专利名称：用于清除晚期氧化蛋白终产物的药物组合物及其用途的制作方法
技术领域：
本发明属于药物学和制剂学领域，涉及用于清除晚期氧化蛋白终产物的药物组合物及其用途。
背景技术：
0 ^ Szfe^ (Advanced oxidation protein products， AOPPs，*胃曰月巾也称为Α0ΡΡ)是体内氧化应激过程中生成的一类含双酪氨酸的蛋白质交联物，血浆AOPI^s 主要由白蛋白携带。循环AOPP水平增高最先在慢性肾功能衰竭、腹膜透析的患者中发现， 随后在糖尿病、肥胖或代谢综合征、动脉粥样硬化等多种常见疾病中被证实。AOPP潴留还见于类风湿性关节炎、溃疡性结肠炎等免疫炎症性疾病和恶性肿瘤(结肠、直肠癌、乳腺癌等)。AOPP被认为是体内氧化应激的敏感生物学标志。近年不断增加的研究证据表明，血浆AOPP水平增高促使该分子在肾脏和血管等组织中沉积并与慢性肾脏疾病、动脉粥样硬化病变及糖尿病肾病的发生发展密切相关(黄金杰，崔明姬.慢性肾功能衰竭患者晚期氧化蛋白与动脉粥样硬化.吉林医学，2008; (17) :1493-1496;史春虹，姜一农.血清晚期氧化蛋白产物与2型糖尿病患者动脉粥样硬化的关系.中国动脉硬化杂志，2009 ;17(4) 297-300.)。AOPP有希望成为上述疾病发生发展的新的生物学标志或干预靶标。中国专利ZL200310110019. 3中公开了一种用于治疗慢性肾功能不全病的组合物。但是，该专利公开的组合物的制剂至今仍未上市，并且该组合物的实验研究结果表明， 只能降低慢性肾功能不全病患者血循环中的肌酐、尿素氮，其对AOPP无作用。因此，仍需寻找和开发对AOPP有清除作用的药物。
发明内容
本发明人经过深入的研究和创造性的劳动，得到了一种药物组合物，并且本发明人惊奇地发现，本发明的药物组合物能够有效地清除晚期氧化蛋白产物，具有作为防治慢性肾脏疾病、糖尿病肾病、糖尿病并发症、或动脉粥样硬化的药物的潜力。由此提供了下述发明
本发明的一个方面涉及一种药物组合物，包含如下组分
甘草、牡丹皮、附子、大黄、和桂枝。
优选地，所述甘草、牡丹皮、附子、大黄、或桂枝为饮片。
在本发明的一个实施方案中，所述的药物组合物由甘草、牡丹皮、附子、大黄、和桂枝组成。
在本发明的一个实施方案中，所述的药物组合物，其包含
甘草 1-3重量份
牡丹皮0.5-2重量份，
附子 1-3重量份，
大黄 2-5重量份，和CN 102526237 A桂枝 0.1-1重量份。根据本发明任一项所述的药物组合物，其中，其特征还在于如下的(1)-( 任-项或多项
(1)甘草1. 5-2. 5重量份；优选1. 8-2. 2重量份；
(2)牡丹皮1-2重量份；优选1.2-1. 8重量份；
(3)附子1-2重量份；优选1. 2-1. 8重量份；
(4)大黄2. 5-4重量份；优选2. 5-3. 5重量份； 更优选2. 8-3. 2重量份；和
0.3-0. 8重量份；优选0. 4-0. 6重量份。 一个实施方案中，所述的药物组合物，其包含 2重量份，
1.5重量份，
(5)桂枝在本发明的-甘草牡丹皮
附子 1. 5重量份， 大黄 3重量份，和桂枝 0. 5重量份
根据本发明任一项所述的药物组合物(提取物)，其通过下述步骤1)或2、制备 1)取权利要求1至3中任一项所述的甘草、牡丹皮、附子、大黄、桂枝药材(例如饮片)，加5-10倍量(优选8倍量)的60-80% (优选70% )的乙醇为溶剂，浸泡30π η- !， 回流提取1-3次，每次l_3h，合并醇提取液；可选地，残渣用3倍量水煎煮30min-a!，得到水提取液，并合并水提取液与醇提取液；或2)取权利要求1至3中任一项所述的甘草、牡丹皮、附子、大黄、桂枝药材(例如饮片)，加5-15倍量的水进行煎煮至少15min，得到提取液。