本申请要求2014年5月12日提交的美国临时申请No.61/992,169的优先权，将其全文通过引用并入本文。
2.发明领域
本文提供通过给药半胱天冬酶抑制剂治疗某些慢性肝脏疾病并发症的方法。
3.
背景技术：
由慢性肝脏疾病引起的并发症影响大量患者群，并且与高度的发病率和死亡率有关。门静脉高压是一种重要且常见临床病症，其是慢性肝脏疾病的并发症，定义为当通过肝脏静脉压力梯度(HVPG)测定时肝脏中升高的血压大于5mmHg。正常的HVPG被认为在3至5mmHg之间。虽然高于5mmHg的所有门静脉血压被认为异常，但是大于10mmHg的HVPG测量结果被证明能高度预测重度虚弱和潜在威胁生命后果的发展。具有10mmHg或以上的门静脉压力的患者的临床结果是：发展为食管静脉曲张、腹水、肝性脑病、静脉曲张出血和肝细胞癌。门静脉高压可能是由于阻止肝脏内和向肝脏的正常血流和正常血液动力学的多种临床病症引起的。病症比如脾静脉或门静脉的血栓形成、Budd-Chiari综合征或例如血吸虫病引起门静脉高压。在这些病症中，血管被阻断，引起血压升高。门静脉高压也是肝硬化或肝脏瘢痕形成的并发症。肝硬化中肝脏的瘢痕形成增加了肝脏硬度，导致门静脉高压和肝功能受损。肝硬化的瘢痕形成也增加了肝脏中的细胞死亡。一种肝脏细胞死亡的形式是通过被称为细胞凋亡的方式进行。另一种肝脏细胞死亡的形式是通过炎症进行。肝硬化是所有慢性肝脏疾病的末期临床并发症。
晚期慢性肝脏疾病影响大量患者群，且与高度的发病率和死亡率有关。在2009年，慢性肝脏疾病是美国45岁至54岁之间人群的主要死亡原因(参见Asrani et al.Hepatology,2013；145:375-382)。鉴于慢性肝脏疾病的并发症影响大量患者群，强烈需要向这些患者提供新的有效的药用试剂。
4.发明简述
本文提供的方法、化合物、药物组合物和制品具有多种组成成分、制备步骤和实施步骤及相关生物物理学、物理学、生物化学或化学参数的特征。如将本领域技术人员显而易见的是，本文提供的方法可以包括如下所述化合物、组合物、制品和相关成分、步骤和/或参数的任何和所有的排列与组合。
在一个方面，本文提供通过半胱天冬酶抑制剂治疗门静脉高压的方法。在某些实施方案中，门静脉高压是慢性肝脏疾病本文本文结果。本文预期了本领域技术人员已知且理解的半胱天冬酶抑制剂。用于所述方法的示例性的化合物为本文在其他地方描述的。还提供了用于所述方法的药物组合物。
在一些实施方案中，本文提供的方法包括治疗慢性肝脏疾病导致的门静脉高压。在一个实施方案中慢性肝脏疾病是由于毒素引起的，所述毒素包括酒精、某些药物和血液中正常物质的异常组合。在另一个实施方案中，慢性肝脏疾病是由于感染自身免疫病症引起的。在一些实施方案中，慢性肝脏疾病的准确原因未知。在一些实施方案中，慢性肝脏疾病包括但不限于、脂肪肝、肝硬化、原发性胆汁性肝硬变、原发性硬化性胆管炎、Budd-Chiari综合征和α1-抗胰蛋白酶缺乏。
在一个实施方案中，慢性肝脏疾病包括，但不限于肝硬化、肝纤维化、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肝炎(包括病毒性和酒精性肝炎)、原发性胆汁性肝硬变(PBC)和原发性硬化性胆管炎(PSC)。
在一些实施方案中，提供了用于治疗患有由于慢性肝脏疾病引起的门静脉高压的治疗失败的患者的治疗方法。在一个实施方案中，本文提供的方法降低了与慢性肝脏疾病有关的门静脉高压。在一个实施方案中，本文提供的方法降低了肝酶的升高水平，比如ALT(丙氨酸转氨酶)和AST(天门冬氨酸氨基转移酶)水平的升高水平。在一个实施方案中，本文提供的方法改善了与慢性肝脏疾病有关的肝功能。
还提供了用于本文提供的方法的半胱天冬酶抑制剂。在一个实施方案中，用于本文提供的方法的半胱天冬酶抑制剂化合物选自∶
或其可药用衍生物。在一个实施方案中，所述可药用衍生物为可药用盐。
在一个实施方案中，用于本文提供的方法中的半胱天冬酶抑制剂为
或其可药用衍生物。在一个实施方案中，所述可药用衍生物为可药用盐。
在某些实施方案中，在本文提供的方法中可以顺序或同时使用多于一种半胱天冬酶抑制剂。
还提供了包含治疗有效量的本文提供的化合物和可药用载体的药物组合物，其中所述药物组合物用于预防、治疗或改善肝脏疾病的一种或多种症状。在某些实施方案中，所述症状为门静脉高压。在其它实施方案中，肝脏疾病为慢性肝脏疾病，选自肝硬化、肝纤维化、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肝炎(包括病毒性和酒精性肝炎)、原发性胆汁性肝硬变(PBC)和原发性硬化性胆管炎(PSC)。在仍然其它实施方案中，门静脉高压是慢性肝脏疾病的结果。在某些实施方案中，慢性肝脏疾病为肝硬化。
进一步提供包含包装材料、本文提供的化合物或其可药用衍生物的制品，其用于治疗、预防或改善与肝脏疾病有关的一种或多种症状，以及标签，其指示所述化合物或其可药用衍生物用于治疗、预防或改善肝脏疾病的一种或多种症状。在某些实施方案中，所述症状症状为门静脉高压。在其它实施方案中，肝脏疾病为慢性肝脏疾病，选自肝硬化、肝纤维化、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肝炎(包括病毒性和酒精性肝炎)、原发性胆汁性肝硬变(PBC)和原发性硬化性胆管炎(PSC)。在仍然其它实施方案中，门静脉高压是慢性肝脏疾病的结果。在某些实施方案中，慢性肝脏疾病为肝硬化。
5.优选的实施方案的详细说明
5.1.定义
除非另有定义，否则本文使用的所有技术术语和科学术语具有如本领域普通技术人员通常理解的相同含义。将本文提及的所有专利、申请、公开的申请及其他出版物的全文通过引用并入本文。在本文使用的术语存在多个定义的情况下，除非另有说明，否则以此部分中定义为准。
除非上下文另有明确的规定，否则单数形式“一个”、“一种”和“所述”包括复数指示。
如本文使用的术语“对象”为动物，比如为哺乳动物，包括人类，比如患者。
如本文使用的生物活性指化合物的体内活性，或者当化合物、组合物或其它混合物在体内给药时产生的生理反应。因此，生物活性涵盖这样的化合物、组合物和混合物的治疗效果和药代动力学行为。可以在被设计用来测试生物活性的体外系统中观察这样的活性。
如本文使用的化合物的可药用衍生物包括其盐、酯、缩醛、缩酮、原酸酯、半缩醛、半缩酮、酸、碱、溶剂化物、水合物或前药。这样的衍生物可以由本领域技术人员使用已知用于这样的衍生化的方法轻易制备。制备的化合物可以对动物或人给药，没有实质性的毒性作用，并且该化合物具有药物活性或者是前药。可药用盐包括，但不限于胺盐，比如但不限于N,N'-二苄基乙二胺、氯普鲁卡因、胆碱、氨、二乙醇胺及其它羟基烷基胺、乙二胺、N-甲基葡糖胺、普鲁卡因、N-苄基苯乙胺、1-对-氯苄基-2-吡咯烷-1'-基甲基苯并咪唑、二乙胺及其它烷基胺、哌嗪和三(羟甲基)氨基甲烷；碱金属盐，比如但不限于锂盐、钾盐和钠盐；碱土金属盐，比如但不限于钡盐、钙盐和镁盐；过渡金属盐，比如但不限于锌盐；和无机盐，比如但不限于磷酸氢二钠和磷酸二钠；以及包括，但不限于，无机酸的盐，比如但不限于盐酸盐和硫酸盐；和有机酸盐，比如但不限于乙酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、丁酸盐、戊酸盐、甲磺酸盐和富马酸盐。可药用酯包括，但不限于酸性基团的烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基和环烷基酯，所述酸性基团包括但不限于羧酸、磷酸、膦酸、磺酸、亚磺酸和硼酸。可药用溶剂化物和水合物是化合物与一或多个溶剂或水分子，或1至约100个，或1至约10个，或1至约2、3或4个溶剂或水分子的复合物。
如本文使用的治疗指任何改善或以其他方式有益地改变疾病或病症的一种或多种症状的方式。治疗也涵盖本文组合物的任何药学应用，例如用于治疗肝脏疾病。
如本文使用的通过给药特定化合物或药物组合物来改善特定病症的症状，指可以归于给药该组合物或与给药该组合物相关的任何减轻，不管是永久的减轻还是暂时的减轻，持续的减轻还是短暂的减轻。
如本文使用的“并发症”指与病症或疾病相关而发展的病症。并发症可能是病症或疾病引起的直接后果，或者可能与原发性病症或疾病的存在相关。例如，门静脉高压是慢性肝脏疾病的并发症。另外，肝硬化可能是慢性肝脏疾病的并发症。在某些实施方案中，疾病的并发症可以表现为症状，并且在那些情形中，这两个术语在本文中可互换地使用。
如本文使用的，且除非另有说明，否则术语“控制”涵盖预防特定疾病或病症在已经经受过该疾病或病症的患者中复发，和/或使患有该疾病或病症的患者停留在症状缓解的时间延长。该术语涵盖调节该疾病或病症的阀值、发展和/或持续时间，或者改变患者对该疾病或病症的反应方式。
应当理解，本文提供的化合物可以包含手性中心。这样的手性中心可以是(R)或(S)构型，或者可以是其混合物。因此，本文提供的化合物可以是对映异构体纯的，或者是立体异构或非对映异构的混合物。同样地，本领域技术人员将认识到对于在体内进行差向异构的化合物，以(R)形式给药该化合物和以(S)形式给药该化合物是等效的。
如本文使用的基本上纯的指足够均质，如通过本领域技术人员用于分析这样的纯度使用的标准分析方法(比如薄层色谱法(TLC)、凝胶电泳、高效液相色谱法(HPLC)和质谱法(MS))测定时显示出没有容易可检测的杂质，或者足够纯，以致进一步纯化没有可检测地改变物质的物理和化学性质，比如酶活性和生物学活性。用于纯化化合物以制备基本化学纯的化合物的方法是本领域技术人员已知的。然而，基本化学纯的化合物可以是立体异构体的混合物。在这样的情况下，进一步的纯化可能会增加化合物的比活性。本发明公开内容意味着包括所有这样的可能异构体，以及其外消旋和光学纯形式。光学活性的(+)和(-)、(R)-和(S)-、或者(D)-和(L)-异构体，可以使用手性合成子或手性试剂制备，或者使用常规方法比如反相HPLC拆分。当本文描述的化合物包含烯烃双键或其它几何不对称中心时，除非另外指定，其指化合物包含E和Z两种几何异构体。同样地，也意味着包括所有的互变异构形式。
在一些实施方案中，本文提供的方法中使用的化合物是“立体化学纯的”。立体化学纯的化合物具有被本领域技术人员认可为“纯”的立体化学纯度水平。在一些实施方案中，“立体化学纯的”指基本不含其它异构体的化合物。在特定的实施方案中，化合物是85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、99.5％或99.9％的不含其它异构体。
如本文使用的“用于肝脏疾病的治疗”指用任何已知并在市场上可得到或正在被开发用于治疗肝脏疾病的药物治疗。例如，门静脉高压的治疗指用市场上可得到的用于治疗门静脉高压的药物治疗患者。在下文“联合治疗”部分中描述了一些示例性的药物。
如本文使用的“慢性肝脏疾病的治疗”指用任何已知并在市场上可得到或正在被开发用于治疗慢性肝脏疾病的药物治疗。例如，门静脉高压的治疗指用市场上可得到的用于治疗门静脉高压治疗的药物治疗患者。在下文“联合治疗”部分中描述了一些示例性的药物。
