本发明涉及植物提取物，具体涉及植物提取物的制备方法，尤其涉及一种从枸杞(Lyciumchinense)制备脱除低熔点杂质的枸杞提取物及其制备方法。
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：本发明人的“含有枸杞酸的枸杞提取物及其制备方法”已经获得中国专利授权CN103044569B。众所周知，枸杞子是一种产于中国西北地区滋补强壮药食两用的植物种子，其药用价值高又富含人体所需营养物质。从古到今一直被中医和民间奉为一种具有特殊功效和能够抵抗疲劳强壮筋骨的良药。经现代医药学研究，其所含的有效成分证实，枸杞含有的类胡萝卜素有着明目功效，其含有的蛋白多糖(糖肽)化合物具有增强人体免疫力强健筋骨作用，所含的枸杞酸成分具有特殊的抗氧化保护人体细胞衰老的能力，含有的氨基酸以及维生素成分是人体必要的基本营养成分。因而，除了一般的食用之外，进一步提取其有效成分可进一步扩大其应用范围。然而，在枸杞提取物的制备时，发现枸杞中含有大量的低熔点杂质，低熔点杂质的存在严重影响有效成分含量和制剂成型。因此研究在制备枸杞提取物的过程中脱除低熔点杂质具有积极意义。技术实现要素：本发明所要解决的技术问题在于研究设计在制备枸杞提取物的过程中脱除低熔点杂质，进一步提高枸杞提取物的品质。本发明提供了一种脱除低熔点杂质的枸杞提取物。本发明所述脱除低熔点杂质的枸杞提取物中含有3％～4％的枸杞酸和3％～5％枸杞多糖。本发明的另一目的是提供了所述脱低熔点杂质的枸杞提取物的制备方法，该方法包括下列步骤：(1)提取：将枸杞(Lyciumchinense)原料用反渗透饮用纯净水洗去浮尘，再用反渗透饮用纯净水浸泡粉碎加热提取，获得浸提料液；(2)获得浸提料液原位过滤或者辅助离心澄清除渣，用0.1μm的精滤膜滤清获得浸提料清液；(3)浓缩：浸提料清液真空浓缩至小体积得浓缩液；(4)拌和干燥：浓缩液与固体吸附载体拌和并干燥；(5)粉碎过筛：将上述干燥物粉碎过筛；(6)装柱洗脱：将粉碎过筛的干燥物装入玻璃柱中，用含80％-85％二碳或三碳醇及乙腈的水溶液采用湿柱装填法装填；所述二碳或三碳醇选自乙醇或异丙醇；(7)浓缩：全部50％-55％二碳或三碳醇或乙腈的水溶液洗脱液，真空浓缩至小体积；所述二碳或三碳醇选自乙醇或异丙醇；(8)超高温灭菌：将上述浓缩液通过超高温灭菌设备灭菌；(9)喷雾干燥：将上述通过超高温灭菌的浓缩液用喷雾干燥成粉末即得。本发明方法所述步骤(1)反渗透饮用纯净水与枸杞原料的重量比为8:1～16:1(W/W)，优选12:1(W/W)，每次1～3小时，优选1.5小时；提取温度30℃～90℃，优选80℃；提取1-3次，优选提取2次。所述反渗透饮用纯净水是通过反渗透饮用纯净水机制得，设备型号为KYRO025TH-1，设备符合(中国国家行业标准)HY/T068-2002“饮用水制备系统SRO系列反渗透设备”标准，水质量符合(中国国家标准)GB17324-2003“瓶(桶)装饮用纯净水卫生标准”规定的要求。步骤(2)所述离心分离和精滤处理：浸提料液离心分离，离心设备为平板沉降离心机，设备型号PC-450，转速为2000转/分钟，用0.1μm的精滤膜滤清。步骤(3)浓缩，采用真空浓缩技术将所得过滤液浓缩成固含率20％的浓缩液，固形物含量35％～45％。浓缩条件为-0.093～-0.098兆帕，50～60℃。步骤(4)将浓缩液与5倍重量的固体吸附载体拌和均匀，所述固体吸附载体选自中性层析氧化铝(100～200目)、中性层析硅胶(100～200目)或原木纤维粉(50～100目)等中性载体。