粉防己碱药物制剂及方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及双苄基异喹啉生物碱家族的药物制剂。本文的特定家族被称为"粉防 己碱家族"。
【背景技术】
[0002] 粉防己碱家族双苄基异喹啉具有两个氮位点，因此可以以自由碱的形式存在或作 为单酸盐或二酸盐存在。因为药物成分的盐形式的增大溶解度，故在配制药物组合物中使 用盐形式。因此活性成分溶解更迅速，并且更快地进入血液。
【发明内容】
[0003] 在本发明中，已经令人惊奇地发现，粉防己碱家族成员（特别是d_粉防己碱）的 自由碱制剂与该家族的二酸盐成员的制剂基本一样快速地被吸收到血液中。因此，本发明 包括药物制剂以及配制方法以及该药物制剂在癌症和其它疾病的治疗中的用途，该药物制 剂包含：
[0004] 粉防己碱家族的自由碱成员和药物载体，该自由碱成员具有以下结构式：
[0006] 其中，&和R/为相同的或不同的基于短碳链的配体，包括但不限于013、0) 2013或 H成为CH 3或C 2如和R 3为CH 3或氢。优选地，该家族为d-粉防己碱家族，其中所述化学结 构在C-1'手性碳位点具有"S"异构体构型，并且最优选地包含d-粉防己碱。
【具体实施方式】
[0007] 已经发现粉防己碱家族成员在多种疾病和病症（包括癌症和疟疾）中治疗耐多药 性是有效的。参见美国专利：5025020 ;5332747 ;6528519 ;6911454 ;6124315 和 6962927。 因此这些活性成分进入至合适的药物递送系统的制剂是非常重要的。
[0008] 粉防己碱家族成员具有以下结构式：
[0009]
[0010] 其中，&和R/为相同的或不同的基于短碳链的配体，包括但不限于013、0) 2013或 H成为CH 3或C 2H5;R 3为CH 3或氢；其中该化学结构优选在C-1'手性碳位点具有"S"异构 体构型。
[0011] 粉防己碱家族的优选成员包括以下代表性的例子，其并不意在穷举：d-粉防己 碱、异粉防己碱、鹤氏唐松草碱（hernandezine)、小檗胺、密花藤胺（pycnamine)、亮花木碱 (phaeanthine)、黄皮树碱（obamegine)、乙基防己诺林碱和防己诺林碱。在所有的这些例子 中，&和R/构成甲基。在该基团内会发生变化，其中馬和R 3可以构成甲基或氢，以及该化 合物在C-1和C-1'手性碳位点的异构体构型为R (右旋）或S (左旋）。R构型和S构型的 规则可以在Morrison和Boyd，"有机化学"，第4版，1983年由Allyn和Bacon的版权，在第 138-141页中发现。此外，鹤氏唐松草碱包括在C-5位点的甲氧基。
[0012] 所要求保护的粉防己碱家族的最优选的成员为d-粉防己碱。在第6218541号美 国专利和公布的第2011/0105755号美国专利申请中公开了用于提取和/或纯化d-粉防己 碱的方法。
[0013] 进行鼠的生物等效性研宄，以比较活性药物成分（d-粉防己碱）相对于盐酸盐从 自由碱被吸收的速度和程度。通过肯塔基州大学药物科学与技术中心（CPST)将药物成分 配制成胶囊以等量的d-粉防己碱经口腔灌胃对鼠给药。从Torpac (新泽西州费尔菲尔德） 公司购买适于对鼠给药的剂量注射器、胶囊填充设备和微型胶囊（规格9)。
[0014] 对于HPLC分析，每个时间点单个鼠（破坏性采样）用来获得尽可能多的血液量。 这对于适应使用当前基于UV (紫外线）的HPLC测定的分析是必要的，基于UV的HPLC测定 已被广泛使用在CBA制药中。通过在基于血浆测定中具有丰富经验的科学家在CBA制药工 具中进行HPLC分析。将该结果提供给第二科学家用以评价和建模。