如本文使用的“治疗”指任何改善或以其他方式有益地改变疾病或病症的一种或多种症状的方式。“治疗”也涵盖本文组合物的任何药学应用，例如用于治疗肝脏疾病。
如本文使用的“减轻”指减少或消除症状。减轻也指降低疾病的严重程度或延迟疾病进展或以其他方式有益的改变。
如本文使用的通过给药特定化合物或药物组合物来改善特定病症的症状，指可以归于给药该组合物或与给药该组合物相关的任何减轻，不管是永久的减轻还是暂时的减轻，持续的减轻还是短暂的减轻。
如本文使用的“曾经历治疗失败的患者”指本文在其他地方描述的患者群，包括之前用市场上目前可得到的任何药物治疗肝脏疾病且对治疗没有反应(本文使用的“治疗失败”的同义词)、不能耐受治疗或对于其而言该治疗有医学禁忌的患者。例如，对于其门静脉压力在6至10mm Hg的患者的门静脉高压的治疗反应定义为门静脉压力从患有门静脉高压的患者的基准门静脉压力值降低10％或更大。没有获得门静脉压力从基准门静脉压力值降低10％或更大的患者是在医学上归类为对于治疗没有反应的患者。具有门静脉压力大于12mmHg的患者，反应定义为从患者的基准门静脉压力降低至低于12mmHg或降低20％或更大。没有获得上述反应的患者被认为是治疗失败的。
门静脉高压的治疗对于某些患者是禁忌的。例如，用非选择性β阻断剂治疗还患有哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)或窦性心律徐缓和部分AV阻断(心脏的电传导延长)的患者的门静脉高压是医学禁忌的。
某些患者由于如本领域技术人员所理解的不期望的副作用的发展而不能耐受门静脉高压的治疗。不能耐受治疗可以包括，但不限于虚弱、呼吸急促和疲劳。
如本文使用的术语“组合”指使用超过一种治疗剂(例如，半胱天冬酶抑制剂及其它试剂)。使用术语“组合”并不限制其中向患有病症的对象给药治疗剂(例如，半胱天冬酶抑制剂和其他试剂)的顺序。第一治疗(例如，半胱天冬酶抑制剂及其它试剂)可以在向患有病症的对象给药其它治疗(例如，半胱天冬酶抑制剂及其它试剂)之前(例如，之前5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周)、同时或之后(例如，5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周后)给药。
如本文使用的术语“协同”指半胱天冬酶抑制剂和另外的试剂的组合，其比作为单一疗法单独给药这两种化合物的累加效应更有效。治疗组合(例如半胱天冬酶抑制剂和另外的试剂)的协同效应，允许对患有病症的个体使用较低剂量的一种或多种治疗和/或较低频率地施用治疗。使用较低剂量的治疗(例如半胱天冬酶抑制剂和另外的试剂)和/或以较低频率施用该治疗的能力，减少了对对象施用该治疗伴随的毒性，但没有减少该治疗在病症的预防或治疗中的功效。另外，协同作用可以在病症的预防或治疗中引起药剂功效的改善。最后，治疗组合(例如半胱天冬酶抑制剂和另外的试剂)的协同效应，可以避免或减少单独使用其中一种治疗时伴随的不良作用或不想要的副作用。
5.2.用于所述方法的化合物
文献中已经报道了在本文提供的方法中可以使用的一些半胱天冬酶抑制剂。用于所述方法的一些示例性的半胱天冬酶抑制剂为由Linton在Current Topics in Medicinal Chemistry,(2005)5:1-20中；和Linton et al.在J.Med.Chem.,2005,11,295-322 295,U.S.专利号7,351,702；7,410,956；7,443,790；7,553,852；7,652,153；7,612,091；7,807,659；7,857,712；7,960,415；8,071,618；7,074,782；7,053,057；6,689,784；6,632,962；6,559,304；6,201,118；6,800,619,6,197,750；6,544,951；6,790,989；7,053,056；7,183,260；7,692,038和国际申请号WO 2006/017295；WO 2005/021516；WO 04/002961；WO 02/085899；WO 02/094263和WO 01/094351中描述的。将这些参考文献的全部内容都通过引用并入本文。
在一个实施方案中，用于本文提供的方法中的半胱天冬酶抑制剂选自：
或其可药用衍生物。在一个实施方案中，所述可药用衍生物为可药用盐。
在一个实施方案中，用于本文提供的方法中的半胱天冬酶抑制剂选自
或其可药用衍生物。在一个实施方案中，所述可药用衍生物为可药用盐。
在某些实施方案中，在本文提供的方法中可以顺序或同时使用多于一种半胱天冬酶抑制剂。
在一些实施方案中，本文所述化合物在肝脏疾病模型中在口服给药0.001-1000mg/Kg之后具有功效。在一些实施方案中，本文所述化合物在肝脏疾病模型中在口服给药0.01-100mg/Kg之后具有功效。
5.3.治疗方法
在一些实施方案中，所本文提供的方法包括治疗慢性肝脏疾病。在一个实施方案中，所述方法用于治疗慢性肝脏疾病的并发症。在一个实施方案中，所述方法用于降低与慢性肝脏疾病有关的门静脉高压。在一个实施方案中，所述方法用于减少肝硬化。不受任何特定理论的束缚，据信在本文提供的方法中使用的半胱天冬酶抑制剂起抑制血管活性细胞因子的细胞凋亡和/或炎症及产生和信号传导，所述血管活性细胞因子影响肝脏和肠道血管系统，导致门静脉高压。
在一个实施方案中，慢性肝脏疾病是由于肝脏损伤导致的病症。在一个实施方案中，肝脏损伤是由于毒素引起的，包括酒精、某些药物和血液中正常物质的异常组合。在另一个实施方案中，慢性肝损伤是由于感染或自身免疫疾病引起的。在一些实施方案中，所述损伤的准确原因未知。
在一个实施方案中，慢性肝脏疾病包括，但不限于肝硬化、肝纤维化、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肝炎(包括病毒性和酒精性肝炎)、原发性胆汁性肝硬变(PBC)和原发性硬化性胆管炎(PSC)。在一个实施方案中，慢性肝脏疾病表现为本领域技术人员已知的病症，包括但不限于门静脉高压、肝酶(例如ALT和AST)、碱性磷酸酶(ALP)升高、胆红素升高、肝硬化、皮脂腺病(脂肪肝)或纤维化的病理学证据，.
在一个实施方案中，慢性肝脏疾病表现为本领域技术人员已知的病症，包括但不限于肝门静脉压力升高、肝酶(例如ALT、AST)升高、肝损伤和肝硬化的组织学证据。
在一个实施方案中，本文提供的方法用于治疗门静脉高压。门静脉高压的症状可以包括，但不限于脾肿大、皮肤的小蜘蛛样静脉、以黑色柏油样便或便血为特征的胃肠出血、腹水(液体在腹腔中蓄积(build-up))、脑病、蜘蛛痣(放射出许多小分枝血管的中心小动脉)。门静脉高压的症状可以根据严重程度和个体而变化。在一些实施方案中，指定为在6至10mmHg之间的轻度门静脉高压可能根本不会显示出任何症状。中等水平的门静脉高压在10至12mmHg之间，重度门静脉高压归类为大于或等于12mmHg。用于测定门静脉高压的方法是本领域熟知的(参见Berzigotti,A.et al.Assessing portal hypertension in liver diseases,Expert Reviews Gastroenterol.Hepatol.2013；7:141-155.and Koh,C.et al.Approach to the diagnosis of portal hypertension.Clinical Liver Disease 2012；1:133-135，将其全文通过引用并入本文)。在一个实施方案中，临床上定义的门静脉压力的水平升高降低了至少95％、至少90％、至少80％、至少70％、至少60％、至少50％、至少40％、至少30％、至少20％、至少10％、至少5％、至少2％或至少1％。
在一些实施方案中，提供用于治疗已经治疗失败的患者的门静脉高压的方法。治疗门静脉高压的示例性的方法为Bari,K et al.Treatment of portal hypertension.World J.Gastroenterology 2012；18:1166-1175.和Giannelli,V.et al.Beta-blockers in liver cirrhosis.Annal.Gastroenterology 2014；27:20-26描述的，将其全文通过引用并入本文)。
在一些实施方案中，患者为因为一种或多种与治疗有关的不良事件而中止门静脉高压治疗的患者。由于包括疲劳、虚弱和呼吸急促的副作用，约15％的患者中止了采用非选择性β阻断剂(NSBB)的常规一线治疗。在一些实施方案中，患者为没有指示采用当前治疗的患者。例如，某些患者对于治疗患有绝对的或相对的禁忌症。禁忌症包括，但不限于某些心血管疾病和多种呼吸系统疾病。约15％的其他患者患有对于采用NSBB治疗的绝对的或相对的禁忌症。
在一些实施方案中，提供用于治疗采用对于门静脉高压而言目前市售可得到的治疗和半胱天冬酶抑制剂组合来治疗门静脉高压的方法。门静脉高压的示例性的治疗方法为Bari K et al.的Treatment of portal hypertension World J.Gastroenterology 2012；18:1166-1175.和Giannelli,V.et al.的Beta-blockers in liver cirrhosis.Annal.Gastroenterology 2014；27:20-26中描述的，将其全文通过引用并入本文。
在一个实施方案中，本文提供的方法可以降低升高的肝酶水平(比如ALT和AST水平)。用于测量升高的肝酶水平方法是本领域熟知的(参见，例如Jeong S.Y.et al.Sandwich ELISA for measurement of cytosolic aspartate aminotransferase in sera from patients with liver diseases,Clin Chem.,2003；49(5):826 9and Burin des Roziers N.et al.A microtiter plate assay for measurement of serum alanine aminotransferase in blood donors,Transfusion.,1995；35(4):331 4，将其中每篇的全文通过引用并入本文)。在一个实施方案中，一种或多种肝酶比如ALT或AST的升高水平或肝酶升高的总量，降低了超过约90％或超过95％。在一个实施方案中，一种或多种肝酶的升高水平，比如ALT或AST的升高水平，或肝酶升高的总量降低了至少95％、至少90％、至少80％、至少70％、至少60％、至少50％、至少40％、至少30％、至少20％、至少10％、至少5％、至少2％或至少1％。
