专利名称：一种具有醒酒保肝作用的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明属医药和食品领域，是一种具有防治酒精性肝损伤等相关疾病的天然产物的组合物。本发明涉及一种具有防治酒精性肝损伤等相关疾病的天然产物的组合物，属于医药和食品领域。
背景技术：
肝脏是人体最大的腺体，它在人的代谢、胆汁生成、解毒、凝血、免疫、热量产生及水与电解质的调节中均起着非常重要的作用。一般来说，造成肝损伤主要有两大类致病因素，一类是由病原微生物如病毒感染而引起的肝脏炎症，如甲肝、乙肝等。另一类则是化学性肝损伤，它由各种毒性物质，如食物中的酒精、环境中的化学毒物及某些药物等对肝脏造·成的损伤。另外由于肝脏是人体的主要代谢器官，肝脏脂肪代谢功能的失调会导致诸如高血脂、肥胖等症状。酒精性肝损伤是指由于过量摄入酒精而导致的肝脏损害等一系列病变。酒精性肝损伤可以分为急性酒精性肝损伤以及慢性酒精性肝损伤。急性酒精性肝损伤是由于一次摄入过量酒精而造成肝功能损害，表现为食欲不振、恶心、肝部不适黄疸等类急性肝炎症状。慢性酒精性肝损伤是由于长期摄入酒精而导致肝细胞纤维化变性、坏死，肝脏免疫功能遭到破坏，常表现为酒精性脂肪肝，酒精性肝炎以及酒精性肝硬化。治疗酒精性肝损伤的药物主要有抗内毒素药物、抗氧化剂、糖皮质激素、对抗和改善乙醇代谢的药物。这些药物对急性酒精性肝损伤和慢性酒精性肝损伤初期有一定的疗效，但到了酒精性肝损伤的后期，人体免疫机能严重下降，肝功能受损严重，只有进行肝移植才能能显著改善症状和增加生存率。总而言之，现代医学对于治疗急慢性酒精性肝损伤并无一特效良药。中医学对酒精性肝损伤的研究，论述于“伤酒”、“胁痛”、“酒癖”、“酒鼓”、“黄疸”等病证之中，有其独特的治疗方法。中医理论认为，酒为大热有毒之品，过饮之必伤及脾胃肝胆而引发疾病。病机则可归纳为脾胃气虚、痰湿内阻、水湿内停、气血不和、气滞血瘀等。其中，酒伤肝脾、聚湿生痰为发病之关键；而素体禀赋不足、脾胃虚弱为发病之本。由于长期饮酒能阻碍脂肪酸的分解，引起中性脂肪蓄积，由于过剩的H+能阻碍肝细胞线粒体内作为能源的脂肪酸分解，引起脂肪肝。肝细胞的脂肪化严重影响了肝的正常功能，抑制了体内三羧酸循环的进行，导致酒的代谢途径受阻，加重酒精对正常组织的损害，形成恶性循环。因此研究一种可以降低酒精毒性，并可对酒精所致肝损伤有恢复作用的药物有着较大的社会效益及应用前景。本发明就是将从天然植物中发现和提取的一种具有防治酒精性肝损伤的中药组合物。该组合物是由有效成分创新组合成天然产物组合物，从几种不同作用机制上入手治疗酒精性肝损伤，多组分多靶点协同作用，达到长短结合，标本兼治的效果，以期从疗效和安全性上有显著的突破和提高。积雪草是伞形科植物积雪草Centella asiatica Linn.的全草,别名有崩大碗、缺碗草、马蹄草、雷公根等。始载于《神农本草经》，列为中品，苦、辛、寒，归肝、脾、肾经，具有清热利湿，解毒消肿的功效。用于湿热黄疸，中暑腹泻，砂淋血淋，痈肿疮毒，跌打损伤。我国民间常用于治疗感冒、扁桃腺炎、传染性肝炎、痢疾、跌打损伤、疔疮肿毒、流行性脑脊髓膜炎等。《岭南草药志》记载，崩大碗每次约八两至一斤，煎水服，用于治肝脏肿大。《江西民间草药》记载积雪草一两，冰糖一两，水煎服，用于治湿热黄疸。《广东中药》II记载，积雪草具有清暑热，去湿热，治肝肿大等作用。积雪草的有效成分为积雪草总皂苷、积雪草酸、羟基积雪草酸等。