本发明属于医药技术领域，具体涉及一种中药组合物及其制备方法。
背景技术：
外感发热是小儿最常见的临床症状之一，以发热、鼻塞、流涕、喷嚏、咽部刺激为主要临床表现。是由于小儿遭受风热、风寒之邪而致发烧，并伴有鼻塞，流鼻涕，延后不适，乏力，头疼，关节疼和咳嗽等。中医理论认为，小儿为稚阴稚阳之体，肌肤柔嫩，肺卫外功能不固，免疫力低下，极易受风邪侵袭而致病；易寒易热，转变迅速为其特点，外感表征是发热的主要原因。风热风寒之邪，外各肌表，内犯于肺卫之症。具有热证多、寒证少、年龄越小兼证越多的特点。
小儿热速清颗粒是针对外感高热而研制的中药制剂。具有清热、解毒、利咽之功效。其由柴胡、黄芩、板蓝根、葛根、金银花、水牛角、连翘、大黄组成，具有清热、解毒、利咽的功效。方中柴胡和解表里，黄芩倾泻上焦热，二者相配，具有和解退热的功效；板蓝根清热解毒，消肿利咽；金银花、连翘、葛根解表清热；水牛角清热解毒；大黄清热泻火。荡涤实热。诸药共用，共奏清热、解毒、泻火、利咽之功效。临床报道，应用小儿热速清颗粒治疗小儿外感发热有较好疗效。
CN200510200720小儿热速清泡腾片，公开一种小儿热速清泡腾片及其制备方法，其用柴胡625g、黄芩312.5g、板蓝根625g、葛根312.5g、金银花346.75g、水牛角156.25g、连翘375g、大黄156.25g和乳糖125g、碳酸氢钠660g、枸橼酸540g、阿司八坦100g、聚乙二醇6000 100g、硬脂酸镁4g制成的；此专利工艺中，首先，由于忽略了板蓝根中挥发油的清热解毒、泻火利咽的药理作用，未对挥发油进行提取，影响了产品的疗效。其次，其尽管对柴胡、金银花、连翘三味药进行了挥发油提取，但在应用中，由于挥发油易于挥发，有效成分损失大，降低了产品疗效。再次，原生产工艺中对水牛角使用水提方式提取，由于水牛角的角蛋白较难溶于水，传统水煎煮法并未使水牛角的氨基酸成分充分溶出，降低了产品疗效。
由于制备方法的缺陷使药物有效成分损失较多，在一定程度上影响了产品的疗效。同时也限制了产品质量标准的提升，现有技术仅对黄芩苷、葛根素含量有低限要求，未对绿原酸、连翘苷、大黄素等成分的含量及范围进行限定，产品质量可控性有待提高。
技术实现要素：
针对现有技术中存在的生产工艺不合理、产品质量可控性较差以及疗效有进一步提升的需要等问题。本发明人经过研究发现，板蓝根中的挥发油的清热解毒、泻火利咽的药理作用，对疗效影响显著，为此对板蓝根挥发油进行了提取。本生产工艺对挥发油进行了包合。另外，发明人经过研究发现水牛角的角蛋白较难溶于水，本生产工艺采用酶水解与酸水解以及超滤方式得到的氨基酸量分别是传统水提取方式的几十倍。
具体地，
本发明方案如下：
本发明提供一种中药组合物，该药物组合物含有黄芩苷、葛根素、绿原酸、大黄素。
优选地，还含有连翘苷、总挥发油和总氨基酸。
优选地，其中，黄芩苷:葛根素:绿原酸:大黄素:连翘苷:总挥发油:总氨基酸的重量比为100-300:30-100:10-30:1-5:2-10:25-100:200-600。
进一步优选地，所述黄芩苷:葛根素:绿原酸:大黄素:连翘苷:总挥发油:总氨基酸的重量比为100-200:50-80:10-20:1-3:2-6:25-50:200-300。
本发明还提供热速清中药组合物的制备方法，包括如下步骤：
将A、B和C三组物质混合，即得到本发明的组合物：
A、水牛角提取物；B、板蓝根、柴胡、金银花、连翘的挥发油；C、黄芩、葛根、大黄、水牛角药渣、板蓝根药渣、柴胡药渣、金银花药渣和连翘药渣的水提醇沉物；
1）所述A按照包括如下步骤的方法制备得到：
在按重量比加5-12倍量溶液中超声波辅助水解水牛角，水解时间为0.5h-6h，得到的提取液经30-50KD分子量超滤装置超滤并干燥得水牛角提取物即物质A；
2）所述B按照包括如下步骤的方法制备得到：