在一个实施方案中，本文提供一种用于治疗肝硬化的方法。在某些实施方案中，用于治疗肝硬化的方法进一步减少了与肝硬化有关的症状。在一些实施方案中，肝硬化的症状可以包括，但不限于门静脉高压、神经功能异常、腹水(液体在腹腔中蓄积)、男性乳房肥大、咳血或呕血、手指变形(手掌的腱膜挛缩)、胆结石、脱发、发痒、黄疸、肾衰竭、肝脑病、肌肉丧失、食欲不振、手掌变红、面颊中唾液腺肥大、睾丸萎缩、皮肤中小的蜘蛛样静脉、虚弱、体重损失、蜘蛛痣(放射出许多小分枝血管的中心小动脉)、脑病和扑翼样震颤(扑动状震颤)。肝硬化的症状可以变化。肝硬化定义为代偿性的或失代偿性的，并且使用本领域技术人员已知的所谓的Child-Pugh系统进一步分类。基于某些临床上参数对肝硬化患者分类。Child Pugh A是代偿性的，可显示最小明显的症状。分类为Child Pugh B或Child Pugh C的患者是失代偿性的，可显示出外部症状，比如腹水。
在其它实施方案中，肝硬化的原因包括任何原因诱导的肝炎、过度脂肪沉积、病毒(例如，HCV和HBV)、某些药物的使用、化学暴露、胆管阻塞、自体免疫疾病、血液从肝脏流出障碍(即，Budd-Chiari综合症)、心脏和血管失调、α1-抗胰蛋白酶缺乏、血半乳糖水平高、血酪氨酸水平高、糖原贮积病、糖尿病、营养失调、过多的铜(Wilson疾病)或铁(血色素沉着症)的遗传性积累。在一个实施方案中，肝硬化的原因是滥用酒精。
在一个实施方案中，本文提供用于治疗肝硬化的方法。在一个实施方案中，肝硬化的病理学特征是正常微观小叶结构的丧失和结节再生。用于测量肝硬化程度的方法是本领域熟知的。例如，肝硬化存在的测量是由临床病理学家通过组织学检查从肝硬化患者的肝脏采集的肝活组织检查样品确定的。
在一些实施方案中，提供用于治疗采用对于门静脉高压(portal hypertension)而言目前市售可得到的或试验性的治疗和半胱天冬酶抑制剂组合来治疗肝硬化的方法。门静脉高压的示例性的治疗方法为Bari,K et al.Treatment of portal hypertension.World J.Gastroenterology 2012；18:1166-1175和Giannelli,V.et al.Beta-blockers in liver cirrhosis.Annal.Gastroenterology 2014；27:20-26描述的，将其全文通过引用并入本文。用于门静脉高压的示例性的化合物和目前试验性的治疗剂包括普萘洛尔、纳多洛尔、卡维地洛及本领域技术人员理解的其类似物或衍生物。用于治疗肝硬化的示例性的化合物和目前试验性的治疗剂包括Gilead的Simtuzumab(GS-6624)、Bayer和Onyx的索拉非尼、Norvartis的Serelaxin(RLX030)、噻吗洛尔、NCX-1000、特利加压素(Terlipressin)、NGM Biopharmaceuticals的NGM282、Lumena Pharmaceuticals的LUM001及本领域技术人员理解的其类似物或衍生物。
在一些实施方案中，提供用于治疗采用对于门静脉高压而言目前市售可得到的或试验性的治疗和半胱天冬酶抑制剂组合来治疗肝硬化的方法。门静脉高压的示例性的治疗方法为Bari,K et al.Treatment of portal hypertension.World J.Gastroenterology 2012；18:1166-1175和Giannelli,V.et al.Beta-blockers in liver cirrhosis.Annal.Gastroenterology 2014；27:20-26中描述的，将其全文通过引用并入本文。用于治疗门静脉高压的示例性的化合物和目前试验性的治疗剂包括普萘洛尔((RS)-1-(1-甲基乙基氨基)-3-(1-萘氧基)丙-2-醇)、纳多洛尔((2R*,3S*)-5-{[(2R*)-3-(叔-丁基氨基)-2-羟丙基]氧基}-1,2,3,4-四氢萘-2,3-二醇)、卡维地洛((±)-[3-(9H-咔唑-4-基氧基)-2-羟丙基][2-(2-甲氧基苯氧基)乙基]胺)及本领域技术人员理解的其类似物或衍生物。用于治疗肝硬化的示例性的化合物和目前试验性的治疗剂包括单克隆抗体，比如Gilead的人化的单克隆抗体Simtuzumab(GS-6624,其结合赖氨酰氧化酶-样2(LOXL2)酶，且可以充当免疫调节剂)、SorafenibBayer和Onyx的索拉非尼(4-[4-[[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]氨基甲酰基氨基]苯氧基]-N-甲基吡啶-2-甲酰胺)、激素比如Norvartis的Serelaxin(RLX030，人松弛素-2的重组形式，由如下序列表示L-丝氨酸、L-α-天冬氨酰基-L-丝氨酰基-L-色氨酰基-L-甲硫氨酰基-L-α-谷氨酰基-L-α-谷氨酰基-L-缬氨酰基-L-异亮氨酰基-L-赖氨酰基-L-亮氨酰基-L-半胱氨酰基甘氨酰基-L-精氨酰基-L-α-谷氨酰基-L-亮氨酰基-L-缬氨酰基-L-精氨酰基-L-丙氨酰基-L-谷氨酰胺酰基-L-异亮氨酰基-L-丙氨酰基L-异亮氨酰基-L-半胱氨酰基甘氨酰基-L-甲硫氨酰基-L-丝氨酰基-L-苏氨酰基-L-色氨酰基、环(11→11'),(23→24')-双(二硫化物)与5-氧代-L-脯氨酰基-L-亮氨酰基-L-酪氨酰基-L-丝氨酰基-L-丙氨酰基-L-亮氨酰基-L-丙氨酰基-L-天冬酰胺酰基-L-赖氨酰基-L-半胱氨酰基基-L-半胱氨酰基基-L-组氨酰基-L-基-缬氨酰基甘氨酰基-L-半胱氨酰基L-苏氨酰基-L-赖氨酰基-L-精氨酰基-L-丝氨酰基-L-亮氨酰基-L-丙氨酰基-L-精氨酰基-L-苯基丙氨酰基-L-半胱氨酸环(10'→15')-二硫化物)、噻吗洛尔((S)-1-(叔丁基氨基)-3-[(4-吗啉-4-基-1,2,5-噻二唑-3-基)氧基]丙-2-醇)、NCX-1000(例如Fiorucci et al.in Cardiovasc Drug Rev.2004Summer；22(2):135-46描述的)、特利加压素(1-{[(4R,7S,10S,13S,16S,19R)-19-{[({[(氨基乙酰基)氨基]乙酰基}氨基)乙酰基]氨基}-7-(2-氨基-2-氧代乙基)-10-(3-氨基-3-氧代丙基)-13-苄基-16-(4-羟基苯甲基)-6,9,12,15,18-五氧代-1,2-二硫代-5,8,11,14,17-五氮杂环二十烷(pentaazacycloicosan)-4-基]羰基}-L-脯氨酰基-N-(2-氨基-2-氧代乙基)-L-赖氨酰基酰胺)、NGM282(一种成纤维细胞生长因子的工程化类似物)(参见例如Rossi et al.,Journal of Hepatology,Volume 60,Issue 1,Supplement,Page S533,April 2014)、LUM001(参见例如，美国专利申请号20130338093；20130109671；20130108573和20130034536)，以及本领域技术人员理解的其类似物或衍生物。
在一些实施方案中，提供采用目前用于门静脉高压的试验性治疗和半胱天冬酶抑制剂组合来治疗肝硬化的方法。门静脉高压的示例性的治疗方法为Bari,K et al.Treatment of portal hypertension.World J.Gastroenterology 2012；18:1166-1175和Giannelli,V.et al.Beta-blockers in liver cirrhosis.Annal.Gastroenterology 2014；27:20-26描述的，并将其全文通过引用并入本文。
在一些实施方案中，本文提供用于治疗原发性胆汁性肝硬化(PBC)的方法。原发性胆汁性肝硬化是由肝脏内部的胆管炎症开始。该炎症阻碍了胆汁从肝脏流出；因此，胆汁停留在肝细胞中或外溢到血流中。随着炎症从胆管扩散到肝脏的其余部分，疤痕组织的网格在整个肝脏内发展。门静脉高压是一种PBC常见并发症。在一个实施方案中，所述方法用于治疗35到60岁的女性中的PBC。在一些实施方案中，PBC是由自身免疫病症引起的。本文提供的方法用于治疗一种或多种前述原发性胆汁性肝硬化的症状。
在一些实施方案中，本文提供用于治疗原发性硬化性胆管炎(PSC)的方法。原发性硬化性胆管炎的特征在于慢性胆汁郁积，其与肝脏内胆道中的慢性炎症和细胞凋亡有关。该慢性病症可导致患者的肝硬化和癌症。PSC的病因学没有被充分理解，目前没有任何有效的医学疗法。在一个实施方案中，所述方法用于治疗PSC。门静脉高压是一种PSC常见并发症。在一个实施方案中，原发性硬化性胆管炎的出现与炎性肠病相关。本文提供的方法用于治疗一种或多种前述原发性硬化性胆管炎的症状。
细胞凋亡主要经由两个信号途径出现：死亡受体介导的外源性途径或线粒体介导的内源性途径。在被称为死亡受体的细胞因子受体家族(比如，肿瘤坏死因子受体1(TNF-R1)，Fas/CD95，及肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导的配体受体1和2(TRAIL-R1和TRAIL-R2))与它们的同源配体(TNF-、Fas配体(FasL)/CD95L,TRAIL)结合之后，外源性途径在质膜上开始。参见，Guicciardi et al.Gut,2005:54,1024-1033和Ghavami et al.,Med.Sci.Monit.,2005:11(11):RA337-345。如Mookerjee et al.in Gut 2003；52:1182-1187所示，TNF-可介导患者的门静脉高压。
如本领域技术人员已知，细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素18(IL-18)介导肝脏中的炎症且与慢性肝脏疾病有关。因此，预防或抑制肝脏中的炎症是慢性肝脏疾病治疗中的一个组成部分。IL-1β和IL-18需要半胱天冬酶的作用由它们各自的前体蛋白pro-IL1β和pro-IL-18活化它们各自的炎症活性。前体蛋白pro-IL1β和pro-IL-18缺乏炎症活性。不受任何特定理论的束缚，据信在一些实施方案中，本文提供的化合物预防或抑制肝脏中的过度炎症有助于减少与慢性肝脏疾病有关的肝损伤。如Buck,M et al.在Hepatology 2014；59:1052-1059中所示，IL1-α可介导患者的门静脉高压。
5.4.化合物的制备
用于本文提供的方法的化合物可以使用常规合成步骤制备。用于制备本文使用的半胱天冬酶抑制剂的示例性的方法描述在(6,197,750；6,544,951；6,790,989；7,053,056；7,183,260；7,692,038和Linton S.et al J.Med Chem.2005；48:,6779,Ueno H.et al.Biorg.Med.Chem.Lett.2009；19,199-102中，将其中每篇的全文通过引用并入本文)。一种制备恩利卡生(emricasan)的示例性的方法描述在实施例1中。