其中，优选的是步骤1)所示的方法。根据本发明任一项所述的药物组合物，其制备还包括下述步骤3)3)将步骤1)中制得的提取液(水提取液和/或醇提取液)和/或步骤2、中制得的提取液浓缩至相对密度为1. 20-1. 35的稠膏，50-80°C (优选60°C )真空干燥成干浸膏； 可选地，将干浸膏粉碎。本发明中提及的乙醇的浓度，如果没有特别说明，均指体积浓度(ν/ν)。本发明的另一方面涉及一种药物组合物，包含如下组分甘草苷、丹皮酚、附子苷、大黄酚、和桂皮醛。在本发明的一个实施方案中，所述的药物组合物由甘草苷、丹皮酚、附子苷、大黄酚、和桂皮醛组成。在本发明的一个实施方案中，所述的药物组合物为含有甘草苷、丹皮酚、附子苷、 大黄酚、和桂皮醛的提取物；具体地，为甘草、牡丹皮、附子、大黄、和桂枝的提取物；更具体地；为上面所述的步骤1)和/或幻和/或幻所制备的提取物。在本发明的一个实施方案中，所述的药物组合物，其包含甘草苷 1-3重量份，丹皮酚 0. 5-2重量份，附子苷 1-3重量份，
大黄酚 2-5重量份，和桂皮醛 0. 1-1重量份。根据本发明任一项所述的药物组合物，其中，其特征还在于如下的(1)-( 任一项或多项(1)甘草苷 1. 5-2. 5重量份；优选1. 8-2. 2重量份；(2)丹皮酚 1-2重量份；优选1. 2-1. 8重量份；(3)附子苷 1-2重量份；优选1. 2-1. 8重量份；(4)大黄酚 2. 5-4重量份；优选2. 5-3. 5重量份；
更优选2. 8-3. 2重量份；和(5)桂枝醛 0. 3-0. 8重量份；优选0. 4-0. 6重量份。在本发明的一个实施方案中，所述的药物组合物，其包含甘草苷2重量份，丹皮酚1. 5重量份，附子苷1. 5重量份，大黄酚3重量份，和桂皮醛0. 5重量份。根据本发明任一项所述的药物组合物，其中，所述甘草为炙甘草。本发明的另一方面涉及一种药物制剂，其包含根据本发明任一项所述的药物组合物，以及药学上可接受的载体或辅料。在本发明中，所述载体或辅料包括但不限于粘附剂、分散剂和表面活性剂中的任意的一种、两种、或多种。在本发明中，将本发明的任一项所述的药物组合物利用粘附剂、润湿剂和分散剂等合适的药剂学辅料使其在体液中可以高效的润湿、分散，从而得到制剂等技术均在本发明申请保护的范围内。在实际应用中，还可以根据需要加入其它常规辅料及成型剂，比如淀粉、糊精、预胶化淀粉、微晶纤维素、羟丙基纤维素、壳聚糖、卡波姆、羧甲基纤维素钠、聚维酮、聚乙二醇、交联聚维酮、微粉硅胶、枸橼酸、甘露醇等。在本发明中，粘附剂优选淀粉浆、聚维酮和干淀粉中的任一种或多种。表面活性剂优选壳聚糖、泊洛沙姆和卵磷脂中的任一种或多种。不拘于理论的限制，因其对脂溶性成分有表面润湿作用，降低表面张力，可以增加脂溶性成分的溶解度，促进其分散吸收，有利于脂溶性成分更好地发挥药效。分散剂优选微晶纤维素、微粉硅胶、聚乙二醇中的任一种或多种。不拘于理论的限制，这些分散剂本身具有亲水性，有利于脂溶性成分的润湿、分散，可以增强药物的稳定性。将本发明的组合物与上述辅料配合使用，充分混合均勻，制成的片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂，可以增强组合物的分散性，润湿性，提高其生物利用度。本发明中所用的术语“组合物”意指包括包含指定量的各指定成分的产品，以及直接或间接从指定量的各指定成分的组合产生的任何产品。可改变本发明药物组合物中活性成分的实际剂量水平，以便所得的药物组合物能有效针对具体患者、剂型和给药方式得到所需的治疗反应。在本发明的一个实施方案中，所述的药物制剂的组成为(重量份)[0070 [0071 [0072 [0073 [0074 [0075 [0076 [0077
