具有延缓衰老和美容养颜功能的组合物及其应用的制作方法

文档序号:12323038阅读:582来源:国知局

本发明属于生物医药领域,具体涉及一种具有延缓衰老和美容养颜功能的组合物及其应用。



背景技术:

2014年年底,中国的老年人口数量达到2.12亿人,成为世界上第一个老年人口破2亿的国家,人口老龄化问题日渐严重。随着我国的工业化进程加快,不良的生活方式以及环境污染等问题,人体的健康受到威胁,专家指出,我国的亚健康人群约占70%,伴随而来的问题就是适应力减弱,免疫水平低下,皮肤健康问题日益显著。因此,寻求抗衰老、增强机体免疫力的活性物质,对过多的老龄化人口以及人类的健康具有非常重要的作用。

衰老是生命过程的必然规律,可分两大类:一是生理性衰老,指人体达到成熟后所出现的生理退化现象;二是病理性衰老,即在生理变化的基础上,因患某些疾病或受外界因素的影响,而加速衰老的过程。现代研究较多的是衰老的自由基学说和免疫学说,生物体的衰老过程是机体的组织细胞不断产生的自由基积累结果,自由基可以引起DNA损伤从而导致突变,诱发肿瘤形成。自由基是正常代谢的中间产物,其反应能力很强,可使细胞中的多种物质发生氧化,损害生物膜。还能够使蛋白质、核酸等大分子交联,影响其正常功能。衰老的免疫学说可以分为两种观点:第一,免疫功能的衰老是造成机体衰老的原因;第二,自身免疫学说,认为与自身抗体有关的自身免疫在导致衰老的过程中起着决定性的作用。衰老并非是细胞死亡和脱落的被动过程,而是最为积极地自身破坏过程。

近年来研究表明,益生菌具有潜在的抗衰老作用。益生菌可以通过调节宿主免疫系统而起到一定的抗衰老作用,包括肠道黏膜免疫系统、体液免疫系统及细胞免疫系统。在衰老过程中机体的氧化应激明显增强,氧化应激不仅会造成大分子物质如蛋白质、核酸等氧化损伤,还会对免疫系统产生有害的影响;益生菌的抗氧化作用可能有利于维持机体免疫系统的平衡,提高免疫调控能力从而延长寿命。从免疫学角度看,益生菌在宿主体内定殖,通过产生的代谢产物或菌体本身来调节机体的免疫系统,表现为刺激淋巴细胞增殖,激活细胞的吞噬活性等。免疫功能的改善可以减少衰老疾病的发生率,从而起到一定的延长寿命的效果。从抗氧化的角度看,益生菌的抗衰老作用可能是通过诱导SOD、GSH-Px等具有抗衰老功能的活性酶的合成,使衰老特征产物如MDA、LPO的含量降低,从而提高机体的抗氧化能力,抑制机体、组织、细胞的过氧化过程而起到延缓衰老的作用。益生元的添加有利于人体肠道内有益菌的生长,同时抑制有害菌的繁殖,从而达到调节肠道菌群平衡的功效,间接的促进益生菌的抗氧化及增强免疫力的功能。

2010年,Takashi Kuda等人对日本传统发酵食品中分离的菌株Lactobacillus plantarum(植物乳杆菌)的抗氧化能力进行了研究,发现其可有效清除氧自由基。孟和毕力格等研究了酸马奶中L.acidophilusMG2-1的抗氧化作用,发现活菌制剂灌服大鼠至28d后能够使大鼠肝脏组织匀浆中SOD活力和GSH-Px活力均明显提高,并显著地降低大鼠血液和肝脏组织匀浆中MDA含量。许多研究表明益生菌在清除体内自由基、提高SOD活力以及降低MDA含量方面发挥重要作用。

中医衰老学说和现代衰老理论,分别从不同的角度对衰老理论进行研究。《素问·上古天真论》就详细论述了女子以七、男子以八为基数递进的生长、发育、衰老的肾气盛衰曲线,明确指出机体的生、长、壮、老、已,受肾中精气的调节,总结衰老的内因是“肾”起主导作用。现代衰老理论自由基学说,免疫衰弱学说,以及脂褐质积累学说等,其抗衰老的本质主要表现为:调节神经系统功能、促进免疫力、修复DNA、调节内分泌功能、清除自由基、促进物质代谢等方面,从分子水平对衰老机制进行了阐述。利用现代科技提取中药的有效成分,如黄酮类化合物、多糖、苷类、萜内酯类、香豆素、挥发油及生物碱等,经过分离、纯化,进行动物实验,结果表明,药物的有效成分在动物寿命实验、免疫功能实验、抗氧化、抗动脉粥样硬化以及血流变有效降低体内过氧化脂质等方面具有良好的抗衰老的作用。

