抗体和蛋白质制剂的制作方法
【专利说明】抗体和蛋白质制剂
[0001] 本申请于2013年8月28日作为PCT国际专利申请提交，并且要求于2012年8月 31日提交的美国专利申请号13/601,598和于2013年3月15日提交的美国专利申请号 13/843, 780的优先权，所述美国专利申请的公开内容在此通过引用全文并入本文。
[0002] 背景 本公开内容一般涉及等渗且具有低粘度的抗体及其他蛋白质制剂，包括用于注射和一 般施用的制剂。
[0003] 血友病患者患有出血障碍，这导致在损伤或手术后延迟的血液凝固。延长出血由 一种或多种血液凝固因子中的遗传缺陷引起。两类常见的血友病是已知的--血友病A和 血友病B。血友病A由因子VIII中的缺陷引起，而血友病B由因子IX中的缺陷引起。总血 友病患者中的约75-80%患有血友病A。
[0004] 组织因子途径抑制剂（TFPI)是血液凝固的外源性途径的人抑制剂并在抗凝中起 效。针对TFPI的抗体包括抗TFPI单克隆抗体（aTFPImAb)在阻断TFPI功能的努力中得 到开发。一种此类aTFPImAb是人IgG2抗TFPImAb，其开发用于治疗血友病A和B患者。 [0005] 抗体及其他蛋白质可以经由静脉内、肌内和/或皮下注射施用于患者。为了确保 患者依从性，希望皮下注射剂型是等渗的且包括小注射体积（〈2.0ml/注射部位)。为了 降低注射体积，蛋白质通常在1mg/ml- 150mg/ml的范围内施用。
[0006] 虽然液体和冻干剂型两者均用于目前销售的基于抗体及其他蛋白质的药物产品， 但冻干形式更频繁用于具有高蛋白质浓度的蛋白质和抗体药物产品。
[0007] 蛋白质和抗体剂型可以呈现制剂开发中的许多挑战，尤其是对于液体制剂。对于 其中蛋白质浓度接近其表观溶解度限制的制剂，相分离可以通过沉淀、胶凝和/或结晶而 发生。在高蛋白质浓度时，由于可溶性和不溶性蛋白质-蛋白质聚集体的形成，抗体或其他 蛋白质的稳定性可以变得成问题。高度浓缩的蛋白质制剂通常是高度粘稠的，这呈现加工 例如超滤和无菌过滤以及剂量溶液注射的困难。并且在对于预期用于肌内或皮下施用的制 剂希望的蛋白质浓度时，需要高浓度的稳定剂例如鹿糖和氯化钠，以实现长期蛋白质稳定 性。所得到的高渗溶液通常由于组织损害而引起注射疼痛。因此，对于高蛋白质浓度制剂 的稳定性和渗透压摩尔浓度平衡稳定剂的量是关键的。
[0008] 出于这些原因，本领域存在对以液体形式的基于抗体及其他蛋白质的治疗制剂的 需要，所述治疗制剂显示出高蛋白质浓度，而无显著增加的蛋白质聚集、渗透压摩尔浓度或 粘度和/或蛋白质稳定性减少的问题。因此，希望基于抗体及其他蛋白质的制剂含有有限 量的赋形剂和小体积以便于治疗施用或递送。进一步希望基于抗体及其他蛋白质的治疗制 剂可顺应于冻干，以增强在延长贮存条件下的蛋白质稳定性。
[0009] 概述 本公开内容提供了液体和冻干的基于抗体和蛋白质的制剂，其基本上是等渗和低粘度 的，并且基本上不含无机盐。本文呈现的抗体及其他蛋白质制剂在约pH4.0 -约pH6.0 的pH下含有约0mM-约30mM组氨酸；约50ppm-约200ppm非离子型表面活性剂例 如聚山梨酯（Tween?)80或聚山梨酯（Tween?)20;约88mM-约292mM糖或糖醇例如甘露 糖醇、右旋糖、葡萄糖、海藻糖和/或蔗糖；约0mM-约50mM精氨酸；约0mM-约50mM赖氨酸；约〇mM_约133mM甘氨酸或丙氨酸；约0mM-约10mM甲硫氨酸；和约1mg/ ml-约150mg/ml的蛋白质。本文公开的制剂显示出范围为在22°C下约1mPa-S-约20 mPa-S，或在 22°C下约 1mPa-S-约 15mPa-S，或在 22°C下约 1mPa-S-约 10mPa-S，或 在22°C下约1mPa-S-约8mPa-S或在22°C下约1mPa-S-约6mPa-S的粘度和范围为 约240 -约380mmol/kg的渗透压摩尔浓度。