本发明的药物组合物55-90重量份，
泊洛沙姆聚维酮卵磷脂微晶纤维素
2-11重量份， 1-6重量份， 1-6重量份，
3-11重量份，和 10%淀粉浆 3-11重量份。
在本发明的一个实施方案中，所述的药物制剂的组成为(重量份)
本发明的药物组合物60 - 80重量份
泊洛沙姆5-10重量份
聚维酮2. 5 - 5重量份
卵磷脂2.5-5重量份
微晶纤维素5-10重量份
10%淀粉浆5-10重量份根据本发明任一项所述的药物制剂，其为口服制剂，例如片剂、滴丸、胶囊、或颗粒剂。根据本发明任一项所述的药物组合物或药物制剂，其用于清除晚期氧化蛋白产物；具体，用于清除生物体的体内或体外的晚期氧化蛋白产物；更具体地，用于清除生物体的体内喜欢中的晚期氧化蛋白产物；进一步具体地，所述循环包括但不限于血液循环、体液循环。术语“清除”的含义包括但不限于全部或部分清除或去除、或者降低含量或水平。 清除的对象包括但不限于期氧化蛋白产物、血尿素氮、血肌酐、和血清丙二醛中的任一种或多种。本发明的再一方面涉及本发明中任一项所述的药物组合物或药物制剂在制备清除晚期氧化蛋白产物、血尿素氮、血肌酐、或血清丙二醛的药物或者提高超氧化物歧化酶活性的药物中的用途。本发明的再一方面涉及本发明中任一项所述的药物组合物或药物制剂在制备预防和/或治疗和/或辅助治疗晚期氧化蛋白终产物所致疾病的药物中的用途；具体地，所述疾病为慢性肾脏疾病、糖尿病肾病、糖尿病并发症、或动脉粥样硬化。本发明通过实施例11证明；本发明的药物组合物或药物制剂能够有效地清除 AOPP,而根据背景技术中记载的参考文献等，AOPP的清除能够有效地预防和/或治疗和/或辅助治疗上述疾病。本发明的再一方面涉及一种在体内或体外清除晚期氧化蛋白产物、血尿素氮、血肌酐、或血清丙二醛的方法或者提高超氧化物歧化酶活性的方法，包括使用有效量的本发明中任一项所述的药物组合物或药物制剂的步骤。本发明的再一方面涉及一种预防和/或治疗和/或辅助治疗晚期氧化蛋白终产物所致疾病的方法，包括给与受试者有效量的本发明中任一项所述的药物组合物或药物制剂的步骤；具体地，所述疾病为慢性肾脏疾病、糖尿病肾病、糖尿病并发症、或动脉粥样硬化。术语“受试者”可以指患者或者其它接受本发明组合物以治疗、预防、减轻和/或缓解本发明所述疾病或病症的动物，特别是哺乳动物，例如人、狗、猴、牛、马等。在本发明中，术语“有效量”是指可在受试者中实现治疗、预防、减轻和/或缓解本发明所述疾病或病症的剂量。但应认识到，本发明药物组合物的总日用量须由主诊医师在可靠的医学判断范围内作出决定。对于任何具体的患者，具体的治疗有效剂量水平须根据多种因素而定，所述因素包括所治疗的障碍和该障碍的严重程度；所采用的具体药物组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；给药时间、给药途径和排泄率；治疗持续时间；与所采用的具体药物组合物组合使用或同时使用的药物；及医疗领域公知的类似因素。例如，本领域的做法是，给药剂量从低于为得到所需治疗效果而要求的水平开始，逐渐增加剂量，直到得到所需的效果。根据本发明的药物组合物或药物制剂可以有效地预防和/或治疗本发明所述的各种疾病或病症。发明的有益效果本发明的药物组合物或药物制剂能够有效地清除晚期氧化蛋白产物，具有作为防治慢性肾脏疾病、糖尿病肾病、糖尿病并发症、或动脉粥样硬化的药物的潜力。
图1 提取物样品、甘草苷标准品、丹皮酚标准品、附子苷标准品、大黄酚标准品、 桂皮醛标准品的HPLC图谱。由上到下的六条曲线依次分别是提取物样品、甘草苷标准品、 丹皮酚标准品、附子苷标准品、大黄酚标准品、以及桂皮醛标准品的HPLC曲线。
