本发明属于医药技术领域，具体涉及一种含有卢立康唑的外用乳膏组合物及其制备方法和用途。
背景技术：
真菌性皮肤病是皮肤组织部位真菌感染的结果。真菌感染部位可分布于全身皮肤，发病最高的为角质层，其典型代表病症为癣病、念珠菌感染及白癜风。调查显示，皮肤真菌感染患者占皮肤科门诊患者的13％左右，其中包括88.0％的癣病患者、8.5％的念珠菌感染患者和3.4％的白癜风患者，癣病中又有64.0％为足癣。
癣病是一种难治性皮肤疾病，病程缓慢，治疗复发率极高，发病时炎症明显，周边有水疱、脓胞、鳞屑及结痂等皮损现象，且伴有不同程度的瘙痒，严重影响人们的正常生活。癣病包括足癣、体癣、股癣等。足癣是皮肤癣菌侵犯跖趾间皮肤所引起的浅部真菌感染，俗称“脚气”。足癣很常见，世界各地均有，是真菌病中发病率最高的一种。在我国城市中成人发病率可达60％以上，不但可以传染自己，还可以传染他人，是产生手癣、体癣、股癣和甲癣的根源。体癣是发生在平滑皮肤上的浅层真菌感染。股癣是特指发生在腹股沟、会阴部和肛门周围的皮肤真菌感染。
念珠菌感染是由念珠菌属，尤其是白色念珠菌引起的一种真菌病。该病原菌既可侵犯皮肤和粘膜，又能累及内脏。最常见的皮肤念珠菌感染包括指间糜烂和擦烂。指间糜烂多见于长期浸泡于水中的作业人员，以3-4指间最为常见，指间皮肤浸渍发白，去除浸渍的皮肤，呈界限清楚的湿润面，基底潮红，可有少量渗液。擦烂是发生在皱折部位的皮肤急性炎症，表现为皮肤红斑、肿胀、潮湿、多汗、表皮浸渍，易有糜烂及浆液渗出，继发感染可形成微小脓疱及溃疡，白癜风是后天因皮肤色素脱失而发生的局限性白色斑片，是一种常见病、多发病，为皮肤病中三大顽症之一。世界上各色人种、各种民族均可得病。全世界发病率约在1—2％左右。我国大约在2％左右。白癜风虽无自觉症状，但给患者精神上造成极大痛苦，严重影响美容和社会交往。
卢立康唑是日本农药株式会社开发的咪唑类抗真菌药物，较早即开始非临床试验及乳膏的Ⅰ期临床试验、Ⅱ期临床试验第一阶段，其后由于战略原因停止了开发进程。90年代日本农药株式会社与Pola化工株式会社签署协议共同开发，Pola化工株式会社于2001开始乳膏的Ⅱ期临床试验第二阶段及Ⅲ期临床试验，并进行了洗剂的Ⅰ期临床试验及与乳膏的对比试验。最终本药于2005年6月获得批准，2005年7月20日起以商品名ルリコン(Lulicon)上市，乳膏及洗剂规格均为1％，用于下列真菌感染：癣病--脚癣、体癣、股癣；念珠菌感染—指间糜烂症、擦烂；癜风。
体外抗菌活性测定中，卢立康唑显示了其广谱强效抗菌性。在对发癣菌属、念珠菌属、表皮癣菌属等多个菌种的的抗菌试验中，卢立康唑的MIC值均小于现在经常使用的各抗真菌药物。
体内抗菌试验：进行了卢立康唑及现有抗真菌药物对豚鼠足癣、体癣、念珠菌感染等模型治疗效果的对比试验，结果证实了卢立康唑对足癣、体癣、念珠菌感染等的疗效均好于现在常用的药物。
卢立康唑，中文名:4-(2，4-二氯苯基)-1，3-二硫戊环-2-叉-1-咪唑基乙腈，CAS:187164-19-8，分子量:354.2774，结构式如下：
上述化合物结构中咪唑环中氮原子存在孤对电子，易被氧化形成为氮氧化物，暂称为杂质X，结构如下：