将板蓝根、柴胡、金银花、连翘浸泡在6-12倍量水中，浸泡的时间为10-60min；90℃-100℃蒸馏提取1h-5h，蒸馏提取1-3次，得到馏出液，收集馏出液，即得到B的挥发油，药渣备用，板蓝根、柴胡、金银花、连翘的挥发油与环糊精进行包合，干燥即物质B；
3）所述C按照包括如下步骤的方法制备得到：将黄芩、葛根、大黄和步骤2）的药渣及水牛角药渣加水混合，进行煎煮，煎煮的温度为90℃-100℃，煎煮的时间为1h-3h，煎煮次数2-3次，过滤，收集滤液，加入乙醇，使滤液中乙醇的体积百分含量为70-95%，静置、收集上清液，即得到黄芩、葛根、大黄、水牛角药渣、板蓝根药渣、柴胡药渣、金银花药渣和连翘药渣的水提醇沉物并干燥即物质C；
其中所述的原料按重量份计为:柴胡160-320、黄芩80-160、葛根80-160、水牛角40-80、金银花120-240、板蓝根160-320、连翘96-192和大黄40-80。
优选地，所述的药效原料按重量份计为：柴胡250、黄芩125，葛根125、水牛角62.5、金银花187.5、板蓝根250、连翘150和大黄62.5。
所述步骤1）所述溶液为浓度200-6000U/g的蛋白酶溶液，或0.2-5mol/L的酸溶液。
优选地，所述挥发油与环糊精比例为1:5-20进行包合，包合温度为30-60℃，搅拌时间1h-8h，然后干燥即得。
本发明还提供一种热速清制剂，其由上述组合物与药学上可接受的载体或稀释剂组成，所述制剂为糖浆剂、口服液、片剂、颗粒剂或胶囊剂。
本发明还提供上述组合物在用于制备解热、治疗和/或预防炎症的药物中的应用。
本发明相对于现有技术存在以下优势：
（1）组合物含有重量比在一定范围内的黄芩苷、葛根素、绿原酸、大黄素和连翘苷，确保了疗效，实现了质量可控性强和药效提高的目标。
（2）针对水牛角传统提取工艺有效成分溶出差的问题，水牛角由与其他药材混合提取改为单独提取后，再与其他药材混合提取。本发明应用酶水解和酸水解方法，得到的十七种氨基酸量是传统水提取方式的几十倍。
（3）超声波辅助水解水牛角未见报道，得到的提取液经30-50KD分子量超滤装置超滤得到小分子提取物，有效提高了镇静及退热作用。
（4）板蓝根挥发油具有清热解毒、泻火利咽的药理作用，在原工艺提取柴胡、金银花、连翘挥发油的基础上增加了板蓝根挥发油的提取。
（5）对挥发油进行了包合，减少了挥发油的挥发，提高了疗效。
本发明提高了产品质量标准，增强了质量可控性，同时提高了产品中有效物质含量，改善了产品疗效。
具体实施方式
实施例1
处方
柴胡250g、黄芩125g，葛根125g、水牛角62.5g、金银花187.5g、板蓝根250g、连翘150g和大黄62.5g
制备方法
1）在5倍量浓度为0.2mol/L的盐酸溶液中超声波辅助水解水牛角，水解时间为6h，得到的提取液经30KD分子量超滤装置超滤得到滤液并干燥得水牛角提取物即物质A。
2）将板蓝根、柴胡、金银花、连翘按重量比加6倍量水浸泡在水中10min，蒸馏提取挥发油6h，蒸馏提取3次，蒸馏温度为90℃，得到馏出液，收集馏出液，即得到板蓝根、柴胡、金银花、连翘的挥发油，药渣备用；板蓝根、柴胡、金银花、连翘的挥发油与环糊精比例为1:5进行包合，包合温度为30℃，搅拌时间8h，干燥即物质B。
3）步骤1）所得的水牛角药渣、步骤2所得的板蓝根、柴胡、金银花、连翘蒸馏后的药渣与黄芩、葛根、大黄3味药，按重量比加6倍量水煎煮2次，煎煮的温度为90℃，每次3h，合并滤液，滤液减压浓缩至相对密度为1.12(60℃测)，加乙醇使含醇量达70％，静置24，取上清液回收乙醇，浓缩至无醇味并干燥即物质C。
将A、B和C三组物质混合，即得到组合物。
检测结果：根据实施例5检验方法测得实施例1组合物中，每克组合物含：黄芩苷30mg、葛根素24mg、绿原酸3mg、大黄素0.9mg、连翘苷0.6mg、总氨基酸90mg、总挥发油7.5mg。
