本发明涉及生物技术领域，具体地，本发明涉及一种双环醇的新用途。
背景技术：
异烟肼(inh)和利福平(rfp)仍是世界卫生组织推荐的、不可替代的一线用抗结核药，二者对于繁殖期和静止状态的细菌均有较强抑、杀菌作用，联合应用对杀灭细胞内外结核杆菌有协同效果并减少耐药性。但是，两药合用时肝脏毒性发生的几率却明显增加，不少患者由于肝功能损害被迫选用二线抗结核药或中断治疗，甚至发生急性肝脏衰竭危及生命。
双环醇(bicyclol)是治疗慢性病毒性肝炎的新药。临床治疗表明，双环醇可明显改善慢性乙肝和丙肝患者的临床症状和肝功能损伤。以往药理研究显示，双环醇对多种化学毒物如四氯化碳、乙醇等所致肝损伤均有明显的保护作用。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是提供了一种双环醇的新用途。
本发明提供了一种双环醇的新用途，其特征在于：双环醇用于制备缓解异烟肼或利福平引起的肝损伤的药物的用途。
本发明提供了一种双环醇的新用途，其特征在于：所述双环醇包括双环醇的羧酸酯或糖苷化合物。
本发明提供了一种双环醇的新用途，其特征在于：所述双环醇与异烟肼和利福平制备成药用组合物，其重量份数为：双环醇1～4份，异烟肼2.5～10份，利福平2～4份。
进一步的，本发明提供了一种双环醇的新用途，其特征在于：双环醇1～2份，异烟肼2.5～10份，利福平2～4份。
更进一步的，本发明提供了一种双环醇的新用途，其特征在于：双环醇1份，异烟肼2.5～5份，利福平2份。
本发明提供了一种双环醇的新用途，其特征在于：所述双环醇或药用组合物是片剂、胶囊或滴丸形式的口服制剂。
具体实施方式
实施例1试液配置
1、dmem培养基的配制
将1l剂量的dmem培养基粉末倒入一个洁净的1l锥形瓶中，加入950ml超纯水，置于磁力搅拌器上搅拌，直至培养基粉末全部溶解后，加入3.7g碳酸氢钠，继续搅拌半小时，调节ph至7.0～7.2，0.22μm滤膜过滤除菌后4℃保存。
2、磷酸缓冲液(pbs)的配制
称取nacl8g、kcl0.2g、na2hpo41.44g、kh2po40.24g，调ph7.4，定容1l，高压蒸汽灭菌后4℃保存。
3、mtt溶液(5mg/ml)的配制
称取mtt0.5克，溶于100ml的磷酸缓冲液(pbs)中，用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌，分装于1.5mlep管，每管1ml，锡箔纸包裹管子外壁，置于-20℃避光保存。
4、异烟肼母液(500mm)的配制
称取异烟肼粉末685mg，溶解于10ml超纯水中，涡旋振荡混匀，待药物全部溶解后，0.22μm滤膜过滤除菌后，分装于1.5mlep管，每管1ml，做好标记，冻存于-20度冰箱。
5、利福平母液(100mm)的配制
称取利福平粉末822mg，溶解于10mldmso中，涡旋振荡混匀，待药物全部溶解后，0.22μm滤膜过滤除菌后，分装于1.5mlep管，每管1ml，做好标记，冻存于-20度冰箱。
6、双环醇母液(1m)的配制
称取双环醇粉末3.9g，溶解于10mldmso中，涡旋振荡混匀，待药物全部溶解后，0.22μm滤膜过滤除菌后，分装于1.5mlep管，每管1ml，做好标记，冻存于-20度冰箱。
实施例2细胞培养
1、实验前准备
a)预热培养用液：细胞培养操作前半小时，将培养基、胰酶、pbs溶液等置于37℃水浴锅内预热。
b)超净工作台：超净台经紫外线照射半小时后，关掉紫外灯，打开抽风机清洁空气，除去臭氧；合理摆放各种器械，保证足够的操作空间，便于操作；用75％酒精擦拭的超净工作台和双手，减少污染。
c)取出已经预热好的培养用液，用酒精棉球擦拭后放入超净台内。
2、细胞复苏
a)取一洁净500ml烧杯，加入约1/2体积的超纯水，微波炉中加热至37℃～42℃。
b)从液氮罐中取出changliver细胞，立即置于烧杯中液面下，并迅速晃动冻存管，迅速解冻，直至解冻完全。
c)将冻存管置于离心机中，800g离心2min。
d)超净工作台中，用75％酒精清洁冻存管管口，打开，吸弃冻存液，向冻存管中加入1ml含10％fbs的dmem培养基，轻轻吹起细胞沉淀，转移全部细胞悬液至干净无菌的100mm直径的培养皿中，补加9ml含10％fbs的dmem培养基，左右轻轻晃动器皿，镜下观察，确保细胞均匀分布于器皿底部。
e)细胞复苏6h，显微镜下观察细胞贴壁率及活率，如果死细胞较多，弃掉培养基更换为新鲜含10％fbs的dmem培养基。
3、传代培养
a)点燃酒精灯，医用酒精擦拭台面，保持工作区域的无菌环境，从培养箱中取出待传代细胞，吸弃培养基；
b)用1mlpbs缓冲液涮洗一下培养皿，除去残留血清，避免血清抑制胰酶消化作用；
c)加入1ml0.25％胰酶，轻轻晃动器皿底部，确保胰酶覆盖所有细胞，镜检确定消化时间，当细胞收缩变圆时，弃掉胰酶；
d)加入3ml含10％fbs的dmem培养基，反复轻轻吹打，直到细胞悬浮分散；将细胞悬液吸入10ml离心管中；
e)将离心管放入台式离心机中，以800g/min离心2分钟；
f)吸弃上清液，加入3ml新鲜培养基，用滴管轻轻吹打细胞，制成细胞悬液。
g)细胞计数及分装稀释。细胞悬液吹匀后，取出10μl进行计数，计数完成后确定细胞稀释倍数；将细胞悬液吸出分装至100mm直径的培养皿中，补足培养基至10ml，摇晃培养瓶使细胞尽可能均匀地分布于底部，放入co2培养箱(37℃，5％co2)中继续培养。
实施例3mtt实验流程
1、细胞培养及铺板
a)根据实施例2的细胞复苏及传代方法培养changliver细胞至对数生长期。
b)细胞铺板
从二氧化碳孵箱中取出处于对数生长期的changliver细胞，0.25％胰酶消化收集细胞沉淀，用3ml完全dmem培养基重悬，细胞计数，稀释细胞至浓度为5×104cell/ml，将稀释后的细胞悬液以0.1ml/well种入96孔板中心的60个孔中，即5000cells/well，周围一圈36个孔，每孔加入200μlpbs缓冲液。将铺好细胞的96孔板置于二氧化碳培养箱中孵育过夜。