[0010] 在进一步方面内，本公开内容提供了用于治疗患者中的病症的方法，其包括给患 者施用治疗有效量的本文描述的一种或多种制剂。例如，提供的是用于治疗患者中的病症 的方法，其包括给患者施用治疗有效量的如本文更详细地描述的抗体或其他蛋白质制剂。
[0011] 本文教导的这些及其他特点在本文中阐述。
[0012] 附图简述 技术人员应当理解下文描述的附图仅用于举例说明目的。附图不预期以任何方式限制 本文教导的范围。
[0013] 图1是显示氯化钠（NaCl)浓度对20mg/ml以pH5. 5的抗TFPImAb制剂的浊度 的作用的图示。
[0014] 图2是显示pH对抗TFPImAb药品的浊度的作用的图示。
[0015] 多种实施方案的描述 如上所述，本公开内容提供了抗体及其他蛋白质制剂，其在预期贮存条件下以液体形 式或冻干形式稳定抗体或其他蛋白质。本文描述的制剂包括一种或多种药学上可接受的赋 形剂或稳定剂，并且包含在以合适pH的缓冲介质中，并且与生理溶液基本上等渗。对于全 身施用，注射是一种施用途径，包括肌内、静脉内、腹膜内和皮下注射。
[0016] 由于其低粘度，本文公开的蛋白质制剂可以方便地经由例如超滤和无菌过滤进行 加工，并且可以经由注射包括皮下注射施用于患者。此外，因为它们基本上是等渗的，所以 本文公开的抗体和蛋白质制剂降低组织损害或其他不利生理效应，并且从而实现有利的患 者耐受和增加的患者依从性。
[0017] 本文描述的制剂的特征在于基本上不存在添加的盐，其提供增加其他稳定剂例如 蔗糖的浓度的灵活性，同时维持制剂的渗透压摩尔浓度用于改善的体内耐受性和因而增加 的患者依从性。此外，本文描述的制剂的低粘度允许方便加工，包括但不限于超滤和无菌过 滤，和通过针注射药物产品溶液。
[0018] 如本文使用的，术语"粘度"指例如当在施用于患者期间通过注射针注射时，液体 制剂对流动的抗性。粘度测量可以通过锥板技术用在限定温度例如如本文描述的22°C下设 定的泊尔帖元件（Peltierelement)完成。通常，将明确限定的剪切应力梯度应用于液体 制剂，并测量所得到的剪切速率。粘度是剪切应力与剪切速率的比。如本文使用的，粘度以 在22°C下的mPa-S单位表示，其中1mPa-S= 1cP。本文公开的低粘度、基本上等渗的制 剂通常特征在于具有范围为在22°C下约1mPa-S-约20mPa-S，或在22°C下约1mPa-S-约 15mPa-S，或在 22°C下约 1mPa-S-约 10mPa-S，或在 22°C下约 1mPa-S-约 8mPa-S 或在22°C下约1mPa-S-约6mPa-S的粘度。
[0019] 如本文使用的，术语"渗透压摩尔浓度"指定义为每kg溶液的溶质mmole数的溶 质浓度量度。所需渗透压摩尔浓度水平可以通过添加一种或多种稳定剂来实现，所述稳定 剂例如糖或糖醇，包括但不限于甘露糖醇、右旋糖、葡萄糖、海藻糖和/或蔗糖。适合于提 供渗透压摩尔浓度的另外稳定剂在参考文献例如PharmaceuticalExcipients(第四版， RoyalPharmaceuticalSocietyofGreatBritain，Science&PracticePublishers) 或Remingtons: TheScienceandPracticeofPharmacy(第十九版，MackPublishing Company)的手册中描述。
[0020] 如本文使用的，术语"约"指提供的单位值的+/- 10%。如本文使用的，术语"基本 上"指显示出总计或近似程度的目的特征或特性的定性状况。生物学领域的普通技术人员 应当理解生物学和化学现象很少(如果有的话)实现或避免绝对结果。术语基本上因此在本 文中用于捕获许多生物学和化学现象中固有的完全性的潜在缺乏。如本文使用的，术语"等 渗的"和"等张的"可与术语"基本上等渗的"和"基本上等张的"互换使用，并且指特征在于 具有的渗透压与另一种溶液的渗透压相同或至少基本上相等