一种小檗果提取物的制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种小檗果提取物的制备方法，属于医药领域。其制备方法是以小檗果为原料，用0-30%浓度乙醇提取后，通过两次大孔吸附树脂纯化得到，包括小檗果提取物A、小檗果提取物B。该小檗果提取物，可与药学上可接受的载体或其他适宜赋形剂相结合，按照常规方法制成口服给药的剂型。
【专利说明】一种小檗果提取物的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于生物医药领域，涉及一种中药材提取物的制备方法，具体是涉及一种小檗果提取物的制备方法。
【背景技术】
[0002]小檗果为小檗科植物红果小檗Berberis nummularia Bge.的干燥成熟果实。收载于1998年《中华人民共和国卫生部药品标准维吾尔药分册》。其性平，具有健胃和中，生津止渴，清热解毒之功效。用于消化不良，痢疾泻下，口渴，口疮，咽炎。为我国藏蒙等少数民族地区的常用药物。但有关小檗果的基础研究尚十分有限，使该药材的后续推广和应用受到限制。现代研究表明，小檗果含有小檗碱、药根碱、巴马亭等生物碱类成分，以及天竺葵色素、锦葵色素等花色素类成分。其他化学成分不详；药理作用研究未见报道。
[0003]国内专利检索结果，未见小檗果相关专利。
[0004]上述文献及专利等，尚未见小檗果提取物制备方法的相关报道。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于提供一种小檗果提取物的制备方法。
[0006]本发明是通过如下技术方案实现的:
本发明所用原料:小檗果为小檗 科植物红果小檗Berberis nummularia Bge.的干燥成熟果实。
[0007]本发明一种小檗果提取物的制备方法，其特征在于按以下步骤制备:
(O小檗果，用浓度0-30%乙醇作为溶剂，提取温度50°C _95°C，提取次数为1_3次，每次提取时间为1-4小时，每次溶剂用量为小檗果重量的6-15倍；滤过，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度d=l.10-1.18，滤过，得药液A ;
(2)将步骤(1)得到的药液A，通过非极性大孔吸附树脂，先用水洗脱，水洗脱液直接通过极性大孔树脂，再用浓度30%-70%的乙醇溶液洗脱非极性大孔吸附树脂，收集不同浓度乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得小檗果提取物A ;再用浓度50%-95%的乙醇溶液洗脱极性大孔吸附树脂，收集不同浓度乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得小檗果提取物B ；
(3)将上述小檗果提取物A和小檗果提取物B混匀，即得本发明的小檗果提取物。
[0008]一种小檗果提取物的制备方法，其特征在于按以下步骤制备:
(1)小檗果，用浓度20%乙醇作为溶剂，提取温度70°C，提取次数为3次，每次提取时间为3小时，每次溶剂用量为小檗果重量的14倍；滤过，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度d=l.12，滤过，得药液A;
(2)将步骤(1)得到的药液A，通过DlOl非极性大孔吸附树脂，先用水洗脱，水洗脱液直接通过LSA-40极性大孔树脂，再用浓度50%的乙醇溶液洗脱DlOl非极性大孔吸附树脂，收集50%浓度乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得小檗果提取物A ;再用浓度80%的乙醇溶液洗脱LSA-40极性大孔吸附树脂，收集80%浓度乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得小檗果提取物B ；(3)将上述小檗果提取物A和小檗果提取物B混匀，即得本发明的小檗果提取物。
[0009]一种小檗果提取物的制备方法，其特征在于按以下步骤制备:
(1)将小檗果，用水作为溶剂，加热回流提取，提取次数为2次，每次提取时间为2小时，每次溶剂用量为小檗果重量的12倍；滤过，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度d=l.12，滤过，得药液A ;
(2)将步骤(1)得到的药液A，通过DlOl非极性大孔吸附树脂，先用水洗脱，水洗脱液直接通过LSA-40极性大孔树脂，再用浓度50%的乙醇溶液洗脱DlOl非极性大孔吸附树脂，收集50%浓度乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得小檗果提取物A ;再用浓度80%的乙醇溶液洗脱LSA-40极性大孔吸附树脂，收集80%浓度乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得小檗果提取物B ；
(3)将上述小檗果提取物A和小檗果提取物B混匀，即得本发明的小檗果提取物。
[0010]本发明的一种小檗果提取物的制备方法，其特征在于:所述的小檗果提取物主要含有:小檗碱、药根碱、巴马亭、木兰花碱、天竺葵色素、锦葵色素。
[0011]本发明的一种小檗果提取物的制备方法，其特征在于:所采用的非极性大孔吸附树脂为DlOl大孔吸附树脂、AB-8大孔吸附树脂；所采用的极性大孔吸附树脂为LSA-40大孔树脂、HPD600大 孔树脂。
