本发明涉及一种芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒的制备工艺体的方法及其用途。
技术背景
芍药苷是中药赤芍和白芍的主要药效成分，具有抗炎、镇痛、安神等生物活性，以芍药苷为主要有效成分的中药新药白芍总苷是临床上第一个用于治疗类风湿性关节炎的抗炎免疫调节药，其治疗R A疗效肯定、不良反应少，但起效较慢。由于芍药苷亲水性较强，亲脂性较弱，跨膜吸收能力较弱，导致芍药苷在小肠吸收困难，生物利用度低，仅为3％-4％。芍药苷口服吸收差，不但浪费了大量的药物资源，同时增加了病人药物的服用量，普通制剂难以通过口服给药途径在体内发挥其良好的生物活性。
纳米给药系统是指药物与载体材料采用纳米技术制成的1-1000nm的药物输送系统。常用的纳米制剂颗粒粒径大小多在10-1000nm之间。作为口服药物输送系统纳米粒可通过小肠的pcycr’s结而进入循环系统，粒径小的纳米载体还可穿过肠系膜的细胞间通路进入循环；同时由于纳米粒高度的分散性和巨大的表面积，能增加难溶性药物的溶解度和溶出速度，也能增加与胃肠道壁的接触，从而增加吸收的机会，更能被十二指肠的微毛所捕获并滞留较长时间，进一步延长药物与细胞壁接触时间，提高药物的吸收速率和吸收率，提高药物的生物利用度。因此，采用现代药剂学手段设计合理的药物纳米口服传输系统，是解决难溶性药物低口服生物利用度问题的一种有效途径。小麦醇溶蛋白是从小麦贮存蛋白中以乙醇提取的分子量在25-100kD的一组蛋白质。其主要氨基酸组成约40％的谷氨酸和14％的脯氨酸，其疏水和亲水两性性质使其能够产生具有脂质体囊泡形态特征的空心球体，为包裹药物提供了重要的前提条件。是新型给药系统的药物载体，具有纯天然，无毒易得，稳定性好的特点。
本发明利用小麦醇溶蛋白良好的纳米载体的特点，针对芍药苷生物利用度低，难以吸收的缺点，制成芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒，增加了芍药苷体内的吸收，为芍药苷新药的研究和制造提供了新的方法。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒的制备工艺体的方法及其用途。
它是称取面筋粉，加3-10倍体积百分比石油醚脱脂两次，脱脂面筋加入5-10倍量30％-90％乙醇，超声提取2-4h，离心，上清液浓缩，浓缩液水透析至无酸味，透析物冷冻干燥，即得小麦醇溶蛋白；称取处方量的小麦醇溶蛋白∶芍药苷(比例：85-95∶5-15)。加入适量50％-90％乙醇，超声使完全溶解。机械搅拌条件下，将所得的乙醇混合物溶液注入到2-5倍体积的0.1％-1％普朗尼克F68或PVA-0486水溶液中，搅拌5-30min，再加入1-5％海藻糖，搅拌5-30min，冷冻干燥，即得芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒。芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒可以单独或与其他药物配合制成相应的口服制剂，能够增加芍药苷吸收，提高其生物利用度。
所述的制备纳米粒的物料，优选小麦醇溶蛋白∶芍药苷的比例为85-95∶5-15；水相分散剂选用0.1％-1％普朗尼克F68或PVA-0486水溶液；芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒支架剂选用1-5％海藻糖。
本发明采用的原材料属于纯天然面粉材料，取材容易，成本低；生产工艺简单、可行。由该方法制备的芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒。通过该方法制备的芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒可以单独或与其他药物配合制成相应的口服制剂，能够增加芍药苷吸收，提高其生物利用度，为开发芍药苷药物的新的原料。
具体实施方式
称取面筋粉，加3-10倍体积百分比石油醚脱脂两次，脱脂面筋加入5-10倍量30％-90％乙醇，超声提取2-4h，离心，上清液浓缩至无醇味，浓缩液进行水透析24小时，至无酸味，透析物先-20℃预冻24小时，再冷冻干燥24小时，即得小麦醇溶蛋白；称取处方量的小麦醇溶蛋白∶芍药苷(比例：85-95∶5-15)。加入2倍体积百分比的50％-90％乙醇，超声使完全溶解。机械搅拌条件下，将所得的乙醇混合物溶液注入到2-5倍体积的0.1％-1％普朗尼克F68或PVA-0486水溶液中，搅拌5-30min，再加入1-5％海藻糖，搅拌5-30min，20℃预冻24小时，再冷冻干燥24小时，即得芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒。芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒可以单独或与其他药物配合制成相应的口服制剂，能够增加芍药苷吸收，提高其生物利用度。