脂质体(liposome)是一种药物载体。是由具有类似生物膜结构的磷脂双分子层构成的小囊泡。它可以将药物包埋在直径为亚微米或纳米级的脂质微粒中，这种微粒具有类似生物细胞膜结构，在体内可以生物降解，无免疫原性。进入人体后可以改变被包封药物的体内分布，使药物主要分布在肝、脾、肺和淋巴等组织器官中，因而有一定的器官靶向性。脂质体具有可以保护药物活性基团，延长药物的半衰期，提高药物的治疗指数，减少药物的毒副反应等特点。脂质体还是解决难溶性药物发挥其生物活性的又一利器，其应用领域包括药品、基因治疗、医用材料、疫苗、生物制剂、农药、化妆品和保健品等。同时由于脂质体双分子层结构和细胞膜类似，故其做为外用药物载体，可以促进药物渗透的作用。
醇质体是专门用于药物透皮吸收的一种特殊的脂质体载体，由touitou等首先提出，用较高浓度的醇代替脂质体中的胆固醇。与普通脂质体相比，具有粒径更小，包封率高，载药量大，有更好的柔性，透皮效率高，皮肤滞留量大的优点，因此醇质体在新型经皮给药系统研究中备受瞩目。
致密有序的角质层是药物透皮吸收的屏障，醇质体作为药物载体促进药物透皮吸收的机制主要有两种：①穿透机制：醇质体形成的囊泡结构携带药物直接穿透角质层，由于磷脂层中高浓度(20％～45％)的醇存在(乙醇，异丙醇，丙二醇等)，醇质体比脂质体有更好的柔性和膜的流动性，因此穿透深度要比脂质体深很多，药物透皮效率显著提高；②融合机制：醇质体的磷脂与角质层脂质融合，角质层致密有序的结构被打乱，同时药物从囊泡中释放出来，独自透入皮肤。
醇的加入，是醇质体透皮效率增强的主要原因。一方面，醇本身就具有促渗透作用，可以降低角质层脂质的临界温度，增加其流动性；另一方面，醇的加入使醇质体的粒径更小，囊泡结构的流动性更强，zeta电位也发生了利于渗透的变化。
萜烯类化合物广泛存在于中药挥发油中，是很多驱风通窍中药的有效成分。近年来，萜烯类化合物作为天然的经皮促透剂在外用制剂中得到了广泛研究与应用，由于这类成分毒副刺激性甚小，部分已被美国FDA称为GRAS化合物(generally regardedas safe，公认的安全药物)，因此，萜烯类经皮促透剂已成为经皮给药系统中的热点研究领域。大部分萜烯类化合物作为经皮促透剂可促进不同极性药物有效成分的透皮吸收，显示出良好的促透效果。
桉叶油醇又称1,8-桉树脑，是一种无色至淡黄色油状透明液体。有樟脑气息和清凉的草药味道。沸点176℃，熔点1～1.5℃，闪点47～48℃。溶于乙醇、乙醚、氯仿、冰醋酸、丙二醇、甘油和大多数非挥发性油，微溶于水。天然品存在于桉叶油等200余种天然精油中。结构如下：
由于卢立康唑水溶性较差，较难制得水溶性制剂，例如喷剂，溶液剂等。
因此急待开发一种性质稳定的卢立康唑制剂，尤其是外用制剂，在制剂研究中同时关注制剂中的原料药的氧化降解和增强皮肤渗透作用，从而大大增强制剂的稳定性和药效。
技术实现要素：
为降低制剂中原料药氧化降解杂质的产生并增强其皮肤渗透作用。发明人经过研究，得到一种含有卢立康唑的外用乳膏组合物，由主药卢立康唑，透皮促进剂桉叶油醇，抗氧剂维生素E，油相溶剂丙二醇，乳化剂聚山梨酯80，助乳化剂单硬脂酸甘油酯，增稠剂十八醇，水相溶剂纯化水组成，该组合物通过如下步骤进一步制备成乳膏剂：
