专利名称：用作神经激肽拮抗剂的杂环类化合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的具有治疗作用的杂环类化合物，更具体地讲，本发明涉及对一种内源性神经肽速激酶(也被称为神经激肽)的药理学作用，特别是对神经激肽2(NK2)受体上的药理学作用具有拮抗作用的新的4-取代的哌啶衍生物。每当需要这种拮抗作用时，所述新的具有治疗作用的杂环类化合物就具有了实用性。因此，这类化合物在治疗与NK2受体有关的疾病方面，例如在治疗哮喘和有关的疾病方面可能是有价值的。本发明还涉及用于此类治疗目的的含有所述新的具有治疗作用的杂环类化合物的药物组合物，它们的使用方法，以及制备所述新的具有治疗作用的杂环类化合物的方法和中间体。
哺乳动物神经激肽包括在外周和中枢神经系统中发现的一类肽类神经递质。P物质(SP)、神经激肽A(NKA)和神经激肽B(NKB)是三种重要的神经激肽。还有至少NKA的N-末端扩展形式。对于所述三种重要的神经激肽已知有至少三种受体类型。根据它们分别激动所述神经激肽SP、NKA和NKB的相对选择性，将所述受体分别分类为神经激肽1(NK1)受体、神经激肽2(NK2)受体和神经激肽3(NK3)受体。在外周神经系统中，SP和NKA位于C-传入感觉神经元，所述神经元的特点在于无髓鞘神经末梢，也就是被称作的C-类纤维神经，并且SP和NKA是通过这些神经元的选择性除极作用或者通过所述C-类纤维神经的选择性刺激作用释放的。C-类纤维神经位于气道的上皮并且已知速激肽能引起与哮喘中所观察到许多症状十分相似的更深层的作用。在哺乳动物气道中，速激肽的释放或引入的后果包括支气管狭窄、微血管通透性的提高、血管舒张以及肥大细胞的激活，因此，所述速激肽与在哮喘中观察到的病理生理学和气道的高应答性有关；而阻滞速激肽的释放作用可以用于治疗哮喘以及有关的疾病。
有关肽类NK2拮抗剂已有过报导。例如，环状六肽，也被称为L-659,877已作为选择性NK2拮抗剂报导过。也报导了非肽类NK2拮抗剂例如还有在欧洲专利申请，公开号为428434、474561、512901、512902、5152440和559538中所公开的某些哌啶类化合物。在国际专利申请，公开号为WO94/10146中还公开了一系列哌啶NK2拮抗剂。
我们现已发现了一系列新的非肽类NK2拮抗剂，这一发明构成本发明的基础。我们的发现一方面包括4-取代的哌啶子基衍生物，其中所述4-取代基为N-键连的杂环(如下述定义)。例如，我们发现，在下述试验A中所述体外筛选试验和下述试验B中所述功能测定试验中，下列实施例1中所述4-(2-氧代-1，3-氧氮杂环戊烷-3-基)哌啶子基化合物是一种有效的NK2拮抗剂。
本发明提供了一种本发明化合物，所述本发明化合物即为式I化合物(分子式列于下列实施例后，它与其它分子式一起用罗马数字表示)，其中m为2或3；D为式Ia或式Ib残基，其中Q为可带有一个或两个取代基的苯基，所述取代基独立地选自卤素、三氟甲基、羟基、(1-3C)烷氧基、(1-3C)烷基和亚甲二氧基；或者Q为噻吩基、咪唑基、苯并[b]噻吩基或萘基，其中任何一个基团都可带有卤素取代基；或者Q为联苯基；或者Q为在1-位上可带有苄基取代基的碳-键连的吲哚基；
Qa为氢、(1-4C)烷基或式-(CH2)q-NR5R6基团，其中q为2或3以及R5和R6独立地为(1-4C)烷基或者NR5R6为哌啶子基或4-苄基哌啶子基；R1为氢、甲基或可带有末端氨基基团的(2-6C)正-烷基；R2为-C(＝O)R3、-C(＝O)OR3或-C(＝J1)NHR3，其中J1为氧和硫并且R3为氢、(1-6C)烷基、苯基(1-3C)烷基(其中所述苯基可以带有一个或多个卤素、羟基、(1-4C)烷氧基或(1-4C)烷基取代基)、吡啶基(1-3C)烷基、萘基(1-3C)烷基、吡啶硫基(1-3C)烷基、苯乙烯基、1-甲基咪唑-2-基硫基(1-3C)烷基、芳基(其可以带有一个或多个卤素、羟基、(1-4C)烷氧基或(1-4C)烷基取代基)、杂芳基(其可以带有一个或多个卤素、羟基、(1-4C)烷氧基或(1-4C)烷基取代基)，或者(当R2为-COR3时)为α-羟基苄基；n为0、1、2或3；p为1或2，并且当p为2时，n为1和J2为两个氢；J2为氧或两个氢；L6为羰基或亚甲基；r为0、1、2或3；和R4为可带有一个或多个卤素、三氟甲基、(1-4C)烷基、羟基或(1-4C)烷氧基取代基(并且特别是一个或多个氯或氟取代基)的苯基；可带有一个或多个卤素、三氟甲基、(1-4C)烷基或羟基取代基的萘基；吡啶基；噻吩基；吲哚基；喹啉基；苯并噻吩基或咪唑基；或者当L6为羰基时，所述基团-(CH2)r-R4可表示芳基、杂芳基或者带有α-取代基的苄基，所述α-取代基选自羟基、(1-4C)烷氧基和(1-4C)烷基，并且其中所述芳基、杂芳基或者所述苄基的苯基部分可带有一个或多个取代基，所述取代基独立地选自卤素、三氟甲基、(1-4C)烷基、羟基和(1-4C)烷基、羟基和(1-4C)烷氧基(并且特别是一个或多个氯或氟取代基)；G表示单键、双键或二价烃基；当G表示双键时，J表示通过单键与所述环连接的基团，否则，J表示通过双键连接的基团；M表示杂原子或被取代的杂原子；和L表示其中1-位与M相连接的烃基，其中G、J、M和L选自(a)G为单键；J为氧代或硫代；M为氧、硫或NR12；和L为L1；(b)G为单键；J为NR8；M为NR7；和L为L1；(c)G为双键；J为OR7、SR7或NR9R10；M为氮；和L为L1；(d)G为亚甲基，其可以带有一个或两个甲基取代基；J为氧代、硫代或NR11；M为氧、硫、亚磺酰基、磺酰基或NR7；和L为L2；(e)G为单键；J为氧代、硫代或NR11；M为氮；和L为L3；(f)G为次甲基，其可以带有(1-3C)烷基取代基；J为氧代、硫代或NR11；M为氮；和L为L4；和(g)G为顺-1，2-亚乙烯基，其可以带有一个或两个甲基取代基；J为氧代、硫代或NR11；M为氮；和L为L5；其中R7为氢或(1-3C)烷基；R8为氢、(1-3C)烷基、氰基、(1-3C)烷基磺酰基或硝基；R9和R10独立地为氢或(1-3C)烷基或者基团NR9R10为吡咯烷-1-基、哌啶子基、吗啉代、硫代吗啉代(或其S-氧化物)或哌嗪-1-基(在其4-位上可带有(1-3C)烷基取代基)；
R11为氢或(1-3C)烷基；R12为氢、(1-3C)烷基、RaOC(＝O)CH2-或RbRcNC(＝O)CH2-；Ra为氢或(1-3C)烷基；Rb和Rc独立地为氢、(1-3C)烷基、苯基或苄基；L1为1，2-亚乙基、顺-1，2-亚乙烯基、三亚甲基或四亚甲基，其中基团L1本身可以带有一个或两个甲基取代基；L2为1，2-亚乙基或三亚甲基，其中基团L2本身可以带有一个或两个甲基取代基；L3为1，3-亚丙-2-烯基，其中基团L3本身可以带有一个或两个甲基取代基；L4为顺-1，2-亚乙烯基，其中基团L4本身可以带有一个或两个甲基取代基；L5为次甲基，其中基团L5本身可以带有(1-3C)烷基取代基；或者所述式I化合物的由Δ标引的哌啶子基氮原子的N-氧化物；或者所述式I化合物或所述N-氧化物的药物上可接受的盐；或者所述式I化合物的季铵盐，其中由Δ标引的哌啶子基氮原子为四配价铵氮原子，其中所述氮原子上的第四个基团为(1-4C)烷基或苄基并且所述有关的抗衡离子为药物上可接受的阴离子。
可以理解的是，式I化合物含有一个或多个不对称取代的碳原子，因此，此化合物可以被分离成光学活性体、外消旋体和/或非对映体。还可以理解的是，式I化合物可以以互变异构体形式存在并且化合物可以具有同质多晶现象。可以理解的是，本发明包括任何外消旋体、光学活性体、非对映体、互变异构体、多晶型物或立体异构体或者它们的混合物，这些形式均具有NK2拮抗剂性质，而如何制备光学活性体(例如，通过对所述的外消旋体进行拆分或者通过由光学活性起始原料进行合成)以及如何用下文所述标准试验测定NK2拮抗剂的性质是本领域公知的。优选可以使用特征在于含有例如至少95％，98％或99％对映体过量形式的所述式I化合物。进一步可以优选使用式I化合物，其为式Ic化合物，其特征在于含有例如至少95％，98％或99％的在分子式中由*标引的手性中心具有(S)-构型的对映体过量的化合物。
在本申请文件中，Ra、Rb、R1、R2等代表一般性基团而不具有其它意义。可以理解的是，所述一般性术语“(1-3C)烷基”包括直链和支链烷基基团，但是，对于各个具体烷基基团例如“丙基”则只是包括直链(“正链”)基团，而支链异构体例如“异丙基”有具体的明示。其它一般性基团可以相似地转换，例如烷氧基、链烷酰基等。卤素指氟、氯、溴或碘。