具体实施例方式下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。实施例1-3、5中使用的各药材均购自康美药业股份有限公司。实施例1 组合物样品1的制备取药材饮片炙甘草31. 25kg、牡丹皮23. 44kg、附子23. 44kg、大黄46. 87kg、桂枝 7. 8kg,加8倍量70%乙醇，回流提取2次，每次1. 5h，弃渣旋转蒸发回收乙醇，60°C真空干燥。得干浸膏，粉碎成浸膏粉。实施例2 组合物样品2的制备取药材饮片炙甘草46. 87kg、牡丹皮31. 25kg、附子46. 87kg、大黄78. Ukg、桂枝 31. 25kg，加8倍量70%乙醇，回流提取2次，每次1. 5h，弃渣旋转蒸发回收乙醇，60°C真空干燥。得干浸膏，粉碎成浸膏粉。实施例3 组合物样品3的制备取药材饮片炙甘草15.6^^、牡丹皮7.^^、附子15.6^^、大黄31.2证8、桂枝 15. 62kg，加8倍量70%乙醇，回流提取2次，每次1. 5h，弃渣旋转蒸发回收乙醇，60°C真空干燥。得干浸膏，粉碎成浸膏粉。实施例4 组合物样品4的制备按照如下的配比称取各组分(商购，例如购自上海雅吉生物科技有限公司)，并混合均勻甘草苷 2重量份，丹皮酚 1.5重量份，附子苷 1.5重量份，大黄酚 3重量份，和桂皮醛 0.5重量份。实施例5 组合物样品5的制备按照实施例1中的药材配比制备水提取物，全方药材加十倍量水，煎煮二次，每次 2h,弃渣浓缩，60°C真空干燥，得浸膏，粉碎成浸膏粉。实施例6 组合物制剂的制备(1)取按照实施例1方法制备的浸膏粉80g，加入泊洛沙姆5g，聚维酮2. 5g，卵磷脂 2. 5g，微晶纤维素5g。将以上成分充分混勻，加入粘合剂10%淀粉浆5g，然后制粒，干燥，整粒，共制备200片，包衣。实施例7 组合物制剂的制备(2)取按照实施例3方法制备的浸膏粉90g，加入泊洛沙姆2g，卵磷脂lg，聚维酮lg， 微晶纤维素3g，将以上药材充分混合均勻，加入10%淀粉浆3g，然后制粒，干燥，整粒，最后分装成200粒胶囊。实施例8 组合物制剂的制备(3)取按照实施例4制备的样60g，加入泊洛沙姆10g，聚维酮5g，卵磷脂5g，微晶纤维素log。将以上成分充分混勻，加入粘合剂10%淀粉浆10g，然后制粒，干燥，整粒，压200 片，包衣。实施例9 组合物制剂的制备⑷取按照实施例4制备的样品55g，加入泊洛沙姆1 lg，卵磷脂6g，聚维酮6g，微晶纤维素lig，将以上药材充分混合均勻，加入10%淀粉浆llg，然后制粒，干燥，整粒，最后分装成200粒胶囊。实施例10 药物组合物(提取物)的成分分析取药材饮片炙甘草31. 25kg、牡丹皮23. 44kg、附子23. 44kg、大黄46. 87kg、桂枝 7. 8kg,加8倍量70%乙醇，回流提取2次，每次1. 5h，弃渣旋转蒸发回收乙醇。提取物经高效液相色谱(HPLC)法检测化学成分。采用WaterS996HPLC仪，515型泵，色谱柱为大连依利特HypersiL0DS2 C18柱06mmX 250mm，5 μ m)。色谱条件乙腈水梯度洗脱，B泵为水相，梯度洗脱程序见下面的表1，检测波长为280nm。表1:梯度洗脱程序
权利要求
1.一种药物组合物，包含如下组分 甘草、牡丹皮、附子、大黄、和桂枝。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其包含 甘草 1-3重量份，牡丹皮0.5-2重量份， 附子 1-3重量份， 大黄 2-5重量份，和桂枝 0. 1-1重量份。