所述的制备纳米粒的物料，优选小麦醇溶蛋白∶芍药苷的比例为85-95∶5-15；水相分散剂选用0.1％-1.0％普朗尼克F68或PVA-0486水溶液；芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒支架剂选用1-5％海藻糖。
采用优化工艺制备载药小麦醇溶蛋白纳米粒的粒径范围为150-250nm，芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒包封率不低于70％，载药量4.0-6.0％。
实施例1：
称取面筋粉，加5倍体积百分比石油醚脱脂2次，脱脂面筋加入8倍量65％乙醇，超声提取2h，离心，上清液浓缩至无醇味，浓缩液进行水透析24小时，至无酸味，透析物先-20℃预冻24小时，再冷冻干燥24小时，即得小麦醇溶蛋白；称取处方量的小麦醇溶蛋白∶芍药苷(90∶10)。加入2倍体积百分比的65％乙醇，超声使完全溶解。机械搅拌条件下，将所得的乙醇混合物溶液注入到3倍体积的0.3％PVA-0486水溶液中，搅拌15min，再加入2％海藻糖，搅拌20min，20℃预冻24小时，再冷冻干燥24小时，得芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒。该芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒的粒径范围为200nm，芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒包封率73％，载药量4.6％。
实验例2：
称取面筋粉，加6倍体积百分比石油醚脱脂2次，脱脂面筋加入7倍量80％乙醇，超声提取3h，离心，上清液浓缩至无醇味，浓缩液进行水透析24小时，至无酸味，透析物先-20℃预冻24小时，再冷冻干燥24小时，即得小麦醇溶蛋白；称取处方量的小麦醇溶蛋白∶芍药苷(85∶15)。加入2倍体积百分比的85％乙醇，超声使完全溶解。机械搅拌条件下，将所得的乙醇混合物溶液注入到4倍体积的0.5％普朗尼克F68水溶液中，搅拌10min，再加入4％海藻糖，搅拌10min，20℃预冻24小时，再冷冻干燥24小时，得芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒。该芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒的粒径范围为180nm，芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒包封率83％，载药量6.1％。
实施例3
称取面筋粉，加9倍体积百分比石油醚脱脂两次，脱脂面筋加入6倍量40％乙醇，超声提取2h，离心，上清液浓缩至无醇味，浓缩液进行水透析24小时，至无酸味，透析物先-20℃预冻24小时，再冷冻干燥24小时，即得小麦醇溶蛋白；称取处方量的小麦醇溶蛋白∶芍药苷(比例：93∶7)。加入2倍体积百分比的50％乙醇，超声使完全溶解。机械搅拌条件下，将所得的乙醇混合物溶液注入到2倍体积的0.2％普朗尼克F68水溶液中，搅拌5min，再加入2％海藻糖，搅拌5min，20℃预冻24小时，再冷冻干燥24小时，得芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒。该芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒的粒径范围为220nm，芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒包封率87％，载药量4.3％。
所制备的芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒药剂学性质
1、芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒的形态观察
取芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒胶体分散液，滴加在覆盖碳膜的铜网上，用2％磷钨酸钠负染液染色，拍摄透射电镜照片，制备的芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒样品为大小均一，近球形粒子。
2、芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒体外释药试验
采用动态透析技术进行芍药苷小麦醇溶蛋白纳米粒的体外释药规律的研究，芍药苷以小麦醇溶蛋白纳米粒为载体，在胃液中的释放速度快于在人工肠液中的释放。在胃液、肠液和生理盐水三种释放介质中均以weibull方程拟合优度最高。