下列所述基团、取代基和化合物的范围的特别优选的定义只是用于说明目的并不排除其它所限定的定义或者在所限定的所述基团和取代基范围内的其它定义。
特别优选的是，m为2。
特别优选的是，(1-6C)烷基为甲基、乙基、丙基、异丙基或丁基。
特别优选的是，(1-3C)烷基为甲基或乙基。
当D为式Ia时，特别优选的是，Qa为氢，特别优选的是，R1为甲基以及特别优选的是，R2为-COR3。特别优选的是，R3为芳基，并且更优选的是苯基，所述芳基(或苯基)可以带有一个或两个氯或氟取代基。
当D为式Ib时，特别优选的是，n为1或2；特别优选的是，p为1；特别优选的是，J2为两个氢；特别优选的是，L6为羰基；特别优选的是，r为0或1；以及特别优选的是，R4为可带有一个或两个卤素或(1-4C)烷氧基取代基并且特别是氯、氟或异丙氧基取代基的苯基。
特别优选的是，Q为例如可带有一个或两个选自卤素、三氟甲基和亚甲二氧基取代基的苯基；并且更优选的是3，4-二氯苯基或3，4-亚甲二氧基苯基。
特别优选的是，G为例如单键或亚甲基；并且更优选的是单键。特别优选的是，J为例如氧代、硫代、亚氨基、甲基亚氨基或乙基亚氨基；并且更优选的是氧代或硫代。特别优选的是，M为氧、硫或NH；并且更优选的是氧或NH。特别优选的是，L为例如1，2-亚乙基、顺-1，2-亚乙烯基或三亚甲基；并且更优选的是1，2-亚乙基或三亚甲基。
特别优选的一组式I化合物为式Ic化合物，其中Qb为可带有一个或两个取代基的苯基，所述取代基独立地选自卤素、三氟甲基、羟基、(1-3C)烷氧基、(1-3C)烷基和亚甲二氧基；或者Qb为噻吩基、咪唑基、苯并[b]噻吩基或萘基，它们中的任何一个基团都可带有卤素取代基；或者Qb为联苯基；或者Qb为可在1-位带有苄基取代基的碳-键连的吲哚基；T和U独立地为氢、卤素、羟基、(1-3C)烷基或(1-3C)烷氧基；W为(1-3C)烷基；以及G、J和M如式I中相应基团的定义；或者所述式I化合物的由Δ标引的哌啶子基氮原子的N-氧化物；或者所述式I化合物或所述N-氧化物的药物上可接受的盐；或者所述式I化合物的季铵盐，其中由Δ标引的哌啶子基氮原子为四配价铵氮原子，其中所述氮原子上的第四个基团为(1-4C)烷基或苄基并且所述有关的抗衡离子为药物上可接受的阴离子。
其它特别优选的式I化合物为式Ic化合物及其药物上可接受的盐，其中R12为氢或(1-3C)烷基；T和U为氢并且W为甲基。
优选的化合物包括(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氢嘧啶-1--基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺；(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(3-甲基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺；(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(3-乙基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺和(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-乙基苯甲酰胺，及其药物上可接受的盐。
具体的化合物如下列实施例中所述。
药物上可接受的盐为与可提供生理上可接受的阴离子的酸形成的盐。药物上可接受的盐包括与可提供生理上可接受的阴离子的强无机酸和有机酸形成的盐，所述酸为例如盐酸、硫酸、磷酸、甲磺酸或对甲苯磺酸。
所述化合物可以通过化学领域中公知的制备结构相似的杂环化合物的方法制备。如上所述，制备式I化合物；所述式I化合物的由Δ标引的哌啶子基氮原子的N-氧化物；或者所述式I化合物或所述N-氧化物的药物上可接受的盐；或者所述式I化合物的季铵盐，(其中由Δ标引的哌啶子基氮原子为四配价铵氮原子，其中所述氮原子上的第四个基团为(1-4C)烷基或苄基并且所述有关的抗衡离子为药物上可接受的阴离子)的此类方法和中间体构成本发明的进一步的特征并且通过下述方法得以说明，其中一般性基团的含义，如上述定义，除非另有说明(a)用式IV的醛通过还原烷基化或者用其中Y为离去基团的式V烷基化剂将式II的哌啶进行烷基化。典型的离去基团Y包括例如碘、溴、甲磺酸酯基、对甲苯磺酸酯基、三氟甲磺酸酯基等。所述烷基化反应优选通过常规还原烷基化作用进行，例如，如实施例1中所述，通过就地经过酸催化形成亚铵盐，随后用在醇类溶剂中的氰基硼氢化钠进行还原作用。
(b)对于其中G为单键；J分别为氧代或硫代；M为氧、硫或NR12以及L为L1的式I化合物，分别用碳酸的二活化衍生物或硫代羰基的二活化衍生物将相应的式III化合物环合。碳酸的二活化衍生物包括例如1，1′-羰基二咪唑、氯代甲酸酯(如甲酯、乙酯或苯酯)和碳酸二酯，以及光气、双光气和三光气；而硫代羰基二活化衍生物包括例如1，1＇-硫代羰基二-2(1H)-吡啶酮、1，1′-硫代羰基二咪唑、二硫代氯甲酸苯酯和硫代光气。通常，所述环合反应，例如如实施例3所述，是在约环境温度至所述反应混合物的回流温度之间的温度下，在惰性溶剂例如氯仿、四氢呋喃或甲苯中进行。当所述碳酸二活化衍生物或所述硫代羰基二活化衍生物为酰氯时，可优选向所述环合反应加入作为酸接受体的碱，例如三乙胺。
(c)对于为式Ic化合物的式I化合物，可将式VIII的胺与适宜的酰氯进行反应。所述反应可在-78～100℃，优选-20～50℃温度范围内，在惰性溶剂如四氢呋喃、乙醚、甲苯、氯仿或二氯甲烷中进行。例如，所述反应可以在实施例17中所述相似的反应条件下进行。
(d)对于为式Ic化合物的式I化合物，可将式VIII的胺与活化的羧酸衍生物进行反应。所述反应可以在适宜的活化剂例如1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺存在下，在-78～100℃，优选-20～50℃温度范围内，在惰性溶剂如四氢呋喃、乙醚、甲苯、氯仿或二氯甲烷中进行。例如，所述反应可以在实施例20中所述相似的反应条件下进行。
(e)对于式I化合物的由Δ标引的哌啶子基氮原子的N-氧化物，可用常规方法，例如用过氧化氢的甲醇溶液、过乙酸、3-氯代过氧苯甲酸的惰性溶剂(例如二氯甲烷)溶液或二氧丙环的丙酮溶液将式I化合物中所述由Δ标引的哌啶子基氮原子进行氧化。适宜的反应条件例如如实施例21中所述。
(f)对于其中R12为(1-3C)烷基、RaOC(＝O)CH2-或RbRcNC(＝O)CH2-的式I化合物，可用适宜的相应的烷基化剂将其中R12为氢的相应的式I化合物进行烷基化。所述烷基化反应可在适宜的碱存在下，在-78～100℃，优选0～50℃温度范围内，在惰性溶剂如四氢呋喃、乙醚、甲苯或1，2-二甲氧基乙烷中进行。适宜的反应条件例如如实施例22中所述。
(g)对于式I化合物的季铵盐，可用适宜的烷基化剂将式I化合物中由Δ标引的哌啶子基氮原子进行烷基化。所述烷基化反应可在适宜的碱存在下，在-78～100℃，优选0～50℃温度范围内，在惰性溶剂如四氢呋喃、乙醚、甲苯或1，2-二甲氧基乙烷中进行。
可以理解的是，在上述方法的全过程或部分过程中可以任意地使用保护基；当所述最终产物形成后，可再除去所述的保护基。
在上述任何一步反应之后，当需要获得式I化合物药物上可接受的盐或式I化合物N-氧化物的药物上可接受的盐时，可以将相应的式I化合物或N-氧化物与可提供生理上可接受的抗衡离子的酸进行反应或者通过其它常规方法获得。
还可以理解的是，所述化合物中某些可选择的取代基的变化可以在上述反应之前或者紧随其后通过常规芳基取代反应引入或者通过常规的功能基修饰方法生成。此类反应和修饰方法包括例如引入硝基或卤素以及将硝基还原。此类反应中所用试剂及反应条件是化学领域公知的。
当不能通过商业途径获得时，上述方法中所必须的起始原料可以通过选自下述的方法制备，所述方法包括杂环化学中常规方法、与结构相似的化合物的公知合成方法相似的方法以及与上述方法或实施例中所述方法相似的方法。所述起始原料以及它们的制备方法构成了本发明的另一方面。