5.5.药物组合物的制剂
本文提供的药物组合物包含治疗有效量的一种或多种本发明提供的用于预防、治疗或改善肝脏疾病的一种或多种症状的化合物和可药用载体。
将所述化合物配制成合适的药物制剂，比如用于口服给药的溶液、混悬液、片剂、分散片、丸剂、胶囊、散剂、缓释制剂或酏剂，用于肠胃外给药的无菌溶液或混悬液，以及透皮贴剂制剂和干粉吸入剂。在一个实施方案中，使用本领域熟知的技术和方法将上述化合物配制成药物组合物(参见，例如Remington’s Pharmaceutical Sciences,20th eds.,Mack Publishing,Easton PA(2000))。
在组合物中，有效浓度的一种或多种化合物或可药用衍生物，与合适的药物载体或溶媒混合。在配制前，所述化合物可以如上所述衍生化为相应的盐、酯、酸、碱、溶剂化物、水合物或前药。所述化合物在组合物中的浓度是当给药时能有效治疗、预防或改善肝脏疾病的一种或多种症状的给药量。
在一个实施方案中，所述组合物配制用于单一剂量给药。为了配制组合物，以缓解或改善治疗病症的有效浓度，将重量百分比的化合物溶解、悬浮、分散、或以其他方式混合在所选择的溶媒中。适于给药本文提供的化合物的药物载体或溶媒包括本领域技术人员已知适合特定给药方式的任何载体。
另外，所述化合物可以配制为组合物中的单一可药用活性成分，或者可以与其它活性成分组合。脂质体混悬液，包括组织靶向脂质体，比如肿瘤靶向脂质体，也可以适合作为可药用载体。这些可以根据本领域技术人员已知的方法制备。例如，脂质体制剂可以如本领域已知的制备。简而言之，脂质体比如多层囊泡(MLV’s)可以通过在烧瓶内壁上干燥蛋磷脂酰胆碱和脑磷脂酰丝氨酸(摩尔比7∶3)而形成。加入本文提供的化合物在缺乏二价阳离子的磷酸盐缓冲液(PBS)中的溶液，并振摇烧瓶直到脂质膜分散。洗涤所得到的囊泡，以除去未包封的化合物，离心沉淀，然后再悬浮在PBS中。
活性化合物以对治疗的患者足以发挥治疗有用效果而不存在不期望的副作用的量包括在可药用载体中。治疗有效浓度可以凭经验决定，通过在本领域已知的体外和体内系统中测试化合物，然后从中外推出用于人类的剂量。
药物组合物中活性化合物的浓度将取决于活性化合物的吸收、失活和排泄速率，化合物的物理化学性质，剂量时间表和给药量，以及本领域技术人员已知的其它因素。例如，递送量足以改善肝脏疾病的一种或多种症状。
在一个实施方案中，治疗有效剂量将产生如下的活性成分血清浓度：约0.1ng/ml到约50-100μg/ml、约0.5ng/ml至约80μg/ml、约1ng/ml至约60μg/ml、约5ng/ml至约50μg/ml、约5ng/ml至约40μg/ml、约10ng/ml至约35μg/ml、约10ng/ml至约25μg/ml、约10ng/ml至约10μg/ml、约25ng/ml至约10μg/ml、约50ng/ml至约10μg/ml、约50ng/ml至约5μg/ml、约100ng/ml至约5μg/ml、约200ng/ml至约5μg/ml、约250ng/ml至约5μg/ml、约500ng/ml至约5μg/ml、约1μg/ml至约50μg/ml、约0.1ng/ml至约5ng/ml、约1ng/ml至约10ng/ml或约1μg/ml至约10μg/ml。在一些实施方案中、药物组合物将提供如下剂量：约0.001mg至约2000mg化合物/千克体重/日、约0.002ml至约1000mg化合物/千克体重/日、约0.005ml至约500mg化合物/千克体重/日、约0.005ml至约250mg化合物/千克体重/日、约0.005ml至约200mg化合物/千克体重/日、约0.005ml至约100mg化合物/千克体重/日、约0.001ml至约0.005mg化合物/千克体重/日、约0.01ml至约100mg化合物/千克体重/日、约0.02ml至约100mg化合物/千克体重/日、约0.05ml至约100mg化合物/千克体重/日、约0.1ml至约100mg化合物/千克体重/日、约0.5ml至约100mg化合物/千克体重/日、约0.75ml至约100mg化合物/千克体重/日、约1ml至约100mg化合物/千克体重/日、约1ml至约10mg化合物/千克体重/日、约0.001ml至约5mg化合物/千克体重/日约200ml至约2000mg化合物/千克体重/日、或约10ml至约100mg化合物/千克体重/日。药物剂量单位形式制备为提供每个剂量单元形式约1ml至约1000mg、约1ml至约800mg、约5ml至约800mg、约1ml至约100mg、约1ml至约50mg、约5ml至约100mg、约10ml至约50mg、约10ml至约100mg、约25ml至约50mg和约10ml至约500mg的主要活性成分或主要成分的组合。
所述活性成分可以一次给药，或者可以分成许多较小的剂量以间隔时间给药。应当理解，精确剂量和治疗的持续时间随受治疗的疾病变化，，并且可以使用已知的测试方案凭经验确定，或者通过体内或体外测试数据外推确定。应当注意浓度和剂量值也可以随着要缓解的病症的严重程度而变化。应当进一步理解，对于任何特定的对象，具体剂量方案应当随着时间根据个体需要和给药或监督组合物给药的人的专业判断来调整，而且，本文列出的浓度范围仅仅为示例性的，而不意味着限制权利要求的组合物的范围或实施。
可药用衍生物包括酸、碱和酯、盐、水合物、溶剂化物和前药形式。选择衍生物，使得其药代动力学性质优于相应的中性化合物。
因此，有效浓度或数量的本文所述一种或多种化合物或其可药用衍生物与用于全身、局部或区域给药的合适药物载体或溶媒混合，以形成药物组合物。化合物以用于治疗或预防肝脏疾病或改善其一种或多种症状的有效量被包括。组合物中活性化合物的浓度将取决于活性化合物的吸收、失活和排泄速率，剂量时间表、给药量、具体制剂、以及本领域技术人员已知的其它因素。
所述组合物旨在通过合适的途径给药，包括口服、肠胃外、直肠、局部、区域或经由鼻饲管(nasogastric tube)或口胃管(orogastric tube.)。对于口服给药，可以使用胶囊和片剂。所述组合物是液体、半液体或固体形式，而且以适合每种给药途径的方式配制。在一个实施方案中，给药方式包括肠胃外和口服给药模式。在一些实施方案中，预期口服给药。
用于肠胃外、皮内、皮下或局部应用的溶液或悬浮液可以包括任一种下述组分：无菌稀释剂，比如注射用水、盐溶液、非挥发油、聚乙二醇、甘油、丙二醇、二甲基乙酰胺或其它合成溶剂；抗微生物剂，比如苯甲醇和尼泊金甲酯；抗氧剂，比如抗坏血酸和亚硫酸氢钠；螯合剂，比如乙二胺四乙酸(EDTA)；缓冲液，比如乙酸盐、柠檬酸盐和磷酸盐；以及用于调节张力的试剂，比如氯化钠或葡萄糖。肠胃外制剂可以封装在安瓿、一次性注射器、或者由玻璃、塑料或其它合适的材料制成的单一剂量或多次剂量小瓶中。
在化合物显示出溶解性不足的情况下，可以使用增溶化合物的方法。这样的方法是本领域那些技术人员已知的，包括但不限于使用共溶剂比如二甲亚砜(DMSO)，使用表面活性剂比如或溶解在碳酸氢钠水溶液中。
在混合或加入化合物时，得到的混合物可以是溶液、悬浮液、乳液等。得到的混合物的形式取决于多种因素，包括预期的给药方式和化合物在选择的载体或溶媒中的溶解性。所述有效浓度足以改善受治疗的疾病、障碍或病症的症状，其可以凭经验确定。
为了给药至人类和动物，以单位剂型提供所述药物组合物，比如片剂、胶囊、丸剂、粉末、颗粒剂、无菌肠胃外溶液或悬浮液、和口服溶液或悬浮液、以及油包水乳液，其包含了适量的化合物或其可药用衍生物。可药用治疗活性化合物及其衍生物以单位剂型或多次剂型被配制和给药。如本文使用的单位剂型指适合人类和动物对象且如本领域已知的独立包装的物理上离散单元。每个单位剂量包含预定量的足以产生期望治疗效果的治疗活性化合物，与需要的药物载体、溶媒或稀释剂组合。单位剂型的实例包括安瓿和注射器，以及独立包装的片剂或胶囊。单位剂型可以以部分或多倍给药。多次剂型是多个同样的单位剂型，包装在单一容器中，以分开的单位剂型给药。多次剂型的实例包括小瓶、片剂或胶囊瓶、或品脱或加仑瓶。因此，多次剂型是没有在包装中分开的多个单位剂量。
也可以制备缓释释放制剂。缓释释放制剂的合适的实施例包括其包含本文提供的化合物的固体疏水性聚合物的半渗透性基质，其中所述基质是成形制品的形式，例如薄膜或微胶囊。缓释释放基质的实例包括聚酯、水凝胶(例如聚(2-羟乙基-甲基丙烯酸酯)或聚(乙烯醇))、聚交酯、L-谷氨酸和乙基-L-谷氨酸酯的共聚物、不可降解的乙烯-乙酸乙烯酯、可降解的乳酸-羟基乙酸共聚物比如LUPRON DEPOTTM(由乳酸-乙醇酸共聚物和醋酸亮丙瑞林组成的可注射微球体)、和聚-D-(-)-3-羟基丁酸。虽然聚合物比如乙烯-乙酸乙烯酯和乳酸-乙醇酸能够在100天内释放分子，但是一些水凝胶释放蛋白的时间段较短。当包封的化合物在体内保持很长时间时，在37℃下暴露于水分导致它们可能变性或聚合，使得生物活性的丧失，并且它们结构的可能改变。根据参与的作用机制，可以设计合理策略以实现稳定化。例如，如果发现聚合机制是通过硫代-二硫化物交换而形成分子间S--S键，那么可以通过修饰巯基残基、从酸性溶液中冻干、控制含水量、使用合适的添加剂和开发特定聚合物基质组合物，以实现稳定化。
可以制备包含如下范围活性成分的剂型或组合物：0.001％至100％活性成分、0.002％至100％活性成分、0.005％至90％活性成分、0.01％至100％活性成分、0.05％至100％活性成分、0.05％至90％活性成分、0.1％至100％活性成分、0.1％至1％活性成分、0.1％至0.5％活性成分、1％至100％活性成分、1％至99％活性成分、1％至98％活性成分、1％至97％活性成分、1％至96％活性成分、1％至95％活性成分、5％至95％活性成分、10％至100％活性成分、10％至95％活性成分、15％至95％活性成分、20％至95％活性成分、25％至100％活性成分、50％至100％活性成分、50％至95％活性成分、60％至95％活性成分或75％至100％活性成分，其余是无毒性载体。对于口服给药，通过加入任何常用的赋形剂，比如例如，药物级的甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、滑石、纤维素衍生物、交联羧甲基纤维素钠、葡萄糖、蔗糖、碳酸镁或糖精钠，形成可药用无毒组合物。这样的组合物包括溶液、悬浮液、片剂、胶囊、粉末和缓释释放制剂，比如但不限于植入物和微胶囊递送系统，以及可生物降解的生物相容的聚合物，比如胶原、乙烯醋酸乙烯、聚酐、聚乙醇酸、聚原酸酯、聚乳酸等。用于制备这些组合物的方法是本领域技术人员已知的。预期的组合物可以包含0.001％至100％的活性成分，在一个实施方案中，包含75-95％的活性成分。
活性化合物或可药用衍生物可以与保护化合物使其不会被身体快速清除的载体一起制备，例如延时释放制剂或包衣。
所述组合物可以包括其它活性化合物，以获得期望的性质组合。如本文所述的，本文提供的化合物或其可药用衍生物也可以为了治疗或预防目的，与一般领域中已知的对治疗肝脏疾病具有价值的另一种药理学试剂一起有利地给药。应当理解，这样的组合治疗构成了本文提供的组合物和治疗方法的一个进一步的方面。
