本发明属于医药
技术领域：
，具体的涉及到一种含有依诺肝素钠的注射用依诺肝素钠及其制备方法。
背景技术：
：依诺肝素钠(enoxaparinsodium)，是一种低分子的肝素钠盐，系由猪小肠黏膜提取的肝素经苄基酯化后，碱降解获得的硫酸氨基葡聚糖片段的钠盐，为多糖混合物，平均分子量为4500道尔顿左右。1933年获得fda批准，在美国上市，其主要作用机制在于通过与抗凝血酶及其复合物结合抑制xa因子和ⅱa因子的活性，其主要适应症包括：预防活动受限患者发生的深度静脉血栓、预防腹部手术存在血栓栓塞并发症患者的深度静脉血栓、与阿司匹林合用预防不稳定型心绞痛和无q波心肌梗塞患者发生的动脉血栓、与华法林合用用于无肺栓塞的急性深度静脉栓塞的患者、由各种原因引起的弥漫性血管内凝血、也用于血管透析、体外循环、导管术、微血管手术等操作中及某些血液标本或器械的抗凝处理。依诺肝素钠具有较强的抗xa活性和较低的抗ⅱa活性，因此相对于普通肝素，具有低抗凝、高抗栓、生物利用度高、作用时间长、使用方便和出血作用少的优点。由于普通肝素在临床使用上的不便和具有较大的副作用，因此依诺肝素钠在临床上使用量远远大于肝素钠。通过对依诺肝素钠结构和理化性质的分析，发现其主链上不饱和的半缩醛结构，使依诺肝素钠对热和氧化剂极不稳定，致使依诺肝素钠制剂在放置过程中，发生变质。依诺肝素钠注射液通常的生产工艺为：将依诺肝素钠原料溶解在冷却后的注射用水中，然后无菌过滤和灌装，最后检查、包装。按上述工艺生产出来的依诺肝素钠注射液的ph、颜色和活性稳定性方面较差，特别是加速实验过程中，加速实验后期，药物呈现稳定性不好的情况，包括ph出现较大幅度的下降、颜色发生明显变化、药液效价降低等，因此按照普通无菌工艺生产的注射液存在一定的质量问题。专利cn102085178a通过氮气保护和ph调节工艺来增加溶液的稳定性，但实际操作繁琐，给生产带来不变的同时并不能从根本上解决水中氧含量的问题，导致溶液颜色在长期放置和加速试验中逐渐加深，引起活性下降。专利cn104013570b公开了一种依诺肝素钠注射液的处方，处方中通过添加指定类型的抗氧剂和调节ph工艺应用于依诺肝素钠注射液的制备。具体由依诺肝素钠、维生素c、l-半胱氨酸及注射用水配制而成，ph调节剂调节注射液ph值为5.5～7.5。与现有技术相比，依诺肝素钠注射液在稳定性上大大提高，但处方中添加了两种原研未含的辅料维生素c和l-半胱氨酸，会增加产品临床使用过程中安全性和有效性的风险。介于依诺肝素钠注射液的ph、颜色和效价稳定性方面较差，特别是加速实验过程中，药物稳定性不好的情况，包括ph出现的大幅度的下降、颜色变化和药液效价降低等。因此仍有必要提供一种稳定的依诺肝素钠制剂，使产品具有较好的稳定性，方便临床用药。技术实现要素：本发明提供了一种注射用依诺肝素钠及其制备方法，注射用依诺肝素钠中含有依诺肝素钠和ph调节剂盐酸或氢氧化钠，制备方法包括以下步骤：a.称取25℃以下的60％注射用水，加依诺肝素钠溶解后混合均匀，用ph调节剂盐酸或氢氧化钠调节溶液ph值至6.5～7.5；b.溶液中补加注射用水至处方量；c.经0.22μm的pvdf滤芯过滤，得到每1ml含依诺肝素钠10000axaiu；d.灌装得到每瓶中含有依诺肝素钠的浓度为3000axaiu:0.3ml、4000axaiu:0.4ml、6000axaiu:0.6ml、8000axaiu:0.8ml。根据本发明的注射用依诺肝素钠及其制备方法，原料药依诺肝素钠的细菌内毒素的量小于0.008eu/iu。根据本发明的注射用依诺肝素钠及其制备方法，ph调节剂盐酸或氢氧化钠，调节溶液ph值至6.5～7.5。