3.根据权利要求1所述的药物组合物，其包含 甘草 2重量份，牡丹皮1.5重量份， 附子 1. 5重量份， 大黄 3重量份，和桂枝 0. 5重量份。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的药物组合物，其通过下述步骤1)或2、制备1)取权利要求1至3中任一项所述的甘草、牡丹皮、附子、大黄、桂枝药材(例如饮片)， 加5-10倍量的60-80%的乙醇为溶剂，浸泡30min-ai，回流提取1_3次，每次l_3h，合并醇提取液；可选地，残渣用3倍量水煎煮30min-a!，得到水提取液，并合并水提取液与醇提取液；或2)取权利要求1至3中任一项所述的甘草、牡丹皮、附子、大黄、桂枝药材(例如饮片)， 加5-15倍量的水进行煎煮至少15min，得到提取液。
5.根据权利要求4所述的药物组合物，其制备还包括下述步骤3)3)将步骤1)和/或幻中制得的提取液浓缩至相对密度为1.20-1.35的稠膏，50-80°C 真空干燥成干浸膏；可选地，将干浸膏粉碎。
6.一种药物组合物，包含如下组分 甘草苷、丹皮酚、附子苷、大黄酚、和桂皮醛。
7.根据权利要求6所述的药物组合物，其包含 甘草苷 1-3重量份，丹皮酚 0. 5-2重量份， 附子苷 1-3重量份， 大黄酚 2-5重量份，和桂皮醛 0. 1-1重量份。
8.根据权利要求6所述的药物组合物，其包含 甘草苷 2重量份，丹皮酚 1. 5重量份， 附子苷 1. 5重量份， 大黄酚 3重量份，和桂皮醛 0. 5重量份。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的药物组合物，其中，所述甘草为炙甘草。
10.一种药物制剂，其包含权利要求1至9中任一项所述的药物组合物，以及药学上可接受的载体或辅料；具体地，所述载体或辅料为粘附剂、分散剂和表面活性剂；更具体地， 所述粘附剂选自淀粉浆、聚维酮和干淀粉中的任一种或多种，所述分散剂选自微晶纤维素、 微粉硅胶、聚乙二醇中的任一种或多种，所述表面活性剂选自壳聚糖、泊洛沙姆和卵磷脂中的任一种或多种。
11.根据权利要求10所述的药物制剂，其为口服制剂，例如片剂、滴丸、胶囊、或颗粒剂。
12.根据权利要求10或11所述的药物制剂，其包含权利要求1至9中任一项所述的药物组合物 55-90重量份， 泊洛沙姆2-11重量份，聚维酮1-6重量份，卵磷脂1-6重量份，微晶纤维素3-11重量份，和10%淀粉浆3-11重量份。
13.权利要求1至9中任一项所述的药物组合物或者权利要求10至12中任一项所述的药物制剂在制备清除晚期氧化蛋白产物、血尿素氮、血肌酐、或血清丙二醛的药物或者提高超氧化物歧化酶活性的药物中的用途。
14.权利要求1至9中任一项所述的药物组合物或者权利要求10至12中任一项所述的药物制剂在制备预防和/或治疗和/或辅助治疗晚期氧化蛋白终产物所致疾病的药物中的用途；具体地，所述疾病为慢性肾脏疾病、糖尿病肾病、糖尿病并发症、或动脉粥样硬化。
15.一种在体内或体外清除晚期氧化蛋白产物、血尿素氮、血肌酐、或血清丙二醛的方法或者提高超氧化物歧化酶活性的方法，包括使用有效量的权利要求1至9中任一项所述的药物组合物或者权利要求10至12中任一项所述的药物制剂的步骤。
全文摘要
本发明属于药物学和制剂学领域，涉及用于清除晚期氧化蛋白终产物的药物组合物及其用途。具体地，本发明的药物组合物包含如下组分甘草、牡丹皮、附子、大黄、和桂枝。本发明的药物组合物能够有效地清除晚期氧化蛋白产物，具有作为防治慢性肾脏疾病、糖尿病肾病、糖尿病并发症、或动脉粥样硬化的药物的潜力。
文档编号A61K31/12GK102526237SQ201210019889
公开日2012年7月4日 申请日期2012年1月21日 优先权日2012年1月21日
发明者杨西晓 申请人:南方医科大学南方医院