口服给药的组合物
口服药物剂型是固体、凝胶或液体。固体剂型是片剂、胶囊、颗粒和散装粉末。口服片剂的类型包括压制的、可咀嚼的锭剂和可以包肠溶衣、糖衣或薄膜衣的片剂。胶囊可以是硬胶囊或软明胶胶囊，而颗粒和粉末可以与本领域技术人员已知的其它成分组合，以非泡腾或泡腾形式提供。
在一些实施方案中，制剂是固体剂型，比如胶囊或片剂。片剂、丸剂、胶囊、锭剂等，可以包含任一种下述成分或类似性质的化合物：粘合剂；稀释剂；崩解剂；润滑剂；助流剂；甜味剂；和矫味剂。
粘合剂的实例包括微晶纤维素、西黄蓍胶、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶溶液、蔗糖和淀粉糊。润滑剂包括滑石、淀粉、硬脂酸镁或硬脂酸钙、石松子和硬脂酸。稀释剂包括例如乳糖、蔗糖、淀粉、高岭土、盐、甘露醇和磷酸氢钙。助流剂包括，但不限于胶态二氧化硅。崩解剂包括交联羧甲基纤维素钠、淀粉羟乙酸钠、海藻酸、玉米淀粉、马铃薯淀粉、膨润土、甲基纤维素、琼脂和羧甲基纤维素。着色剂包括，例如任何批准认可的水溶性FD和C染料，其混合物；以及悬浮在氧化铝水合物中的水不溶性FD和C染料。甜味剂包括蔗糖、乳糖、甘露醇和人造甜味剂比如糖精，以及任意数量的喷雾干燥的调味剂。调味剂包括从植物比如水果中萃取的天然调味剂，和产生愉快感觉的化合物的合成混合物，比如但不限于薄荷和水杨酸甲酯。润湿剂包括单硬脂酸丙二醇酯、脱水山梨糖醇单油酸酯、二甘醇单月桂酸酯和聚氧乙烯月桂醚。肠溶衣包括脂肪酸、脂肪、蜡、虫胶、氨化虫胶和邻苯二甲酸醋酸纤维素。膜包衣包括羟乙基纤维素、羧甲基纤维素钠、聚乙二醇4000和邻苯二甲酸醋酸纤维素。
如果期望口服给药，化合物可以提供在保护其免于胃的酸性环境的组合物中。例如，组合物可以配制在于胃中保持其完整性且在肠中释放活性化合物的肠溶衣中。所述组合物也可以与抗酸剂或其它这样的成分配制。
当剂量单位形式是胶囊时，除了上述类型的材料之外，其还可以包含液体载体，比如脂肪油。另外，剂量单位形式可以包含改变剂量单位物理形式的各种其它材料，例如糖衣和其它肠溶剂包衣。所述化合物也可以作为酏剂、悬浮液、糖浆、糯米纸囊剂、喷雾剂(sprinkle)、咀嚼胶等的组分给药。除了活性化合物之外，糖浆可以包含作为甜味剂的蔗糖和一些防腐剂、染料和色素、及调味剂。
活性物质也可以与不损害期望的作用的其它活性物质或者与补充期望的作用的物质混合，所述物质比如抗酸剂、H2阻断剂和利尿剂。所述活性成分为如本文描述的化合物或其可药用衍生物。可以包括较高浓度，至多约98％重量的活性成分。
片剂中包括的可药用载体为粘合剂、润滑剂、稀释剂、崩解剂、着色剂、调味剂和润湿剂。肠溶衣片因为肠溶包衣而有抵抗胃酸的作用，并在中性或碱性的肠中溶解或崩解。糖衣片是压制片，应用了不同层的可药用物质。膜抱衣片是压制片，其已经包有聚合物或其它合适的包衣。多层压制片剂是压制片，使用之前提及的可药用物质，通过超过一个压制循环来制造的。着色剂也可以在上述剂型中使用。调味剂和甜味剂在压制片、糖衣片、多次压制片和可咀嚼片中使用。调味剂和甜味剂在可咀嚼片和锭剂的形成中是特别有用的。
液体口服剂型包括水溶液、乳液、悬浮液、溶液、和/或由非泡腾颗粒重构的悬浮液和由泡腾颗粒重构的泡腾制剂。水溶液包括例如酏剂和糖浆。乳液是水包油型或油包水型。
酏剂是澄清的、甜的、水醇制剂。在酏剂中使用的可药用载体包括溶剂。糖浆是糖例如蔗糖的浓缩水溶液，并且可以包含防腐剂。乳液是一种液体以小珠形式完全分散在另一种液体中的两相系统。在乳液中使用的可药用载体是非水液体、乳化剂和防腐剂。悬浮液使用可药用助悬剂和防腐剂。在重构成液体口服剂型的非泡腾颗粒中使用的可药用物质包括稀释剂、甜味剂和润湿剂。在重构成液体口服剂型的泡腾颗粒中使用的可药用物质包括有机酸和二氧化碳源。上述所有剂型中都使用着色剂和调味剂。
溶剂包括甘油、山梨醇、乙醇和糖浆。防腐剂的实施例包括甘油、尼泊金丙甲酯和尼泊金丙酯、苯甲酸、苯甲酸钠和乙醇。在乳液中使用的非水液体的实例包括矿物油和棉籽油。乳化剂的实施例包括明胶、阿拉伯树胶、西黄蓍胶、膨润土和表面活性剂比如聚氧乙烯脱水山梨醇酐单油酸酯。助悬剂包括羧甲基纤维素钠、果胶、西黄蓍胶、硅酸镁铝和阿拉伯树胶。稀释剂包括乳糖和蔗糖。甜味剂包括蔗糖、糖浆、甘油和人造甜味剂，比如糖精。润温剂包括单硬脂酸丙二醇酯、脱水山梨糖醇单油酸酯、二甘醇单月桂酸酯和聚氧乙烯月桂基醚。有机酸包括柠檬酸和酒石酸。二氧化碳源包括碳酸氢钠和碳酸钠。着色剂包括任何批准认可的水溶性FD和C染料，及其混合物。调味剂包括从植物比如水果中萃取的天然调味剂，和产生愉快味觉的化合物的合成混合物。
对于固体剂型，在例如碳酸丙烯酯、植物油或甘油三酸酯中的溶液或悬浮液可以被包封入明胶胶囊。这样的溶液以及其制剂和包封公开在美国专利号4,328,245；4,409,239；和4,410,545中。对于液体剂型，溶液例如聚乙二醇中的溶液，可以用足量的可药用液体载体例如水稀释，以便于测量给药。
可选地，液体或半固体口服制剂，可以通过将活性化合物或盐溶解或分散在植物油、二醇、甘油三酯、丙二醇酯(例如碳酸丙烯酯)和其它这样的载体中，并把这些溶液或悬浮液包封入硬或软的明胶胶囊壳中来制备。其它有用的制剂，包括但不限于下述制剂：其包含本文提供的化合物、二烷基化的单-或多-烷撑乙二醇(包括，但不限于1,2-二甲氧基甲烷、二甘醇二甲醚、三甘醇二甲醚、四甘醇二甲醚、聚乙二醇-350-二甲醚、聚乙二醇-550-二甲醚、聚乙二醇-750-二甲醚，其中350、550和750指聚乙二醇的近似平均分子量)，以及一种或多种抗氧剂(比如丁基化羟基甲苯(BHT)、丁羟茴醚(BHA)、没食子酸丙酯、维生素E、氢醌、羟基香豆素、乙醇胺、卵磷脂、脑磷脂、抗坏血酸、苹果酸、山梨醇、磷酸、硫代二丙酸及其酯和二硫代氨基甲酸酯)。
其它制剂包括，但不限于包含可药用缩醛的含水醇溶液。在这些制剂中使用的醇是具有一个或多个羟基的任何可药用水可混溶溶剂，包括但不限于丙二醇和乙醇。缩醛包括，但不限于低级烷基醛的二(低级烷基)缩醛，比如乙醛二乙缩醛。
在所有的实施方案中，为了改变或维持活性成分的溶解，片剂和胶囊制剂可以如本领域技术人员已知的进行包衣。因此，例如，它们可以用常规肠可消化的包衣进行包衣，所述包衣为例如水杨酸苯酯、蜡和邻苯二甲酸醋酸纤维素。
可注射的溶液和乳液
本文也预期了肠胃外给药，通常特征为皮下、肌肉或静脉注射。注射剂可以用常规形式制备成液体溶液或悬浮液、适合在注射前在液体中成为溶液或悬浮液的固体形式或乳液。合适的赋形剂为例如水、盐水、葡萄糖、甘油或乙醇。另外，如果期望，要给药的药物组合物也可以包含少量无毒辅助物质，比如润湿剂或乳化剂、pH缓冲剂、稳定剂、溶解性增强剂和其它这样的试剂，比如例如乙酸钠、脱水山梨醇单月桂酸酯、油酸三乙醇胺酯和环糊精。本发明也预期缓慢释放或缓释释放系统的植入，使得剂量维持恒定水平。简而言之，本文提供的化合物分散在固体内部基质中，例如聚甲基丙烯酸甲酯、聚甲基丙烯酸丁酯、增塑或未增塑过的聚氯乙烯、增塑的尼龙、增塑的聚对苯二甲酸乙二醇酯、天然橡胶、聚异戊二烯、聚异丁烯、聚丁二烯、聚乙烯、乙烯-醋酸乙烯酯共聚物、硅酮橡胶、聚二甲基硅氧烷、硅氧烷碳酸酯共聚物、亲水聚合物比如丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯的水凝胶、胶原、交联聚乙烯醇和交联的部分水解的聚乙酸乙烯酯，其被外部聚合膜包围，例如聚乙烯、聚丙烯、乙烯/丙烯共聚物、乙烯/丙烯酸乙酯共聚物、乙烯/醋酸乙烯酯共聚物、硅酮橡胶、聚二甲基硅氧烷、氯丁橡胶、氯化聚乙烯、聚氯乙烯、氯乙烯和醋酸乙烯酯的共聚物、偏二氯乙烯、乙烯和丙烯、聚对苯二甲酸乙二醇酯离聚物、丁基橡胶表氯醇橡胶、乙烯/乙烯醇共聚物、乙烯/乙酸乙烯酯/乙烯醇三元共聚物、和乙烯/乙烯氧基乙醇共聚物，其在体液中不溶。在释放速率控制步骤中，化合物通过外部聚合膜扩散。在这样的肠胃外组合物中包含的活性化合物的百分比高度取决于其具体性质，以及化合物的活性和对象的需要。
组合物的肠胃外给药包括静脉、皮下和肌内给药。用于肠胃外给药的制剂包括准备注射的无菌溶液、无菌无水可溶性产品比如冻干粉(其在使用前与溶剂结合)，包括皮下注射片剂、准备注射用无菌悬浮液、无菌无水不溶性产品(易于在使用前与溶媒结合)和无菌乳液。溶液可以是水溶液或非水溶液。
如果静脉内给药，合适的载体包含生理盐水或磷酸盐缓冲盐水(PBS)和包含增稠剂和增溶剂的溶液，所述增稠剂和增溶剂比如葡萄糖、聚乙二醇和聚丙二醇及其混合物。
在肠胃外制剂中使用的可药用载体，包括水性溶媒、非水性溶媒、抗微生物剂、等渗剂、缓冲液、抗氧剂、局部麻醉剂、助悬剂和分散剂、乳化剂、多价螯合剂或螯合剂，及其它可药用物质。
水性溶媒的实例包括氯化钠注射液、林格氏注射液、等渗葡萄糖注射液、无菌水注射液、葡萄糖和乳酸盐林格氏注射液。非水性肠胃外溶媒包括来自植物的不挥发性油、棉籽油、玉米油、芝麻油和花生油。以抑菌浓度或抑真菌浓度的抗微生物剂必须加入到以多次剂量容器包装的肠胃外制剂中，所述抗微生物剂包括苯酚或甲酚、汞剂、苯甲醇、氯丁醇、对羟基苯甲酸甲酯和丙酯、硫柳汞、苯扎氯铵和苄索氯胺。等渗剂包括氯化钠和葡萄糖。缓冲液包括磷酸盐和柠檬酸盐。抗氧剂包括硫酸氢钠。局部麻醉剂包括盐酸普鲁卡因。助悬剂和分散剂包括羧甲基纤维素钠、羟丙甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮。乳化剂包括聚山梨醇酯80金属离子的多价螯合剂或螯合剂包括EDTA。药物载体也包括用于水混溶性溶媒的乙醇、聚乙二醇和丙二醇，和用于pH调节的氢氧化钠、盐酸、柠檬酸或乳酸。
调节药学活性化合物的浓度以使注射液提供产生期望药理学效果的有效量。精确剂量取决于患者或动物的年龄、体重和状况，如本领域已知的。
单位剂量的肠胃外制剂被包装在安瓿、小瓶或含针注射器中。如本领域已知并且实践的，用于肠胃外给药的所有制剂都必须是无菌的。
作为例证，包含活性化合物的无菌水溶液的静脉内或动脉内输注是一种有效的给药方式。另一个实施方案是无菌水性或油性溶液或悬浮液，其包含根据需要产生期望药理学效果的可注射的活性物质。
注射剂被设计成用于局部和全身给药。在一些实施方案中，治疗有效剂量被配制为包含对于要治疗的组织，浓度为至少约0.1％w/w直至约90％w/w或更多，或超过1％w/w的所述活性化合物。活性成分可以一次性给药，或者也可以被分成许多较小剂量，以间隔时间给药。应当理解，精确剂量和治疗的持续时间随治疗组织而变化，并且可以使用已知的测试方案凭经验确定，或者通过体内或体外测试数据外推出。应当注意，浓度和剂量值也可以随着要治疗个体的年龄而变化。应当进一步理解，对于任何特定对象，具体剂量方案应当随时间推移根据个人需要和给药或监督制剂给药的人的专业判断来调节，而且，本文列出的浓度范围仅仅是示例性的，而不意味着限制权利要求的制剂的范围或实施。
为了制备更可溶的活性产品或制备前药，所述化合物可以为微粉化的或其它合适的形式悬浮或者可以被衍生化。得到的混合物的形式取决于多种因素，包括例如预期给药方式和化合物在选择的载体或溶媒中的溶解性。有效浓度足以改善病症的症状，并且可以凭经验确定。