步骤(5)将上述均匀拌和的物料放入数显鼓风干燥箱内干燥，干燥温度为30～60℃，优选40℃。步骤(6)所述用装柱溶液洗脱低熔点杂质，洗脱三个柱体积的溶剂量，继而改用含50％-55％二碳或三碳醇及乙腈的水溶液洗脱，收集全部洗脱液；所述二碳或三碳醇选自乙醇或异丙醇。进一步，干燥后的物料经粉碎机粉碎后过40目筛。步骤(7)将上述过40目的粉装填于玻璃或者不锈钢柱中，用含80％-85％二碳或三碳醇或乙腈的水溶液，采用湿柱装填法装填；所述二碳或三碳醇选自乙醇或异丙醇。步骤(8)装好的柱开始用装柱溶液以0.2～0.5柱体积/小时的流速洗脱，优选流速是0.2柱体积/小时，洗3个柱体积溶剂后改用含50％-55％二碳或三碳醇及乙腈的水溶液洗脱，收集全部洗脱液。步骤(9)将步骤(8)收集液采用真空浓缩,在-0.093～-0.098兆帕50～60℃下浓缩。步骤(10)的浓缩液通过超高温灭菌设备(120±1℃，电机使用频率25Hz)灭菌。步骤(11)的无菌料液用喷雾干燥设备干燥,进风温度控制在110～120℃，出风温度控制在85～90℃，即得到脱除低熔点杂质的枸杞提取物。本发明方法制得的产品分别经HPLC外标法对枸杞酸的检测和采用GB/T18672-2002中的枸杞多糖测试方法测试。所述枸杞提取物中应含有3％～4％的枸杞酸和3％～4％枸杞多糖。本发明公开了一种不添加糊精即可干燥成固体的脱除低熔点杂质枸杞提取物，同时也公开了一种独创的不添加糊精的枸杞提取物产品和制备不添加糊精的枸杞提取物粉的制备技术。本发明利用所用固形载体对低熔点杂质的不吸附性。提供了一个枸杞的深加工生产新产品同时也进一步提高了枸杞深加工产品的质量。本发明对市场上的枸杞提取物产品产生深远的影响，本发明又是净化枸杞提取物市场的一个实际技术支持，更有利于消费者的利益，造福人类健康。本发明提供的方法适于工业化生产，有很大的应用价值和潜在的社会效益。具体实施方式本发明实施例所用的反渗透饮用纯净水，是通过设备型号为KYRO025TH-1的反渗透饮用纯净水机制得，设备符合(中国国家行业标准)HY/T068-2002“饮用水制备系统SRO系列反渗透设备”标准，水质量符合(中国国家标准)GB17324-2003“瓶(桶)装饮用纯净水卫生标准”规定的要求。实施例1.取宁夏产枸杞干果5kg，用反渗透饮用纯净水冲淋洗去浮尘。用反渗透饮用纯净水浸提，用量每次50kg，打浆后静态浸提1小时，浸提温度60℃。浸泡提取得的料液经过原位过滤。合并浸提液用0.1μm的精滤膜滤清。收集滤液采用真空浓缩，(QN-300球形真空浓缩)真空浓缩参数为-0.093～-0.098兆帕50～60。浓缩到含固率35％料液6805g。将浓缩好的料液与12kg中性层析氧化铝(100～200目)均匀拌和，送入数显鼓风干燥箱内干燥，设备型号为GZX-9140MBE，内在40℃下干燥48小时，取出干燥物于设备型号为XL20B扣压摇摆粉碎机粉碎，全部过40目筛。收集过筛物料加80％的乙腈43kg拌匀赶走气泡成浆状，将此浆状物料在搅动之下倾入装有过滤底板的层析柱(型号：CXB-16)中。装完后静置1小时后开始洗脱，洗脱溶剂为装柱溶剂，洗脱流量设定为：0.2柱体积/小时，待收集洗脱溶剂量达43kg时改用50％乙腈水溶剂洗脱，洗脱流量不变，洗脱剂用量为43kg停止洗脱。收集的80％洗脱液回收乙腈后所得为枸杞低熔点杂质成分，不作进一步处理。收集50％洗脱液真空浓缩到含干物质20％时停止浓缩，放出浓缩液采用超高温灭菌设备灭菌((120±1℃，电机使用频率25Hz)，然后用喷雾干燥设备喷雾干燥成为最终产品。喷雾干燥进风温度控制在110～120℃，出风温度控制在85～90℃。