步骤一：取卢立康唑原料药超微粉碎，平均粒径小于20μm，备用；
步骤二：取油相溶剂丙二醇，水浴加热至60℃，依次取处方量抗氧剂维生素E，卢立康唑，透皮促进剂桉叶油醇，增稠剂十八醇，助乳化剂单硬脂酸甘油酯搅拌，溶解，为油相；
步骤三：取水相溶剂，水浴加热至60℃，搅拌溶解乳化剂聚山梨酯80，以0.1M NaOH或HCl调节pH值至6.0-7.0，为水相；
步骤四：在真空，搅拌状态下，将水相加入到油相中，降温，持续搅拌，直至体系温度降低至室温，得到含有卢立康唑的乳膏；
步骤五：取步骤四所得卢立康唑乳膏，灌装于塑料软膏管中，得成品。
所述含有卢立康唑的外用乳膏组合物，单位制剂处方组成如下：
上述含有卢立康唑的外用乳膏组合物，加入脂质体技术，进一步制备成外用脂质体乳膏剂，由主药卢立康唑，透皮促进剂桉叶油醇，抗氧剂维生素E，脂质溶剂乙醇，大豆卵磷脂，油相溶剂丙二醇，乳化剂聚山梨酯80，助乳化剂单硬脂酸甘油酯，增稠剂十八醇，水相溶剂纯化水组成，该组合物通过如下步骤进一步制备成外用乳膏剂：
步骤一：取卢立康唑原料药超微粉碎，平均粒径小于20μm，备用；
步骤二：取油相溶剂丙二醇，水浴加热至60℃，依次取处方量增稠剂十八醇，助乳化剂单硬脂酸甘油酯搅拌，溶解，为油相；
步骤三：取水相溶剂，水浴加热至60℃，搅拌溶解乳化剂聚山梨酯80，以0.1M NaOH或HCl调节pH值至6.0-7.0，为水相；
步骤四：在真空状态下，将水相加入到油相中，降温，持续搅拌，直至体系温度降低至室温，得到空白乳膏基质；
步骤五：取处方量大豆卵磷脂，卢立康唑原料药，抗氧剂维生素E，透皮促进剂桉叶油醇溶解于适量无水乙醇中，为脂质溶液，备用；
步骤六：取纯化水适量，以0.1M NaOH或HCl调节pH值至6.0-7.0，为脂质体水相，40℃，在搅拌条件下，将步骤五所得脂质溶液，以配25号针头的注射器沿水相旋转方向反向，在贴近容器壁处注入到脂质体水相中，减压蒸发，挥去乙醇，得到卢立康唑脂质体混悬液；
步骤七：取步骤六所得卢立康唑脂质体混悬液，与步骤四所得空白乳膏基质，混合，搅拌均匀，得到卢立康唑脂质体乳膏；
步骤八：取步骤七所得卢立康唑脂质体乳膏，灌装于塑料软膏管中，得成品。
所述含有卢立康唑的外用脂质体乳膏组合物，单位制剂处方组成如下：
更进一步的，上述含有卢立康唑的外用乳膏，加入醇质体技术，进一步制备成外用醇质体乳膏剂，由主药卢立康唑，透皮促进剂桉叶油醇，抗氧剂维生素E，大豆卵磷脂，脂质溶剂丙二醇，乳化剂聚山梨酯80，助乳化剂单硬脂酸甘油酯，增稠剂十八醇，水相溶剂纯化水组成，该组合物通过如下步骤进一步制备成乳膏剂：
步骤一：取卢立康唑原料药超微粉碎，平均粒径小于20μm，备用；
步骤二：依次取处方量增稠剂十八醇，助乳化剂单硬脂酸甘油酯，水浴加热至60℃，搅拌，溶解，为油相；
步骤三：取水相溶剂，水浴加热至60℃，搅拌溶解乳化剂聚山梨酯80，以0.1M NaOH或HCl调节pH值至6.0-7.0，为水相；
步骤四：在真空状态下，将水相加入到油相中，降温，持续搅拌，直至体系温度降低至室温，得到空白乳膏基质；