冻干粉末
冻干粉末也是本文感兴趣的，其可以重构作为溶液、乳液和其它混合物给药。它们也可以重构并配制成固体或凝胶。
通过将本文提供的化合物或其可药用衍生物溶解在合适的溶剂中制备无菌冻干粉末。溶剂可以包含赋形剂，其改善了粉末或由粉末制备的重构溶液的稳定性或其它药理学组分。可以使用的赋形剂包括，但不限于葡萄糖、山梨醇、果糖、玉米糖浆、木糖醇、甘油、葡萄糖、蔗糖或其它合适的试剂。溶剂也可以包含缓冲液，比如柠檬酸盐、磷酸钠或磷酸钾、或本领域技术人员已知的其它这样的缓冲液，pH值为接近中性。随后无菌过滤溶液，接着在本领域技术人员已知的标准条件下冻干，提供期望的制剂。通常，将得到的溶液分配到小瓶中冻干。每个小瓶将包含单一剂量(10-1000mg或100-500mg)或多次剂量的化合物。冻干粉末可以在合适的条件下储存，比如在约4℃到室温。
用注射用水重构该冻干粉末提供了在肠胃外给药中使用的制剂。对于重构，在每毫升无菌水或其它合适的载体中，加入约1-50mg、5-35mg或约9-30mg的冻干粉末。精确数量取决于所选择的化合物。这样的量可以凭经验确定。
局部给药
局部混合物是如用于局部和全身给药的描述来制备的。得到的混合物可以是溶液、混悬液、乳液等，并且制剂成乳膏、凝胶、软膏、乳液、溶液、酏剂、洗剂、悬浮液、酊剂、糊剂、泡沫剂、气雾剂、冲洗剂、喷雾剂、栓剂、绷带、皮肤贴剂或适于局部给药的任何其他制剂。
所述化合物或其可药用衍生物可以配制为用于局部应用的气雾剂，比如通过吸入(参见，例如美国专利号4,044,126、4,414,209和4,364,923，其中描述了用于治疗炎症性疾病特别是哮喘的类固醇递送用气溶胶)。这些用于向呼吸道给药的制剂可以单独或与惰性载体比如乳糖组合，以气溶胶或溶液形式用喷雾器使用，或者以微细粉末形式用于吹入使用。在这种情况下，制剂的微粒直径将具有小于50微米或小于10微米的直径。
所述化合物可以配制用于区域或局部应用，比如用于向皮肤和粘膜局部应用，比如在眼睛中，以凝胶、乳膏和洗剂形式，应用于眼睛或者用于脑池内或脊柱内应用。局部给药预期是透皮递送，以及向眼睛或粘膜给药，或者用于吸入治疗。所述活性化合物单独或与其它可药用赋形剂组合的鼻溶液也可以被给药。
这些溶液，特别是设计用于眼科用途的那些，可以用合适的盐配制成0.01％-10％的等渗溶液，pH约5-7。
用于其他给药途径的组合物
本文还预期其它给药途径，比如局部应用、透皮贴片和直肠给药。例如，用于直肠给药的药物剂型为用于全身效果的直肠栓剂、胶囊和片剂。本发明使用的直肠栓剂指用于插入直肠的固体，其在体温下融化或变软，释放出一种或多种药理学或治疗活性成分。在直肠栓剂中使用的可药用物质是基质或溶媒和升高熔点的试剂。基质的实施例包括可可脂(可可油)、甘油-明胶、聚乙二醇(聚氧乙二醇)以及脂肪酸的甘油单酯、甘油二酯和甘油三酯的合适混合物。可以使用多种基质的组合。升高栓剂熔点的试剂包括鲸蜡和蜡。直肠栓剂可以通过压制方法或模制来制备。在一些实施方案中，直肠栓剂的重量为约2至3克。
使用如用于配制口服给药的制剂相同的可药用物质，通过相同的方法制备用于直肠给药的片剂和胶囊。
缓释组合物
活性成分比如本文提供的化合物可以通过控制释放方式或本领域普通技术人员熟知的递送装置来给药。实例包括，但不限于在如下美国专利号中描述的那些：3,845,770；3,916,899；3,536,809；3,598,123；4,008,719；5,674,533；5,059,595；5,591,767；5,120,548；5,073,543；5,639,476；5,354,556；5,639,480；5,733,566；5,739,108；5,891,474；5,922,356；5,972,891；5,980,945；5,993,855；6,045,830；6,087,324；6,113,943；6,197,350；6,248,363；6,264,970；6,267,981；6,376,461；6,419,961；6,589,548；6,613,358和6,699,500将其中每篇通过引用并入本文。这样的剂型可以用于提供一种或多种活性成分的缓慢或控制释放，使用例如羟丙甲基纤维素、其它聚合物基质、凝胶、可渗透膜、渗透系统、多层包衣、微粒、脂质体、微球或其组合，以不同的比例提供期望的释放特征。本领域普通技术人员已知的合适的控释制剂，包括本文描述的那些，可以容易地选择与本文提供的活性成分一起使用。因此，提供的组合物包含适合口服给药的单一单位剂型，比如但不限于适于控制释放的片剂、胶囊、胶囊锭(gelcaps)和囊片。
所有控制释放的药物产品都具有共同目标：改善药物的治疗，超过它们的非控释对应药物所能达到的疗效。理想地，最佳设计的控制释放制剂在医学治疗中的使用具有如下特征：应用最少量的药物，在最短的时间里治愈或控制病症。控释制剂的优点包括延长药物的活性、减少给药频率，并增加患者的顺应性。另外，控释制剂可以用于影响作用的起效时间或其它特征，比如药物的血液水平，并且因此可以影响副作用(例如不良作用)的发生。
大多数控释制剂被设计为最初释放一定量的药物(活性成分)，其迅速产生期望的治疗效果，并逐渐和连续地释放其它量的药物，以在延长的时间段内保持治疗或预防效果的水平。为了在体内保持这种恒定的药物水平，药物必须从剂型中以一定速率释放，该速率将替换被代谢和从体内排泄的药物量。活性成分的控制释放可以受各种条件刺激，包括但不限于pH、温度、酶、水或其它生理条件或化合物。
在一些实施方案中，可以使用静脉内输注、可植入渗透泵、透皮贴剂、脂质体或其它给药方式给药药物。在一个实施方案中，可以使用泵(参见，Sefton,CRC Crit.Ref.Biomed.Eng.14:201(1987)；Buchwald et al.,Surgery 88:507(1980)；Saudek et al.,N.Engl.J.Med.321:574(1989))。在另一个实施方案中，可以使用聚合材料。在仍然另一个实施方案中，可以将控制释放系统置于对象中由本领域专业人员确定的合适部位，即因此仅需要全身剂量的一小部分(参见例如Goodson,Medical Applications of Controlled Release,vol.2,pp.115-138(1984))。其它控制释放系统在Langer的综述(Science 249:1527-1533(1990))中有论述。活性成分可以分散在固体内部基质中，例如聚甲基丙烯酸甲酯、聚甲基丙烯酸丁酯、增塑或未增塑的聚氯乙烯、增塑的尼龙、增塑的聚对苯二甲酸乙二醇酯、天然橡胶、聚异戊二烯、聚异丁烯、聚丁二烯、聚乙烯、乙烯-醋酸乙烯酯共聚物、硅酮橡胶、聚二甲基硅氧烷、硅氧烷碳酸酯共聚物、亲水性聚合物比如丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯的水凝胶、胶原、交联的聚乙烯醇和交联的部分水解的聚乙酸乙烯酯，其被外部聚合膜包围，例如聚乙烯、聚丙烯、乙烯/丙烯共聚物、乙烯/丙烯酸乙酯共聚物、乙烯/乙酸乙烯酯共聚物、硅酮橡胶、聚二甲基硅氧烷、氯丁橡胶、氯化聚乙烯、聚氯乙烯、氯乙烯和乙酸乙烯酯共聚物、偏二氯乙烯、乙烯和丙烯、聚对苯二甲酸乙二醇酯离聚物、丁基橡胶表氯醇橡胶、乙烯/乙烯醇共聚物、乙烯/乙酸乙烯酯/乙烯醇三元共聚物和乙烯/乙烯氧基乙醇共聚物，其不溶于体液中。然后，在释放速率控制步骤中，活性成分扩散通过外部聚合膜。在这样的肠胃外组合物中，活性成分的百分比高度取决于其具体性质和对象的需求。
靶向制剂
本文提供的化合物或其可药用衍生物也可以配制成靶向特定的组织、受体或待治疗对象的其它身体区域。许多这样的靶向方法是本领域那些技术人员熟知的。所有这样的靶向方法都可以在本文中预期用于本发明的组合物。对于靶向方法的非限制性实例，参见例如美国专利号6,316,652、6,274,552、6,271,359、6,253,872、6,139,865、6,131,570、6,120,751、6,071,495、6,060,082、6,048,736、6,039,975、6,004,534、5,985,307、5,972,366、5,900,252、5,840,674、5,759,542和5,709,874。
在一个实施方案中，脂质体悬浮液，包括组织靶向脂质体，比如肿瘤靶向脂质体，也可以适合作为可药用载体。这些可以根据本领域那些技术人员已知的方法来制备。例如，脂质体制剂可以如美国专利号4,522,811中描述的制备。简而言之，脂质体比如多层囊泡(MLV′s)可以通过在烧瓶内壁上干燥蛋磷脂酰胆碱和脑磷脂酰丝氨酸(摩尔比7∶3)而形成。加入本文提供的化合物在缺乏二价阳离子的磷酸盐缓冲液(PBS)中的溶液，并振摇烧瓶直到脂质膜分散。洗涤得到的囊泡，以去除未包封的化合物，通过离心沉淀，然后再悬浮在PBS中。
剂量和单位剂型
在人类治疗学中，医生将决定剂量，他最适当地根据预防或治疗性治疗并根据受治疗对象的年龄、体重、疾病阶段和其它特异性因素来考虑。通常，剂量对于成人是每日约1至约1000mg，或每日约5至约250mg，或每日约10至50mg。在一些实施方案中，剂量对于每个成年人每日约5至约400mg或每日25至200mg。还预期每日约50至约500mg的给药速率。
在一些实施方案中，将有效地预防或治疗肝脏疾病或其一种或多种症状的化合物或组合物的量将随疾病或病症的性质和严重程度，以及活性成分的给药途径而变化。频率和剂量也将依照每个对象的具体因素而变化，取决于给药的具体治疗(例如，治疗剂或预防剂)，病症、疾病或病况的严重程度，给药途径，以及对象的年龄、身体、体重、反应和既往病史。有效剂量可以由源自体外或动物模型测试系统的剂量反应曲线外推出。
组合物的示例性的剂量包括每千克对象或样本重量计毫克或微克量和半胱天冬酶抑制剂(例如，每千克约10微克至每千克约50毫克，每千克约100微克至每千克约25毫克，或每千克约100微克至每千克约10毫克)。在一些实施方案中，对对象给药的剂量在0.20mg/kg至2.00mg/kg对象体重之间，或在0.30mg/kg至1.50mg/kg对象体重之间。
在一些实施方案中，对于本文描述的病症，本文描述的和半胱天冬酶抑制剂的推荐日剂量范围在每日约0.1mg至约1000mg的每种和半胱天冬酶抑制剂范围内之内，作为单一的一日一次剂量给予，或作为分开的剂量在一天期间给予。在一个实施方案中，日剂量以等分的剂量每日给药两次。特别地，日剂量范围应当为每日约10mg至约200mg，更特别地，在每日约10mg至约150mg之间，或者甚至更特别地，在每日约25至约100mg之间。在某些情况下，在本文公开的范围外使用活性成分的剂量可能是必要的，这对本领域普通技术人员将是显然的。此外，应当注意临床医师或治疗医生结合对象的反应将懂得如何和何时中断、调整或终止治疗。
