一种中药组合物的新用途的制作方法

本发明涉及一种中药组合物的新用途，具体涉及一种中药组合物在制备治疗压力负荷性心衰药物中的应用，属于中医药领域。

背景技术：

心功能不全(心力衰竭)是由于任何原因的初始心肌损伤(如心肌梗死、心肌病、血流动力负荷过重、炎症等)引起心肌结构和功能的变化，最后导致心室泵血和/或充盈功能低下。

人群慢性心力衰竭患病率为0.9％，且患病率随着年龄增加显著上升。高血压是最常见的慢性病，中国18岁以上成年高血压患病率为18.8％。由高血压引起的压力负荷性心衰已逐渐成为慢性心衰最主要的组成部分。

中医认为，心功能不全的病机特点是本虚标实、虚实夹杂；以心、肾及气血阴阳之虚为本，血瘀、毒蕴、水饮为标。注重整体调节、副作用小的中药复方在心功能不全的治疗中有其独到的特色和优势，其多成分、多层次、多环节的作用特点使得不良反应的产生几率大大降低。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种中药组合物在制备治疗压力负荷性心衰的药物中的应用，所述中药组合物的原料药包括：黄芪、丹参、附子、玄参、金银花和甘草。

优选的，所述中药组合物的原料药组成为：黄芪10～40重量份、丹参10～30重量份、附子5～20重量份、玄参5～18重量份、金银花8～20重量份、甘草5～20重量份；

进一步优选的，所述中药组合物的原料药组成为：黄芪10～30重量份、丹参10～20重量份、附子5～15重量份、玄参10～15重量份、金银花10～20重量份、甘草5～15重量份；

更进一步优选的，所述中药组合物的原料药组成为：黄芪15～25重量份、丹参12～18重量份、附子6～12重量份、玄参10～12重量份、金银花12～18重量份、甘草8～12重量份；

更进一步优选的，所述中药组合物的原料药组成为：黄芪20重量份、丹参10重量份、附子6重量份、玄参15重量份、金银花15重量份、甘草10重量份；

或，黄芪30重量份、丹参15重量份、附子9重量份、玄参10重量份、金银花10重量份、甘草6重量份；

或，黄芪10重量份、丹参15重量份、附子9重量份、玄参10重量份、金银花10重量份、甘草10重量份。

所述中药组合物可以是上述原料组成或制成的任何形式，如上述原料按所述配比混合后经粉碎得到的组合物，也可以是上述原料按所述配比混合/分别提取得到的提取物，或提取物进一步经过精制纯化工艺得到的有效组分，还可以是上述组合物/提取物/有效组分进一步按照常规制剂工艺制备得到的常规口服剂型；

其中，所述提取的方法包括浸渍提取、煎煮提取、回流提取、渗漉提取、超声提取等；提取溶剂包括水、20～95％乙醇溶液；所述精制纯化工艺包括水提醇沉、萃取、硅胶色谱柱分离、大孔树脂柱分离等；所述常规口服剂型包括散剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、丸剂等。

本发明所述中药组合物除了以黄芪、丹参、附子、玄参、金银花和甘草作为原料的形式进行投料外，还可以上述各原料药的提取物(有效组分)的形式进行投料，即各原料药经提取后得到提取物/有效组分，再将提取物/有效组分按所述配比混合而成。

因此，所述中药组合物原料组成为：黄芪提取物10～30重量份、丹参提取物10～20重量份、附子提取物5～15重量份、玄参提取物10～15重量份、金银花提取物10～20重量份、甘草提取物5～15重量份；

进一步优选的，所述中药组合物的原料组成为：黄芪提取物15～25重量份、丹参提取物12～18重量份、附子提取物6～12重量份、玄参提取物10～12重量份、金银花提取物12～18重量份、甘草提取物8～12重量份；

更进一步优选的，所述中药组合物的原料组成为：黄芪提取物20重量份、丹参提取物10重量份、附子提取物6重量份、玄参提取物15重量份、金银花提取物15重量份、甘草提取物10重量份；