制备式III、IV和V起始原料的常规中间体化合物为式VI(或VIc)的醇。其中Qb为3，4-二氯苯基的式VIc醇的制备方法如实施例1，a)-f)中所述；而相应的光学活性的醇的制备方法如实施例2，a)-e)中所述。然后，例如如实施例1.g)所述用草酰氯、二甲亚砜和三乙胺或者如实施例2，f)所述用Dess-Martin preiodinane(1，1，1-三乙酰氧基-1，1-二氢-1，2-benziodoxol-3(1H)-酮)，可将式VI的醇氧化成式IV的醛；或者用常规方法可以将其转化为式V的烷基化剂。用与实施例3，a)-e)中所述相似的方法，可以将式IV的醛转化为相应式III的胺。用与实施例1所述相似的方法，可将式IV的醛转化为式VII的哌啶酮；通过用式VII的哌啶酮将式HM-L-NH进行还原烷基化作用以及用实施例1.h)或实施例3，a)-e)中所述一种相似的方法可以获得式III的胺。
为了制备式II的哌啶起始原料，可将1-被保护的4-哌啶酮用于还原烷基化作用，随后经与上述方法(b)相似的方法进行环合，最后进行脱保护，例如如实施例1，h)-j)所述进行脱保护。通常，式II的哌啶起始原料可以用常规合成方法由1-被保护的4-氨基哌啶或1-被保护的4-哌啶酮获得。
对于本领域技术人员显而易见的是，在制备所述起始原料时可以改变反应的顺序，并且当考虑到所述的合成方法以及根据所存在的基团，可以改变制备所述起始原料和本发明产物的反应顺序。
化合物的实用性可以通过包括下文中所述的常规试验和临床研究得以说明。神经激肽A(NKA)受体结合试验(试验A)在NK2受体上化合物对NKA结合的拮抗能力可以按如下所述利用在小鼠红白血病(MEL)细胞中表达的人NK2受体试验来说明，在小鼠红白血病(MEL)细胞中利用带有高亲和性和选择性NK2受体的MEL细胞膜(MELM)进行人NK2受体表达的。所述附图的简要说明附
图1说明MEL细胞表达载体构建体pMEG3/hNK2R的构建。
附图2说明所述表达载体构建体GSE1417/hNK2R的构建。
附图3说明在MEL C88细胞中人NK2受体的表达。
人NK2受体(hNK2R)的MEL细胞表达在小鼠红白血病(MEL)细胞中进行异源性蛋白表达使用了人球蛋白位点控制区(LCR)(F.Grosveld等人，Cell(1987)51，975-985)。在人β-球蛋白启动子和人β-球蛋白基因的第二内含子之间插入所述的cDNAs，然后将表达盒置于LCR的下游并转染到MEL细胞中(M.Needham等人，Nucl.AcidsRes.(1992)20，997-1003)。经聚合酶链反应由人肺RNA中分离出的人NK2受体cDNA并进行DNA序列分析(A.Graham等人，Biochem.Biophy.Res.Commun.(1991)177，8-16)。将人NK2受体cDNA亚克隆到含有β-球蛋白启动子和人β-球蛋白基因3′区的穿梭载体(pMEG3)中(附图1)，用Eco 0109(5′端)和Bam HI(3′端)对人NK2受体cDNA进行限制消化。将含有内Hind III位点和3′端Eco 0109位点的寡聚核苷酸与hNK2R cDNA片段相连。链顶部的低聚核苷酸序列＝5′d(GCGCAAGCTTATGGG)(SEQ IDNO1)，链底部的低聚核苷酸序列＝5′d(GTCCCCATAAGCTTGCGC)(SEQ IDNO2)。将其退火并用标准方法与hNK2R片段相连，用Hind III裂解后，将所得片段克隆到穿梭载体pMEG3多聚接头的Hind III和Bam HI位点上。用限制图谱和对cDNA/载体的5′端和3′端接点进行定序验证构建体(pMEG3/hNK2R)，然后将其转化到E.coli DH5α中，用标准方法分离质粒DNA并用限制图谱和DNA定序进行验证。切割带有β-球蛋白启动子、人NK2受体cNDA和3′β-球蛋白基因片段的ClaI/Asp718盒并亚克隆到质粒pGSE1417中LCR的下游(附图2)。用ClaI和Asp718将所述pMEG3/hKNK-2R构建体裂解并直接克隆到表达载体GSE1417中ClaI和Asp718位点(LCR的3′)上。用限定图谱验证GSE1417/hNK2R构建体(13.9kb)。转化E.coli DH5α并用限定图谱验证重组体质粒。用经PvuI线性化的pGSE1417/人NK2受体DNA对MEL C88细胞(A.Deisseroth等人，Cell(1978)15，55-63)进行电穿孔(M.Antoniou，MethdsMolecular Biology(1991)7，421-434)。直接转染后，用培养基将细胞稀释到每毫升104和105个细胞并将1mL等分试样转移到24孔培养板的每一孔中。为了选择稳定的转染体，在转染24小时后，加入G418至浓度为1mg/mL。加入选择培养基的7-10天后，挑出每一个克隆或者将其合并以生成群体。附图3说明了用于分离转染的MEL/人NK2受体细胞系的方法。为了对表达进行研究，将细胞维持四天的指数生长，然后加入二甲亚砜(DMSO)，使最终浓度达到2％(v/v)以诱导分化并因此表达。诱导后4天取样，进行mRNA和NKA结合分析。结果表明，克隆#1能以高水平(hNK2R mRNA和特异性NKA结合)表达hNK2R。将此克隆按一定比例扩大并以每月20升的规模进行常规发酵并用于试验A。
按照进行了下列微小变化的已公开的方法(D.Aharony等人，Neuropeptides(1992)23，121-130)，由含有高亲和性NK2受体的MEL细胞制备膜制品(MELM)，所述微小变化包括(1)在均浆缓冲液中含有碘代乙酰胺(1mM)；(2)均浆作用按所公开的方法进行，只是每次进行较短的时间，每次进行10秒钟且较低的转速(设定在10)；和(3)不进行KCl/EDTA的平衡步骤。在典型的制品中，3H-NKA(2.5nM)与MELM之间的结合具有很高的特异性(88±4％)并且与所述蛋白质浓度呈线性相关，在低至26μg蛋白质/mL下均能检测到显著的结合作用。平衡-竞争试验表明与高亲和性、高密度受体结合，KD＝1187nM，Bmax＝2229fmol/mg蛋白质。
由Cambridge Research Biochemicals经常规合成得到放射性配位体3H-神经激肽A(3H-NKA)即[4，5-3H-Leu9]-NKA(典型的比放射性为117Ci/nmol)并且纯度大于95％。重复HPLC分析表明在适当的贮藏条件下(氩气氛下含有0.2％乙硫醇的硅烷化小瓶)所述配位体是稳定的，而且，在所述受体结合试验中没有明显的降解和代谢。
所述试验用培养缓冲液进行，所述培养缓冲液含有50mMTrisHCl(pH7.4)、5mM Mg++、100μMthiorphan、1nM3H-NKA、0.02％(wv)BSA、30mM K+、和300μM二硫苏糖醇；所述膜蛋白质浓度保持在每支试管约0.05-0.025mg。1μM的情况通常记作是非特异性结合。每支试管内加入下列组分150μL培养缓冲液、20μL3H-NKA、20μL化合物，适宜的情况下加入NKA或缓冲液，和125μL膜悬浮液。通过加入所述的膜使反应开始。将所述试管在摇动水浴中于25℃温育60分钟，在使用Whatman GF/B滤膜的Brandel细胞收获系统中通过用10mL冰冷却的50mM Tris HCl洗涤使反应终止以收集所述的膜，所述滤膜在室温下在0.01％(wv)聚乙烯亚胺中已浸泡了至少4小时。在闪烁管中保存所述滤膜并用Beckman LS 6000LL闪烁计数器读数。用标准方法计算结合常数Ki，典型的是所述结合常数Ki通常是数个此类检测结果的平均值。所述Ki值可被转化为负对数并且表示为-log molar Ki(即pKi)。
在开始使用本试验时，测得标准化合物L-659,877对抗3H-NKA与MELM结合的IC50值为30nM。通过用标准方法测定化合物在其它受体上的结合作用(例如，使用对NK1受体有选择性的组织制品中的SP的氚化衍生物或者使用对NK3受体选择性的组织制品中的NKB的氚化衍生物)可以表明，所述化合物在NK2受体上的结合作用具有选择性。
豚鼠试验(试验B)在下列试验中，用NKA或[β-Ala8]-NKA(4-10)作激动剂。在整个描述中，将所选择的激动剂记作AG。在肺组织中化合物拮抗AG作用的能力按如下所述进行的豚鼠气管功能试验来说明。
通过猛击雄性豚鼠的后脑将其处死。分离出气管，除去多余的组织并分成两截。在用水保温(37.5℃)的含有生理盐水溶液的组织浴中，用不锈钢将每一截气管悬浮成环状，上述生理盐水溶液含有下列组分(mM)NaCl，119；KCl，4.6；CaCl2，1.8；MgCl2，0.5；NaH2PO4，1；NaHCO3，25；葡萄糖，11；thiorphan，0.001和消炎痛，0.005；用95％O2-％5CO2连续地充气。在每一组织上最初施加的张力为1g，在加入其它药物之前，维持0.5-1.5小时的平衡期。经Grass FT-03力换能器在Grass多种波动描记器上测定收缩应答。