实施例2
处方
柴胡250g、黄芩125g，葛根125g、水牛角62.5g、金银花187.5g、板蓝根250g、连翘150g和大黄62.5g
制备方法
1）在8倍量浓度为200U/g的蛋白酶溶液中超声波辅助水解水牛角，水解时间为6h，得到的提取液经40KD分子量超滤装置超滤得到滤液并干燥得水牛角提取物即物质A。
2）将板蓝根、柴胡、金银花、连翘按重量比加8倍量水浸泡在水中30min，蒸馏提取挥发油3h，蒸馏提取2次，蒸馏温度为100℃，得到馏出液，收集馏出液，即得到板蓝根、柴胡、金银花、连翘的挥发油，药渣备用；板蓝根、柴胡、金银花、连翘的挥发油与环糊精比例为1:10进行包合，包合温度为40℃，搅拌时间1h，干燥即物质B。
3）步骤1）所得的水牛角药渣、步骤2所得的板蓝根、柴胡、金银花、连翘蒸馏后的药渣与黄芩、葛根、大黄3味药，按重量比加10倍量水煎煮2次，煎煮的温度为100℃，每次1h，合并滤液，滤液减压浓缩至相对密度为1.17(60℃测)，加乙醇使含醇量达95％，静置48h，取上清液回收乙醇，浓缩至无醇味并干燥即物质C。
将A、B和C三组物质混合，即得到组合物。
检测结果：根据实施例5检验方法测得实施例2组合物中，每克组合物含：黄芩苷60mg、葛根素15mg、绿原酸6mg、大黄素0.3mg、连翘苷1.8mg、总氨基酸60mg、总挥发油15mg。
实施例3
处方
柴胡160g、黄芩160g、葛根160g、水牛角40g、金银花240g、板蓝根160g、连翘96g和大黄80g。
制备方法
在10倍量浓度为6000U/g的蛋白酶溶液中超声波辅助水解水牛角，水解3次，每次所述水解时间为0.5h，得到的提取液经50KD分子量超滤装置超滤得到滤液并干燥得水牛角提取物即物质A。
将板蓝根、柴胡、金银花、连翘按重量比加10倍量水浸泡在水中60min，蒸馏提取挥发油1次，每次5h，蒸馏温度为100℃，得到馏出液，收集馏出液，即得到板蓝根、柴胡、金银花、连翘的挥发油，药渣备用；板蓝根、柴胡、金银花、连翘的挥发油与环糊精比例为1:20进行包合，包合温度为60℃，搅拌时间2h，然后干燥即物质B。
水牛角药渣、蒸馏后的药渣与黄芩、葛根、大黄3味药，按重量比加10倍量水煎煮2次，煎煮的温度为100℃，每次1h，合并滤液，滤液减压浓缩至相对密度为1.17（60℃测），加乙醇使含醇量达75％，静置48h，取上清液回收乙醇，浓缩至无醇味并干燥即物质C。
将A、B和C三组物质混合，即得到组合物。
检测结果：根据实施例5检验方法测得实施例3组合物中，每克组合物含：黄芩苷84mg、葛根素33.6mg、绿原酸8.4mg、大黄素1.26mg、连翘苷0.42mg、总氨基酸42mg、总挥发油5.25mg。
实施例4
处方
柴胡320g、黄芩80g、葛根80g、水牛角80g、金银花120g、板蓝根320g、连翘192g和大黄40g。
将以下A、B和C三组物质混合，即得到组合物：
A、水牛角提取物；B、板蓝根、柴胡、金银花、连翘的挥发油；C、黄芩、葛根、大黄、水牛角药渣、板蓝根药渣、柴胡药渣、金银花药渣和连翘药渣的水提醇沉物；
1）所述A按照包括如下步骤的方法制备得到：
在按重量比加12倍量5mol/L的盐溶液中超声波辅助水解水牛角，水解时间为0.5h，得到的提取液经50KD分子量超滤装置超滤并干燥得水牛角提取物即物质A；
2）所述B按照包括如下步骤的方法制备得到：
将板蓝根、柴胡、金银花、连翘浸泡在12倍量水中，浸泡的时间为20min；100℃蒸馏提取2h，得到馏出液，收集馏出液，即得到挥发油物质B，药渣备用；
3）所述C按照包括如下步骤的方法制备得到：将黄芩、葛根、大黄、所述B的药渣加水混合，进行煎煮，煎煮的温度为100℃，煎煮的时间为3h，煎煮次数3次，过滤，收集滤液，加入乙醇，使滤液中乙醇的体积百分含量为85%，静置、收集上清液，得到黄芩、葛根、大黄、水牛角药渣、板蓝根药渣、柴胡药渣、金银花药渣和连翘药渣的水提醇沉物并干燥即物质C；