步骤五：取处方量大豆卵磷脂，卢立康唑原料药，抗氧剂维生素E，透皮促进剂桉叶油醇溶解于处方量丙二醇中，为脂质溶液，备用；
步骤六：取纯化水适量，以0.1M NaOH或HCl调节pH值至6.0-7.0，为醇质体水相，40℃，在搅拌条件下，将步骤五所得脂质溶液，以配25号针头的注射器沿水相旋转方向方向，在贴近容器壁处注入到醇质体水相中，得到卢立康唑醇质体混悬液；
步骤七：取步骤六所得卢立康唑醇质体混悬液，与步骤四所得空白乳膏基质，混合，搅拌均匀，得到卢立康唑醇质体乳膏；
步骤八：取步骤七所得卢立康唑脂质体乳膏，灌装于塑料软膏管中，得成品。
所述含有卢立康唑的外用醇质体乳膏组合物，单位制剂处方组成如下：
通过如下实验进一步说明本发明专利申请
针对卢立康唑原料容易氧化降解的缺陷，发明人拟通过在制剂体系中加入抗氧剂的方式，避免氧化反应的发生，并通过添加透皮促进剂，采用脂质体及醇质体技术，增加卢立康唑外用制剂的透皮性能，增强药物疗效。
试验证明所得乳膏剂各项检测均符合标准，同时氧化降解杂质的生成被显著抑制，大大增加及了产品的稳定性，透皮性能由于加入了透皮促进剂，采用脂质体及醇质体技术亦显著提高，达到了本发明最初的目的。
实验一：不同抗氧剂浓度下，药物及大豆卵磷脂的氧化程度
本试验主要考察以乙醇为溶剂，在不同抗氧剂，及抗氧剂浓度下，4小时内，抗氧剂对卢立康唑和大豆卵磷脂的稳定作用，经检测所用卢立康唑原料药中氧化降解杂质，即杂质X，含量为0.005％，大豆卵磷脂过氧化值以usp40方法测定为3。试验条件及对应条件下氧化杂质含量如下所示：
表1不同条件下，抗氧化剂对卢立康唑的保护作用
表2不同条件下，抗氧化剂对大豆卵磷脂的保护作用(大豆卵磷脂氧化程度以过氧化值POV计)
如上数据可以看出，维生素E对卢立康唑和大豆卵磷脂氧化的保护的作用，明显优于其他三种抗氧剂，并且0.01％-0.05％的维生素E即对卢立康唑及大豆卵磷脂氧化具有明显的抑制作用。
实验二：卢立康唑乳膏处方筛选试验
设计如下处方组成：
制备工艺：
步骤一：取卢立康唑原料药超微粉碎，平均粒径小于20μm，备用；
步骤二：取油相溶剂丙二醇，水浴加热至60℃，依次取处方量抗氧剂维生素E，卢立康唑，透皮促进剂桉叶油醇，增稠剂十八醇，助乳化剂单硬脂酸甘油酯搅拌，溶解，为油相；
步骤三：取水相溶剂，水浴加热至60℃，搅拌溶解乳化剂聚山梨酯80，以0.1M NaOH或HCl调节pH值至6.0-7.0，为水相；
步骤四：在真空状态下，将水相加入到油相中，降温，持续搅拌，直至体系温度降低至室温，得到含有卢立康唑的乳膏；
步骤五：取步骤四所得卢立康唑乳膏，灌装于塑料软膏管中，得成品。
试验结果分析：上述处方1-4乳膏成型较好，色泽均匀，质地细腻，具适当粘稠性，易涂布于皮肤上，无砂砾感。
实验三：卢立康唑脂质体乳膏处方筛选试验
设计如下处方组成：
制备步骤如下：
步骤一：取卢立康唑原料药超微粉碎，平均粒径小于20μm，备用；
步骤二：取油相溶剂丙二醇，水浴加热至60℃，依次取处方量增稠剂十八醇，助乳化剂单硬脂酸甘油酯搅拌，溶解，为油相；
步骤三：取水相溶剂，水浴加热至60℃，搅拌溶解乳化剂聚山梨酯80，以0.1M NaOH或HCl调节pH值至6.0-7.0，为水相；
