本发明属于医用材料制备领域，具体涉及一种珍珠层粉-壳聚糖多孔支架的制备方法。
背景技术：
制备适宜的具备生物活性的体内可替代材料来帮助修复人体缺损组织，一直是组织工程研究的热点。珍珠层粉(NP)是腹足类软体动物贝壳最内层磨成的粉末，主要成分为95％的文石型碳酸钙及5％的蛋白质、糖蛋白、多糖等有机质。NP在食品科技及医药领域广受研究人员的青睐，用NP复合多种药物的研究已取得较为理想的成果，近年来，NP的成骨性能也逐渐受到组织工程研究者的重视。NP具有良好的生物相容性、骨传导作用及潜在的骨诱导性，是一种新型可降解的骨修复生物替代材料，但其降解能力有限，有研究表明NP单独植人体内在9个月后方可观察到向心性降解现象。
壳聚糖(CS)广泛存在于自然界中，由甲壳素经浓碱处理脱去N-乙酰基得到。CS具有良好的生物相容性，能促进伤口的愈合，但由于其自身可形成的多孔结构使其力学性能较差。
技术实现要素：
本发明提供一种珍珠层粉-壳聚糖多孔支架的制备方法，力学性能好。
本发明是通过以下技术方案实现的。
珍珠层粉-壳聚糖多孔支架的制备方法，包含以下步骤：
（1）取2.0g 壳聚糖，加入100 mL浓度为0.1 mol/L的醋酸溶液中，搅拌12h后，得到壳聚糖溶液，静置24-36h；
（2）称14.0g β-甘油磷酸钠，加蒸馏水定容至25mL，混合均匀，得到β-甘油磷酸钠溶液；
（3）将步骤（1）和步骤（2）的溶液按照体积比7:1混合，冰浴下搅拌2h，用36％乙酸和4％氢氧化钠溶液调节pH=6.5-7.5；
（4）加入珍珠层粉，珍珠层粉与壳聚糖的质量相同，搅拌后，在200W的功率下超声2h，冰浴下搅拌48h，注入模具在-20℃下静置12h，然后置于真空冷冻干燥机中在-20℃下冷冻干燥48h，灭菌，得到珍珠层粉-壳聚糖多孔支架，4℃保存备用。
优选地，步骤（1）中壳聚糖溶液静置30h。
优选地，步骤（1）中搅拌的速度为500rpm。
优选地，步骤（3）中调节溶液的pH值为7.0。
优选地，步骤（4）中的灭菌是以20 kGy钴-60辐照进行灭菌的。
本发明的优点：
本发明操作简单，生产成本低，制备得到的复合支架具有多孔结构，孔径大小均一，生物安全性良好，力学性能好，可以作为组织缺损修复过程中非承重骨部位的组织工程支架的应用。
具体实施方式
实施例1
珍珠层粉-壳聚糖多孔支架的制备方法，包含以下步骤：
（1）取2.0g 壳聚糖，加入100 mL浓度为0.1 mol/L的醋酸溶液中，搅拌12h后，得到壳聚糖溶液，静置24h；
（2）称14.0g β-甘油磷酸钠，加蒸馏水定容至25mL，混合均匀，得到β-甘油磷酸钠溶液；
（3）将步骤（1）和步骤（2）的溶液按照体积比7:1混合，冰浴下搅拌2h，用36％乙酸和4％氢氧化钠溶液调节pH=6.5；
（4）加入珍珠层粉，珍珠层粉与壳聚糖的质量相同，搅拌后，在200W的功率下超声2h，冰浴下搅拌48h，注入模具在-20℃下静置12h，然后置于真空冷冻干燥机中在-20℃下冷冻干燥48h，灭菌，得到珍珠层粉-壳聚糖多孔支架，4℃保存备用。
实施例2
珍珠层粉-壳聚糖多孔支架的制备方法，包含以下步骤：
（1）取2.0g 壳聚糖，加入100 mL浓度为0.1 mol/L的醋酸溶液中，搅拌12h后，其中，搅拌的速度为500rpm，得到壳聚糖溶液，静置36h；
（2）称14.0g β-甘油磷酸钠，加蒸馏水定容至25mL，混合均匀，得到β-甘油磷酸钠溶液；
（3）将步骤（1）和步骤（2）的溶液按照体积比7:1混合，冰浴下搅拌2h，用36％乙酸和4％氢氧化钠溶液调节pH=7.5；
（4）加入珍珠层粉，珍珠层粉与壳聚糖的质量相同，搅拌后，在200W的功率下超声2h，冰浴下搅拌48h，注入模具在-20℃下静置12h，然后置于真空冷冻干燥机中在-20℃下冷冻干燥48h，以20 kGy钴-60辐照进行灭菌的，得到珍珠层粉-壳聚糖多孔支架，4℃保存备用。
实施例3
珍珠层粉-壳聚糖多孔支架的制备方法，包含以下步骤：
（1）取2.0g 壳聚糖，加入100 mL浓度为0.1 mol/L的醋酸溶液中，搅拌12h后，其中，搅拌的速度为500rpm，得到壳聚糖溶液，静置30h；
（2）称14.0g β-甘油磷酸钠，加蒸馏水定容至25mL，混合均匀，得到β-甘油磷酸钠溶液；
（3）将步骤（1）和步骤（2）的溶液按照体积比7:1混合，冰浴下搅拌2h，用36％乙酸和4％氢氧化钠溶液调节pH=7.0；
（4）加入珍珠层粉，珍珠层粉与壳聚糖的质量相同，搅拌后，在200W的功率下超声2h，冰浴下搅拌48h，注入模具在-20℃下静置12h，然后置于真空冷冻干燥机中在-20℃下冷冻干燥48h，以20 kGy钴-60辐照进行灭菌，得到珍珠层粉-壳聚糖多孔支架，4℃保存备用。