根据本发明的注射用依诺肝素钠及其制备方法，冻干工艺包括预冻、一次干燥和解析干燥三个步骤。根据本发明的注射用依诺肝素钠及其制备方法，预冻包括如下步骤，制品温度降至-20℃后，进行保温1h，然后将隔板温度降至-40℃，保温2h。根据本发明的注射用依诺肝素钠及其制备方法，一次升华步骤将隔板温度升至-25℃，保持约9～13h。根据本发明的注射用依诺肝素钠及其制备方法，解析干燥步骤将隔板温度升至0℃，保持约1～3h。后隔板温度升至20℃，待样品至10℃左右关闭加热，充氮气，压塞。发明人研究发现，将依诺肝素钠注射液制备成注射用依诺肝素钠，具有如下优势：1)注射用依诺肝素钠比依诺肝素钠注射液更稳定，依诺肝素钠注射液受外界温度影响大，在高温条件，依诺肝素钠注射液溶液的颜色会出现明显的变化，在6个月的加速试验中，依诺肝素钠注射液的颜色由黄色1号变为大于黄色8号，远超标准。而本发明生产的注射用依诺肝素钠在加速试验中，各项指标未出现明显变化，甚至在30天的60℃高温试验后，各项指标均保持稳定，颜色小于黄色1号。2)更好的给药便利性，对于大剂量的患者注射用依诺肝素钠40mg使用方便，减少给药次数，降低感染风险，减少痛苦。例如治疗剂量每公斤100iu，75kg的患者，需要用到7500iu，4000iu的依诺肝素钠注射液要打两支，而4000iu的注射用依诺肝素钠可以溶在一起打一针即可，减少病人挨针痛苦。注射用依诺肝素钠相对于依诺肝素钠注射液给药更为便利。3)运输的便利性。注射用依诺肝素钠为2ml的西林瓶包装，10支/盒，占用空间小配送方便。而依诺肝素钠注射液相同大小的盒子仅装2支，占据临床使用空间，且运输不方便。发明人研究发现，当注射用依诺肝素钠的ph值控制在6.5～7.5时，注射用依诺肝素钠具有更优的稳定性。当ph值低于6.5或者ph值高于7.5时，发现制备的注射用依诺肝素钠会出现颜色变深和效价降低的现象。发明人研究发现，当注射用依诺肝素钠的一次干燥的隔板温度控制在-25℃保持约9～13h，解析干燥的隔板温度控制在0℃，保持约1～3h。后隔板温度升至20℃，待样品至10℃左右关闭加热，充氮气，压塞。产品具有更优的浊度和外观。根据本发明，能够得到更加稳定，含有依诺肝素钠的抗凝制剂。本发明采用冻干工艺制备注射用依诺肝素钠，工艺简单，成本节约，更适合商业化生产。具体实施方式为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，特给出以下具体实施例，但本发明不限定于以下实施例。实施例1：备注：*代表在冷冻干燥工艺中去除。处方1的制备方法为：称取25℃以下的60％注射用水，加依诺肝素钠溶解后混合均匀，用ph调节剂盐酸或氢氧化钠调节溶液ph值至目标ph值7.0；溶液中补加注射用水至处方量；经0.22μm的pvdf滤芯过滤，得到每1ml含依诺肝素钠10000axaiu；灌装得到每瓶中含有依诺肝素钠的浓度为4000axaiu:0.4ml的溶液(充氮)。处方2的制备方法为：称取25℃以下的60％注射用水，加依诺肝素钠溶解后混合均匀，用ph调节剂盐酸或氢氧化钠调节溶液ph值至目标ph值7.0；溶液中补加注射用水至处方量；经0.22μm的pvdf滤芯过滤，得到每1ml含依诺肝素钠10000axaiu；灌装得到每瓶中含有依诺肝素钠的浓度为4000axaiu:0.4ml的溶液。然后将所得溶液进行冻干，冻干过程包括如下步骤，预冻制品温度降至-20℃后，进行保温1h，然后将隔板温度降至-40℃，保温2h；一次升华步骤将隔板温度升至-25℃，保持约11h；解析干燥步骤将隔板温度升至0℃，保持约2h后，隔板温度升至20℃，待样品至10℃左右关闭加热，充氮气，压塞。