不同的治疗有效量可以应用于不同的疾病和病症，如本领域普通技术人员将容易地了解的。类似地，足以预防、控制、治疗或改善这样的病症，但不足以引起或足以减少本文描述的化合物相关的副作用的量也被上述给剂量数量和给药频率时间表涵盖。进一步，当向对象给药多重剂量的本文所述化合物时，并非所有的剂量都需要相同。例如，可以增加给药对象的剂量以提高化合物的预防或治疗效果，或者可以减少对给药对象的剂量，以减少特定对象经受到的一种或多种副作用。
在一个实施方案中，给药以预防、治疗、控制或改善对象中的病症或其一种或多种症状的本文所述化合物的剂量为0.1mg/kg、1mg/kg、2mg/kg、3mg/kg、4mg/kg、5mg/kg、6mg/kg、10mg/kg、或15mg/kg以上的对象体重。在另一个实施方案中，给药预防、治疗、控制或改善对象的病症或其一种或多种症状的本文提供的化合物的剂量为以下单位剂量：0.1mg至200mg、0.1mg至100mg、0.1mg至50mg、0.1mg至25mg、0.1mg至20mg、0.1mg至15mg、0.1mg至10mg、0.1mg至7.5mg、0.1mg至5mg、0.1至2.5mg、0.25mg至20mg、0.25至15mg、0.25至12mg、0.25至10mg、0.25mg至7.5mg、0.25mg至5mg、0.5mg至2.5mg、1mg至20mg、1mg至15mg、1mg至12mg、1mg至10mg、1mg至7.5mg、1mg至5mg、或1mg至2.5mg。
在一些实施方案中，可以从本文提供的半胱天冬酶抑制剂的一个或多个负载剂量开始进行治疗或预防，接着是一个或多个维持剂量。在这样的实施方案中，负载剂量可以是例如每日约60致约400mg或每日约100至约200mg，一天至五周。负载剂量后可以是一个或多个维持剂量。每个维持剂量可以独立地为每日约10mg至约200mg，更特别地，在每日约25mg和约150mg之间，或者更特别地，在每日约25mg至约80mg之间，或在每日约25mg至约50mg之间。维持剂量可以每日给药，而且可以作为单一剂量或分开剂量给药。
在一些实施方案中，可以给药本文提供的半胱天冬酶抑制剂的剂量，以在对象的在对象的血液或血清中获得活性成分的稳态密度。稳态密度可以根据技术人员可获得的技术进行测量来测定，或者可以基于对象的物理特征比如身高、体重和年龄。在一些实施方案中，给药足量的本文提供的化合物，以在对象的血液或血清中获得稳态密度约300至约4000ng/mL、约400至约1600ng/mL、或约600至约1200ng/mL。可以施用负载剂量一至五天，以获得稳态的的血液或血清浓度约1200至约8000ng/mL或约2000至约4000ng/mL。可以给药维持剂量，以在对象的血液或血清中获得稳态密度约300至约4000ng/mL、约400至约1600ng/mL、或约600至约1200ng/mL。
在一些实施方案中，可以重复给药同样的化合物，并且可以间隔至少1天、2天、3天、5天、10天、15天、30天、45天、2个月、75天、3个月或6个月给药。在其它实施方案中，可以重复给药同样的预防或治疗剂，并且可以间隔至少1天、2天、3天、5天、10天、15天、30天、45天、2个月、75天、3个月或6个月给药。
在某些方面，本文提供单位剂量，以适于给药的形式包括化合物或其可药用衍生物。这样的形式在上文中详细描述。在一些实施方案中，单位剂量包括1至1000mg、5至250mg或10至50mg的活性成分。在特定的实施方案中，所述单位剂量包括约1、5、10、25、50、100、125、250、500或1000mg的活性成分。这样的单位剂量可以根据本领域技术人员熟悉的技术制备。
制品
所述化合物或可药用衍生物可以包装为制品，其包含包装材料、本文提供的化合物或其可药用衍生物(其用于治疗、预防或改善与肝脏疾病有关的一种或多种症状)和指示所述化合物或其可药用衍生物用于治疗、预防或改善肝脏疾病的一种或多种症状的标签。
本文提供的制品包括包装材料。在包装药物产品中使用的包装材料是本领域技术人员熟知的。参见，例如美国专利号5,323,907、5,052,558和5,033,252。药物包装材料的实例包括，但不限于泡罩包装、瓶子、管子、吸入器、泵、袋子、小瓶、容器、注射器、瓶子、以及适合所选制剂及预期给药和治疗方式的任何包装材料。本文涵盖所提供化合物和组合物的各种制剂。
试剂盒
进一步提供用于治疗肝脏疾病的方法的试剂盒。试剂盒可以包括半胱天冬酶抑制剂或其组合物，提供给护理提供者关于治疗或预防肝脏疾病的用法的信息的说明书。说明书可以印刷形式或以电子媒介比如CD或DVD的形式、或以其中可以或者这种说明的网址的形式提供。单位剂量的或其组合物、或半胱天冬酶抑制剂或其组合物可以包括当向对象给药时使得可以在对象中维持所述化合物或组合物的治疗或预防有效血浆水平至少1天的剂量。在某些实施方案中，化合物或组合物可以呈无菌水性药物组合物或干粉(例如冻干)组合物包括在其中。
5.6.化合物活性的评价
所述化合物的生物活性可以通过本领域技术人员已知的方法证实。例如，如Abraldes,J.el al.Animal models of portal hypertension.World J.Gastroenterology 2006；41:6577-6584.Geerts,A.et al.Comparison of three research models of portal hypertension in mice:macroscopic,histological and portal pressure evaluation.Int.J.Exp.Path.2008；89:251-263.和Guerra,R.et al.A novel chronic cirrhosis TAA-induced model in rats.Braz.J.Vet.Pathol.2010；3:9-16中所述，将其全文通过引用并入本文。
可以使用循环和组织中的多种测量结果进行评价。其中之一是测量血液中肝酶ALT的水平。在患有多种肝脏疾病的患者的血液中，通常观察到ALT水平升高。ALT测量是对于患者肝脏疾病程度的非常普遍且相关的临床实验测试。另一个测量包括肝脏疾病程度的的总评估和组织学评估。组织学通常在患有晚期肝脏疾病的患者中进行，以测量疾病的程度。肝脏疾病的程度可以通过由经训练的观察者检查为显微镜观察制备和评估的肝样品来分级。在一些实施方案中，肝损伤可以严重到足以导致死亡。在一些实施方案中，如通过这些参数所测定的，本文所述化合物对诱导的肝损伤有保护作用。
5.7.组合治疗
在一些实施方案中，本文提供的半胱天冬酶抑制剂与一种或多种已知治疗门静脉高压和/或肝硬化的试剂组合给药。在一些实施方案中，在本文提供的组合治疗中，使用低于已经或目前用于治疗门静脉高压和/或肝硬化的剂量。对于批准用于临床用途的那些药剂，推荐剂量描述在例如Hardman et al.,eds.,1996,Goodman&Gilman’s The Pharmacological Basis Of Basis Of Therapeutics 9th Ed,Mc-Graw-Hill,New York；Physician’s Desk Reference(PDR)57th Ed.,2003,Medical Economics Co.,Inc.,Montvale,NJ中，将其全文通过引用并入本文。给予的剂量将取决于药物的吸收、灭活和排泄速率以及本领域那些技术人员已知的其他因素。应当注意，剂量值也将随要缓解的病症的严重程度而变化。应当进一步理解，对于任何特定对象，具体剂量方案和日程表将随时间推移，根据个人需要和给药组合物或监督组合物给药的人员的专业判断来调节。
在多个实施方案中，给药本文提供的化合物间隔小于5分钟、间隔小于30分钟、间隔小于1小时、间隔为约1小时、间隔约1小时至约2小时、间隔约2小时至约3小时、间隔约3小时至约4小时、间隔约4小时至约5小时、间隔约5小时至约6小时、间隔约6小时至约7小时、间隔约7小时至约8小时、间隔约8小时至约9小时、间隔约9小时至约10小时、间隔约10小时至约11小时、间隔约11小时至约12小时、间隔约12小时至18小时、间隔18小时至24小时、间隔24小时至36小时、间隔36小时至48小时、间隔48小时至52小时、间隔52小时至60小时、间隔60小时至72小时、间隔72小时至84小时、间隔84小时至96小时、或间隔96小时至120小时。在一些实施方案中，在同一患者就诊期间给药两种或多种治疗。
在一些实施方案中，本文提供的化合物和任选地一种另外的试剂以这样的顺序且在这样的时间间隔内向患者例如哺乳动物，比如人类给药，使得本文提供的化合物可以与其他试剂一起作用以提供与如果以其他方式给药它们相比增加的益处。例如，所述化合物可以同时给药或以任何顺序在不同的时间点顺序给药；但是，如果没有同时给药，则为了提供期望的治疗或预防效果，它们应当被给药足够接近的时间。在一个实施方案中，本文提供的化合物和任选地另一种试剂在重叠的时间内发挥它们的作用。每种化合物可以以任何合适的形式和任何合适的途径分别给药。在其它实施方案中，本文提供的化合物在给药第一化合物之前、同时或之后给药。
本文提供的半胱天冬酶抑制剂化合物和任选地一种或多种另外的试剂可以累加或协同作用。在一个实施方案中，本文提供的半胱天冬酶抑制剂化合物可以与另一种试剂累加或协同作用。在一个实施方案中，本文提供的化合物任选地与另一种试剂同时给药与在同一药物组合物中给药。在另一个实施方案中，本文提供的化合物任选地与另一种试剂在不同的药物组合物中同时给药。在仍然另一个实施方案中，在给药第三试剂之前或之后施用，给药本文提供的化合物与另一种试剂。也预期通过相同或不同的给药途径，例如口服和肠胃外给药本文提供的化合物。
在一些实施方案中，根据本文提供的方法与半胱天冬酶抑制剂组合给药的另外的试剂可以包括在治疗患有门静脉高压的患者中目前使用的产品：普萘洛尔、纳多洛尔、卡维地洛及本领域技术人员了解的其类似物或衍生物。
在一些实施方案中，根据本文提供的方法与半胱天冬酶抑制剂组合给药的另外的试剂可以，但不限于目前在用于治疗门静脉高压和/或肝硬化的临床前或临床研究中的任何化合物∶Gilead的的司妥佐单抗(Simtuzumab)(GS-6624)、Bayer和Onyx的索拉非尼、Norvartis的Serelaxin(RLX030)、噻吗洛尔、NCX-1000、特利加压素(Terlipressin)、NGM282、LUM001和如本领域技术人员了解的其类似物或衍生物。
本文提供的化合物也可以与抗生素、抗病毒化合物、抗真菌剂或用于治疗感染给药的其它药物组合给药：利福昔明、新霉素、cefotaximine、环丙沙星、诺氟沙星、乳果糖及如本领域技术人员了解的其类似物或衍生物。
应当理解，前述详细描述和伴随的实施例仅仅是示例性的，并不能被看作是对主题范围的限制。对公开的实施方案的各种改变和修正，对本领域技术人员将是显而易见的。这样的改变和修饰，包括但不限于与本文的化学结构、取代基、衍生物、中间体、合成、制剂和/或使用方法相关的那些，可以在不背离本发明的精神和范围的情况下进行。将本文引用的美国专利和公布并入作为参考。
6.实施例
实施例1.
