一种黄连中生物总碱的提取方法
【专利摘要】本发明属于生物制药【技术领域】，具体涉及一种黄连中生物总碱的提取方法。其步骤包括：1)将黄连粉碎，再以乙醇与乙酸的混合液为溶剂提取2～6次，过滤，滤液合并，干燥成粉末；2)将黄连粉末用95％乙醇浸润，上渗滤柱，依次用90％乙醇、70％乙醇、40％的乙醇、30％的乙醇渗滤，合并渗滤液，回收乙醇，过滤得到黄连渗滤液；3)将所述黄连渗滤液减压蒸发至无醇味，分层，取上清液，沉淀物用乙酸的水溶液反复溶解，过滤，合并滤液与上层清液；4)将合并后的溶液进行超声波提取，得提取液，所述超声时间不少于10分钟。本发明的目的是提供一种黄连中生物总碱的提取方法，该工艺方法成本低，安全可靠，适合中小企业生产使用。
【专利说明】—种黄连中生物总碱的提取方法
【技术领域】
[0001]本发明属于生物制药【技术领域】，具体涉及一种黄连中生物总碱的提取方法。
【背景技术】
[0002]黄连，(学名:Coptis chinensis Franch.)别名:味连、川连、鸡爪连,属毛茛科、黄连属多年生草本植物，叶基徨，坚纸质，卵状三角形，三全裂，中央裂片卵状菱形，羽状深裂，边缘有锐锯齿，侧生裂片不等2深裂；叶柄长5-12cm。野生或栽培于海拔1000-1900m的山谷凉湿荫蔽密林中。有清热燥湿，泻火解毒之功效。其味入口极苦，有俗语云“哑巴吃黄连，有苦说不出”，即道出了其中滋味。从上个世纪开始，先后从黄连根茎中分离鉴定了小檗碱、巴马汀、药根碱、非洲防己碱、黄连碱、表小檗碱等异喹啉类生物碱。目前国内外市售的对照品只有小檗碱、巴马汀、药根碱，而表小檗碱、黄连碱、非洲防己碱因分离困难，中国药品生物制品检定所还没有标准品出售，其他地方也难以买到。
[0003]小檗碱是黄连中最主要的生物碱，含量高达5.2%?7.69%。近年来对小檗碱提取工艺的研究很多，针对其他生物碱的工艺研究相对较少。文献报道的以小檗碱为主的生物碱的提取方法有煎煮法、浸溃法、回流提取、超声提取、固液热提取法、酶解法、微波法、微量法、半仿生、超临界萃取提取等；提取溶媒有水、酸水、乙醇、酸性乙醇、石灰乳等。生物碱的分离纯化工艺有大孔树脂纯化、制备型高速逆流色谱、液膜法等。也有一些学者对几种不同的提取方法进行了比较，例如高红旺等对黄柏中黄连素的提取工艺进行了比较，发现酸醇提取优于碱提取和乙醇提取。石继连等运用药典法、回流法、超声法、回流超声法提取黄连中的小檗碱，结果表明回流超声较其他方法时间短、含量高，较适宜提取黄连中的小檗碱。还有学者对黄连药材的粒度、提取温度及乳化剂对黄连提取的影响进行了考察。
[0004]但目前还没有一种从黄连中同时分离得到黄连几种主要生物碱，且适用工业化生产的低成本的提取方法方法。
【发明内容】
[0005]本发明的目的是提供一种黄连中生物总碱的提取方法，该工艺方法成本低，安全可靠，适合中小企业生产使用。
[0006]一种黄连中生物总碱的提取方法，该方法包括以下步骤:
[0007]I)将黄连粉碎，再以乙醇与乙酸的混合液为溶剂提取2?6次，过滤，滤液合并，干燥成粉末；
[0008]2)将黄连粉末用95%乙醇浸润，上渗滤柱，依次用90%乙醇、70%乙醇、40%的乙醇、30%的乙醇渗滤，合并渗滤液，回收乙醇，过滤得到黄连渗滤液；
[0009]3)将所述黄连渗滤液减压蒸发至无醇味，分层，取上清液，沉淀物用乙酸的水溶液反复溶解，过滤，合并滤液与上层清液；