或，黄芪提取物30重量份、丹参提取物15重量份、附子提取物9重量份、玄参提取物10重量份、金银花提取物10重量份、甘草提取物6重量份；

或，黄芪提取物10重量份、丹参提取物15重量份、附子提取物9重量份、玄参提取物10重量份、金银花提取物10重量份、甘草提取物10重量份。

所述各提取物分别为原料药的水提物或20～95％的乙醇溶液提取物。

各原料药的提取物/有效组分分别为以下类型的成分：黄芪的有效组分黄芪总皂苷类成分，包括黄芪皂苷i、v、iii等；附子的有效组分生物碱类化合物，包括乌头碱、中乌头碱、次乌头碱等；甘草的有效组分皂苷类化合物，包括甘草酸、甘草次酸、甘草多糖等；丹参的有效组分酚酸类化合物，包括丹酚酸、原儿茶醛、原儿茶酸等；玄参的有效组分环烯醚萜类化合物，包括哈帕苷、哈帕俄苷等；金金银花的有效组分有机酸类化合物，包括绿原酸等。

本发明进一步提供所述中药组合物抑制压力负荷性心衰导致的心肌增厚和/或延缓心肌重塑和/或改善心功能的用途。

本发明进一步提供所述中药组合物减轻压力负荷性心衰导致的心肌纤维化的用途。

研究表明，本发明中药组合物具有减缓压力负荷导致的病理性心肌肥厚的作用，具有改善压力负荷性心衰小鼠心功能、减轻压力负荷性心衰小鼠心肌纤维化的作用。

所述压力负荷性心衰中″压力负荷″包括由高血压引起的。

附图说明

图1假手术组心肌组织he染色图；

图2模型组心肌组织he染色图；

图3实验药物组心肌组织he染色图；

图4假手术组心肌组织mallory染色图；

图5模型组心肌组织mallory染色图；

图6实验药物组心肌组织mallory染色图；

以上图1～6中，a为放大200倍图，b为放大400倍图。

具体实施方式

实施例1

原料：黄芪20g、丹参10g、附子6g、玄参15g、金银花15g、甘草10g。

制备方法：按比例取原料药，加8倍量水提取3次，每次1小时，过滤，滤液浓缩至相对密度1.10～1.15(60℃)，加乙醇调至乙醇浓度为70％，静置16小时，离心弃去沉淀，上清液减压浓缩，真空干燥(60℃，-0.8mpa)，得到浸膏粉，加入乳糖为赋形剂，干压制粒。

实施例2

原料：黄芪30g、丹参15g、附子9g、玄参10g、金银花10g、甘草6g。

制备方法同实施例1。

实施例3

原料：黄芪10g、丹参15g、附子9g、玄参10g、金银花10g、甘草10g。

制备方法同实施例1。

实施例4

原料：黄芪40g、丹参10g、附子15g、玄参5g、金银花20g、甘草5g。

制备方法同实施例1。

实施例5

黄芪提取物20g、丹参提取物10g、附子提取物6g、玄参提取物15g、金银花提取物15g、甘草提取物10g。

实施例6

黄芪提取物30g、丹参提取物15g、附子提取物9g、玄参提取物10g、金银花提取物10g、甘草提取物6g。

实施例7

黄芪提取物10g、丹参提取物15g、附子提取物9g、玄参提取物10g、金银花提取物10g、甘草提取物10g。

本发明中药组合物治疗压力负荷性心衰的效果实验

1材料和方法

健康雄性c57bl/6小鼠适应性喂养1周后，按照体重随机分为手术和手术组。手术组动物行主动脉弓缩窄术(transverseaorticconstriction，tac)，制备压力负荷性心衰模型。

小鼠经戊巴比妥钠(40mg/kg)腹腔注射麻醉，固定后开胸，从无名动脉与左侧颈总动脉的分叉处探出并夹持5-0真丝编织线，随后将夹持5-0真丝编织线的钩状弯镊提出使得丝线包绕过主动脉弓；将自制的″l″形26g垫扎针置于主动脉弓垂直上方，随后夹持真丝编织线的两端捆扎在该垫扎针上，打结后将垫扎针轻轻退出，剪断结旁多余线头，完成主动脉弓缩窄。手术组动物随机分为模型组和实验药物组。假手术组动物仅行开胸操作，而不进行缩窄操作，其余操作步骤与模型组相同，关胸。术后第2天开始给药，每日给予临床等效剂量的实验药物(按实施例2方法制备，相当于生药14.66g/kg)，灌胃给药，灌胃体积为1.0ml/100g；假手术组和模型组每日给予相同体积纯水灌胃，持续4周。

