一种紫杉烷衍生物tm-2的脂质微球注射液及其制备方法
【专利摘要】一种紫杉烷衍生物TM-2的脂质微球注射液及其制备方法属医药【技术领域】。该注射液包含以下成分：TM-2、注射用油、乳化剂、胆固醇、聚乙二醇-聚天冬氨酸共聚物、辅助乳化剂、稳定剂、等渗调节剂及注射用水。其制备方法为按上述制剂质量计，将TM-2与油溶性介质混合均匀后，在分散在水相中，经过高速搅拌制备初乳后，再进行高压均质过程，制剂采用高压旋转灭菌法灭菌。与参比制剂紫杉醇脂质微球注射液相比，TM-2脂质微球注射液显示出更好的抗肿瘤活性。本发明公开的TM-2脂质微球注射液不仅药效好于参比制剂紫杉醇脂质微球注射液，而且其稳定性好，降低了TM-2的毒性，提高了疗效，同时可以耐受热压灭菌，适合工业化生产。
【专利说明】一种紫杉烷衍生物TM-2的脂质微球注射液及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属医药【技术领域】，具体涉及一种紫杉烷衍生物TM-2的脂质微球注射液及 其制备方法。
【背景技术】
[0002] 癌症是严重危害人类健康的一大顽症，每年全世界因癌症而死亡的人不计其数。 攻克癌症难关已成为医药工作者和化学工作者当务之急的任务。因此寻找有效的抗癌药物 成为研究的热点。抗癌药物的研发是当今的一个世界课题，特别是从天然产物中筛选抗癌 新药，已成为抗癌药物研发的热点。
[0003] 紫杉醇（Paclitaxe, Taxol TAX)最初是由美国科学家Wall和Wani于1971年从 太平洋短叶红豆杉（Taxus drevifolia)的树皮中提取分离得到的，后由Albert Einstein 医学院的生化教授SchifT和Horwitz报道其独特作用后被广泛重视的一种天然活性产物。 近四十年来，紫杉醇作为一种抗癌机理独特、抗癌效果显著、抗癌谱广的一线抗癌药物至今 仍成为全世界药物学家研究的焦点，其中代表药物紫杉醇和多西紫杉醇已被美国食品药品 监督管理局（FDA)批准用于乳腺癌、宫颈癌、非小细胞肺癌以及前列腺癌的临床治疗。紫 杉烷类化合物可与微管蛋白的亚基结合以及通过激活多条信号转导通路，诱导肿瘤细胞凋 亡。尽管紫杉烷类化合物具有理想的抗肿瘤效果，但制剂开发却一直受到其极差的水溶性 的制约，时至今日美国FDA批准上市的制剂也屈指可数。为解决这一问题，传统制剂学采取 了大量加入表面活性剂（聚氧乙烯蓖麻油、吐温-80)的做法，但会直接导致如过敏反应、神 经毒性等严重不良反应。开发不含或低含量表面活性剂的紫杉烷制剂，已成为其制剂研究 的主要问题。此外，长期的化疗给药导致的多药耐药也限制了对癌症病人的成功治疗。多 药耐药（MDR)主要归因于P-糖蛋白（P-gp)在肿瘤细胞中过表达，P-gp外排泵能够显著降 低细胞内化疗药物的浓度。近年来随着多药耐药肿瘤的出现，紫杉烷类药物的抗肿瘤效果 大打折扣。因此，现有的紫杉烷衍生物制剂不但毒副作用较大，疗效降低，而且降低了病人 的顺应性，不利于临床应用。这些问题的解决往往有赖于新颖化学结构和独特作用机制化 合物的发现。
[0004] 近十几年来，紫杉醇对敏感肿瘤细胞和耐药肿瘤细胞的构效关系一直是人们研究 的重点和热点。紫杉醇对敏感肿瘤细胞的构效关系研究结果表明：C-13侧链、C-4、C-5的 四元氧环及C-4位的乙酰氧基取代、C-2位酯基与细胞毒性密切相关。紫杉醇的对P-gp过 表达机制引起的多药耐药肿瘤（MDR)的构效关系研究结果表明：紫杉醇C-13侧链的C-3' 苯甲酰基及苯基区域、C-7位及10位的羟基为P-糖蛋白识别并结合的结合高度敏感区域， 将这些区域进行结构改造可显著增强对多药耐药（MDR)肿瘤的活性。根据此研究基础，由 法国制药公司Sanofi-Aventis投资研发了骨架结构较为新颖的紫杉烷类化合物-拉洛他赛 (Larotaxel，XRP9881)，其结构特点是将多西他赛的C-IO位乙酰化，C-7、C-8、C-19成三元 环。拉洛他赛的临床研究证明，人们对拉洛他赛显著的抗癌疗效，较低的副作用非常满意， 尤其是对于过表达多药耐药基因的卵巢癌、乳腺癌疗效更佳。而新一代紫杉烷衍生物TM-2 是以拉洛他赛（LarotaXel，XRP9881)为先导化合物，用叔丁基替换C-13侧链的C-3'位苯 环，设计而成。与拉洛他赛相比，TM-2对敏感肿瘤细胞和耐药肿瘤细胞的活性均有显著提 高，同时，由于侧链C-3'位苯环对位也是细胞色素P450酶系统的代谢位点，此部位叔丁基 的引入在一定程度上可使药物代谢稳定性增加，药物作用时间延长。