[0012]本发明的小檗果提取物，通过加入药剂学允许的各种辅料，制成药剂学上的片剂、颗粒剂、胶囊剂等口服剂型。
【具体实施方式】
[0013]下面通过具体实验例和实施例对本发明的一种小檗果提取物的制备方法做进一步说明，但不限于本发明。
[0014]下面通过具体实施例作进一步详述。
[0015]实施例1:小檗果提取物的制备及单体成分研究
(O小檗果20kg，用水作为溶剂，加热回流提取，提取次数为2次，每次提取时间为2小时，每次溶剂用量为小檗果重量的12倍；滤过，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度d=l.12，滤过，得药液A ;
(2)将步骤(1)得到的药液A，通过DlOl非极性大孔吸附树脂，先用水洗脱，水洗脱液直接通过LSA-40极性大孔树脂，再用浓度50%的乙醇溶液洗脱DlOl非极性大孔吸附树脂，收集50%浓度乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得小檗果提取物A ;再用浓度80%的乙醇溶液洗脱LSA-40极性大孔吸附树脂，收集80%浓度乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得小檗果提取物B ；
(3)将上述小檗果提取物A和小檗果提取物B混匀，即得本发明的小檗果提取物。
[0016]小檗果提取物进行硅胶柱色谱、制备薄层色谱、以及S印hadex LH 一 20柱色谱，分别得到蜕小檗碱、药根碱、巴马亭、木兰花碱、天竺葵色素、锦葵色素。以上各化合物的化学结构均经质谱和核磁共振等波谱手段确证，纯度经高效液相色谱检测均大于98%。
[0017]实施例2:小檗果提取物的制备及单体成分研究
(1)小檗果15kg，用浓度20%乙醇作为溶剂，提取温度70°C，提取次数为3次，每次提取时间为3小时，每次溶剂用量为小檗果重量的14倍；滤过，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度d=l.12，滤过，得药液A;
(2)将步骤(1)得到的药液A，通过DlOl非极性大孔吸附树脂，先用水洗脱，水洗脱液直接通过LSA-40极性大孔树脂，再用浓度50%的乙醇溶液洗脱DlOl非极性大孔吸附树脂，收集50%浓度乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得小檗果提取物A ;再用浓度80%的乙醇溶液洗脱LSA-40极性大孔吸附树脂，收集80%浓度乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得小檗果提取物B ；
(3)将上述小檗果提取物A和小檗果提取物B混匀，即得本发明的小檗果提取物。
[0018]小檗果提取物进行硅胶柱色谱、制备薄层色谱、以及S印hadex LH 一 20柱色谱，分别得到蜕小檗碱、药根碱、巴马亭、木兰花碱、天竺葵色素、锦葵色素。以上各化合物的化学结构均经质谱和核磁共振等波谱手段确证，纯度经高效液相色谱检测均大于98%。
[0019]实施例3:小檗果提取物的制备及单体成分研究
(1)小檗果30kg，用浓度30%乙醇作为溶剂，提取温度50°C，提取次数为I次，每次提取时间为4小时，每次溶剂用量为小檗果重量的15倍；滤过，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度d=l.18，滤过，得药液A;
(2)将步骤(1)得到的药液A，通过AB-8非极性大孔吸附树脂，先用水洗脱，水洗脱液直接通过HPD600极性大孔树脂，再用浓度70%的乙醇溶液洗脱AB-8非极性大孔吸附树脂，收集70%浓度乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得小檗果提取物A ;再用浓度95%的乙醇溶液洗脱HPD600极性大孔吸附树脂，收集95%浓度乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得小檗果提取物B ；
(3)将上述小檗果提取物A和小檗果提取物B混匀，即得本发明的小檗果提取物。
[0020]小檗果提取物进行硅胶柱色谱、制备薄层色谱、以及S印hadex LH 一 20柱色谱，分别得到蜕小檗碱、药根碱、巴马亭、木兰花碱、天竺葵色素、锦葵色素。以上各化合物的化学结构均经质谱和核磁共振等波谱手段确证，纯度经高效液相色谱检测均大于98%。
[0021]实施例4:小檗果·提取物的制备及单体成分研究
(O小檗果15kg，用浓度5%乙醇作为溶剂，提取温度95°C，提取次数为3次，每次提取时间为I小时，每次溶剂用量为小檗果重量的6倍；滤过，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度d=l.10，滤过，得药液A ;
(2)将步骤(1)得到的药液A，通过DlOl非极性大孔吸附树脂，先用水洗脱，水洗脱液直接通过LSA-40极性大孔树脂，再用浓度30%的乙醇溶液洗脱DlOl非极性大孔吸附树脂，收集30%浓度乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得小檗果提取物A ;再用浓度50%的乙醇溶液洗脱LSA-40极性大孔吸附树脂，收集50%浓度乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得小檗果提取物B ；