获得干燥的脱除低熔点杂质枸杞提取物粉末产物1072g。检测所得脱除低熔点杂质枸杞提取物粉末产物中枸杞酸含量为：3.3％；枸杞多糖含量为：3.5％。(HPLC外标法对枸杞酸的检测和采用GB/T18672-2002中的枸杞多糖测试方法。实施例2.称取宁夏产枸杞干果5kg，用反渗透饮用纯净水冲淋洗去浮尘。用反渗透饮用纯净水浸提，用量每次50kg，打浆后静态浸提1小时，浸提温度60℃。浸泡提取得的料液经过原位过滤。合并浸提液用0.1μm的精滤膜滤清。收集滤液液采用真空浓缩，真空浓缩条件为-0.093～-0.098兆帕50～60。浓缩到含固率34％料液7235g。将浓缩好的料液与7.5kg中性层析硅胶(100～200目)均匀拌和，送入鼓风烘箱内在40℃下干燥48小时，取出干燥物粉碎全部过40目筛。收集过筛物料加85％的乙醇63kg拌匀赶走气泡成浆状，将此浆状物料在搅动之下倾入装有过滤底板的层析柱中。装完后静置1小时后开始洗脱，洗脱溶剂为装柱溶剂，洗脱流量设定为：0.2柱体积/小时，待收集洗脱溶剂量达到63kg时改用55％乙醇水溶剂洗脱，洗脱流量不变，洗脱剂用量达63kg时停止洗脱。收集85％的洗脱液回收乙醇后所得为枸杞低熔点杂质成分，不作进一步处理。收集55％洗脱液真空浓缩到含干物质20％时停止浓缩，放出浓缩液采用超高温灭菌设备灭菌((120±1℃，电机使用频率25Hz)，然后用喷雾干燥设备喷雾干燥成为最终产品。喷雾干燥进风温度控制在110～120℃，出风温度控制在85～90℃。获得干燥的脱除低熔点杂质枸杞提取物粉末产物1174g。检测所得脱除低熔点杂质枸杞提取物粉末产物中枸杞酸含量为：3.6％；枸杞多糖含量为：3.2％。(HPLC外标法对枸杞酸的检测和采用GB/T18672-2002中的枸杞多糖测试方法。)实施例3.称取宁夏产枸杞干果5kg，用反渗透饮用纯净水冲淋洗去浮尘。用反渗透饮用纯净水浸提，用量每次50kg，打浆后静态浸提1小时，浸提温度60℃。浸泡提取得的料液经过原位过滤。合并浸提液用0.1μm的精滤膜滤清。收集滤液液采用真空浓缩，真空浓缩条件为-0.093～-0.098兆帕50～60。浓缩到含固率36.2％料液6768g。将浓缩好的料液与24.5kg原木纤维粉均匀拌和，送入鼓风烘箱内在40℃下干燥48小时，取出干燥物粉碎全部过40目筛。收集过筛物料加82％的异丙醇162kg拌匀赶走气泡成浆状，将此浆状物料在搅动之下倾入装有过滤底板的层析柱中。装完后静置1小时后开始洗脱，洗脱溶剂为装柱溶剂，洗脱流量设定为：0.2柱体积/小时，待收集洗脱量达到2倍柱体积162kg时改用52％异丙醇溶剂洗脱，洗脱流量不变，洗脱剂用量达162kg时停止洗脱。收集82％的洗脱液浓缩得到枸杞低熔点杂质成分，不作处理。收集52％洗脱液真空浓缩到含干物质20％时停止浓缩，放出浓缩液采用超高温灭菌设备灭菌((120±1℃，电机使用频率25Hz)，然后用喷雾干燥设备喷雾干燥成为最终产品。喷雾干燥进风温度控制在110～120℃，出风温度控制在85～90℃。获得干燥的脱除低熔点杂质枸杞提取物粉末产物1205g。检测所得脱除低熔点杂质枸杞提取物粉末产物中枸杞酸含量为：3.1％；枸杞多糖含量为：3.2％。(HPLC外标法对枸杞酸的检测和采用GB/T18672-2002中的枸杞多糖测试方法。实施例4本发明改进提取工艺试验：通常在植物提取学科的知识范畴里，极性偏低的水溶性小分子化合物一般都熔点低而且易吸潮。如果是在总提取物中含量较高就会导致总提取物容易吸潮，并且难以被干燥。