近年研究报道积雪草有促进伤口愈合，软化疤痕，抗牛皮癣，抗抑郁，抗乳腺增生，抗肝纤维化，抗癌，治疗水肿，保肝，降血糖及并发症的治疗等作用。王胜浩等发明专利(公开号CN100441201C)报道了积雪草总苷具有治疗外伤、手术创伤、烧伤，疤痕疙瘩及硬皮病及抗抑郁和治疗肝肾纤维化作用。国内专利公开了积雪草酸及衍生物有治疗皮肤创伤、抗抑郁、抗阿尔茨海默病以及保肝、保护心脑血管和诱导肿瘤细胞调亡等多种作用(CN1238692、CN1248918、CN1543964及CN1582946)。积雪草酸还有治疗肝纤维化、肺纤维化作用(专利申请号200610122561. 4、200610118041. 6)。李洪钟研究表明羟基积雪草苷对小 鼠急性肝损伤具有明显的保护作用。张丽娜研究表明积雪草苷对小鼠脓毒症致急性肝损伤具有明显的保护作用。桅子为菌草科植物桅子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果实,始载于《神农本草经》，性寒味苦，归心、肺、三焦经，具有泻火除烦，清热利尿，凉血解毒之功效。用于热病心烦，湿热黄疸，血淋涩痛，血热吐衄，目赤肿痛，火毒疮疡。桅子利胆、退黄作用较强，生品治疗黄疸性肝炎效果最好。现代研究发现，桅子中含有桅子苷(Gardenoside)、桅子新苷、羟异桅子苷等环烯醚萜苷类成分，该类成分是桅子的主要有效部位。有文献报道，事先给予ICR大鼠桅子提取物，可防止因半乳糖胺诱发的爆发性肝损伤。给予桅子苷能够有效降低由异硫氰酸α-萘酯造成的大鼠转氨酶升高。家兔和大鼠消化道给予桅子提取物能够增加胆汁分泌，与去氢胆酸钠效价相当。临床文献报道，单用桅子水煎口服，对于黄疸性肝炎即有满意的利胆退黄疗效，在不同类型的肝炎的不同疾病阶段，口服桅子水煎液能够获得较为明显的保肝降酶作用。桅子提取物能显著降低血清胆红素含量、ALT和AST活性，对肝细胞有保护作用(阴健，郭力弓.中药现代研究与临床应用II.北京学苑出版社，第一版.1993，473)。在治疗肝脏疾病传统中药复方中，桅子为常用的药味。姜黄为姜科植物姜黄Curcuma longa L.的干燥根莖，中医认为姜黄性味辛、苦，温。归脾、肝经。功能破血行气、通经止痛。用于胸胁刺痛，闭经，徵瘕等。现代药理学研究表明，姜黄主要含精油、脂肪油等挥发油及姜黄素类成分。其中类姜黄素类是二苯基炔类成分，有酚性和非酚性成分。姜黄的黄色物质为略带酸性的酚性物质，是姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素的混合体，称之为姜黄色素，是姜黄发挥药理作用的主要成分，而姜黄素是其中最重要的活性成分。研究表明，姜黄具有抗炎、抗氧化、保肝、对抗纤维化、抗癌等作用。试验证明，姜黄和姜黄素在体内和体外对各种毒物如四氯化碳、黄曲霉素B1、对乙酰氨基酚、铁和环磷酰胺诱导的肝损伤都有保护作用，可抑制黄曲霉素B1诱导菌株thyphimurium沙门菌TA98和TAlOO的突变，抑制率超过80 %0此外，姜黄素可显著降低酒精加多不饱和脂肪酸喂饲动物的血中碱性磷酸酶、Y-谷氨酰转移酶及组织中胆固醇、TG和游离脂肪酸的含量，使肝和肾组织中的磷脂显著降低，与组织病理学结果一致。因此姜黄素具有防止实验性脂肪肝的作用。一般认为姜黄素的保肝作用是通过抗脂质过氧化而间接实现的。在四氯化碳诱导的肝损害大鼠中，姜黄素可减少肝脏胶原沉积、α -平滑肌肌动蛋白阳性染色面积以及I型胶原mRNA的表达；在体外，姜黄素可减少星形细胞DNA的合成，下调α-平滑肌肌动蛋白、I型胶原蛋白及α 链mRNA的表达。