目前市场上延缓衰老的主要产品为单一的益生菌粉或黄酮类提取物如大豆异黄酮等,或人类自的自体物质如维生素类、氨基酸等,较少有益生菌粉和中药提取物复合的产品,本发明的目的在于提供一种具有延缓衰老美容养颜功能的益生菌组合物,能加和单独的益生菌或中药提取物的抗氧化功能,从而达到延缓衰老养颜美容的效果。



技术实现要素:

有鉴于此,本发明的目的在于提供一种具有延缓衰老和美容养颜功能的组合物。该组合物安全有效,能够有效增强人体免疫力,提高机体的抗氧化能力,从而达到延缓衰老美容养颜的效果。

为实现上述目的,本发明的技术方案为:

具有延缓衰老和美容养颜功能的组合物,由益生菌与具有延缓衰老和美容养颜功能的药食同源中药协同组合而成;所述益生菌由植物乳杆菌BL-WHSYM9、植物乳杆菌BLCC2-0015和植物乳杆菌BLCC2-0126组成。

植物乳杆菌BL-WHSYM9,是一种嗜甘草的植物乳杆菌,所述嗜甘草的植物乳杆菌是在乳杆菌发酵甘草过程中获得的,其在以甘草为唯一营养成分的培养基环境中能够旺盛繁殖,该菌株命名为Lactobacillus plantarum BL-WHSYM9,WHSYM9,已于2013年09月26日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为:CCTCC NO:M 2013449。

植物乳杆菌BLCC2-0015,是一株具高抗氧化活性的植物乳杆菌,该乳酸菌命名为植物乳杆菌BLCC2-0015(Lactobacillus plantarumBLCC2-0015),保藏编号为CCTCC NO:M2015126,保藏日期为2015年3月18日,保藏于中国典型培养物保藏中心。该植物乳杆菌具高抗氧化活性,还可以具有良好的耐酸耐胆盐特性,将该乳酸菌制备成菌粉后制成机体抗氧化食品或保健品,直接食用或冲服饮用,使用方便,可增强机体免疫力。

植物乳杆菌BLCC2-0126,保藏编号CCTCC NO:M2015128是一株具有吸附或降解肠毒素功能的乳酸菌,所述乳酸菌具有吸附或降解肠毒素功能,且有较好的耐酸、耐胆盐及耐人工胃液、肠液效果。具体体现在:可吸附或降解肠毒素,具有较好的清除肠毒素能力;能够抑制常见病原菌的生长;能够耐酸、耐胆盐可在消化道内存活。不仅具高清肠毒素能力,还具有良好的性能,可用于人体保健。保藏编号CCTCC NO:M2015128,保藏日期为2015年3月18日,保藏于中国典型培养物保藏中心。

进一步,所述组合物还包括益生元、麦芽糊精和辅料填充物。

作为一种优选,所述辅料填充物包括柠檬酸、果粉、糖醇等。

进一步,所述组合物按质量百分比计,包括以下组分:益生菌2-10%、药食同源中药提取物20-30%、益生元50-60%、麦芽糊精和辅料填充物5-10%。

作为一种优选,所述组合物按质量百分比计,包括以下组分:益生菌5%、药食同源中药提取物30%、益生元55%、麦芽糊精和辅料填充物10%。

进一步,其特征在于,所述益生菌的含量为8.0×109-4.0×1010cfu/g。

作为一种优选,所述益生菌的含量为8.0×109cfu/g。

进一步,其特征在于,所述植物乳杆菌BL-WHSYM9、植物乳杆菌BLCC2-0015和植物乳杆菌BLCC2-0126的质量比为1:1:1。

作为一种优选,所述益生菌为益生菌的冻干粉。

所述益生菌的冻干粉的具体的制备方法包括以下步骤:

1)按上述重量份分别将三株植物乳杆菌经培养基活化后,接种于发酵培养液中,37℃恒温静置培养,使菌体浓度达到对数生长期4.0×109-8.0×109cfu/ml;

2)将步骤1)中各种发酵液分别离心,弃上清,得到菌泥;

3)配制冻干保护剂;