每隔30分钟用单一浓度的AG(10nM)重复激发组织，通过冲洗令所述张力恢复到基线水平。两次激发后，对AG的收缩程度达到一个恒定水平，并在第三次或随后与所述激发剂接触前15分钟，通过向所述组织浴中加入化合物，对每一种化合物对AG的应答抑制作用进行试验。将有化合物存在下的对AG的收缩应答与所述第二次AG激发(在无化合物存在下)获得的收缩应答进行比较。当化合物产生了统计学意义上显著(p＜0.05)降低收缩作用时，测定百分抑制作用并以第二次收缩应答作为100％进行计算。
用下列标准式计算每一种所试验浓度的表观离解常数(KB)，评估所选择的化合物的效力KB＝[拮抗剂]/(剂量比-1)其中剂量比＝antilog[(AG-log molar EC50(无化合物存在下))-(AG-log molar EC50(有化合物存在下))]。所述KB值可以被转换成负对数并且表示为-log molar KB(即pKB)。评估时，用配对气管环获得无化合物存在下和有化合物存在下(培养时间为30分钟)完整的AG浓度-应答曲线，以每条曲线中最大应答水平的50％测定AG的效力。将所述EC50值转换成负对数并表示为-log molar EC50。通过用由氯化氨甲酰胆碱(30μM)所引起的收缩百分比形式表示的对AG的最大应答来确定对AG的最大收缩应答，所述氯化氨甲酰胆碱是在初始平衡期后加入。当化合物对AG的最大应答产生了统计学意义上显著(p＜0.05)降低时，相对于未处理过的、成对的组织中氯化氨甲酰胆碱的收缩百分比为100％计算所述化合物百分抑制作用。
临床研究表明，化合物的功效可以用标准方法进行测定。例如，用吸入冷空气或者过敏原激发并且通过常规统计学分析方法进行分析，经标准肺测定法，例如FEV1(一秒钟被动呼气量)和FVC(被动肺活量)进行评估，可以说明化合物预防或治疗哮喘或哮喘-样疾病症状的能力。
可以理解的是，在试验A或试验B中，涉及的化合物的活性并不仅限于与哮喘有关，而是所述试验提供了一般性NKA拮抗作用的证据。通常，所试验化合物具有统计学意义上的显著活性，在试验A中，Ki为1μM或更低。例如，典型地是实施例2中所述化合物的Ki为4.1nM。在试验B中，典型地是，测得化合物的PkB为5或更高。例如，对实施例2中所述化合物，测得PKB为8.7。应当注意的是，试验A中以Ki值表示的所测定化合物的活性与在其它试验中所测定的值，例如试验B中所测定的PKB之间通常可能并非总是有直接的相关性。
正如上述讨论，本发明化合物具有NKA拮抗活性。因此，它们可以拮抗NKA的至少一种作用，所述作用已知包括支气管狭窄、微血管通透性的提高、血管舒张以及肥大细胞的激活。因此本发明的一个特点在于应用如上述定义的式I化合物；或者所述式I化合物的由Δ标引的哌啶子基氮原子的N-氧化物；或者所述式I化合物或所述N-氧化物的药物上可接受的盐；或者所述式I化合物的季铵盐(其中由Δ标引的哌啶子基氮原子为四配价铵氮原子，其中所述氮原子上的第四个基团为(1-4C)烷基或苄基并且所述有关的抗衡离子为药物上可接受的阴离子)治疗与NKA有关并且需要这种拮抗作用的人或其它哺乳动物疾病，例如治疗哮喘或其它有关的疾病。另外，本发明的另一个特点在于将如上述定义的式I化合物；或者所述式I化合物的由Δ标引的哌啶子基氮原子的N-氧化物；或者所述式I化合物或所述N-氧化物的药物上可接受的盐；或者所述式I化合物的季铵盐(其中由Δ标引的哌啶子基氮原子为四配价铵氮原子，其中所述氮原子上的第四个基团为(1-4C)烷基或苄基并且所述有关的抗衡离子为药物上可接受的阴离子)用作建立新的疾病模型或者用于开发治疗与NKA有关的疾病或诊断试验的新的治疗剂试验并使其标准化的药理生理学标准。
当用于治疗此类疾病时，化合物通常是以适宜的药物组合物的形式用药，所述药物组合物含有如上述定义的式I化合物；或者所述式I化合物的由Δ标引的哌啶子基氮原子的N-氧化物；或者所述式I化合物或所述N-氧化物的药物上可接受的盐；或者所述式I化合物的季铵盐(其中由Δ标引的哌啶子基氮原子为四配价铵氮原子，其中所述氮原子上的第四个基团为(1-4C)烷基或苄基并且所述有关的抗衡离子为药物上可接受的阴离子)和药物上可接受的稀释剂或载体，所述组合物应与所选择的特定的用药途径相适应。此类组合物构成了本发明的另一个特点。所述组合物可以用常规方法以及常规的赋形剂和粘合剂获得，并且可以以一种不同的剂型存在。所述剂型包括例如片剂、胶囊剂、口服溶液或悬浮液；直肠用栓剂；通过静脉或肌内输注或注射给药的无菌溶液或悬浮液；通过吸入法给药的气雾剂或喷雾溶液或悬浮液；或者通过吹入法用药的与药物上可接受的固体稀释剂例如乳糖一起混合的粉剂。
当口服用药时，通常可以使用含有至多250mg(典型的是5-100mg)的式I化合物。当通过吸入法给人施用式I化合物时，日剂量范围为例如5-100mg，每日单一用药或用药分为2-4次。相似地，当静脉或肌内注射或输注时，通常可以使用含有至多10％w/w(典型的是0.05-5％w/w)的式I化合物的无菌溶液或悬浮液。
考虑到用药途径和病情以及所医治患者的身材和年龄，施用式I化合物的剂量可以根据本领域公知的原则有必要进行改变。但是，通常所述式I化合物是给温血动物(例如人)施用，因此可接受的剂量范围例如为0.01-25mg/kg(并且通常为0.1--5mg/kg)。可以理解的是，通常可以使用等量的N-氧化物或式I化合物药物上可接受的盐或季铵盐。
除非另有说明，本发明将通过下列非限定性实施例加以说明(i)所给温度为摄氏温度(℃)；操作是在室温或环境温度下，也就是在18-25℃温度范围内进行。
(ii)有机溶液用无水硫酸钠干燥；溶剂的蒸发是在热浴温度至多60℃和减压(600-4000帕斯卡；4.5-30mmHg)下用旋转蒸发仪进行；(iii)色谱法即‘闪式色谱法’(Still法)是在MerckKieselgel(Art9385，由E.Merck，Darmstadt，Germany获得)上进行；反相硅胶即为粒径为32-74μ十八烷基甲硅烷(ODS)包覆的支持剂，也称作“PREP-40-ODS”(Art 731740-100，由Bodman Chemicals，Aston，PA，USA获得)；薄层色谱分离(TLC)是在0.25mm硅胶GHLF板(Art21521，由Analtech，Newark，DE，USA获得)上进行；(iv)通常，所述反应进程是根据TLC确定的，而所给出的反应时间只是用于说明目的；(v)熔点未经校正并且(d)表示分解；所述熔点是所获得的制备产物的熔点；多晶型物可导致在一些制备过程中具有不同熔点的产物的分离；
(vi)最终产物具有令人满意的核磁共振(NMR)谱并且经TLC测定为基本上纯的产物；(vii)所给出的产率只是用于说明目的并且所述产率不必是完全按照精细的操作过程获得的产率；当需要更多的物料时，可重复进行制备过程；(viii)所给出的NMR值是相对于内标四甲基甲硅烷(TMS)，以百万分之一(ppm)为单位，用CDCl3作溶剂在300MHz测定的主要特征质子的δ值；使用信号峰形的常规缩写；对于AB谱，报告是直接观测到的位移；(ix)化学符号具有它们通常的含义；使用SI单位和符号；(x)所给出的降低的压力为以帕斯卡(Pa)为单位的绝对压力；所给出的升高的压力为以bar为单位的表压；(xi)所给溶剂比为体积比体积(v/v)；和(xii)质谱(MS)是在化学试剂电离方式中用直接暴露的探头，使用70电子伏特的电子能运行；通常，只记录指示母体质量的峰。
实施例1N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代-1，3-氧氮杂环戊烷-3-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺盐酸盐将N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基苯甲酰胺(0,823g)的甲醇(4ml)溶液加入到4-(2-氧代-1，3-氧氮杂环戊烷-3-基)哌啶(0.600g)和乙酸(0.20ml)的甲醇(8ml)溶液中。5分钟后，以一份加入氰基硼氢化钠(0.220g)的甲醇(4ml)溶液。搅拌3小时后，将所述反应混合物用碳酸氢钠水溶液稀释，搅拌30分钟，并用二氯甲烷萃取。将有机萃取液干燥，蒸发并用二氯甲烷∶甲醇(98∶2，90∶10梯度液)作洗脱剂进行色谱分离。将所得产物溶于二氯甲烷，用氯化氢的乙醚液处理使其以所述盐酸盐的形式沉淀出，蒸发，并在高真空下放置过夜，得到白色固体状标题化合物(0.88g)；MSm/z＝504(M＋1)；元素分析C26H31Cl2N3O3·1.20 HCl计算值C，56.96；H，5.92；N，7.66；实测值C，57.02；H，6.05；N，7.62。