无论在体内还是体外均提示姜黄素可能是一种抗纤维化制剂。第一军医大学的刘永刚等人的研究结果证明，姜黄素对3种试验动物模型的肝损伤具有明显的保护作用。姜黄素可显著降低肝损伤所致血清ALT，AST,NO的升高，降低损伤肝组织MDA的含量。刘永刚的另一项试验证明，姜黄素能使升高的HA、LN、肝Hyp水平显著降低，且病理观察提示姜黄可以明显抑制胶原纤维的增生，说明姜黄素确能抑制肝脏胶原纤维的合成和沉降，具有抗肝纤维化的作用，其机制与抑制MDA的产生有关。白苟为毛茛科植物苟药Paeonia lacticilore Pall的干燥根。主要化学成分为白芍总苷。《滇南本草》泻脾热，止腹疼，止水泻，收肝气逆疼，调养心肝脾经血，舒经降气，止肝气疼痛”。《中华本草》记载白芍用于治疗肝炎，白芍具有保肝、降酶的作用，目前认为白芍能促进白蛋白的合成。白芍提取物对D-半乳糖胺所致肝损伤和SGPT升高有明显的对抗作用，能使SGPT降低，并使肝细胞的病变和坏死恢复正常。白芍的乙醇提取物能使黄曲霉·素^引起的大鼠急性肝损伤所表现出来的乳酸脱氢酶及同功酶的总活性升高得以降低。白芍总苷可抑制四氯化碳所致小鼠血浆GPT和乳酸脱氢酶升高，并对肝脏组织噬酸性变性、坏死有一定的对抗作用。研究认为，四氯化碳所致的肝损伤是因细胞膜结构发生过氧化作用而破坏，使血中谷丙转氨酶和乳酸脱氢酶升高，白芍总苷可能对肝细胞损伤具有保护作用，因此可使转氨酶降低。白芍总苷(60、120、240mg/kg)灌胃给药均能降低血浆中升高的转氨酶水平，病理检查也发现其可明显减轻肝组织坏死范围及程度，减少炎细胞浸润。同时发现白芍总苷可降低肝匀浆中升高的MDA水平，使降低的肝匀浆SOD、GSH-Px酶活性升高。说明白芍总苷对CCl4致小鼠急性化学性肝损伤具有保护作用，其机制与其抗自由基、提高抗氧化物酶的活性等有关。丹参是唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge的干燥根及根莖,具有活血祛淤、安神宁心、止痛等功效。丹参素、丹参酮是其主要药理成份。现代药理研究表明，丹参是天然的抗氧化剂，丹参具有清除毒性自由基、抑制正常及损伤肝细胞脂质过氧化的作用。丹参素、丹参酮对四氯化碳和D-氨基半乳糖诱导的小鼠急性肝损伤和四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化有保护作用。南京医科大学的李菁等的试验证明，丹参素能使正常肝细胞增殖，能消除活性氧自由基，增强肝细胞SOD活力，抑制膜的脂质过氧化反应，减轻肝细胞变性坏死。白求恩医科大学的叶红军等人的研究显示，丹参减轻肝细胞坏死、脂肪变性、促进肝细胞再生，改善肝脾血液循环及减轻其淤血及缺血状态作用均优于辅酶Q1(l。辽宁中医学院附属医院的吴百灵的研究表明，丹参可抑制ALT、AST酶活性增高，其作用是因为丹参具有显著的抗脂质过氧化作用。山西医科大学郑晓宾等人的研究证明了丹参防治实验性肝损伤的途径之一可能是减少了 TNF-α的释放，降低了 TNF-α的毒性而发挥作用。南京铁道医学院附属医院的刘怡晟等人研究表明，丹参对CCl4所致肝损伤有明显的保护作用。丹参能明显降低血清ALT、血清和肝匀浆MDA以及肝细胞的钙含量，也能减少血清及肝组织SOD活力的下降，光镜和电镜下肝组织病理病变明显减轻，同时发现丹参能明显降低血清TNF-α，表明丹参的作用机制是通过减轻肝细胞膜脂质过氧化，保持自由基清除能力，减轻钙超载，同时抑制TNF-α的释放，加速其灭活。