分别将参比制剂8s275、处方1和处方2分别放置在加速条件下(40℃、75％rh)考察稳定性情况，考察结果见表1加速条件下的稳定性。表1：加速条件下稳定性批号检测项加速0月加速6月8s275溶液颜色黄色1号黄色8号处方1溶液颜色黄色1号黄色8号处方2溶液颜色小于黄色1号小于黄色1号结果分析：从原研依诺肝素钠注射液和自制依诺肝素钠注射液加速条件下溶液颜色由加速0月的黄色1号变为加速6月的黄色8号，颜色随着稳定性时间的增加，颜色变深；而注射用依诺肝素钠颜色未发现显著加深的现象，加速0月和6月均为小于黄色1号。实施例2：备注：*代表在冷冻干燥工艺中去除。制备方法为：称取25℃以下的60％注射用水，加依诺肝素钠溶解后混合均匀，用ph调节剂盐酸或氢氧化钠调节溶液ph值至目标ph值；溶液中补加注射用水至处方量；经0.22μm的pvdf滤芯过滤，得到每1ml含依诺肝素钠10000axaiu；灌装得到每瓶中含有依诺肝素钠的浓度为4000axaiu:0.4ml的溶液。然后将所得溶液进行冻干，冻干过程包括如下步骤，预冻制品温度降至-20℃后，进行保温1h，然后将隔板温度降至-40℃，保温2h；一次升华步骤将隔板温度升至-25℃，保持约11h；解析干燥步骤将隔板温度升至0℃，保持约2h后，隔板温度升至20℃，待样品至10℃左右关闭加热，充氮气，压塞。实施例3：备注：*代表在冷冻干燥工艺中去除。制备方法为：称取25℃以下的60％注射用水，加依诺肝素钠溶解后混合均匀，用ph调节剂盐酸或氢氧化钠调节溶液ph值至目标ph值；溶液中补加注射用水至处方量；经0.22μm的pvdf滤芯过滤，得到每1ml含依诺肝素钠10000axaiu；灌装得到每瓶中含有依诺肝素钠的浓度为3000axaiu:0.3ml的溶液。然后将所得溶液进行冻干，冻干过程包括如下步骤，预冻制品温度降至-20℃后，进行保温1h，然后将隔板温度降至-40℃，保温2h；一次升华步骤将隔板温度升至-25℃，保持约9h；解析干燥步骤将隔板温度升至0℃，保持约2h后，隔板温度升至20℃，待样品至10℃左右关闭加热，充氮气，压塞。实施例4：备注：*代表在冷冻干燥工艺中去除。制备方法为：称取25℃以下的60％注射用水，加依诺肝素钠溶解后混合均匀，用ph调节剂盐酸或氢氧化钠调节溶液ph值至目标ph值；溶液中补加注射用水至处方量；经0.22μm的pvdf滤芯过滤，得到每1ml含依诺肝素钠10000axaiu；灌装得到每瓶中含有依诺肝素钠的浓度为6000axaiu:0.6ml的溶液。然后将所得溶液进行冻干，冻干过程包括如下步骤，预冻制品温度降至-20℃后，进行保温1h，然后将隔板温度降至-40℃，保温2h；一次升华步骤将隔板温度升至-25℃，保持约13h；解析干燥步骤将隔板温度升至0℃，保持约1h后，隔板温度升至20℃，待样品至10℃左右关闭加热，充氮气，压塞。实施例5：备注：*代表在冷冻干燥工艺中去除。制备方法为：称取25℃以下的60％注射用水，加依诺肝素钠溶解后混合均匀，用ph调节剂盐酸或氢氧化钠调节溶液ph值至目标ph值；溶液中补加注射用水至处方量；经0.22μm的pvdf滤芯过滤，得到每1ml含依诺肝素钠10000axaiu；灌装得到每瓶中含有依诺肝素钠的浓度为10000axaiu:1.0ml的溶液。然后将所得溶液进行冻干，冻干过程包括如下步骤，预冻制品温度降至-20℃后，进行保温1h，然后将隔板温度降至-40℃，保温2h；一次升华步骤将隔板温度升至-25℃，保持约9h；解析干燥步骤将隔板温度升至0℃，保持约3h后，隔板温度升至20℃，待样品至10℃左右关闭加热，充氮气，压塞。当前第1页12