恩利卡生是如Linton S.et al.J.Med Chem.2005；48:6779中所述制备的。
部分A∶2-[N-(2-叔丁基苯基氨基)]-2-氧代乙酸甲酯
在氮气下，将2-叔丁基苯胺(57mL,54.5g,366mmol)、三乙胺(56mL,402mmol)和亚甲基氯(370mL)的溶液冷却至0℃(冰浴)，并搅拌。然后，给加料漏斗装入2-氯-2-氧代乙酸甲酯(50g，408mmol)，然后经20分钟滴加到所述搅拌溶液中，引起明显放热。在加入完成之后，搅拌得到的悬浮液1小时。然后，在真空下浓缩该悬浮液，接着收集在乙酸乙酯中，并用水分配。用乙酸乙酯洗涤水层两次，然后先用5％硫酸氢钾水溶液萃取合并的有机层，接着用饱和的氯化钠萃取，之后经硫酸镁干燥，并在减压下浓缩。然后，将得到的油状物干燥过夜，之后从3:1的己烷/甲苯(两轮，two crops)中重结晶，得到呈白色结晶固体的标题化合物(60.43g，70％)。
部分B∶N-(2-叔丁基苯基氨基)草氨酸
向2-[N-(2-叔丁基苯基氨基)]-2-氧代乙酸甲酯(59.8g,254mmol)在1,4-二噁烷(600mL)中的溶液中慢慢地加入1N氢氧化锂(300mL,300mmol)。搅拌该溶液1小时。然后，滴加浓HCl(12M,25.0mL,300mmol)酸化该溶液，并用乙酸乙酯萃取得到的溶液(3时间)，接着用饱和的氯化钠洗涤合并的有机萃取物，经硫酸镁干燥并在真空下浓缩，从乙酸乙酯/己烷重结晶，得到标题化合物(32.55g，58％)。
部份C∶[(N-苄氧基羰基)丙氨酸基]天门冬氨酸[β]-叔丁酯
在室温下，在氮气下，向天门冬氨酸b-叔丁酯(3.784g，20mmol)在二甲基甲酰胺(150mL)中的悬浮液中加入双(三甲基甲硅烷基)-三氟乙酰胺(10.6mL,40mmol)。在室温下，搅拌30分钟之后，用(N-苄基氧基羰基)丙氨酸N-羟基琥珀酰亚胺酯(6.406g，20mmol)处理得到的澄清溶液。在室温下搅拌18小时之后，用水(20mL)处理该混合物，搅拌15分钟，然后在乙酸乙酯&水之间分配。用水、5％硫酸氢钾和饱和的氯化钠溶液洗涤有机相，经无水硫酸钠干燥并蒸干。然后，将残余物收集在乙醚中，并用饱和的碳酸氢钠萃取。将水提取物用浓HCl酸化(pH 2.0)，并用乙酸乙酯萃取。用饱和的氯化钠溶液洗涤乙酸乙酯萃取物，经无水钠干燥。
部分D：(3S,4RS)-3-[(N-苄氧基羰基)丙氨酸基]氨基-5-溴-4-氧代戊酸叔丁基酯
部分D：(3S,4RS)-3-[(N-苄氧基羰基)丙氨酸基]氨基-5-溴-4-氧代戊酸叔丁基酯
在氮气下，在-10℃(NaCl/冰浴)下，滴加异丁基氯甲酸酯(2.6g,2.47mL,19.04mmol)处理[(N-苄氧基羰基)丙氨酸基]天门冬氨酸β-叔丁基酯(5.0g,12.7mmol)和N-甲基吗啉(2.05g,2.23mL,20.3mmol)在四氢呋喃(65mL)中的溶液。在-10℃下搅拌20分钟之后，将该混合物过滤(多孔玻璃)到预冷却的收集器(冰浴)中，用另外的四氢呋喃(约48mL)洗涤滤饼。在0℃下，在氮气下，用过量的重氮甲烷/乙醚溶液(由4.67g,31.73mmol的1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍，34mL的40％KOH/85ml乙醚)处理合并的滤液。在0℃下搅拌15分钟且在室温下搅拌30分钟之后，再次将该反应混合物冷却至0℃，并用在乙酸(34mL,204mmol)/乙酸(34mL)中的48％HBr处理。在0℃下搅拌15分钟且在室温下搅拌30分钟之后，将该混合物分配在乙酸乙酯&水之间。用水、饱和的碳酸氢钠和饱和的氯化钠连续洗涤有机相；经无水硫酸钠干燥并蒸干，并通过在硅胶上的快速色谱纯化，用乙酸乙酯-己烷(1:2)洗脱，得到呈白色泡沫状物的标题化合物(3.12g，52％)。
部分E∶(3S,4RS)-3-[(N-苄氧基羰基)丙氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸叔丁基酯
在室温下，在氮气下，向(3S)-3-[(N-苄氧基羰基)丙氨酸基]氨基-5-溴-4-氧代戊酸叔丁基酯(0.167g,0.355mmol)和2,3,5,6-四氟苯酚(0.071g,0.426mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中的溶液中加入氟化钾(0.082g,1.42mmol)。在室温下，搅拌4小时之后，用乙酸乙酯稀释该混合物，用饱和的碳酸氢钠和饱和的氯化钠溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥并蒸干。收集粗物质(0.144g)用于下一步而无需纯化。
部分F：(3S,4RS)-3-[(N-苄氧基羰基)丙氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-羟基戊酸叔丁基酯
在0℃下，在氮气下，向粗(3S)-3-[(N-苄氧基羰基)丙氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸叔丁基酯(0.144g,0.26mmol)在四氢呋喃(4mL)中的溶液中加入硼氢化钠(0.040g，1.04mmol)。在0℃下搅拌1小时之后，浓缩该混合物，并将残余物分配在乙酸乙酯-半饱和的氯化铵溶液(50％饱和的氯化铵/50％水)之间。将有机相用饱和的碳酸氢钠和饱和的氯化钠溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥，并蒸干。通过在硅胶上的快速色谱纯化残余物，用乙酸乙酯-己烷(1:2)洗脱，得到呈白色泡沫状物的标题化合物(0.142g，78％)。
部分G：(3S,4RS)-3-(丙氨酸基)氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸叔丁基酯
向(3S,4RS)-3-[(N-苄氧基羰基)缬氨酰基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-羟基戊酸叔丁基酯(0.112g,0.201mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中加入10％Pd-C(0.017g)，并在氢气氛(1气压，气球)下搅拌得到的混合物2小时。将该混合物过滤通过硅藻土，用甲醇洗涤滤饼。将合并的滤液蒸干，得到呈无色、粘性油状物的粗标题化合物(0.066g，70％)，收集其用于下一步而无需纯化。
部分H：(3S,4RS)-3-[N-(N'-(2-叔丁基苯基)草氨酰基)丙氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸叔丁基酯
在0℃下，在氮气下，向N-(2-叔丁基苯基)草氨酸(0.041g,0.19mmol)在亚甲基氯(6.0mL)中的溶液中加入羟基苯并三唑水合物(0.030g,0.261mmol)，接着加入1-乙基-3-(3',3'-二甲基-1'-氨基丙基)-碳二亚胺盐酸盐(EDCI)(0.050g,0.26mmol)。在0℃下搅拌10分钟之后，用(3S,4RS)-3-(丙氨酸基)氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-羟基戊酸叔丁基酯(0.079g,0.19mmol)和N-甲基吗啉(NMM)(22mL,0.20mmol)处理该混合物。在室温下，搅拌16小时之后，将该混合物分配在乙酸乙酯&水之间。用水、5％硫酸氢钾、饱和的碳酸氢钠和饱和的氯化钠溶液洗涤有机相，经无水硫酸钠干燥并蒸发，得到呈粘性油状物的粗标题化合物(0.090g,77％)。
部分I∶(3S)-3-[N-(N'-(2-叔丁基苯基)草氨酰基)丙氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'--四氟苯氧基)-4-氧代戊酸叔丁基酯
在室温下，在氮气下，向(3S,4RS)-3-[N-(N'-(2-叔丁基苯基)草氨酰基)丙氨酸基]氨基酸-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-羟基戊酸叔丁基酯(0.0.092g,约0.15mmol)在亚甲基氯(6.5mL)中的溶液中加入碘代苯双乙酸酯(0.188g，0.58mmol)，接着加入催化量的2,2,6,6-四甲基-1-哌啶基氧基自由基(TEMPO,0.0046g,0.03mmol)。在室温下搅拌16小时之后，将该混合物分配在乙酸乙酯&水之间。用饱和的碳酸氢钠和饱和的氯化钠溶液洗涤有机相，经无水硫酸钠干燥并蒸干。通过在硅胶上的制备层色谱纯化残余物(0.096g)，用乙酸乙酯-己烷(3:7)洗脱，得到呈无色玻璃状物的标题化合物(0.071g，77％)。
部分J∶(3S)-3-[N-(N'-(2-叔丁基苯基)草氨酰基)丙氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸
在室温下，在氮气下，向(3S)-3-[N-(N'-(2-叔丁基苯基)草氨酰基)丙氨酸基]氨基-5-(2',3',5',6'-四氟苯氧基)-4-氧代戊酸叔丁基酯(0.071g,0.11mmol)和苯甲醚(0.05mL)在亚甲基氯(2.5mL)中的溶液中加入三氟乙酸酯(1.5mL)。在室温下，搅拌得到的澄清溶液1小时，蒸干并用甲苯-亚甲基氯(1:1)洗涤纯化(chased)。通过在硅胶上的制备层色谱纯化残余物(0.061g)，用甲醇-亚甲基氯(1:9)洗脱，得到呈无色玻璃状物的标题化合物(0.044g，69％)。
上述实施方案仅仅是示例性的，本领域技术人员应当认识到或将仅使用常规实验就能确定特定化合物、材料和操作的许多等同物。所有这样的等同物都被认为是在本申请权利要求的范围之内，并且被附加权利要求书涵盖。