蓝莓(越桔)为杜鹃花科植物笃斯越桔的成熟果实。蓝莓中花色苷的含量很高，是其最重要的生物活性成分。蓝莓花色苷常见的有15种，主要为花青素(cyanidin)。蓝莓提取物中不仅花青素的分子优越，而且含有丰富的有机锗、有机硒、熊果苷、氨基酸、果酸和维生素等特殊营养成分，这些特殊营养物质在游离状态就对人体生理具有特别有益的功效；如果镶嵌在低聚体花青素分子中，随着生物利用率的提高，其功效更加明显。蓝莓的果胶含量也很高，能有效降低胆固醇，防止动脉粥样硬化，促进心血管健康。其果酸、甘、平，能补气血，益肝阴，舒筋活血，暖胃健脾，除烦解渴。所含的多酚类物质是天然的自由基清除剂，具有很强的抗氧化活性，可以有效地调整肝脏细胞的功能，抵御或减少自由基对它们的伤害。花青素拥有强有力的抗氧化能力，在体内其抗氧化、清除自由基能力是维生素E的50倍、维生素C的20倍。蓝莓提取物对乙醇肝损伤有预防和治疗作用，对四氯化碳肝损伤也有一定治疗作用。能抑制红细胞膜和低密度脂蛋白的脂质过氧化。还能促进内皮细胞松弛因子NO的形成，对细胞和组织的损伤起保护作用。程彦杰经研究发现服用花青素可明显降低动物的醉倒率，提高动物对酒精的耐受能力，改善长期服用酒精的动物的肝功能，降低过氧化脂质在肝中的沉积，增加动物对疼痛的耐受力，同时可明显改善长期饮酒后头痛人群的头痛症状。 综上所述，六味药合用以不同的药效物质从不同的作用靶点和途径有非常明确的防治酒精想性肝损伤的作用，可有效的预防和治疗酒精性肝损伤。因此该组合物可用于制备具有防治酒精性肝损伤的药品和保健品。
发明内容
本发明提供一种具有清热养阴，化瘀通络之功效，用于治疗酒精性肝损伤药物组合物。本发明人依据科学理论、经过反复试验，选用了积雪草、桅子、姜黄、白芍、丹参、蓝莓等六种卫生部规定的既是食品又是药品和可用于保健食品的原料，所以该处方组成非常安全、无任何副作用。用以制备本发明具有防治酒精性肝损伤的保健食品。在选取本发明保健食品的各原料进行组合搭配时，考虑到它们各自所能发挥的功效及将它们进行搭配所能产生的协调效果。本组合物与欧美、日本畅销的解酒剂(添加兴奋剂、止痛剂、维生素和矿物质等类型的产品，只能暂时缓解宿醉引起的症状，但对于酒精引起的肝损伤并无确切疗效)具有明显的不同；同时与目前已有的护肝解酒类保健食品相比，具有活性更确切，化学组成具有明显的特色，这是本发明的突出贡献。本发明目的是，基于现代病理分子机制和传统中医理论结合的原则，经过大量的研究发现本发明组合物对于酒精性肝损伤的治疗具有显著的疗效，可以用来制备成防治酒精性肝损伤的药物或保健品。这种现代天然产物组合物，其中蕴涵了大量抗肝纤维化，修复损坏组织，增加胆汁分泌，降低转氨酶，降低血清胆红素含量、ALT和AST活性，降低碱性磷酸酶、Y-谷氨酰转移酶及组织中胆固醇、TG和游离脂肪酸的含量，减少肝脏胶原沉积，减少肝细胞坏死、脂肪变性，促进肝细胞再生，消除氧自由基等化学成分成分。这些化学成分相互协同、多靶点、多途径作用，六药组合从根本上全面调节肝损伤人的机体，改善身体健康状况。本发明适用于饮酒较多造成酒精性肝损伤者，通过降低乙醇在血中的浓度，促进乙醇的清除，消除酒后体内产生的过量自由基，阻碍过氧化脂质的形成，从而减轻了乙醇对肝组织的损伤，起到对肝损伤的辅助保护功能，并有美容护肤的功效。具有明显的创新性和技术进步。