术后4周行心脏超声检查。胸部褪毛，异氟烷呼吸麻醉，仰卧位。使用vevo2100超声仪(visualsonics加拿大)及配置的相应探头(ms-400号)，中心频率30mhz，标准帧频449fps。于主动脉弓切面行彩色多普勒获得其血流图像；于左胸骨旁短轴切面，左心长轴切面获得左心室m型超声心动图和左心室二维图像。长轴及短轴切面下，每一测量点记录10个心动周期；获得左室收缩末期内径(lvids)、左室舒张末期内径(lvidd)、左室后壁收缩期厚度(lvpws)、左室后壁舒张期厚度(lvpwd)、左室前壁收缩末期厚度(lvaws)、左室前壁舒张末期厚度(lvawd)、左心室收缩期容积(lvesv)、左心室舒张期容积(lvedv)、左心室重量(lvm)、左心室射血分数(ef)、左室短轴缩短率(fs)。

小动物心脏超声后，腹腔麻醉小鼠后处死动物，迅速开胸，摘取心脏，用预冷的磷酸缓冲液(pbs)冲净心腔中的血块，剪除心脏周围结缔组织和血管，称重后留取心脏组织，经多聚甲醛固定，乙醇梯度脱水，石蜡包埋，切片，he染色和mallory染色，显微镜下观察。

2结果

2.1心脏超声结果

结果见表1。

表1本发明中药组合物对压力负荷性心衰小鼠心功能的影响

^▲与假手术组比，p＜0.05；^▲▲与假手术组比，p＜0.01。^*与模型组比，p＜0.05；^**与模型组比，p＜0.01。

由表1可见，术后4周，主动脉弓切面下，模型组动物无名动脉与左侧颈总动脉间可见缩窄线；主动脉弓缩窄处血流速率超过2400mm/s；假手术组血流速率均低于900mm/s。结果表明该手术模型能够显著增加心脏后负荷。

术后4周，模型组与假手术组相比：左室收缩末期内径(lvids)、左室舒张末期内径(lvidd)、左室后壁收缩期厚度(lvpws)、左室后壁舒张期厚度(lvpwd)、左室前壁收缩末期厚度(lvaws)、左室前壁舒张末期厚度(lvawd)、左室收缩期容积(lvesv)、左室舒张期容积(lvedv)、左室重量(lvm)显著增加(p＜0.01)；射血分数(ef)、左室短轴缩短率(fs)显著降低(p＜0.01)；

术后4周，实验药物组与模型组相比：左室收缩末期内径(lvids)、左室收缩期容积(lvesv)显著降低(p＜0.05)；左室后壁收缩期厚度(lvpws)、左室后壁舒张期厚度(lvpwd)、左室前壁收缩末期厚度(lvaws)、左室前壁舒张末期厚度(lvawd)、左室重量(lvm)明显降低(p＜0.01)；左室射血分数(ef)、左室短轴缩短率(fs)显著升高(p＜0.05)；其余指标无统计学差异。

结果表明：模型组动物心脏重量增加、室壁增厚、顺应性降低，心功能有所下降，本发明组合物可以抑制室壁过度增厚，延缓心肌重塑，改善心功能。

2.2心脏组织病理学结果

he染色可见(图1-3)，假手术组表现为正常心肌组织，心肌细胞排列整齐有序；模型组小鼠心肌细胞排列紊乱、肥大，大量心肌细胞坏死、丧失正常结构，发生肌纤维溶解；实验组心肌细胞排列较为整齐，细胞基本维持原有形态。

mallory染色下(图4-6)，胶原纤维呈蓝色，细胞核深红色，胞浆红色。假手术组心肌排列紧密，心肌间隙有极少量胶原组织分布；模型组心肌肥大明显，胶原纤维弥漫性生长，并侵入正常心肌组织中逐渐替代正常心肌；实验组心肌排列基本紧密，心肌间隙少量胶原组织分布。

3结论

本发明中药组合物具有减缓压力负荷导致的病理性心肌肥厚的作用，具有改善压力负荷性心衰小鼠心功能、减轻压力负荷性心衰小鼠心肌纤维化的作用。