4)将菌泥和冻干保护剂混合均匀,将混合物预冻,再真空冷冻干燥,制成具有包埋层的活性益生菌组合物的冻干粉。

进一步,所述药食同源中药由沙棘、枸杞、山药、桂圆和红枣组成。

近年来关于中药的有效成分如黄酮类、多糖、皂苷类、萜内酯类等在机体抗衰老、抗氧化方面的研究越来越多。本发明中中药提取物的各组分主要有效成分为多糖,有研究表明,具有生物活性的天然产物多糖类物质,有清除氧自由基的作用。当体内氧自由基积累过多时,将对人体造成毒害,导致癌变、衰老、炎症、免疫功能紊乱等疾病。

本发明的中药提取物其中组分之一枸杞含有大量的枸杞多糖(LBP),给一定浓度范围的LBP,能剂量依赖性地增加细胞的增殖活性,增加细胞内SOD活性、减少MDA含量;同时LBP能有效清除DPPH自由基,降低蛋白质氧化损伤而发挥抗衰老的作用。沙棘中含有维生素类、糖类、氨基酸类、不饱和脂肪酸、多酚类、黄酮类、SOD、5-羟色胺以及各种微量元素等,具有抗氧化、抗衰老、提高免疫等多种作用。茯苓多糖能不同程度增加血清中T-SOD和Cu-SOD活性,降低MDA含量,茯苓多糖具有较好的抗衰老作用。覆盆子中的有效成分如黄酮类、苷类及其糖蛋白均具有很好的抗氧化能力,能够很好的的清除DPPH和ABTS,具有很好的还原能力。山药具有补脾养胃、生津益肺、补肾涩精之功效;玫瑰花能够行气解郁、和血止痛;桂圆具有补益心脾、养血安神之功效;红枣补中益气、养血安神,各种中药均能发挥其作用,且中药提取物的制备是已有技术,各个成分均能在本发明中实施应用并能发挥有益作用,综合评价,该中药提取物的各有效成分具有较好的延缓衰老养颜美容的功效。

进一步,所述药食同源中药按重量份计,由以下组分组成:沙棘3-9份,枸杞6-12份,山药15-30份,桂圆9-15份,红枣6-15份。

进一步,所述益生元包括低聚异麦芽糖、低聚果糖和低聚木糖;所述低聚异麦芽糖、低聚果糖和低聚木糖的质量比为5:3:1。

所述药食同源中药提取物制备方法包括以下步骤:

取上述重量份的沙棘,枸杞,山药,桂圆,红枣置于10倍水中浸泡30-60min,煎煮,水开后继续煎煮20-40min,过滤得到第一滤液;药渣用8倍水进行二次煎煮,水开后继续煎煮20-40min,过滤得到第二滤液与第一滤液混合均匀,通过真空减压旋转蒸发仪浓缩中药液,至固形物含量为30%以上,进喷雾干燥器,进风温度控制140℃,出风温度90℃,雾化器转速45转/分钟,进料速度为5ml/分钟,得喷雾干燥粉,粉碎,过100目以上筛子即得药食同源中药提取物。

本发明的具有延缓衰老和美容养颜功能的组合物的制备方法包括选料、过筛、配料、混合,具体包括以下步骤:

将制备好的益生菌的冻干粉和药食同源中药提取物分别过100目以上筛子,并称量备用;所述各组分的质量百分比为益生菌干粉2-10%(8.0×109-4.0×1010cfu/g),中药提取物20-30%,益生元50-60%,麦芽糊精、柠檬酸、果粉、糖醇等辅料填充物5-10%。将以上各物质在混合机中充分混匀至色泽均匀,无色差,即得到具有延缓衰老和美容养颜功能的组合物。

本发明的目的之二在于提供一种所述的具有延缓衰老和美容养颜功能的组合物在制备延缓衰老和美容养颜产品中的应用。

本发明的目的还在于提供一种具有延缓衰老和美容养颜功能的益生菌组合物,所述益生菌组合物由植物乳杆菌BL-WHSYM9、植物乳杆菌BLCC2-0015和植物乳杆菌BLCC2-0126组成。所述益生菌组合物能应用在制备延缓衰老和美容养颜产品中。

根据上述提到的植物乳杆菌BL-WHSYM9、植物乳杆菌BLCC2-0015和植物乳杆菌BLCC2-0126的特点和活性,也能以单独益生菌组合物作用实现延缓衰老和美容养颜的功能。

作为一优选,所述益生菌组合物的益生菌总数量为8.0×109-4.0×1010cfu/g。

作为一优选,所述植物乳杆菌BL-WHSYM9、植物乳杆菌BLCC2-0015和植物乳杆菌BLCC2-0126的质量比为1:1:1。

所述延缓衰老和美容养颜产品包括食品和保健品,具体可制成粉剂、片剂、胶囊剂、颗粒、冲剂等。

本发明的有益效果在于:

1)本发明提供的本发明所提供的具有延缓衰老和美容养颜功能的组合物其优势在于益生菌和中药提取物科学复配,按照重量科学配比而成,安全有效,较目前市场现有的产品单纯的益生菌产品或单纯的中药产品有更加明显的效果。

2)该组合物制备工艺简单,中药中的各个有效成分损失较少,安全性高,保证了产品批次之间的稳定性。

3)益生菌和中药提取物完美结合,中药提取物具有明显的增菌作用,益生菌能够将中药提取物更好的分解成小分子物质,有利于肠道的吸收,中药和益生菌合理配伍,经试验验证,效果优于任何一种单一的原料,各种有效成分协同作用。

具体实施方式

以下将对本发明的优选实施例进行详细描述。优选实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件,所举实施例是为了更好地对本发明的内容进行说明,但并不是本发明的内容仅限于所举实施例。所以熟悉本领域的技术人员根据上述发明内容对实施方案进行非本质的改进和调整,和任何未背离本发明的精神实质与原理下所做的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式仍属于本发明的保护范围。

实施例1益生菌的冻干粉的制备

1)分别将三株植物乳杆菌经培养基活化后,接种于发酵培养液中,37℃恒温静置培养,使菌体浓度达到对数生长期4.0×109-8.0×109cfu/ml;

乳杆菌种子液的制备:取出菌种保藏管,用乳酸菌斜面固体培养基分别划线进行复苏,37度培养24-36h。挑取斜面培养基上的菌落结晶紫染色镜检,为短杆菌或长杆菌。挑取菌落接种100mL乳酸菌培养基中,在37度培养箱中培养24h。种子采用2-5%的接种量,接种至3L大三角瓶中,37度培养24-36h,检测其菌液浓度,菌含量超过20亿/毫升,即可作为乳杆菌液体菌种接种。其中所述的MRS培养基:葡萄糖2.0%、柠檬酸铵0.2%、乙酸钠0.5%、磷酸氢二钾0.5%、硫酸锰0.02%、硫酸镁0.05%、蛋白胨1.0%、牛肉膏1.0%、酵母膏0.5%、吐温80 0.1%,调节pH至6.0;固体培养基加1.5%琼脂粉。培养基灭菌条件为:0.10-0.15MPa,121℃灭菌20min。

2)将步骤1)中各种发酵液分别离心,弃上清,得到菌泥;

3)配制冻干保护剂;其中冻干保护剂的配方组成为:脱脂奶粉25g、蔗糖8g、食用甘油1g、蒸馏水100mL。

4)将菌泥和冻干保护剂混合均匀,将混合物预冻,再真空冷冻干燥,制成具有包埋层的活性益生菌的冻干粉。

实施例2中药提取物的制备

1)按照重量份:沙棘5g,枸杞10g,山药15g,桂圆12,红枣15g;

2)将混合物置于10倍水中浸泡40min,煎煮,水开后继续煎煮30min,过滤得到第一滤液;药渣用8倍水进行二次煎煮,水开后继续煎煮30min,过滤得到第二滤液与第一滤液混合均匀,通过真空减压旋转蒸发仪浓缩中药液,至固形物含量为30%以上,进喷雾干燥器,进风温度控制140℃,出风温度90℃,雾化器转速45转/分钟,进料速度为5ml/分钟,得喷雾干燥粉,粉碎,过100目以上筛子即得中药提取物。

实施例3中药提取物的制备

1)按照重量份:沙棘9g,枸杞10g,山药28g,桂圆14g,红枣13g;

2)将混合物置于10倍水中浸泡50min,煎煮,水开后继续煎煮40min,过滤得到第一滤液;药渣用8倍水进行二次煎煮,水开后继续煎煮40min,过滤得到第二滤液与第一滤液混合均匀,通过真空减压旋转蒸发仪浓缩中药液,至固形物含量为30%以上,进喷雾干燥器,进风温度控制140℃,出风温度90℃,雾化器转速45转/分钟,进料速度为5ml/分钟,得喷雾干燥粉,粉碎,过100目以上筛子即得中药提取物。

实施例4益生菌的冻干粉与中药提取物等的复配

将制备好的益生菌的冻干粉和中药提取物分别过100目以上筛子,并称量备用;所述各组分的质量百分比为益生菌干粉8%,中药提取物30%,益生元55%,麦芽糊精、柠檬酸、果粉、糖醇等辅料填充物7%。将以上各物质在混合机中充分混匀至色泽均匀,无色差,即得到具有延缓衰老养颜美容的益生菌混合物。