本发明选用民间常用中药的积雪草为君药，积雪草早于古书《岭南草药志》、《江西民间草药》、《广东中药》II中有记载，用于治疗湿热黄疸、肝肿大。现代研究表明，积雪草皂苷及积雪草酸具有抗肝纤维化、修复损坏组织、抗炎等药理活性。本发明是根据古方中积雪草的用途与现代成分化学相结合，经过试验证明，具有明显的抗肝损伤的活性，同时兼顾中医理论，与桅子、姜黄、白芍、丹参、蓝莓组方，与目前市场上用于治疗酒精性肝损伤的药物具有实质的区别和明显的技术进步，也是本发明的有一创新点。本发明提供了可改善与治疗酒后头晕、头痛、恶心、呕吐、胃内不适症状及酒精性肝损伤、脂肪肝的药物组合物。该组合物具有清热养阴、化瘀通络，解毒，肝胃并治，行敛相兼，从多环节共同发挥解酒护肝之保健功效。符合成分化学的研究，同时也符合中医理论，《内经》云“肝苦急，急食甘以缓之。肝欲散，急食辛以散之，用甘补之，酸泻之”。其从中医理论的角度指出了辛、甘、酸三味与肝病的重要关系。积雪草，苦、辛、寒，归肝、脾、肾经，具·有清热利湿，解毒消肿的功效，用于湿热黄疸。桅子，性寒味苦，归心、肺、三焦经，具有泻火除烦，清热利尿，凉血解毒之功效，用于热病心烦，黄疸尿赤。姜黄调和肝脾、破血行气、健胃利胆。白芍，性苦、酸、微寒，主归经、脾经，平抑肝阳，养血敛阴，柔肝止痛。丹参，活血化瘀、清热安神。蓝莓，酸、甘、平，利尿解毒。诸药合用，共奏解酒醒酒、养肝扶肝，具有清热养阴，化瘀通络之功效。本发明所要解决的技术问题在于从天然植物积雪草、桅子、姜黄、白芍、丹参、蓝莓中提取具有防治酒精性肝损伤作用的活性组分、制备天然产物组合物。本发明提供了一种具有防治酒精性肝损伤的中药制成的组合物，该组合物包括积雪草100-500份、桅子100-500份、姜黄50-250份、白芍50-250份、丹参50-250份、蓝莓50-250份。优选积雪草250份、桅子150份、姜黄100份、白芍100份、丹参80份、蓝莓80份，也可由以上六味药提取物组成，积雪草提取物25-150份、桅子提取物25-150份、姜黄提取物10-50份、白芍提取物10-50份、丹参提取物10-50份、蓝莓提取物10-50份，优选积雪草提取物50份、桅子提取物30份、姜黄提取物20份、白芍提取物20份、丹参提取物20份、蓝莓提取物15份。按照上述比例混合组成活性成份与药用辅料制成的。本发明的另一目的是提供了本组合物的制备方法( I)将蓝莓粉碎成粗粉；(2)桅子、姜黄、丹参、蓝莓粗粉四味中药用8-15倍40% -95%的乙醇溶液，提取2-3次，每次1-3小时，过滤，滤液回收乙醇，浓缩，干燥，粉碎，即得乙醇提取物；(3)积雪草、白芍两味中药用8-20倍去离子水，提取2-4次，每次1_3小时，过滤，滤液浓缩，干燥，粉碎，即得水提取物；(4)将乙醇提取物、水提取物混合后，再与药用辅料一起混合，按常规方法制成口服制剂。由于本发明首次公开了由积雪草、桅子、姜黄、丹参、白芍、蓝莓组成的组合物具有防治酒精性肝损伤的作用，因此，将本组合物单独或与其它活性组份或辅料配合制成药剂，只要是该药剂用于预防和治疗酒精性肝损伤，均属于本发明的保护范围。本发明的组合物在制成任何一种剂型时，均具有预防和治疗酒精性肝损伤的作用。