要改变总提取物的易吸潮与难干燥缺点，本发明人不单需要从总提取物中将这些造成提取物易吸潮难干燥的水溶性小分子化合物脱除同时还要满足提取物产品质量的设计要求,枸杞多糖含量为3％～4％,枸杞酸含量3％～5％的质量标准。因而，为找到同时满足上述两个条件,发明人公开本专利基础性的提取参数研究。以下列举提取条件的正交实验研究。以多糖和枸杞酸为检测指标，设计4因素3水平正交实验获得兼顾多糖和枸杞酸的提取参数。枸杞水提正交实验结果1.枸杞水提正交实验多糖指标枸杞水提正交实验多糖指标计划表所在列12345因素水量(B)温度(℃)时间(h)粉碎实验结果实验15250.5整粒0.002实验25601切碎0.028实验351002打浆0.051实验410251打浆0.039实验510602整粒0.019实验6101000.5切碎0.044实验715252切碎0.037实验815600.5打浆0.046实验9151001整粒0.031枸杞水提正交实验多糖指标直观分析表所在列1234因素水量(B)温度(℃)时间(h)粉碎实验结果实验111110.002实验212220.028实验313330.051实验421230.039实验522310.019实验623120.044实验731320.037实验832130.046实验933210.031均值10.0270.0260.0310.017均值20.0340.0310.0330.036均值30.0380.0420.0360.045极差0.0110.0160.0050.028实验结论:①水量增加有利于多糖成分的提取；②温度提升同样有利于多糖提取；③提取时间也是与多糖的提取率成正比；④提取前的材料粉碎很重要，也就是说明材料必须要与提取剂的充分接触。2.枸杞水提正交实验枸杞酸指标枸杞水提正交实验枸杞酸指标计划表所在列12345因素水量(B)温度(℃)时间(h)粉碎实验结果实验15250.5整粒0.001实验25601切碎0.034实验351002打浆0.027实验410251打浆0.033实验510602整粒0.017实验6101000.5切碎0.019实验715252切碎0.031实验815600.5打浆0.038实验9151001整粒0.008枸杞水提正交实验枸杞酸指标直观分析表所在列1234因素水量(B)温度(℃)时间(h)粉碎实验结果实验111110.001实验212220.034实验313330.027实验421230.033实验522310.017实验623120.019实验731320.031实验832130.038实验933210.008均值10.0210.0220.0190.009均值20.0230.0300.0250.028均值30.0260.0180.0250.033极差0.0050.0120.0060.024实验结论:①水量同样有利于枸杞酸成分的提取；②温度在提取时的控制很重要，60℃时理想，温度过高对枸杞酸不利；③提取时间1小时与2小时无差别；④提取前的材料粉碎很重要，也就是说明材料必须要与提取剂充分接触。综合上述正交实验的结论，本发明人认为，如要在提取物中保有较高含量枸杞酸和枸杞多糖，就必须选择下列条件：提取用水10倍左右，提取温度控制在60℃左右，提取时间1小时，并且提取前对原材料需要打浆处理等。根据正交实验结果实施了对提取率的考察。提取率实验研究：提取率考察实验设计：(提取时原料打浆)*原料内多糖含量2.1％；枸杞酸含量1.5％考察实验结果显示，根据转移率最优原则，提取参数宜定为10倍提取水量，60℃提取1小时,原材料打浆。当前第1页1 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