如下所述制备中间体N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基苯甲酰胺。a. 1-溴-2-(四氢吡喃-2-基氧基)乙烷在使内温保持在35-40℃的冷水浴中，于1.5小时内，向在机械搅拌下的二氢吡喃(1L)和强酸离子交换树脂(10.0g)的己烷(2L)溶液中滴加2-溴代乙醇(985g)。于室温下搅拌过夜后，将所述混合物用己烷(6L)进行色谱分离。将洗脱液蒸发得到琥珀色液体，将其用2英寸维格罗分馏柱进行蒸馏，收集75-95℃(3,300-4,700Pa)之间的蒸馏产物。将此产物再蒸馏，得到油状所述醚化合物(1195.5g)；bp80-90℃(2666Pa)；NMR4.68(m，1)，4.01(m，1)，3.89(m，1)，3.77(m，1)，3.52(m，3)，1.75-1.50(m，6)。b. α-[2-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-3，4-二氯苯基乙腈于10℃冰/水浴中，在45分钟内向氢化钠(218.0g，55％油悬浮液)的四氢呋喃(4L)溶液中加入3，4-二氯苯基乙腈(893.0g)的四氢呋喃(2L)溶液，并令所得溶液于室温下搅拌2小时。将所述混合物于冰/水浴中冷却，并在25分钟内以净油状形式滴加1-溴代-2-(四氢吡喃-2-基氧基)乙烷(1076.0g)。将所述混合物于室温下搅拌过夜并分成4份，每份2升。每份用饱和氯化铵(3L)稀释并用乙醚(500ml)萃取，将合并的有机层用氯化铵水溶液洗涤，干燥并蒸发。所得产物用己烷∶二氯甲烷(100∶0，0∶100梯度液)作洗脱剂进行色谱分离，得到油状所述腈化合物(932g)；NMR7.47(m，4)，7.20(m，2)，4.57(m，2)，4.08(m，2)，3.85(m，4)，3.54(m，3)，3.37(m，1)，2.15(m，4)，1.77(m，4)，1.56(m，8)。c. 2-(3，4-二氯苯基)-4-(四氢吡喃-2-基氧基)丁胺向上述腈化物(128.3g)的95％乙醇(1.1L)溶液和浓氢氧化铵(550ml)中加入阮内镍(25.0g)。于3.6bar氢气氛下将所述混合物氢化1.5天。将所述混合物经硅藻土过滤，除去所述催化剂，并将所得滤液蒸发。将所得产物用二氯甲烷∶甲醇(100∶0，95∶5梯度液)作洗脱剂进行色谱分离，得到油状所述胺化合物(91g)；NMR7.40(s，1)，7.38(s，1)，7.32(d，1，J＝2.1)，7.28(d，1，J＝2.0)，7.07(dd，1，J＝2.1，4.9)，7.04(dd，1，J＝2.1，4.9)，4.50(m，1)，4.43(m，1)，3.70(m，4)，3.45(m，2)，3.27(m，1)，3.17(m，1)，2.97-2.75(m，6)，2.00(m，2)，1.82-1.66(m，6)，1.53(m，8)，1.18(brs，4)；MSm/z＝318(M＋1)。d. N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-(四氢吡喃-2-基氧基)丁基]苯甲酰胺向所述胺(2.5g)的二氯甲烷(35ml)溶液中加入三乙胺(1.1ml)和苯甲酸酐(1.85g)，并将所得溶液搅拌45分钟。将所述混合物用0.2N盐酸、1N氢氧化钠和水洗涤，干燥并蒸发，得到油状所述的酰胺化合物(3.3g)；NMR7.63(m，4)，7.46(m，2)，7.37(m，8)，7.09(m，2)，6.22(m，2)，4.50(m，1)，4.43(m，1)，3.8(m，5)，3.63(m，1)，3.5(m，4)，3.36(m，1)，3.23(m，1)，3.11(m，2)，2.06(m，2)，1.90-1.77(m，4)，1.68(m，2)，1.51(m，8)；MSm/z＝338[(M＋1)-四氢吡喃基]。e. N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-(四氢吡喃-2-基氧基)丁基]-N-甲基苯甲酰胺向上述酰胺(3.3g)的二甲亚砜(20ml)溶液中加入粉末状氢氧化钾(1.6g)，15分钟后再加入碘甲烷(1.0ml)。1小时后，将所述混合物用水稀释并用二氯甲烷萃取。将合并的有机萃取液干燥并蒸发，得到油状所述的酰胺化合物(3.1g)；MSm/z＝352[(M＋1)-四氢吡喃基]。f. N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-羟基丁基]-N-甲基苯甲酰胺向上述酰胺(10.5g)的四氢呋喃(100ml)溶液中加入6N盐酸(50ml)，并将所得溶液搅拌过夜。将所述混合物用10N氢氧化钠中和，用水稀释并用二氯甲烷萃取。将有机层干燥并蒸发。将所得黄色固体悬浮于乙醚中并过滤，得到白色固体状所述醇化合物(8.4g)；MSm/z＝352(M＋1)。g. N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基苯甲酰胺于-78℃下向草酰氯(2.6ml)的二氯甲烷(60ml)溶液中加入二甲亚砜(4.2ml)的二氯甲烷(30ml)溶液，随后加入上述醇(8.3g)的二甲亚砜(30ml)和二氯甲烷(30ml)溶液。将所得溶液搅拌30分钟，并加入三乙胺(16.4ml)。将所述混合物热至室温，用二氯甲烷稀释，用1N盐酸、饱和碳酸氢钠水溶液和水洗涤，干燥并蒸发。将所得黄色固体悬浮于乙醚中并过滤，得到白色固体状所述的醛化合物(6.4g)；MSm/z＝350(M＋1)。
如下所述制备中间体4-(2-氧代-1，3-氧氮杂环戊烷-3-基)哌啶。h. 1-于苄氧羰基-4-(2-羟乙氨基)哌啶将1-苄氧羰基-4-氧代哌啶(2.5g)的甲醇(7.0ml)溶液加入到乙醇胺(1.3ml)和乙酸(1.2ml)的甲醇(20ml)溶液中。5分钟后，以一份加入氰基硼氢化钠(1.35g)的甲醇(6ml)溶液。搅拌过夜后，将所述反应混合物用碳酸氢钠水溶液稀释，搅拌30分钟并用二氯甲烷萃取。将合并的有机萃取液蒸发，溶于1N盐酸中，并用二氯甲烷洗涤。水相用1N氢氧化钠碱化并用二氯甲烷萃取。将所述萃取液干燥并蒸发，得到油状所述的氨基醇化合物(1.7g)；NMR(CD3OD)7.34(m，5)，5.10(s，2)，4.13(m，2)，，3.64(m，2)，2.86(m，2)，2.73(m，2)，2.67(m，1)，1.90(m，2)，1.25(m，2)；MSm/z＝279(M＋1)。i. 1-苄氧羰基-4-(2-氧代-1，3-氧氮杂环戊烷-3-基)哌啶将所述氨基醇(1.7g)和1，1′-羰基二咪唑(2.4g)的氯仿(30ml)溶液于回流状态下加热6小时。所述反应混合物用二氯甲烷稀释并用1N氢氧化钠和水洗涤。将分出的有机相干燥并蒸发，得到粘稠油状所述1，3-氧氮杂环戊烷-3-基哌啶(1.9g)；NMR7.35(m，5)，5.1 3(s，2)，4.34(m，4)，3.89(m，1)，3.49(m，2)，2.86(m，2)，1.78(m，2)，1.58(m，2)；MSm/z＝305(M＋1)。j. 4-(2-氧代-1，3-氧氮杂环戊烷-3-基)哌啶将上述1，3-氧氮杂环戊烷-3-基哌啶(1.85g)和20％氢氧化钯/碳(0.340g)的乙醇(30ml)溶液于1bar氢气下搅拌过夜。将所述反应混合物经硅藻土过滤并将滤液蒸发，得到白色固体状所述标题化合物(0.950g)；NMR(CD3OD)4.35(m，2)，3.75(m，1)，3.62(m，2)，3.20(m，2)，2.76(m，2)，1.75(m，4)；MSm/z＝171(M＋1)。