由积雪草、桅子、姜黄、丹参、白芍、蓝莓组成的组合物(简称组合物)具有防治酒精性肝损伤作用，通过以下药效学实验得到证实。I、本发明组合物对酒精性肝损伤的保护作用小鼠60只，随机分为6组，即本发明组合物低、中、高三个剂量组，酒精模型组，空白对照组和阳性对照组。本发明组合物组分别按200、400及800mg/kg灌胃小鼠，阳性对照组(联苯双酯滴丸)60mg/kg, I次/d，共14d，酒精模型组和空白组对照组分别灌胃等体积蒸馏水，I次/d，共14d。末次给药后禁食12小时，除空白对照组仍然灌胃等量蒸馏水外，其他5组动物(本发明组合物低、中、高三个剂量组，阳性药对照组，酒精模型组)分别灌胃50%乙醇15mL/kg，6h后眼静脉取血，测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量，取小鼠肝脏称重，测定肝器指数，取右叶测定超氧化物歧化酶的(S0D)，谷胱甘肽过氧化酶(GSH-PX)活性，丙二醛(MDA)含量。
表I本发明组合物对酒精损伤小鼠血清ALT、AST及肝脏系数的影响(i )
组别剂量(mg/kg) 动物数(只) ALT(U/L)AST(U/L) 肝脏指数(％)
空白对照组—1038. 6±6. 2 83. 5±20.58 4. 25±0.80
酒精组—10107. 7±7.58_ 199. 2±65.21 8. 25±0.99**
组合物2001070. 8±8.89λ 132. 9±29.644 6. 05±1.08ΛΛ
组合物4001063. 1±9.98δ 120. 5±31.58λ !5. 28±1.25λδ
组合物8001048. 9±7.95λλ 100. 8±33.68λλ 4 68 ±0.48〃
联苯双酯601043. 2±6.58δλ 102. 5±29.64λλ 4. 78±0.33Ji与空白对照组比较* P〈 O. 05，* * P〈 O. 01，* * * P〈 O. 001 ;酒精组比较Ap
<O. 05，Δ Δρ < O. 01。从表I可知，灌胃酒精使小鼠肝指数显著增加，灌胃本发明组合物可使酒精损伤小鼠肝脏指数显著降低。灌胃酒精使小鼠血清ALT、AST显著增加，灌胃本发明组合物可使酒精损伤小鼠血清ALT、AST显著降低。阳性对照药可使小鼠血清ALT、AST显著降低，也可显著降低小鼠肝脏指数。表2本发明组合物对酒精损伤小鼠肝脏MDA、GSH-PX, SOD的影响( )
组另U剂量动物数MDAGSH-PXSOD
^(mg/kg) C只) (nmol/mlprot)(umol/L prot)(mg/gprot)
空白对照组 —108. 1±1.2132.2±4.89163.7±29.6
酒精组—1043.4±9.98*** 16.9±2.00** 78.5±20.6***
组合物2001025.2±4.88Λ24. 8±4.86、 103. 8±31.5iA
组合物4001024. 1±5.98λ28.2±5.98、 111.1±22.6ΔΔ
组合物8001022.2±4.98δλ 32.2±6.11Ai 126.7±39.6iAi
联苯双酯601024. 3±5.62λ27.8±5.25" 108.6±19.6"Δ与空白对照组比较* P〈 O. 05，* * P〈 O. 01，* * * P〈 O. 001 ;酒精组比较Ap
<0. 05，Δ Δρ < 0. 01。