[0005] 以紫杉醇和多西他赛为阳性对照而进行的各体内体外抗肿瘤活性研究结果表明， TM-2对多种人源肿瘤细胞系的增殖抑制作用均显著强于阳性对照，尤其是针对MDR肿瘤细 胞（MCF-7/ADR、KB/VCR)与紫杉醇相比具有3-5个数量级活性的提高，与多西他赛相比具有 1-3个数量级活性的提高，与拉洛他赛相比具有1-2个数量级活性的提高。TM-2作为新一 代具有抗多药耐药性的半合成紫杉烷衍生物，在抗肿瘤活性、抗耐药性、生物利用度、抗代 谢等方面均有显著优势，因此TM-2的开发与应用具有重大的社会价值。
[0006] 处方前研究结果表明TM-2难溶于水，且水中稳定性差，但其脂溶性极佳，其在油 中的溶解度明显优于多西他赛等现有的紫杉烷类衍生物，TM-2的降解主要发生在水中，而 在油中几乎不发生降解。因此采用高压均质技术将TM-2载入0/W型脂质微球的油相或界 面膜中，提高其在制剂中的溶解性能及化学稳定性，同时以脂质微球的高效、低毒的优势充 分发挥TM-2抗肿瘤活性并降低毒副作用，以促进和推广TM-2的应用。
[0007] 静脉注射脂肪乳剂作为肠外能量的重要补给方式应用于临床已近半个世纪，是 根据乳糜微粒的组成、结构与特点而设计，主要是由甘油三酯和磷脂组成的乳剂颗粒溶 液。由于药物包裹于脂肪乳剂的脂质核心部分，该结构类似于微球，因此脂质微球（Lipid Microsphere, LM)的名称也应用而生。载药脂质微球最主要的优点是解决了脂溶性药物难 溶于水的问题，避免了有机溶剂的加入，而且药物大部分分散在油相，少部分分散在油水界 面层，减少了药物与血管的直接接触，从而减少了对血管的刺激性；其乳化形成的乳滴与人 体的乳糜微粒极为相似，易为人体吸收、利用；另外，载药脂质微球也具有靶向定位作用，淋 巴系统和MPS靶向性显著，S卩乳剂中的药物可被动靶向至淋巴液及富含MPS的脏器组织。 利用这一特点，将抗癌药物制成静脉注射用脂质微球注射液，注入体内后可明显提高在肝、 脾、肺及淋巴等部位的药物浓度，增强疗效，减轻不良反应；而且较高的淋巴药物浓度可有 效防止癌细胞从淋巴途径转移。高晓黎等制备的去氢骆驼蓬碱静脉注射用脂质微球注射 液，可显著提高药物在肝、脾、淋巴等器官的分布，减少向脑组织的转运，表明其可提高去氢 骆驼蓬碱治疗肝、脾等部位癌症的疗效并降低其对神经系统的不良反应。Wang等制备了阿 克拉霉素A乳剂，并进行了小鼠药物动力学、组织分布、急毒和药效学研究。结果表明，乳剂 可提高疗效并降低药物的心脏毒性，急毒和药效学研究也证实了这项推测。鉴于脂质微球 给药系统有上述诸多优势，该剂型已经成为抗癌药物的良好载体。通过系统的处方及工艺 摸索，载药脂质微球存在的粒径、灭菌及稳定性等三大难题也已基本得以解决，为实现其 工业化生产提供了有力的保证。
【发明内容】
[0008] 本发明提供一种紫杉烷衍生物TM-2的脂质微球注射液及其制备方法，目的在于 不使用聚氧乙烯蓖麻油、Tween-80、有机溶剂，解决TM-2水溶性差及物理和化学稳定性问 题，增加药物的包封率，延长药物的半衰期，制备能耐受热压灭菌的长期放置稳定的TM-2 脂质微球注射液。该制剂刺激性小、稳定性好、成本低、适用于工业化大生产。