(3)将上述小檗果提取物A和小檗果提取物B混匀，即得本发明的小檗果提取物。
[0022]小檗果提取物进行硅胶柱色谱、制备薄层色谱、以及S印hadex LH 一 20柱色谱，分别得到蜕小檗碱、药根碱、巴马亭、木兰花碱、天竺葵色素、锦葵色素。以上各化合物的化学结构均经质谱和核磁共振等波谱手段确证，纯度经高效液相色谱检测均大于98%。
[0023]实施例5:小檗果提取物片剂的制备
取实施例1小檗果提取物235g，加入淀粉45g，混匀，制粒，干燥，过筛，加微晶纤维素35g，硬脂酸镁3.5g，混匀，压制成1000片，即得小檗果提取物片剂。
[0024]实施例6:小檗果提取物颗粒剂的制备
取实施例2小檗果提取物265g，加入糊精50g，蔗糖50g，混匀，制粒，干燥，整粒，即得小檗果提取物颗粒剂。
[0025]实施例7:小檗果提取物胶囊剂的制备
取实施例3小檗果提取物225g，加入淀粉65g，混匀，制粒，干燥，整粒，装胶囊1000粒，即得小檗果提取物胶囊剂。
【权利要求】
1.一种小檗果提取物的制备方法，其特征在于按以下步骤制备: (O小檗果，用浓度0-30%乙醇作为溶剂，提取温度50°C -95°C，提取次数为1_3次，每次提取时间为1-4小时，每次溶剂用量为小檗果重量的6-15倍；滤过，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度d=l.10-1.18，滤过，得药液A ; (2)将步骤(1)得到的药液A，通过非极性大孔吸附树脂，先用水洗脱，水洗脱液直接通过极性大孔树脂，再用浓度30%-70%的乙醇溶液洗脱非极性大孔吸附树脂，收集不同浓度乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得小檗果提取物A ;再用浓度50%-95%的乙醇溶液洗脱极性大孔吸附树脂，收集不同浓度乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得小檗果提取物B ； (3)将上述小檗果提取物A和小檗果提取物B混匀，即得本发明的小檗果提取物。
2.根据权利要求1所述的一种小檗果提取物的制备方法，其特征在于按以下步骤制备: (1)小檗果，用浓度20%乙醇作为溶剂，提取温度70°C，提取次数为3次，每次提取时间为3小时，每次溶剂用量为小檗果重量的14倍；滤过，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度d=l.12，滤过，得药液A; (2)将步骤(1)得到的药液A，通过DlOl非极性大孔吸附树脂，先用水洗脱，水洗脱液直接通过LSA-40极性大孔树脂，再用浓度50%的乙醇溶液洗脱DlOl非极性大孔吸附树脂，收集50%浓度乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得小檗果提取物A ;再用浓度80%的乙醇溶液洗脱LSA-40极性大孔吸附树脂，收集80%浓度乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得小檗果提取物B ； (3)将上述小檗果提取物A和小檗果提取物B混匀，即得本发明的小檗果提取物。
3.根据权利要求1所述的一种小檗果提取物的制备方法，其特征在于按以下步骤制`备: (1)小檗果，用水作为溶剂，加热回流提取，提取次数为2次，每次提取时间为2小时，每次溶剂用量为小檗果重量的12倍；滤过，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度d=l.12，滤过，得药液A ; (2)将步骤(1)得到的药液A，通过DlOl非极性大孔吸附树脂，先用水洗脱，水洗脱液直接通过LSA-40极性大孔树脂，再用浓度50%的乙醇溶液洗脱DlOl非极性大孔吸附树脂，收集50%浓度乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得小檗果提取物A ;再用浓度80%的乙醇溶液洗脱LSA-40极性大孔吸附树脂，收集80%浓度乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得小檗果提取物B ； (3)将上述小檗果提取物A和小檗果提取物B混匀，即得本发明的小檗果提取物。
4.根据权利要求1、权利要求2、权利要求3所述的一种小檗果提取物的制备方法，其特征在于:所述的小檗果提取物主要含有:小檗碱、药根碱、巴马亭、木兰花碱、天竺葵色素、锦葵色素。
5.根据权利要求1所述的一种小檗果提取物的制备方法，其特征在于:所采用的非极性大孔吸附树脂为DlOl大孔吸附树脂、AB-8大孔吸附树脂；所采用的极性大孔吸附树脂为LSA-40大孔树脂、HPD600大孔树脂。
6.根据权利要求1、权利要求2、权利要求3所述的小檗果提取物，通过加入药剂学允许的各种辅料，制成药剂学上的片剂、颗粒剂、胶囊剂等口服剂型。
【文档编号】A61K131/00GK103585235SQ201310525393
【公开日】2014年2月19日 申请日期:2013年10月31日 优先权日:2013年10月31日
【发明者】孔倩倩 申请人:济南星懿医药技术有限公司