步骤四：在真空状态下，将水相加入到油相中，降温，持续搅拌，直至体系温度降低至室温，得到空白乳膏基质；
步骤五：取处方量大豆卵磷脂，卢立康唑原料药，抗氧剂维生素E，透皮促进剂桉叶油醇溶解于适量无水乙醇中，为脂质溶液，备用；
步骤六：取纯化水适量，以0.1M NaOH或HCl调节pH值至6.0-7.0，为脂质体水相，40℃，在搅拌条件下，将步骤五所得脂质溶液，以配25号针头的注射器沿水相旋转方向反向，在贴近容器壁处注入到脂质体水相中，减压蒸发，挥去乙醇，得到卢立康唑脂质体混悬液；
步骤七：取步骤六所得卢立康唑脂质体混悬液，与步骤四所得空白乳膏基质，混合，搅拌均匀，得到卢立康唑脂质体乳膏；
步骤八：取步骤七所得卢立康唑脂质体乳膏，灌装于塑料软膏管中，得成品。
试验结果分析：上述处方1-4乳膏成型较好，色泽均匀，质地细腻，具适当粘稠性，易涂布于皮肤上，无砂砾感。
实验四：卢立康唑醇质体乳膏处方筛选试验
设计如下处方组成：
制备步骤如下：
步骤一：取卢立康唑原料药超微粉碎，平均粒径小于20μm，备用；
步骤二：依次取处方量增稠剂十八醇，助乳化剂单硬脂酸甘油酯，水浴加热至60℃，搅拌，溶解，为油相；
步骤三：取水相溶剂，水浴加热至60℃，搅拌溶解乳化剂聚山梨酯80，以0.1M NaOH或HCl调节pH值至6.0-7.0，为水相；
步骤四：在真空状态下，将水相加入到油相中，降温，持续搅拌，直至体系温度降低至室温，得到空白乳膏基质；
步骤五：取处方量大豆卵磷脂，卢立康唑原料药，抗氧剂维生素E，透皮促进剂桉叶油醇溶解于处方量丙二醇中，为脂质溶液，备用；
步骤六：取纯化水适量，以0.1M NaOH或HCl调节pH值至6.0-7.0，为醇质体水相，40℃，在搅拌条件下，将步骤五所得脂质溶液，以配25号针头的注射器沿水相旋转方向方向，在贴近容器壁处注入到醇质体水相中，得到卢立康唑醇质体混悬液；
步骤七：取步骤六所得卢立康唑醇质体混悬液，与步骤四所得空白乳膏基质，混合，搅拌均匀，得到卢立康唑醇质体乳膏；
步骤八：取步骤七所得卢立康唑脂质体乳膏，灌装于塑料软膏管中，得成品。
试验结果分析：上述处方1-4乳膏成型较好，色泽均匀，质地细腻，具适当粘稠性，易涂布于皮肤上，无砂砾感。
实验五：实验三所得脂质体及实验四所得醇质体的包封率
取实验三所得卢立康唑脂质体及实验四所得醇质体样品适量，以离心超滤法分离游离药物，分别计算游离药物和被包裹药物量，以被包裹药物量/(被包裹药物量+游离药物量)*100％为包封率，所得结果如下：
由上表数据可以看出，以实验三所述处方和工艺制备的卢立康唑脂质体和醇质体包封率良好，均超过95％，接近100％，可见卢立康唑分子虽然水溶水溶性不好，但是脂溶性良好，并且与磷脂双分子层具有良好的相容性，可以以镶嵌方式存在于双分子层中，故脂质体及醇质体的包封率均很高。
实验六：脂质体及醇质体粒径检测
取实验三所得卢立康唑脂质体及醇质体样品适量，以动态光散射法测定粒径，所得结果如下表所示：
由于采用注入法制备，过程中脂质混合物和水相接触时，经过了极大的剪切力，故所得脂质体及醇质体粒径较小。
实验七：乳膏，脂质体及醇质体外用乳膏体外释放：