[0009] -种紫杉烷衍生物TM-2的脂质微球注射液，该注射液包含以下成分：TM-2、注射 用油、乳化剂、胆固醇、聚乙二醇-聚天冬氨酸共聚物、辅助乳化剂、稳定剂、等渗调节剂及 注射用水，各组成成分按质量百分比组成为：TM-20. 001% -1%、注射用油5-25%、乳化剂 0.8-8%、胆固醇0.03% -0. 15%、聚乙二醇-聚天冬氨酸共聚物0.05% -1%、辅助乳化剂 0. 2-0. 8%、稳定剂0. 02-0. 2%、等渗调节剂1. 5-3. 5%，余量为注射用水。
[0010] 所述注射液中TM-2结构式为：
[0011]
【权利要求】
1. 一种紫杉烷衍生物TM-2的脂质微球注射液，其特征在于该注射液由TM-2、注射用 油、乳化齐IJ、胆固醇、聚乙二醇聚氨基酸、辅助乳化齐IJ、稳定齐IJ、等渗调节剂及注射用水组成； 各组成成分按质量百分比为：TM-2 0. 001% -1%、注射用油5-25%、乳化剂0. 8-8%、胆固 醇0.03% -0. 15%、聚乙二醇-聚天冬氨酸共聚物0.05% -1 %、辅助乳化剂0.2-0. 8%、稳 定剂0. 02-0. 2%、等渗调节剂1. 5-3. 5%，余量为注射用水。
2. 根据权利要求1所述的新型紫杉烷衍生物TM-2的脂质微球注射液，其特征在于所述 TM-2结构式为：
3. 根据权利要求1所述的紫杉烷衍生物TM-2的脂质微球注射液，其特征在于所述注射 用油选自红花油、大豆油、玉米油、中链脂肪酸甘油三酯、薏茌油、沙棘油、紫苏油、橄榄油、 蓖麻油或鸦胆子油中的一种或几种混合。
4. 根据权利要求1所述的紫杉烷衍生物TM-2的脂质微球注射液，其特征在于所述的乳 化剂选自天然磷脂或合成磷脂中的一种或几种；其中所述天然磷脂为蛋黄卵磷脂、大豆磷 脂；所述合成磷脂为磷脂酰甘油酯或二硬脂酰磷脂酰胆碱。
5. 根据权利要求1所述的紫杉烷衍生物TM-2的脂质微球注射液，其特征在于所述聚乙 二醇-聚氨基酸材料为亲水性的聚乙二醇（分子量2000-10000Da)与疏水性的聚天冬氨酸 (分子量1000?5000Da)构成的嵌段共聚物。
6. 根据权利要求1所述的紫杉烷衍生物TM-2的脂质微球注射液，其特征在于所述的辅 助乳化剂选自泊洛沙姆188和聚山梨酯-80中的一种或几种的混合物。
7. 根据权利要求1所述的紫杉烷衍生物TM-2的脂质微球注射液，其特征在于所述的稳 定剂为油酸。
8. 根据权利要求1所述的紫杉烷衍生物TM-2的脂质微球注射液，其特征在于所述等渗 调节剂为甘油，山梨醇，甘露醇，葡萄糖中的一种或其混合物。
9. 一种如权利要求1所述的紫杉烷衍生物TM-2的脂质微球注射液的制备方法，其特征 在于包括如下步骤： (1) 将处方量TM-2、乳化剂、稳定剂、胆固醇分散在适量注射用油中，置磁力搅拌器中 加入60?80°C至混合均勻，作为油相； (2) 将处方量的辅助乳化剂、等渗调节剂、聚乙二醇-聚天冬氨酸材料加入适量注射用 水中，置磁力搅拌器中加入60?80°C至混合均匀，作为水相； (3) 利用组织捣碎机，缓慢将水相加入油相或将油相加入水相中，以每分钟8, 000? 20, 000转搅拌3?5分钟，即得初乳，将出初乳冷却，用氢氧化钠或盐酸溶液调节pH值至 4-7左右，用注射用水定容至全量； (4) 将初乳转移至高压乳匀机中，在20-80MPa，30°C?60°C条件下匀化4-15次； (5) 装瓶，封罐氮气，旋转式高压蒸汽灭菌，冷水浴迅速降温即得。
10.根据权利要求9所述的紫杉烷衍生物TM-2的脂质微球注射液的制备方法，其 特征在于所述处方量为：按质量百分比为：TM-2 0.001%-1%、注射用油5-25%、乳化剂 0.8-8%、胆固醇0.03% -0. 15%、聚乙二醇-聚天冬氨酸共聚物0.05% -1%、辅助乳化剂 0. 2-0. 8%、稳定剂0. 02-0. 2%、等渗调节剂1. 5-3. 5%，余量为注射用水。
【文档编号】A61K9/107GK104323990SQ201410512919
【公开日】2015年2月4日 申请日期:2014年9月28日 优先权日:2014年9月28日
【发明者】唐星, 王艳娇, 张岩, 何海冰 申请人:沈阳药科大学