实施例2(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-(2-氧代全氢-1，3-噁嗪-3-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺盐酸盐用实施例1的方法，用4-(2-氧代全氢-1，3-噁嗪-3-基)哌啶代替4-[4-(2-氧代-1，3-氧氮杂环戊烷-3-基)哌啶并用相应(S)-对映体代替N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧基丁基]-N-甲基苯甲酰胺，得到白色固体状所述标题化合物；MSm/z＝518(M＋1)；元素分析C27H33Cl2N3O3·1.55 HCl·0.20(C2H5)2O计算值C，56.61；H，6.24；N，7.12；实测值C，56.54；H，6.60；N，7.38。
如下所述制备(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧基丁基]-N-甲基苯甲酰胺。a. 2-(3，4-二氯苯基)-4-羟丁基胺向机械搅拌下的2-(3，4-二氯苯基)-4-(四氢吡喃-2-基氧基)丁基胺(550g)的甲醇(3300ml)溶液中一次加入6.0N盐酸(352ml)，反应轻微放热。搅拌3小时后，将反应混合物蒸发，并将残余物用水稀释至3升。此溶液用乙醚(500ml×2)萃取，用氢氧化钠颗粒(100g)碱化，并用乙酸乙酯(500ml×4)萃取。将合并的乙酸乙酯萃取液洗涤(800ml饱和氯化钠)，干燥并蒸发，得到琥珀色油状所述的醇化合物(367g)，将其在高真空下固化；NMR7.39(d，1，J＝8.2)，7.28(d，1，J＝2.0)，7.04(dd，1，J＝8.2，2.0)，3.65(m，1)，3.50(m，1)，2.90(m，2)，2.71(m，1)，2.25(m，2)，1.86(m，2)。b. (S)-2-(3，4-二氯苯基)-4-羟丁基胺在机械搅拌下，向回流状态下的D-酒石酸(222g)的甲醇(4ml)溶液中一次加入上述氨基醇(342g)的热甲醇(2L)溶液并用另外的甲醇(1L)冲洗。将所述混合物加热至回流，在达到沸点前开始有结晶生成。回流1.5小时后，将所述溶液逐渐冷却至室温并搅拌3天。吸滤收集第一批酒石酸盐产物并在60℃真空烘箱中干燥，得到所述产物(232g)。将此产物溶于沸腾的甲醇(13.5L)中，并在回流状态下保持1小时，蒸出1L甲醇。将所述混合物逐渐冷却至室温并搅拌4天。吸滤收集第一批结晶并干燥，得到固体(178.8g)。将甲醇滤液蒸发至体积约为3L，将所得悬浮液再加热至回流状态，得到一澄清溶液，将其在搅拌下逐渐冷却至室温。收集第二批结晶产物(43.8g)。将所得氨基醇酒石酸盐的合并产物(222.6g)溶于1.0N氢氧化钠(1.5L)中并用二氯甲烷(500ml×4)萃取，将合并的有机萃取液用盐水洗涤，干燥并蒸发，得到灰白色固体状所述富含光学活性的氨基醇(135.4g)；mp80-2℃；NMR(CD3OD)7.47(d，1，J＝8.3)，7.42(d，1，J＝2.1)，7.17(dd，1，J＝8.2，2.1)，3.47(m，1)，3.34(m，1)，2.83(m，3)，1.92((m，1)，1.74(m，1)；MSm/z＝324(M＋1)。c. (S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-羟基丁基]氨基甲酸乙酯在20分钟内，将氯甲酸乙酯(25.5g)滴加到在机械搅拌下冷却至-30℃的上述氨基醇(50.0g)和三乙胺(24.9g)的二氯甲烷(600ml)溶液中，在加入过程中内温保持在-20—-25℃。然后在4小时内令所述反应混合物逐渐温热至室温，并洗涤(1N盐酸，饱和碳酸氢钠水溶液和饱和氯化钠水溶液)。将分出的二氯甲烷相干燥并蒸发，得到黄色油状所述氨基甲酸酯(65.3g)；NMR(CD3OD)7.44(d，1，J＝8.3)，7.38(d，1，J＝2.1)，7.15(dd，1，J＝8.3，2.1)，3.99(q，2，J＝7.1)，3.45(m，1)，3.29(m，3)，2.97(m，1)，1.92(m，1)，1.75(m，1)，1.16(t，3，J＝7.1)；MSm/z＝306(M＋1)。d. (S)-N-甲基-2-(3，4-二氯苯基)-4-羟丁基胺在30分钟内，将上述氨基甲酸酯(65.3g)的四氢呋喃(500ml)溶液滴加到机械搅拌下的氢化锂铝(16.0g)的四氢呋喃(200ml)溶液中，在加入过程中内温升至45℃。将所述反应混合物在回流状态下加热1小时，然后冷却至室温并搅拌过夜。将所述混合物在冰浴中冷却，并在45分钟内滴加饱和硫酸钠水溶液(50ml)。再另外搅拌1小时后，加入无水硫酸钠固体(50g)。搅拌30分钟后，将所述混合物经硅藻土过滤，并将滤液蒸发，得到黄色油状所述的甲基胺化合物(52.9g)；NMR7.37(d，1，J＝8.2)，7.27(d，1，J＝2.0)，7.01(dd，1，J＝8.2，2.1)，3.69(m，1)，3.53(m，1)，3.40(m，2)，2.76(m，3)，2.45(m，3)，1.89(m，2)；MSm/z＝248(M＋1)。e. (S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-羟基丁基]-N-甲基苯甲酰胺在45分钟内，将苯甲酰氯(31.5g)的二氯甲烷(200ml)溶液滴加到机械搅拌下的上述胺(52.9g)和三乙胺(54.0g)的二氯甲烷(1L)溶液中，用冰浴冷却以维持内温为5-8℃。将所述反应混合物于室温下搅拌3小时，然后洗涤(1N盐酸，盐水)。将分出的二氯甲烷层蒸发，得到一黄色油状物，将其用二氯甲烷∶甲醇(100∶0，95∶5梯度液)作洗脱液进行色谱分离，得到白色固体状所述苯甲酰胺(65.6g)；mp123-5℃；MSm/z＝352(M＋1)；[a]D＝-18.3°(c＝2.46，CH3OH)。f. (S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基苯甲酰胺将上述醇(12.9g)的二氯甲烷(150ml)溶液用插管引入到Dess-Martinperiodinane(18.6g)和叔丁醇(4.5ml)的二氯甲烷(150ml)溶液中。搅拌5分钟后，所述反应混合物用乙醚(600ml)和碳酸氢钠(19.7g)和硫代硫酸钠五水合物(64.5g)的水(825ml)溶液稀释。将此两相系统剧烈搅拌直至明显地分成两层(约30分钟)。将分出的有机层洗涤(饱和碳酸氢钠水溶液)，干燥并蒸发。所述粗产物用二氯甲烷∶乙醚(1∶1)作洗脱剂进行色谱分离，由乙醚中沉淀并过滤，得到白色固体状所述的醛(9.7g)；MSm/z＝350(M＋1)。
如下所述制备中间体4-(2-氧代全氢-1，3-噁嗪-3-基)哌啶。g. 1-苄氧羰基-4-(3-羟丙基氨基)哌啶用实施例1.h的方法，用3-氨基-1-丙醇代替乙醇胺，得到油状所述的氨基哌啶；NMR(CD3OD)7.35(m，5)，5.10(s，2)，4.12(m，2)，3.62(t，2，J＝6.2)，2.86(m，2)，2.71(m，2)，2.65(m，1)，1.90(m，2)，1.71(m，2)，1.24(m，2)；MSm/z＝293(M＋1)。h. 1-苄氧羰基-4-(2-氧代全氢-1，3-噁嗪-3-基)哌啶用实施例1.i的方法，用1-苄氧羰基-4-(3-羟丙基氨基)哌啶代替1-苄氧羰基-4-(2-羟乙基氨基)哌啶，得到油状所述的噁嗪-3-基哌啶；NMR(CD3OD)7.35(m，5)，5.11(s，2)，4.22(m，5)，3.24(m，2)，2.88(m，2)，1.99(m，2)，1.69(m，4)；MSm/z＝319(M＋1)。i. 4-(2-氧代全氢-1，3-噁嗪)哌啶用实施例1.j的方法，用1-苄氧羰基-4-(2-氧代全氢-1，3-噁嗪-3-基)哌啶代替1-苄氧羰基-4-(2-氧代全氢-1，3-氧氮杂环戊烷-3-基)哌啶，得到非晶体、白色固体状脱保护的哌啶；NMR(CD3OD)4.24(m，2)，4.12(m，1)，3.32(m，2)，3.22(m，2)，2.78(m，2)，2.03(m，2)，1.79(m，4)；MSm/z＝185(M＋1)。