取实验二所得外用乳膏，实验三所得脂质体及实验四醇质体外用乳膏样品适量(样品编号A1-A4，B1-B4，C1-C4)，另取市售卢立康唑普通乳膏(LUZU)为对照样品D，以截留分子量为3500的半透膜评价三者的膜透过性能。
方法如下：
体外释放实验将截留分子量3500的透析袋剪开为透析膜，将透析膜置于2％(m/V)碳酸氢钠和1mmol/L依地酸二钠(pH＝8.0)中，煮沸10min，放冷，然后将透析膜用蒸馏水彻底漂洗，备用。以Franz扩散池为释放装置。将透析膜固定于供给池和接收池之间，精密称取1.0g样品均匀涂布于半透膜上，涂布面积，1cm2，释放接收液为0.5％十二烷基硫酸钠生理盐水溶液，体积6.4mL，温度为(37±1)℃，磁力搅拌速度300r/min。分别于15min，30min，1h，2h，4h，6h，8h，12h，16h取样，每次取样1mL，同时补加1mL生理盐水。样品以0.45um微孔滤膜过滤后进行HPLC测定药品含量，计算药品释放百分数。如下表所示：
如上表数据可以看出，与市售卢立康唑乳膏样品D相比，样品A，B，C透过速率均有所增加，顺序为C>B>A，即醇质体乳膏>脂质体乳膏>加促透剂乳膏>普通乳膏。
实验四：乳膏，脂质体及醇质体外用乳膏体外经皮释放
取实验二所得外用乳膏，实验三所得脂质体及实验四醇质体外用乳膏样品适量(样品编号A1-A4，B1-B4，C1-C4)，另取按实施例四制备卢立康唑普通乳膏为对照样品D，以乳猪皮肤评价三者的膜透过性能。方法如下：
将乳猪颈动脉放血处死，用电动剃刀去毛，剥取皮肤，用植皮刀制备成均一厚度，-80℃保存备用。
采用垂直Franz扩散试验仪考察样品的经皮渗透释放量。取乳猪皮肤置于生理盐水中洗净。将其角质层朝上固定在扩散池的供给池与接受池之间，排尽气泡，循环水保持(37±0.5)℃。接受池内加入预先脱气的接受介质，为35ml 0.5％十二烷基硫酸钠生理盐水溶液，加搅拌子以300r·min-1的速度搅拌。精密称取1.0g样品均匀涂布于皮肤上，涂布面积为3.3cm2，分别于2、4、8、18、20、22和24h取样1mL，并补充等量同温的接收液。样品以0.45um微孔滤膜过滤后进行HPLC测定药品含量，计算药品累计释放百分数。如下表所示：
由上表数据可知，促透剂桉叶油醇，脂质体，醇质体的技术的引入，逐渐增加了普通乳膏的24小时皮肤累计透过量，即醇质体乳膏>脂质体乳膏>加促透剂乳膏>普通乳膏。
试验五：乳膏，脂质体及醇质体外用乳膏抗真菌活性
取实验二所得外用乳膏，实验三所得脂质体及实验四所得醇质体外用乳膏样品适量(样品编号A1-A4，B1-B4，C1-C4)，另取市售卢立康唑普通乳膏(LUZU)为对照样品D，以黑曲霉测定器抗真菌活性。
方法如下：在25℃下在琼脂平板上培养黑曲霉：
以约0.4ml无菌水中制备真菌培养物悬浮液并静置20分钟，然后转移到固体琼脂培养基中，其中菌株以冻干形式存在。将真菌培养悬浮液(0.1ml)与9.9ml液体培养基(无琼脂)混合，并在25℃的培养箱中接种24小时。