[0010]4)将合并后的溶液进行超声波提取，得提取液，所述超声时间不少于10分钟。
[0011]优选的，该方法包括以下步骤:
[0012]I)将黄连粉碎，再以乙醇与乙酸的混合液为溶剂提取2次，过滤，滤液合并，干燥成粉末；
[0013]2)将黄连粉末用95%乙醇浸润，上渗滤柱，依次用90%乙醇、70%乙醇、40%的乙醇、30%的乙醇渗滤，合并渗滤液，回收乙醇，过滤得到黄连渗滤液；
[0014]3)将所述黄连渗滤液减压蒸发至无醇味，分层，取上清液，沉淀物用乙酸的水溶液反复溶解，过滤，合并滤液与上层清液；
[0015]4)将合并后的溶液进行超声波提取，得提取液，所述超声时间为2小时。
[0016]优选的，该方法包括以下步骤:
[0017]I)将黄连粉碎，再以乙醇与乙酸的混合液为溶剂提取4次，过滤，滤液合并，干燥成粉末；
[0018]2)将黄连粉末用95%乙醇浸润，上渗滤柱，依次用90%乙醇、70%乙醇、40%的乙醇、30%的乙醇渗滤，合并渗滤液，回收乙醇，过滤得到黄连渗滤液；
[0019]3)将所述黄连渗滤液减压蒸发至无醇味，分层，取上清液，沉淀物用乙酸的水溶液反复溶解，过滤，合并滤液与上层清液；
[0020]4)将合并后的溶液进行超声波提取，得提取液，所述超声时间为I小时。
[0021]优选的，该方法包括以下步骤:
[0022]I)将黄连粉碎，再以乙醇与乙酸的混合液为溶剂提取6次，过滤，滤液合并，干燥成粉末；
[0023]2)将黄连粉末用95%乙醇浸润，上渗滤柱，依次用90%乙醇、70%乙醇、40%的乙醇、30%的乙醇渗滤，合并渗滤液，回收乙醇，过滤得到黄连渗滤液；
[0024]3)将所述黄连渗滤液减压蒸发至无醇味，分层，取上清液，沉淀物用乙酸的水溶液反复溶解，过滤，合并滤液与上层清液；
[0025]4)将合并后的溶液进行超声波提取，得提取液，所述超声时间为30分钟。
【具体实施方式】
[0026]以下对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
[0027]实施例1
[0028]一种黄连中生物总碱的提取方法，包括如下步骤:
[0029]I)将黄连粉碎，再以乙醇与乙酸的混合液为溶剂提取2次，过滤，滤液合并，干燥成粉末；
[0030]2)将黄连粉末用95%乙醇浸润，上渗滤柱，依次用90%乙醇、70%乙醇、40%的乙醇、30 %的乙醇渗滤，合并渗滤液，回收乙醇，过滤得到黄连渗滤液。
[0031]3)将所述黄连渗滤液减压蒸发至无醇味，分层，取上清液，沉淀物用乙酸的水溶液反复溶解，过滤，合并滤液与上层清液；
[0032]4)将合并后的溶液进行超声波提取，得提取液，所述超声时间为2小时。
[0033]实施例2
[0034]一种黄连中生物总碱的提取方法，包括如下步骤:
[0035]I)将黄连粉碎，再以乙醇与乙酸的混合液为溶剂提取4次，过滤，滤液合并，干燥成粉末；
[0036]2)将黄连粉末用95%乙醇浸润，上渗滤柱，依次用90%乙醇、70%乙醇、40%的乙醇、30 %的乙醇渗滤，合并渗滤液，回收乙醇，过滤得到黄连渗滤液。
[0037]3)将所述黄连渗滤液减压蒸发至无醇味，分层，取上清液，沉淀物用乙酸的水溶液反复溶解，过滤，合并滤液与上层清液；
[0038]4)将合并后的溶液进行超声波提取，得提取液，所述超声时间为I小时。
