溶液。
20.根据权利要求15的药物组合物，该药物组合物包含浓度为O.1-lOOOmg/mL的所述 HDAC抑制剂。
21.根据权利要求15中的药物组合物，该药物组合物包含浓度为lOO-lOOOmg/mL的所述HDAC抑制剂。
22.根据权利要求15中的药物组合物，该药物组合物包含浓度为30-300mg/mL的所述 HDAC抑制剂。
23.根据权利要求15的药物组合物，该药物组合物包含浓度为O.3-3000mM的所述 HDAC抑制剂。
24.根据权利要求15的药物组合物，该药物组合物包含浓度为IOO-IOOOmM的所述 HDAC抑制剂。
25.根据权利要求15的药物组合物，该药物组合物包含浓度为100-500mM的所述HDAC 抑制剂。
26.根据权利要求15的药物组合物，该药物组合物包含浓度为0.01-300mg/mL的所述 HDAC抑制剂。
27.根据权利要求15的药物组合物，该药物组合物包含浓度为I.0-10mg/mL的所述 HDAC抑制剂。
28.根据权利要求15的药物组合物，该药物组合物包含浓度为I.0-5mg/mL的所述 HDAC抑制剂。
29.根据权利要求15的药物组合物，该药物组合物包含浓度为0.Ol-IOOmM的所述 HDAC抑制剂。
30.根据权利要求15的药物组合物，该药物组合物包含浓度为3-30mM的所述HDAC抑制剂。
31.根据权利要求15的药物组合物，该药物组合物包含浓度为0. l-5mM的所述HDAC抑制剂。
32.根据权利要求15的药物组合物，其中所述组合物适于胃肠外给药至患者。
33.根据权利要求15的药物组合物，其中所述组合物适于通过注射给药至患者。
34.根据权利要求15的药物组合物，其中所述组合物适于通过输注给药至患者。
35.静脉(IV)输注袋，该静脉输注袋包含根据权利要求15的药物组合物。
36.管形瓶或安瓿，该管形瓶或安瓿包含根据权利要求15的药物组合物。
37.根据权利要求1-13中任一项的药物组合物，该药物组合物在治疗人类或动物身体的方法中使用。
38.根据权利要求1-13中任一项的药物组合物，该药物组合物用于HDAC介导的病症的治疗方法中。
39.根据权利要求38的药物组合物，其中所述HDAC介导的病症为增殖性病症。
40.根据权利要求38的药物组合物，其中所述HDAC介导的病症为癌症。
41.(a) HDAC抑制剂，其中所述HDAC抑制剂为下式的化合物或其药学上可接受的盐
42.根据权利要求41的用途，其中所述HDAC介导的病症为增殖性病症。
43.根据权利要求41的用途，其中所述HDAC介导的病症为癌症。
44.根据权利要求1-41中的任何一项的组合物在制备治疗所述HDAC介导的病症的药物中的用途。
45.根据权利要求44的用途，其中所述HDAC介导的病症为癌症。
46.根据权利要求44的用途，其中所述HDAC介导的病症为增殖性病症。
全文摘要
本发明涉及药物组合物，该药物组合物包含某些氨基甲酸化合物(例如抑制HDAC(组蛋白脱乙酰基酶)活性的)(例如PXD-101、N-羟基-3-(3-苯基氨磺酰基-苯基)-丙烯酰胺))以及一种或多种选自环糊精、精氨酸和葡甲胺的另外的成分。本发明还涉及上述组合物的用途，例如在抑制HDAC中以及在治疗HDAC介导的病症、癌症、增殖性病症、银屑病等疾病中的用途。
文档编号A61K47/18GK102579417SQ201210004670
公开日2012年7月18日 申请日期2006年5月11日 优先权日2005年5月13日
发明者N·J·休斯, R·J·巴斯廷 申请人:托波塔吉特英国有限公司