将含有真菌培养悬浮液(1mL)的接种液体培养液加入到琼脂培养基的无菌培养皿中。通过顺时针和逆时针方向的平板旋转将接种物均匀地铺展在固体琼脂表面。以无菌软木塞钻孔器在培养基中间打孔(孔直径18mm)，用于填入药物样品。将平板在25℃温育。在48小时内在药物周围出现清楚抑菌圈。抑菌圈的大小与制剂的抗真菌效果成正比。三种制剂的抑菌圈数据如下表所示：
如上表所示，按本发明实验二，实验三及实验四所得的乳膏样品抑菌作用均优于市售品。
实验六：产品刺激性试验：
取实验二所得外用乳膏，实验三所得脂质体及实验四醇质体外用乳膏样品适量(样品编号A1-A4，B1-B4，C1-C4)。
新西兰兔24只，分为正常皮肤组和破损皮肤组，每组1只。采用同体左右侧自身对比法。试验前24h对给药区进行脱毛处理，左右各一块，去毛范围3cm*3cm。破损皮肤组在用药部位划“井”字，以渗出血为度。左侧脱毛处分别涂抹样品A1-A4，B1-B4，C1-C4乳膏0.5g，右侧涂等量空白对照乳膏。贴敷时间4h，每天一次，连续28天。贴敷结束后，除去供试品并用温水或无刺激性溶剂清洁给药部位。每次涂药前仔细观察涂药处皮肤有无红斑或水肿，停药后继续观察3天。
试验结果，在给药期和观察期内。在全光谱灯光下肉眼观察兔给药部位与对照部位皮肤均未见红斑形成。也未见糜烂、溃疡等病变。镜下检查。正常皮肤组和破损皮肤组空白对照部位表皮完整。表面无角化不全。颗粒层、棘层厚度正常。细胞未见变性、坏死。真皮血管无明显的扩张或充血。间质无水肿。毛囊、皮脂腺等皮肤附件结构清楚。正常皮肤组和破损皮肤组给位表皮各层组织结构完整。真皮无血管扩张、充血及炎性细胞浸润。
试验七耐热耐寒试验：
取实验二所得外用乳膏，实验三所得脂质体及实验四醇质体外用乳膏样品适量(样品编号A1-A4，B1-B4，C1-C4)适量，分别置于55℃恒温6小时及-15℃放置24小时，观察是否分层，结果如下：
实验八：12个月加速稳定性实验
取实验二所得外用乳膏，实验三所得脂质体及实验四醇质体外用乳膏样品适量(样品编号A1-A4，B1-B4，C1-C4)，另取市售卢立康唑普通乳膏(LUZU)为对照样品D(含包装)，分别置40℃±2℃，75％±5％RH条件下存储12个月，分别于0月，1月，3月，6月，12月，取样测定相关性质，得到相应数据，如下表所示：
表5四种制剂样品稳定性比较
由上表数据可以看出，依本发明所述实验二所得外用乳膏，实验三所得脂质体及实验四醇质体外用乳膏样品，在40℃±2℃，75％±5％RH加速条件下，12个月存储后，其含量，有关物质均有所变化，但是含量均超过98.5％，氧化杂质及最大单一杂质均小于0.05％，总杂质均低于1.0％；与之相对应，市售卢立康唑乳膏经过加速12个月存储后，其含量下降至约95％，氧化杂质超过1.3％，最大单一杂质超过1.1％，总杂质则超过4.0％。
基于如上分析，依本发明所述实验二所得外用乳膏，实验三所得脂质体及实验四醇质体外用乳膏样品在加速条件下，存储12个月后的数据显示，其稳定性明显好于市售乳膏，即通过本发明的处方和工艺使卢立康唑乳膏的稳定性得到了明显增强，氧化及水解杂质的生成得到显著抑制，从而使得本发明具有突出的实质性特点和显著进步，并具有实用性。
具体实施方式
通过以下实验进一步说明本发明的有益效果。但并不局限于下述实施例，本领域的技术人员在本发明基础上所作的，不脱离本发明实质内容的等同替代或变换，亦均在本发明的保护范围之内。