检测结果：根据实施例5检验方法测得实施例4组合物中，每克组合物含：黄芩苷21mg、葛根素6.3mg、绿原酸2.1mg、大黄素0.21mg、连翘苷2.52mg、总氨基酸126mg、总挥发油21mg。
实施例5本发明组合物种含量测定方法
黄芩苷、葛根素的含量测定：照高效液相色谱法(中国药典2015年版通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，0.1%磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱：葛根素检测波长250nm，黄芩苷检测波长274nm。理论板数按葛根素峰计算应不低于6000。
对照品溶液的制备 取葛根素对照品、黄芩苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇分别制成每lml含葛根素20μg、黄芩苷60μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 精密称取组合物100mg，置100ml量瓶中，加50%甲醇90ml，超声处理（功率250W，频率25kHz）30分钟，放冷，加50%甲醇至刻度，摇勻，滤过，取续滤液，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
绿原酸的含量测定：照高效液相色谱法(中国药典2015年版通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺（15:85:1:0.3）为流动相；检测波长为324nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于6000。
对照品溶液的制备取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加水制成每1ml含20μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 精密称取组合物100mg，置100ml量瓶中，加50%甲醇90ml，超声处理（功率250W，频率25kHz）30分钟，放冷，加50%甲醇至刻度，摇勻，滤过，取续滤液，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
大黄素的含量测定：照高效液相色谱法(中国药典2015年版通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-0.1%磷酸溶液(85:15）为流动相;检测波长为254nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备 取大黄素对照品，精密称定，加甲醇制成每lml含15μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 精密称取组合物100mg，置25ml量瓶中，加甲醇20ml，超声处理（功率250W，频率25kHz）30分钟，放冷，加甲醇至刻度，摇勻，滤过，取续滤液，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。连翘苷的含量测定：照高效液相色谱法(中国药典2015年版通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为229nm。理论板数按连翘苷峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备 取连翘苷对照品，精密称定，加甲醇制成每lml含15μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 精密称取组合物100mg，置25ml量瓶中，加甲醇20ml，超声处理（功率250W，频率25kHz）30分钟，放冷，加甲醇至刻度，摇勻，滤过，取续滤液，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