[0039]实施例3
[0040]一种黄连中生物总碱的提取方法，包括如下步骤:
[0041]I)将黄连粉碎，再以乙醇与乙酸的混合液为溶剂提取6次，过滤，滤液合并，干燥成粉末；
[0042]2)将黄连粉末用95%乙醇浸润，上渗滤柱，依次用90%乙醇、70%乙醇、40%的乙醇、30 %的乙醇渗滤，合并渗滤液，回收乙醇，过滤得到黄连渗滤液。
[0043]3)将所述黄连渗滤液减压蒸发至无醇味，分层，取上清液，沉淀物用乙酸的水溶液反复溶解，过滤，合并滤液与上层清液；
[0044]4)将合并后的溶液进行超声波提取，得提取液，所述超声时间为30分钟。
[0045]以上所述仅为本发明的较佳实施方式，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.一种黄连中生物总碱的提取方法，该方法包括以下步骤: 1)将黄连粉碎，再以乙醇与乙酸的混合液为溶剂提取2?6次，过滤，滤液合并，干燥成粉末； 2)将黄连粉末用95%乙醇浸润，上渗滤柱，依次用90%乙醇、70%乙醇、40%的乙醇、30%的乙醇渗滤，合并渗滤液，回收乙醇，过滤得到黄连渗滤液； 3)将所述黄连渗滤液减压蒸发至无醇味，分层，取上清液，沉淀物用乙酸的水溶液反复溶解，过滤，合并滤液与上层清液； 4)将合并后的溶液进行超声波提取，得提取液，所述超声时间不少于10分钟。
2.根据权利要求1所述的黄连中生物总碱的提取方法，该方法包括以下步骤: 1)将黄连粉碎，再以乙醇与乙酸的混合液为溶剂提取2次，过滤，滤液合并，干燥成粉末； 2)将黄连粉末用95%乙醇浸润，上渗滤柱，依次用90%乙醇、70%乙醇、40%的乙醇、30%的乙醇渗滤，合并渗滤液，回收乙醇，过滤得到黄连渗滤液； 3)将所述黄连渗滤液减压蒸发至无醇味，分层，取上清液，沉淀物用乙酸的水溶液反复溶解，过滤，合并滤液与上层清液； 4)将合并后的溶液进行超声波提取，得提取液，所述超声时间为2小时。
3.根据权利要求1所述的黄连中生物总碱的提取方法，该方法包括以下步骤: 1)将黄连粉碎，再以乙醇与乙酸的混合液为溶剂提取4次，过滤，滤液合并，干燥成粉末； 2)将黄连粉末用95%乙醇浸润，上渗滤柱，依次用90%乙醇、70%乙醇、40%的乙醇、30%的乙醇渗滤，合并渗滤液，回收乙醇，过滤得到黄连渗滤液； 3)将所述黄连渗滤液减压蒸发至无醇味，分层，取上清液，沉淀物用乙酸的水溶液反复溶解，过滤，合并滤液与上层清液； 4)将合并后的溶液进行超声波提取，得提取液，所述超声时间为I小时。
4.根据权利要求1所述的黄连中生物总碱的提取方法，该方法包括以下步骤: 1)将黄连粉碎，再以乙醇与乙酸的混合液为溶剂提取6次，过滤，滤液合并，干燥成粉末； 2)将黄连粉末用95%乙醇浸润，上渗滤柱，依次用90%乙醇、70%乙醇、40%的乙醇、30%的乙醇渗滤，合并渗滤液，回收乙醇，过滤得到黄连渗滤液； 3)将所述黄连渗滤液减压蒸发至无醇味，分层，取上清液，沉淀物用乙酸的水溶液反复溶解，过滤，合并滤液与上层清液； 4)将合并后的溶液进行超声波提取，得提取液，所述超声时间为30分钟。
【文档编号】A61K36/718GK104491037SQ201410699233
【公开日】2015年4月8日 申请日期:2014年11月27日 优先权日:2014年11月27日
【发明者】林炳营 申请人:桂林瑞丰环保微生物应用研究所