实施例3(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代咪唑烷-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺盐酸盐将搅拌下的(S)-N-[4-[4-(2-氨基乙基氨基)哌啶子基]-2-(3，4-二氯苯基)丁基]-N-甲基苯甲酰胺(0.356g)和1，1′-羰基二咪唑(0.157g)的氯仿(6ml)溶液在回流状态下加热2小时。所述反应混合物用二氯甲烷稀释，洗涤(碳酸氢钠水溶液)，干燥，蒸发并用二氯甲烷∶甲醇(98∶2，90∶10梯度液)作洗脱剂进行色谱分离。将所得产物溶于二氯甲烷中，用氯化氢的乙醚溶液使其以盐酸盐的形式沉淀出，蒸发并在高真空下静置，得到白色固体状所述标题化合物(0.244g)；MSm/z＝503(M＋1)；元素分析C26H32Cl2N4O2·1.70 HCl·0.20(C2H5)2O计算值C，55.47；H，6.20；N，9.65；实测值C，55.47；H，6.35；N，9.44。
如下所述制备中间体(S)-N-[4-[4-(2-氨基乙基氨基)哌啶子基]-2-(3，4-二氯苯基)丁基]-N-甲基苯甲酰胺。a. 1-苄氧羰基-4-(2-氨基乙基氨基)哌啶将1-苄氧羰基-4-氧代-哌啶(12.0g)的甲醇(72ml)溶液加入到搅拌下的乙二胺(5.2ml)和乙酸(8.8ml)的甲醇(72ml)溶液中。15分钟后，一次加入氰基硼氢化钠(9.7g)的甲醇(72ml)溶液。搅拌过夜后，将所述反应混合物蒸发；并将残余物溶于1N盐酸(100ml)。滴加浓盐酸并连续地搅拌直至不再有气体放出。将所述酸性水溶液混合物用二氯甲烷洗涤，用10N氢氧化钠碱化至pH10，并用二氯甲烷萃取。将所述二氯甲烷萃取液干燥并蒸发，得到粘稠油状所述的二胺(7.5g)；NMR(CD3OD)7.35(m，5)，5.10(s，2)，4.12(m，2)，2.89(m，2)，2.70(m，5)，1.90(m，2)，1.24(m，2)；MSm/z＝278(M＋1)。b. 1-苄氧羰基-4-[(2，2，2-三氟乙酰基)[2-(2，2，2-三氟乙酰氨基)乙基]氨基]哌啶将三氟乙酸酐(10.5ml)加入到上述二胺(7.5g)的氯仿(90ml)溶液中。搅拌过夜后，将所述反应混合物冷却至0℃；滴加入三乙胺(8.3ml)。1小时后，所述混合物用二氯甲烷稀释，洗涤(1N盐酸，碳酸氢钠水溶液)，干燥，蒸发并用二氯甲烷∶甲醇(98∶2)作洗脱剂进行色谱分离，得到白色泡沫状所述三氟乙酰基化的哌啶(8.9g)；NMR(CD3OD)7.35(m，5)，5.12(s，2)，4.28(m，2)，3.95(m，1)，3.48(m，4)，2.90(m，2)，1.78(m，4)；MSm/z＝470(M＋1)。c. 4-[(2，2，2-三氟乙酰基)[2-(2，2，2-三氟乙酰氨基)乙基]氨基]哌啶用实施例1.j的方法，用1-苄氧羰基-4-[(2，2，2-三氟乙酰基)[2-(2，2，2-三氟乙酰氨基)乙基]氨基]哌啶代替1-苄氧羰基-4-(2-氧代-1，3-氧氮杂环戊烷-3-基)哌啶，得到黄色油状所述的1-脱保护的哌啶；NMR(CD3OD)3.84(m，1)，3.51(m，4)，3.12(m，2)，2.61(m，2)，1.74(m，4)；MSm/z＝336(M＋1)。d. (S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-[(2，2，2-三氟乙酰基)[2-(2，2，2-三氟乙酰氨基)乙基]氨基]哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺用实施例1的方法，用4-[(2，2，2-三氟乙酰基)[2-(2，2，2-三氟乙酰氨基)乙基]氨基]哌啶代替4-(2-氧代-1，3-氧氮杂环戊烷-3-基)哌啶，并且用所述(S)-对映体代替N-[-2-(3，4-二氯苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基苯甲酰胺，得到粘稠油状所述的N-甲基苯甲酰胺；MSm/z＝669(M＋1)。e. (S)-N-[4-[4-(2-氨基乙基氨基)哌啶子基]-2-(3，4-二氯苯基)丁基]-N-甲基苯甲酰胺将实施例3.d中所得的粗产物(2.5g)在20％氢氧化钾水溶液(8.5ml)和甲醇(11ml)中的溶液搅拌1小时。用1N盐酸将所述反应混合物酸化至pH2并用二氯甲烷洗涤3次。水相用10N氢氧化钠碱化至pH10并用二氯甲烷萃取。将所述萃取液干燥并蒸发，得到粘稠油状所述的二胺(1.8g)；MSm/z＝477(M＋1)。
实施例4(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-硫代咪唑烷-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺盐酸盐用实施例3的方法，用1，1′-硫代羰基二-2(1H)-吡啶酮代替1，1＇-羰基二咪唑并且用在室温下搅拌1.5小时替代回流，得到白色固体状所述标题化合物；MSm/z＝519(M＋1)；元素分析C26H32Cl2N4OS·1.70HCl·0.10(C2H5)2O计算值C，53.84；H，5.93；N，9.51；实测值C，53.89；H，5.89；N，9.48。
实施例5(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氢-嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺盐酸盐用实施例3的方法，用(S)-N-[4-[4-(3-氨基丙基氨基)哌啶子基]-2-(3，4-二氯苯基)丁基]-N-甲基苯甲酰胺代替(S)-N-[4-[4-(2-氨基乙基氨基)哌啶子基]-2-(3，4-二氯苯基)丁基]-N-甲基苯甲酰胺，得到白色固体状所述标题化合物；MSm/z＝517(M＋1)；元素分析C27H34Cl2N4O2·2.60 HCl·0.13(C2H5)2O计算值C，53.14；H，6.14；N，9.00；实测值C，53.14；H，6.31；N，9.16。
如下所述制备中间体(S)-N-[4-[4-(3-氨基丙基氨基)哌啶子基]-2-(3，4-二氯苯基)丁基]-N-甲基苯甲酰胺。a. 1-苄氧羰基-4-(3-氨基丙基氨基)哌啶用实施例3.a的方法，用1，3-二氨基丙烷代替乙二胺，得到粘稠油状所述哌啶；MSm/z＝292(M＋1)；NMR(CD3OD)7.34(m，5)，5.10(s，2)，4.13(m，2)，2.86(m，2)，2.65(m，5)，1.90(m，2)，1.65(m，2)，1.23(m，2)。b. 1-苄氧羰基-4-[(2，2，2-三氟乙酰基)-[3-(2，2，2-三氟乙酰氨基)丙基]氨基]哌啶用实施例3.b的方法，用1-苄氧羰基-4-(3-氨基丙基氨基)哌啶代替1-苄氧羰基-4-(2-氨基乙基氨基)哌啶并且在0℃加入三氟乙酸酐之前向所述溶液中加入三乙胺，得到粘稠油状所述的三氟乙酰基化的哌啶；NMR7.36(m，5)，5.14(s，2)，4.35(m，2)，3.93(m，1)，3.35(m，4)，2.83(m，2)，1.87-1.74(m，6)；MSm/z＝484(M＋1)。c. 4-[(2，2，2-三氟乙酰基)[3-(2，2，2-三氟乙酰氨基)丙基]氨基]哌啶用实施例1.j的方法，用1-苄氧羰基-4-[(2，2，2-三氟乙酰基)-[3-(2，2，2-三氟乙酰氨基)丙基]氨基]哌啶代替1-苄氧羰基-4-(2-氧代-1，3-氧氮杂环戊烷-3-基)哌啶，得到粘稠油状所述1-脱保护的哌啶；NMR(CDOD)4.39(m，1)，3.98(m，1)，3.30(m，3)，2.95(m，1)，2.82(m，1)，2.65(m，2)，2.01(m，2)，1.75(m，2)，1.32(m，2)；MSm/z＝350(M＋1)。d. (S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-[(2，2，2-三氟乙酰基)-[2-(2，2，2-三氟乙酰氨基)乙基]氨基]哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺用实施例1的方法，用4-[(2，2，2-三氟乙酰基)[3-(2，2，2-三氟乙酰氨基)丙基]氨基]哌啶代替4-(2-氧代-1，3-氧氮杂环戊烷-3-基)哌啶并且用相应(S)-对映体代替N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧丁基]-N-甲基苯甲酰胺，得到所述N-甲基苯甲酰胺；MSm/z＝683(M＋1)。e. (S)-N-[4-[4-(3-氨基丙基氨基)哌啶子基]-2-(3，4-二氯苯基)丁基]-N-甲基苯甲酰胺用实施例3.e的方法，用N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-[(2，2，2-三氟乙酰基)-[3-(2，2，2-三氟乙酰氨基)丙基]氨基]哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺代替(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-[(2，2，2-三氟乙酰基)-[2-(2，2，2-三氟乙酰氨基)乙基]氨基]哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺，得到粘稠油状所述的二胺；MSm/z＝491(M＋1)。