总氨基酸的含量测定：
精密称取组合物100mg，置蒸发皿中，用0.02mol/L盐酸溶液分次洗涤，合并洗涤液，滤过，滤液转移至50ml量瓶中，用0.02mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，用氨基酸分析仪测定。
本发明提高了产品质量标准，增强了质量可控性，同时提高了产品中有效物质含量。
实施例6解热作用和抗炎作用
1、解热作用
Wistar雄性大鼠100只，体质量220-240g，常温下喂养3d，体温计测量体温2-3次/d，间隔1h，使其适应测肛温操作，减少实验过程中温度对结果的影响。实验当日需固定好大鼠，使数字温度计探头涂以石蜡插入大鼠直肠4cm，每小时测体温1次，连续测量3次，选取体温在37.0℃-38.0℃之间，体温变化不超过0.3℃的70只大鼠供实验用，取测量的3次体温的平均值作为基础体温。将实验动物随机分成7组，每组10只，标记后称重。正常对照组背部皮下注射无菌生理盐水10mL/kg;模型对照组、专利组合物实施例1-4组、原工艺提取物组均背部皮下注射15%干酵母混悬液10mL/kg。致热后4h测量大鼠体温，同时灌胃给药。正常对照组:生理盐水10mL/kg;模型对照组:生理盐水10mL/kg;专利组合物实施例1-4组:0.35g/kg;原工艺提取物组:0.35g/kg。首次给药后1h测量体温，同时再次给药，剂量同前。首次给药后2h、3h、4h各测量体温1次，计算与致热4h后体温之差。结果见表1。
表1解热作用结果
实验结果显示，与正常对照组比较，模型对照组升温极显著(P<0.01)，说明造模成功;与模型对照组比较，本发明组合物实施例1-4组解热作用明显优于原工艺提取物组。
2、抗炎作用
取体重20±2g的雄性昆明小鼠60只，随机分为6组：空白对照组，原工艺提取物组、本发明组合物实施例1-4组，每组10只。各组小鼠每天经口灌胃1次，空白对照组按照0.01ml/g(体重)的剂量给予小鼠生理盐水，原工艺提取物组、本发明组合物组均分别按照0.5g/kg(体重)的剂量给予原工艺提取物和本发明组合物，连续给药4天。末次给药后1小时，在乙醚麻醉下，将二甲苯0.02mL涂在小鼠左耳前后两面致炎，致炎后30分钟处死小鼠，用7mm直径打孔器在小鼠左右耳相同部位打下耳片，称重并记录左右耳片重量，计算肿胀率，按t检验法进行统计学处理。结果见表2。
表2对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响
二甲苯所致小鼠耳肿胀是经典的急性炎症模型，原工艺提取物组、本发明组合物实施例1-4组均可以降低二甲苯所致小鼠耳肿胀的肿胀率，与空白对照组比较均有极显著差异（P<0.01），本发明组合物组抗炎作用优于原工艺提取物组。
通过对解热动物模型和消炎动物模型的作用效果进行对比发现，本发明实施例1-4组明显优于原工艺组。本发明提高了产品质量，增强了质量可控性，改善了产品疗效。
上述详细说明是针对本发明其中可行实施例的具体说明，说明书中实施例并非用以限制本发明的专利范围。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的修改或改进，均应包含在本发明技术方案的范围内。