实施例5益生菌的冻干粉与中药提取物等的复配

将制备好的益生菌的冻干粉和中药提取物分别过100目以上筛子,并称量备用;所述各组分的质量百分比为益生菌干粉10%,中药提取物25%,益生元58%,麦芽糊精、柠檬酸、果粉、糖醇等辅料填充物7%。将以上各物质在混合机中充分混匀至色泽均匀,无色差,即得到具有延缓衰老养颜美容的益生菌混合物。

实施例6具有延缓衰老和美容养颜功能的组合物对自然衰老小鼠的延缓作用

1)具有延缓衰老养颜美容对的益生菌组合物对衰老小鼠各内脏指标的影响

优选的益生菌组合物比例:益生菌干粉5%(8.0×109cfu/g),中药提取物30%,益生元55%,麦芽糊精等其它辅料填充物10%,将以上物料充分混匀,按照不同的剂量灌服小鼠。

选取8月龄以上的衰老小鼠,随机分为6组,每组10只,即高剂量组(0.55g/只),中剂量组(0.055g/只),低剂量组(0.0275g/只),益生菌组(5.0×107cfu/只),阳性组(原花青素+维生素C),对照组(纯水),各个分组的小鼠每天进行灌胃操作,连续灌胃30d。

停药次日,小鼠称重,取血清并处死,解剖后分别取脾脏、肝脏、肾脏、胸腺称重,保留肝脏制备肝脏组织悬液。

表1益生菌组合物对小鼠内脏指数的益生功能(x±s,n=10)

注:a,b,c表示差异显著(0.01<P<0.05)。

结果显示:以上数据表明产品组尤其是中、低剂量组均能提高各内脏指标,其中脾脏、胸腺指数低剂量组较对照组分别提高10.2%、6.7%,对免疫器官脾脏、胸腺均有一定的益生功能,可能会相应的提高免疫器官的免疫水平,从而增加机体的免疫力,达到延缓衰老保健的效果。

2)具有延缓衰老养颜美容对的益生菌组合物对衰老小鼠各抗氧化指标的影响

根据保健食品抗氧化功能评价方法需要脂质氧化物、蛋白质氧化产物、抗氧化酶、抗氧化物质四项指标。根据需要本发明分别检测小鼠血清中的T-SOD(总超氧化物歧化酶)、MDA(丙二醛),以及肝脏组织悬液中蛋白质羰基、GSH(谷胱甘肽)的含量,通过以上抗氧化指标判定益生菌组合物对衰老小鼠的抗氧化能力,结果判定动物实验中以上四项指标中三项阳性,可判定受试样品抗氧化功能结果为阳性。

表2益生菌组合物对各个抗氧化指标的影响

注:a,b,c表示差异显著(0.01<P<0.05)。

实验结果显示:高剂量组SOD水平较对照组提高14.4%;MDA的水平各个组较对照组均有减少,但是益生菌组和阳性组较对照组有显著差异,MDA减少约18.3%;蛋白质羰基检测水平各组较对照组均有显著性差异,减少率分别为33.3%、33.1%、35.3%、43.0%、38.9%,综合以上数据,益生菌组效果较好,产品组也有一定的效果,说明产品和益生菌均能对小鼠的抗氧化能力有明显的提高。

3)具有延缓衰老养颜美容对的益生菌组合物对过氧化氢造成的氧化损伤的保护作用

取10%的肝脏匀浆上清液0.8mL,分别加入0.1mL 0.5、0.05、0.03g/mL的益生菌组合物以及0.04g/mL的原花青素和维生素C,过氧化氢对照与阴性对照均加入等体积的0.9%的生理盐水,37℃水浴,30min;阴性对照加0.1mL0.9%的生理盐水,其余各组均加入0.1mL的50mmol/L H2O2,再37℃水浴50min;冰浴15min终止反应,最后4℃,3000rmp离心20min,取上清液,检测丙二醛(MDA)的含量。

表3益生菌组合物对H2O2引起的氧化损伤的保护效果

注:a,b,c表示差异显著(0.01<P<0.05)。

实验结果显示:H2O2对照组与其它各组有显著差异性,说明H2O2对组织液有很好的氧化应激作用;阳性组较其他组均有极显著差异,说明0PC+VC对H2O2的氧化损伤刺激有较好的保护效果;从比较结果来看,1、2、3组和H2O2比较差异显著,说明产品组能较好中和H2O2对组织上清的刺激作用,所以产品对H2O2引起的氧化应激有一定的保护效果。

最后说明的是,以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制,尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围,其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

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