实施例1卢立康唑乳膏剂制备(单位：g)
制备工艺：
步骤一：取卢立康唑原料药超微粉碎，平均粒径小于20μm，备用；
步骤二：取油相溶剂丙二醇，水浴加热至60℃，依次取处方量抗氧剂维生素E，卢立康唑，透皮促进剂桉叶油醇，增稠剂十八醇，助乳化剂单硬脂酸甘油酯搅拌，溶解，为油相；
步骤三：取水相溶剂，水浴加热至60℃，搅拌溶解乳化剂聚山梨酯80，以0.1M NaOH或HCl调节pH值至6.0-7.0，为水相；
步骤四：在真空状态下，将水相加入到油相中，降温，持续搅拌，直至体系温度降低至室温，得到含有卢立康唑的乳膏；
步骤五：取步骤四所得卢立康唑乳膏，灌装于塑料软膏管中，得成品。
实施例2卢立康唑脂质体乳膏剂制备
处方组成：
制备步骤如下：
步骤一：取卢立康唑原料药超微粉碎，平均粒径小于20μm，备用；
步骤二：取油相溶剂丙二醇，水浴加热至60℃，依次取处方量增稠剂十八醇，助乳化剂单硬脂酸甘油酯搅拌，溶解，为油相；
步骤三：取水相溶剂，水浴加热至60℃，搅拌溶解乳化剂聚山梨酯80，以0.1M NaOH或HCl调节pH值至6.0-7.0，为水相；
步骤四：在真空状态下，将水相加入到油相中，降温，持续搅拌，直至体系温度降低至室温，得到空白乳膏基质；
步骤五：取处方量大豆卵磷脂，卢立康唑原料药，抗氧剂维生素E，透皮促进剂桉叶油醇溶解于适量无水乙醇中，为脂质溶液，备用；
步骤六：取纯化水适量，以0.1M NaOH或HCl调节pH值至6.0-7.0，为脂质体水相，40℃，在搅拌条件下，将步骤五所得脂质溶液，以配25号针头的注射器沿水相旋转方向反向，在贴近容器壁处注入到脂质体水相中，减压蒸发，挥去乙醇，得到卢立康唑脂质体混悬液；
步骤七：取步骤六所得卢立康唑脂质体混悬液，与步骤四所得空白乳膏基质，混合，搅拌均匀，得到卢立康唑脂质体乳膏；
步骤八：取步骤七所得卢立康唑脂质体乳膏，灌装于塑料软膏管中，得成品。
实施例3卢立康唑醇质体乳膏剂制备
处方组成：
制备步骤如下：
步骤一：取卢立康唑原料药超微粉碎，平均粒径小于20μm，备用；
步骤二：依次取处方量增稠剂十八醇，助乳化剂单硬脂酸甘油酯，水浴加热至60℃，搅拌，溶解，为油相；
步骤三：取水相溶剂，水浴加热至60℃，搅拌溶解乳化剂聚山梨酯80，以0.1M NaOH或HCl调节pH值至6.0-7.0，为水相；
步骤四：在真空状态下，将水相加入到油相中，降温，持续搅拌，直至体系温度降低至室温，得到空白乳膏基质；
步骤五：取处方量大豆卵磷脂，卢立康唑原料药，抗氧剂维生素E，透皮促进剂桉叶油醇溶解于处方量丙二醇中，为脂质溶液，备用；
步骤六：取纯化水适量，以0.1M NaOH或HCl调节pH值至6.0-7.0，为醇质体水相，40℃，在搅拌条件下，将步骤五所得脂质溶液，以配25号针头的注射器沿水相旋转方向方向，在贴近容器壁处注入到醇质体水相中，得到卢立康唑醇质体混悬液；
步骤七：取步骤六所得卢立康唑醇质体混悬液，与步骤四所得空白乳膏基质，混合，搅拌均匀，得到卢立康唑醇质体乳膏；
步骤八：取步骤七所得卢立康唑脂质体乳膏，灌装于塑料软膏管中，得成品。