从表2结果表明，酒精能引起小鼠肝脏MDA含量显著升高、引起GSH-PX酶、SOD活性显著降低，而本发明组合物能显著降低MDA含量，能显著升高GSH-PX酶、SOD活性。阳性对照药也能显著降低MDA含量、显著升高GSH-PX酶、SOD活性，活性与本发明组合物中剂量相当。2、本发明组合物对酒精弓I起的脂肪肝的改善功能试验大鼠120只，随机分为正常对照组；脂肪肝模型组；阳性对照药东宝肝泰600mg/kg给药剂量组本发明组合物设200mg/kg、40mg/kg和800mg/kg三个给药剂量组。共6组，每组20只。除正常对照组外，其余各组大鼠每日上午8 30灌胃给予(56%乙醇+O. 5mL鱼油)1次，乙醇剂量开始为7g/kg，随后每周递增O. 2g/kg，连续4周。正常对照组大鼠灌胃给予等热量的56%葡萄糖+ O. 5mL鱼油。受试药物用蒸馏水配制成混悬液，每日下午I :00灌胃给予I次，正常对照组与模型对照组大鼠灌胃给予等量的蒸馏水，灌胃体积为10ml/kg/d。试验过程中大鼠自由摄食饮水，每周称量体重I次，以调整给药剂量。于给药
第四周末处死动物。标本采集及观测指标，试验结果以均数加减标准差( )表示，统·
计学处理方法采用组间t检验。实验结果见表3和表4。表3本发明组合物对酒精性脂肪肝大鼠血清ALT、AST和LDH活性的影响(;
)
组别动物数剂量 ALT活性 AST活性LDH活性
(只) (mg/kg) (U/L) (U/L)(U/L)
正常对照组 10 — 37.8±9.26 41. 2±7.0253. 2±22.3
模型组 10 — 95.5±21.36 127.8± 11.8 1484. 3±16.5
组合物 10 200 76.4± 16.8 121. 2±30.5399. 6±22.5
组合物 10 400 60. 2±21.6·^ 64. 7±29.5ΛΛΛ361. 2±15.6a
组合物 10 800 50. 2土26.4Aii 70. 3±20.8ΛΔΛ322. 8±15.2ΛΛ
东宝肝泰 10 800 57. 6±19.6iA 84. 6±36.5ΛΛ368. 1±11.2Λ与正常对照组比较* P〈 O. 05，* * P〈 O. 01，* ** P < O. 001 ;模型组比较Ap
<O. 05，Δ Δρ < O. 01, Δ Δ Δρ < O. 001。本发明组合物高、中剂量组动物血清ALT和AST活性非常明显的低于模型组，本试验结果表明，本发明组合物可明显降低酒精性脂肪肝大鼠血清中异常升高的ALT、AST的活性，说明本发明组合物对肝细胞具有良好的保护作用。本发明组合物高、中剂量组对酒精性脂肪肝动物血清LDH水平的异常升高具有明显的降低作用，此项试验结果表明，本发明组合物对酒精所致脂肪肝有很好的保护作用。表4本发明组合物对酒精性脂肪肝大鼠血清TC、TG和MDA含量及肝组织TG含量的影响(X )
与正常对照组比较* P〈 O. 05，* * P〈 O. 01，* ** P < O. 001 ;模型组比较Ap
<O. 05，Δ Δρ < O. 01。本发明组合物可降低脂肪肝模型动物血清MDA含量，抑制脂肪肝时肝细胞的脂质过氧化反应，从而发挥保护肝细胞免受损伤的作用。本发明组合物高、中两个剂量组动物血清中TC、TG含量及肝组织TG含量显著低于模型对照组。表明本发明组合物可以降低酒精所致脂肪肝大鼠血脂含量及肝脏脂类含量的升高，具有抑制肝脏脂肪堆积的作用。从以上的药效学实验可知，本发明组合物具有预防和治疗酒精性肝损伤、酒精性脂肪肝的作用，并且长期服用没有副作用。