直立百部非生物碱提取物及单体在制备肿瘤药物中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明属于直立百部非生物碱提取物、其制备方法及二苯乙烯类化合物逆转肿瘤耐药的新用途。该提取物为富含非生物碱成分，从该提取物中能够分离出五种单体化合物，这五种单体化合物均为二苯乙烯类化合物，采用耐药逆转倍数测定实验验证了其逆转肿瘤耐药的活性。结果表明，直立百部非生物碱提取物及五种二苯乙烯类化合物具有显著的逆转肿瘤耐药的作用，有望开发为逆转肿瘤耐药的药物应用于临床。
【专利说明】直立百部非生物碱提取物及单体在制备肿瘤药物中的应用
【技术领域】:
[0001]本发明属于直立百部非生物碱提取物及二苯乙烯类化合物逆转肿瘤耐药的新用途，具体涉及五种二苯乙烯类化合物在制备逆转肿瘤耐药药物中的应用。
【背景技术】:
[0002]化疗是临床治疗恶性肿瘤的主要手段。肿瘤细胞对抗肿瘤药物产生的多药耐药性(Multidrug resistance,MDR)已成为肿瘤化疗失败的主要原因，寻找高效低毒的多药耐药逆转剂一直是抗肿瘤药物研究的热点。
[0003]直立百部Stemona sessilifolia(Miq.)Miq.为百部科百部属植物，是《中华人民共和国药典》所收载的中药百部的3个品种之一。直立百部总生物碱含量极低，约0.26%-2.1%，且不稳定。药理作用表现为杀虫、止咳和抗乙酰胆碱酯酶活性。虽有文献报道其根提取物、百部叶碱的逆转肿瘤细胞对长春碱耐药活性，但百部叶碱的所需量远高于粗提物，即单体生物碱的生物活性不及根提取物。提示逆转耐药的活性成分不仅仅是生物碱成分，我们发现其主要药效物质正是其主要非生物碱成分二苯乙烯类成分。
[0004]二苯乙烯(sti Ibenoids)类化合物除具有抗老年痴呆、抗病原微生物、预防心脏病等多种重要的生物学功能外，还对多种肿瘤细胞有显著的抑制作用。而随着对药物作用靶点的研究不断深入，二苯乙烯类化合物在治疗恶性肿瘤方面取得了进一步的进展。如有研究证实白藜芦醇能通过减少P-gp基因表达产物，逆转肿瘤的多药耐药性，最终与抗肿瘤药物协同高效地抑制恶性肿瘤细胞生长。
[0005]目前已报道的直 立百部中有32个二苯乙烯类化合物，按结构特征可分为四类，分别是1，2- 二苯乙烯衍生物(2个)，I, 2- 二苯乙烷衍生物(12个)，二氢菲衍生物(4个)和苯基苯并呋喃衍生物(11个)，其中我们获得了五种单体化合物，目前为止，这些单体化合物的逆转肿瘤耐药活性还未见文献报道。
【发明内容】
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[0006]本发明提供了直立百部非生物碱提取物及所含二苯乙烯类化合物对肿瘤耐药的逆转活性，旨在将二苯乙烯类化合物再研究开发得到较好的逆转肿瘤耐药的新型药物。
[0007]一种直立百部非生物碱提取物，其特征在于:该提取物为富含非生物碱成分，从该提取物中能够分离出五种单体化合物，这五种单体化合物均为二苯乙烯类化合物，它们分别是:
A.2-(3, 5- 二甲氧基-2，4- 二甲基苯基)-4-羟基苯并呋喃；B.2-(3-羟基-5-甲氧基苯基)-4-羟基苯并呋喃；C.2-(3-羟基-5-甲氧基-2-甲基苯基)-4-羟基苯并呋喃；D.2, 4- 二羟基_ 二苯乙稀；E.2-甲氧基_3_ (5-甲氧基-3-羟基_苯乙基)苯酌.;它们的结构式分别为:
【权利要求】
1.一种直立百部非生物碱提取物，其特征在于:该提取物为富含非生物碱成分，从该提取物中能够分离出多种单体化合物，这五种单体化合物均为二苯乙烯类化合物，它们分别是: A:2-(3, 5- 二甲氧基-2，4- 二甲基苯基)-4-羟基苯并呋喃；B:2-(3-羟基-5-甲氧基苯基)-4-羟基苯并呋喃；C:2-(3-羟基-5-甲氧基-2-甲基苯基)-4-羟基苯并呋喃；D:2，4- 二羟基-二苯乙烯；E:2-甲氧基-3-(5-甲氧基-3-羟基-苯乙基)苯酚；它们的结构式分别为:
2.一种制备如权利要求1所述直立百部非生物碱提取物的方法，其特征在于:取直立百部药材,用60%乙醇回流提取2~3次，每次0.5~2小时，回收乙醇，得浸膏；将浸膏分散于水中，石油醚脱脂，二氯甲烷萃取；再将二氯甲烷提取液用3%盐酸溶液萃取，得二氯甲烷层，挥干即为富含非生物碱成分的提取物浸膏；该浸膏经过反复硅胶色谱、SephadexLH-20、ODS及制备液相分离手段，并结合理化性质和现代波谱学手段从中分离鉴定出单体化合物，主要为二苯乙烯类化合物。
3.—种如权利要求1所述直立百部非生物碱提取物及所含二苯乙烯类化合物在制备逆转耐药肿瘤药物中的应用，其特征在于:从该提取物中分离出的五种二苯乙烯类化合物在制备逆转肿瘤耐药物中的应用。
4.根据权利要求3所述的直立百部非生物碱提取物及所含二苯乙烯类化合物在制备逆转耐药肿瘤药物中的应用，其特征在于:该药物对人乳腺癌耐药细胞的抑制活性，表明直立百部非生物碱提取物及五种单体化合物均具有显著的逆转肿瘤耐药作用。
【文档编号】A61K31/09GK103467421SQ201310421700
【公开日】2013年12月25日 申请日期:2013年9月16日 优先权日:2013年9月16日
【发明者】赵庆春, 马阳妹, 韩璐, 张乔, 史国兵 申请人:赵庆春