2、细胞荷药
取出接种了changliver细胞的96孔板，弃掉孔内培养基，对照组加入200μl新鲜完全培养基，实验组加入200μl配置好的含药培养基，每个处理组6个复孔，做好标记，置于二氧化碳孵箱中孵育及培养48h。
3、mtt处理
在荷药48h之后，弃掉细胞培养基，更换新鲜的培养基，每孔90ul，然后每孔加入10ulmtt(5mg/ml)，置于培养基中孵育4h。
4、dmso处理
孵育4h后，弃掉培养基，每孔加入100uldmso，摇床上低速摇晃10min。
5、上机检测
用酶标仪在570nm(490nm)波长下测定各孔吸光度值。
6、结果分析
去掉每个处理6个复孔中最高值和最低值，取剩下4孔od值的平均值，计算处理组两种药物单独作用时不同浓度对changliver细胞增殖的抑制率。
存活率＝(实验孔od490/对照孔od490)×100％，(od值取平均值)
抑制率(或增值率)＝100％-存活率
以存活率(y轴)与药物浓度(x轴)绘图，并计算两种药物的半数抑制浓度(ic50)值。
实施例4异烟肼或利福平荷药实验
mtt实验流程如实施例3所示。
含药培养基的配置：
a)异烟肼含药培养基：取出一支500mm异烟肼母液，解冻后稀释至以下浓度梯度：
1mm(10μl母液+5ml完全培养基)、500μm(5μl母液+5ml完全培养基)、250μm(5μl母液+10ml完全培养基)、100μm(1ml500μm异烟肼药物稀释液+4ml完全培养基)、50μm(1ml500μm异烟肼药物稀释液+9ml完全培养基)。
b)利福平含药培养基：取出一支100mm异烟肼母液，解冻后稀释至以下浓度梯度：
200μm(10μl母液+5ml完全培养基)、100μm(5μl母液+5ml完全培养基)、50μm(5μl母液+10ml完全培养基)、10μm(1ml100μm药物稀释液+9ml完全培养基)、1μm(1ml10μm异烟肼药物稀释液+9ml完全培养基)。
实验结果：
实施例5异烟肼和利福平共同荷药实验
mtt实验流程如实施例3所示。
含药培养基的配置：
a)50μm利福平+250μm异烟肼：5μl利福平母液(100mm)+5μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
b)100μm利福平+250μm异烟肼：10μl利福平母液(100mm)+5μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
c)200μm利福平+250μm异烟肼：20μl利福平母液(100mm)+5μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
d)50μm利福平+500μm异烟肼：5μl利福平母液(100mm)+10μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
e)100μm利福平+500μm异烟肼：10μl利福平母液(100mm)+10μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
f)200μm利福平+500μm异烟肼：20μl利福平母液(100mm)+10μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
g)50μm利福平+1000μm异烟肼：5μl利福平母液(100mm)+20μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
h)100μm利福平+1000μm异烟肼：10μl利福平母液(100mm)+20μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
i)200μm利福平+1000μm异烟肼：20μl利福平母液(100mm)+20μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
实验结果：
实施例6异烟肼、利福平和双环醇共同荷药实验
mtt实验流程如实施例3所示。
含药培养基的配置：
a)50μm双环醇+50μm利福平+250μm异烟肼：5μl双环醇溶液(100mm)+5μl利福平母液(100mm)+5μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
b)50μm双环醇+100μm利福平+250μm异烟肼：5μl双环醇溶液(100mm)+10μl利福平母液(100mm)+5μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
c)50μm双环醇+200μm利福平+250μm异烟肼：5μl双环醇溶液(100mm)+20μl利福平母液(100mm)+5μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
d)50μm双环醇50μm利福平+500μm异烟肼：5μl双环醇溶液(100mm)+5μl利福平母液(100mm)+10μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
e)50μm双环醇+100μm利福平+500μm异烟肼：5μl双环醇溶液(100mm)+10μl利福平母液(100mm)+10μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
f)50μm双环醇+200μm利福平+500μm异烟肼：5μl双环醇溶液(100mm)+20μl利福平母液(100mm)+10μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