本发明是通过下面的实施例进行详细的说明，但不意味着本发明仅限于此，具体实施方案如下实施例I、(片剂) (I)将蓝莓160g，粉碎成粗粉；(2)桅子300g、姜黄200g、丹参160g、蓝莓粗粉四味中药用10倍70%的乙醇溶液，提取3次，每次2小时，过滤，滤液回收乙醇，浓缩，干燥，粉碎，即得乙醇提取物；(3)积雪草500g、白芍200g两味中药用12倍去离子水，提取2次，每次2小时，过滤，滤液浓缩，干燥，粉碎，即得水提取物；(4)将乙醇提取物、水提取物混合后，加入适量淀粉，混匀，制粒，干燥，整粒，压片，制成1000片，即得。每次2片、每日3次。实施例2、(胶囊剂)( I)将蓝莓160g，粉碎成粗粉；(2)桅子300g、姜黄200g、丹参160g、蓝莓粗粉四味中药用10倍70%的乙醇溶液，提取3次，每次2小时，过滤，滤液回收乙醇，浓缩，干燥，粉碎，即得乙醇提取物；(3)积雪草500g、白芍200g两味中药用12倍去离子水，提取2次，每次2小时，过滤，滤液浓缩，干燥，粉碎，即得水提取物；(4)将乙醇提取物、水提取物混合后，加入适量淀粉，混匀，制粒，干燥，整粒，装胶囊，制成1000粒，即得。每次2粒、每日3次。
权利要求
1.一种具有清热养阴、化瘀通络作用的中药组合物，其特征在于由积雪草、桅子、姜黄、白芍、丹参、蓝莓组方而成。
2.根据权利要求I所述的中药组合物，其特征在于，它是由下述重量份的原料制成 积雪草100-500份桅子100-500份 姜黄50-250份白芍50-250份 丹参50-250份蓝莓50-250份。
3.根据权利要求I所述的中药组合物，其特征在于，它是由下述重量份的原料制成 积雪草250份桅子150份 姜黄100份白芍100份 丹参80份蓝莓80份。
4.根据权利要求I所述的中药组合物，其特征在于每种原料均可被其提取物代替，提取物的组成重量比为 积雪草提取物25-150份桅子提取物25-150份 姜黄提取物10-50份白芍提取物10-50份 丹参提取物10-50份蓝莓提取物10-50份。
5.根据权利要求I所述的药物组合物，其特征在于每种原料均可被其提取物代替，提取物的组成重量比为 积雪草提取物50份桅子提取物30份 姜黄提取物20份白芍提取物20份 丹参提取物20份蓝莓提取物15份。
6.根据权利要求I所述的中药组合物，其特征在于所述中药组合物的制备方法包括以下步骤 (1)将蓝莓粉碎成粗粉； (2)桅子、姜黄、丹参、蓝莓粗粉四味中药用8-15倍40%-95%的乙醇溶液，提取2-3次，每次1-3小时，过滤，滤液回收乙醇，浓缩，干燥，粉碎，即得乙醇提取物； (3)积雪草、白芍两味中药用8-20倍去离子水，提取2-4次，每次1-3小时，过滤，滤液浓缩，干燥，粉碎，即得水提取物；(4)将乙醇提取物、水提取物混合后，再与药用辅料一起混合，按常规方法制成口服制剂。
7.根据权利要求I所述中药组合物，其特征在于它是硬胶囊、软胶囊、片剂、颗粒剂、散剂、丸剂、袋泡茶、药酒中的一种或多种。
8.根据权利要求I所述的中药组合物在制备具有酒精性肝损伤辅助保护作用的保健品及药品中的应用。
全文摘要
本发明提供一种具有清热养阴，化瘀通络之功效，用于治疗酒精性肝损伤的药物组合物，它以积雪草、栀子、姜黄、白芍、丹参、蓝莓组成。本发明还涉及所述组合物在制备预防治疗急慢性酒精性肝损伤的保健食品中以及在制备治疗非酒精性脂肪肝的保健食品中的应用。本发明组合物的各组份之间产生了良好的协同作用，疗效显著，且原料易得，制备简单，成本相对较低。
文档编号A61K36/9066GK102784366SQ20121031979
公开日2012年11月21日 申请日期2012年9月3日 优先权日2012年9月3日
发明者南敏伦, 赫玉芳, 赵全成, 赵昱玮, 高欢 申请人:赵全成