[0015] 鉴于对鼠d-粉防己碱的药代动力学（PK)的有限资料，该研宄分阶段进行。确定 足够检测灵敏度的剂量的初步研宄（试验），是首先使用在胶囊中约25mg/kg的给药剂量进 行，然后使用在胶囊中约120mg/kg的给药剂量进行。每制剂（酸或碱）每剂量水平的四个 动物被给药。Sprague-Dawley鼠被用于这些研宄，并且从Harlan实验室获得，在实验之前 的至少一周使动物从装运压力中恢复并适应环境。在实验时动物称重为200g至250g。在 药物给药后1小时，动物被安乐死，通过心脏穿刺将血液收集在含有EDTA的试管中，并迅速 离心以分离血浆。通常，获得足够的血浆以提供重复样品分析。将血浆在-80°C下保存直到 它被运送到含有干冰的泡沫塑料容器中的CBA制药工具。这些实验的结果表明，需要每单 位体重较大的剂量。
[0016] 然而，需要以较高剂量投药的多个胶囊有助于在第一初步研宄中观察到药代动力 学变化。因此，在随后的研宄中，较年幼且较小的动物被给药约150mg/kg的剂量，在给药后 两小时获得血液样品。因为片剂的尺寸，故这些较小的动物更难以投药。基于技术人员的 判断，在灌胃投药期间对动物已经造成一些组织损伤，"酸"组的三只动物和"碱"组的两只 动物被排除在外。这些较年幼的动物（每个50克至60克）产生更小的血量，但是在将来 自两个动物的样品合并之后获得用于HPLC分析的足够的血浆量。如在表1中所示，在两种 制剂之间的浓度是相当的。在该表以下各栏中的数值表示从所合并的样品中获得的实际数 据。对于这种分析，控制样品的质量在可接受的额定值的范围内。所观察到的变化被认为 是由于这样的事实：与在两小时时观察的那些动物相比，该药物在吸收之后将被清除/分 散至较低的水平。
[0018]表1:在胶囊给药之后在幼鼠内的血药浓度（约150mg/mL)。
[0019]该第二初步研宄表明，为了 24小时测量样品，将需要较高的剂量。因此，分别对三 只动物给药200mg/kg的以液体或悬浮液的每种酸制剂和碱制剂，以判断剂量和/或变化是 否会改善。该碱不溶于水，因此在悬浮液中使用。在具有0.25%羧甲基纤维素的水中制备 溶液和悬浮液以促进在给药期间的流动性。在胶囊给药后30分钟、1小时、2小时、5小时和 24小时，米集样品。
[0020] 表2列出了从接受胶囊和液体制剂/悬浮液制剂的动物中获得的数据。观察到在 剂量制备中（学生1-测试，双尾测试，P>〇. 05)的无统计学差异。同样地，观察到在d-粉 防己碱和d-粉防己碱-2HC1制剂（学生1-测试，双尾，P>0. 05)中的无统计学差异。使用 归一化剂量浓度的药代动力学曲线也在表3中示出。
[0021] 表2 :在使用较高剂量的d-粉防己碱和d-粉防己碱-2HC1经口腔灌胃后两小时 鼠的血药浓度和归一化剂量血药浓度。
[0023]
[0024] 注意：所有剂量做为碱有效量来报告。
[0025] 表3 :在鼠内超过24小时后标准剂量d-粉防己碱血药浓度。动物以胶囊经口腔 灌胃给药约230mg/kg。
[0027] 在一些情况下，由于极高的干扰峰，故不能测量血药浓度。因此，这些研宄的结果 如下，使用液体制剂/悬浮液制剂进行最终的研宄，l〇〇mg/kg的剂量将转化为约150mg/m 2。 基于1. 7m2的平均人体表面积，这些剂量将转化为约350mg和大约90mg在人体中的固定剂