g)50μm双环醇+50μm利福平+1000μm异烟肼：5μl双环醇溶液(100mm)+5μl利福平母液(100mm)+20μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
h)50μm双环醇+100μm利福平+1000μm异烟肼：5μl双环醇溶液(100mm)+10μl利福平母液(100mm)+20μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
i)50μm双环醇+200μm利福平+1000μm异烟肼：5μl双环醇溶液(100mm)+20μl利福平母液(100mm)+20μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
j)100μm双环醇+50μm利福平+250μm异烟肼：10μl双环醇溶液(100mm)+5μl利福平母液(100mm)+5μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
k)100μm双环醇+100μm利福平+250μm异烟肼：10μl双环醇溶液(100mm)+10μl利福平母液(100mm)+5μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
l)100μm双环醇+200μm利福平+250μm异烟肼：10μl双环醇溶液(100mm)+20μl利福平母液(100mm)+5μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
m)100μm双环醇50μm利福平+500μm异烟肼：10μl双环醇溶液(100mm)+5μl利福平母液(100mm)+10μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
n)100μm双环醇+100μm利福平+500μm异烟肼：10μl双环醇溶液(100mm)+10μl利福平母液(100mm)+10μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
o)100μm双环醇+200μm利福平+500μm异烟肼：10μl双环醇溶液(100mm)+20μl利福平母液(100mm)+10μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
p)100μm双环醇+50μm利福平+1000μm异烟肼：10μl双环醇溶液(100mm)+5μl利福平母液(100mm)+20μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
q)100μm双环醇+100μm利福平+1000μm异烟肼：10μl双环醇溶液(100mm)+10μl利福平母液(100mm)+20μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
r)100μm双环醇+200μm利福平+1000μm异烟肼：10μl双环醇溶液(100mm)+20μl利福平母液(100mm)+20μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
s)200μm双环醇+50μm利福平+250μm异烟肼：20μl双环醇溶液(100mm)+5μl利福平母液(100mm)+5μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
t)200μm双环醇+100μm利福平+250μm异烟肼：20μl双环醇溶液(100mm)+10μl利福平母液(100mm)+5μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
u)200μm双环醇+200μm利福平+250μm异烟肼：20μl双环醇溶液(100mm)+20μl利福平母液(100mm)+5μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
v)200μm双环醇50μm利福平+500μm异烟肼：20μl双环醇溶液(100mm)+5μl利福平母液(100mm)+10μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
w)200μm双环醇+100μm利福平+500μm异烟肼：20μl双环醇溶液(100mm)+10μl利福平母液(100mm)+10μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
x)200μm双环醇+200μm利福平+500μm异烟肼：20μl双环醇溶液(100mm)+20μl利福平母液(100mm)+10μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
y)200μm双环醇+50μm利福平+1000μm异烟肼：20μl双环醇溶液(100mm)+5μl利福平母液(100mm)+20μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
z)200μm双环醇+100μm利福平+1000μm异烟肼：20μl双环醇溶液(100mm)+10μl利福平母液(100mm)+20μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
a)200μm双环醇+200μm利福平+1000μm异烟肼：20μl双环醇溶液(100mm)+20μl利福平母液(100mm)+20μl异烟肼母液(500mm)+10ml10％fbsdmem培养基
实验结果：
50μm双环醇组：
100μm双环醇组：
200μm双环醇组：