实施例6(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-硫代全氢-嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺盐酸盐用实施例3的方法，用1，1′-硫代羰基二咪唑代替1，1′-羰基二咪唑，用(S)-N-[4-[4-(3-氨基丙基氨基)哌啶子基]-2-(3，4-二氯苯基)丁基]-N-甲基苯甲酰胺代替(S)-N-[4-[4-(2-氨基乙基氨基)哌啶子基]-2-(3，4-二氯苯基)丁基]-N-甲基苯甲酰胺，并且用在室温下搅拌过夜替代回流，得到白色固体状所述标题化合物；MSm/z＝533(M＋1)；元素分析C27H34Cl2N4OS·2.30 HCl·0.10(C2H5)2O计算值C，52.67；H，6.01；N，8.96；实测值C，52.57；H，6.11；N，8.84。
实施例7(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(3-甲基-2-硫代全氢嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺盐酸盐用实施例1的方法，用4-(3-甲基-2-硫代全氢嘧啶-1-基)哌啶代替4-(2-氧代-1，3-氧氮杂环戊烷-3-基)哌啶并且用所述(S)-对映体代替N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧丁基]-N-甲基苯甲酰胺，得到白色固体状所述标题化合物；MSm/z＝547(M＋1)；元素分析C28H36Cl2N4OS·1.70HCl·0.10(C2H5)2O计算值C，55.28；H，6.32；N，9.08；实测值C，55.21；H，6.37；N，8.88。
如下所述制备中间体4-(3-甲基-2-硫代全氢嘧啶-1-基)哌啶。a. 1-苄氧羰基-4-(3-甲氨基丙基氨基)哌啶用实施例3.a的方法，用N-甲基-1，3-丙二胺代替乙二胺，得到粘稠油状所述标题化合物；MSm/z＝306(M＋1)；NMR(CD3OD)7.34(m，5)，5.10(s，2)，4.13(m，2)，2.86(m，2)，2.70(m，5)，2.47(s，3)，1.91(m，2)，1.7 3(m，2)，1.24(m，2)。b. 1-苄氧羰基-4-(3-甲基-2-硫代全氢嘧啶-1-基)哌啶将所述二胺(3.0g)和1，1′-硫代羰基二咪唑(1.9g)的氯仿(70ml)溶液回流1.5小时并在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物用二氯甲烷稀释并依次用水、1N盐酸和碳酸氢钠水溶液洗涤。将分出的有机相干燥、蒸发并用二氯甲烷∶乙醚(80∶20)作洗脱剂进行色谱分离，得到白色固体状所述硫脲(1.4g)；MSm/z＝348(M＋1)；NMR(CD3OD)7.35(m，5)，5.66(m，1)，5.11(s，2)，4.24(m，2)，3.35(m，5)，3.22(m，2)，2.88(m，2)，1.92(m，2)，1.72-1.55(m，4)。c. 4-(3-甲基-2-硫代全氢嘧啶-1-基)哌啶0℃下将三氟甲磺酸(2.0ml)加入到上述哌啶(1.4g)和茴香醚(1.4ml)的二氯甲烷(20ml)溶液中。搅拌2小时后，将反应混合物蒸发，溶于甲醇，经过弱碱性离子交换树脂柱，蒸发并用二氯甲烷∶甲醇(98∶2，9∶10梯度液)作洗脱剂进行色谱分离。将所得产物溶于稀盐酸水溶液中，用二氯甲烷萃取(滗析)，并用氢氧化钠碱化。然后将水相用二氯甲烷萃取并蒸发，得到白色固体状所述哌啶(0.75g)；MSm/z＝214(M＋1)；NMR(CD3OD)5.53(m，1)，3.36(m，5)，3.29(m，2)，3.08(m，2)，2.64(m，2)，1.94(m，2)，1.72-1.53(m，4)。
实施例8(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代-1，3-全氢二氮杂-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺二盐酸盐用实施例1的方法，用4-(2-氧代-1，3-全氢二氮杂-1-基)哌啶代替4-(2-氧代-1，3-氧氮杂环戊烷-3-基)哌啶并且用(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基苯甲酰胺代替N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基苯甲酰胺，得到白色固体状所述标题化合物；MSm/z＝531(M＋1)；元素分析C28H36Cl2N4O2·2.10 HCl·0.20(C2H5)2O计算值C，55.53；H，6.48；N，8.99；实测值C，55.70；H，6.53；N，8.91。
如下所述制备中间体4-(2-氧代-1，3-全氢二氮杂-1-基)哌啶。a. 1-苄氧羰基-4-(4-氨基丁基氨基)哌啶用实施例3.a的方法，用1，4-二氨基丁烷代替乙二胺，得到粘稠油状所述的标题化合物；MSm/z＝306(M＋1)；NMR(CD3OD)7.34(m，5)，5.10(s，2)，4.13(m，2)，2.86(m，2)，2.63(m，5)，1.90(m，2)，1.51(m，4)，1.23(m，2)。b. 1-苄氧羰基-4-(2-氧代-1，3-全氢二氮杂-1-基)哌啶将所述二胺(1.6g)和1，1′-羰基二咪唑(0.94g)的氯仿(40ml)溶液回流1小时。反应混合物用二氯甲烷稀释并用水洗涤。将分出的有机相干燥，蒸发并用二氯甲烷∶甲醇(98∶2，90∶10梯度液)作洗脱剂进行色谱分离，得到白色固体状所述的脲(0.36g)；MSm/z＝332(M＋1)；NMR(CD3OD)7.34(m，5)，5.09(s，2)，4.21(m，3)，3.25(m，2)，3.13(m，2)，2.85(m，2)，1.58(m，6)，1.44(m，2)。c. 4-(2-氧代-1，3-全氢二氮杂-1-基)哌啶用实施例1.j的方法，用1-苄氧羰基-4-(2-氧代-1，3-全氢二氮杂-1-基)哌啶代替1-苄氧羰基-4-(2-氧代-1，3-氧氮杂环戊烷-1-基)哌啶，得到白色固体状所述的哌啶；MSm/z＝198(M＋1)；NMR(CD3OD)4.16(m，1)，3.29(m，2)，3.21(m，2)，3.11(m，2)，2.65(m，2)，1.62(m，6)，1.48(m，2)。
实施例9(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代-5，5-二甲基-全氢嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺将(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧代丙基]-N-甲基苯甲酰胺(0.622g)甲醇(8.0ml)溶液加入到4-(2-氧代-5，5-二甲基全氢嘧啶-1-基)哌啶(0.400g)和乙酸(0.11ml)的甲醇(8.0ml)溶液中。5分钟后，一次加入氰基硼氢化钠(0.119g)的甲醇(8.0ml)溶液。搅拌过夜后，反应混合物用碳酸氢钠水溶液稀释，搅拌30分钟并用二氯甲烷萃取。将分出的有机层干燥、蒸发并用二氯甲烷∶甲醇(95∶5)作洗脱剂进行色谱分离。将静置开始析晶的所得油状物悬浮于乙醚中并过滤，得到白色固体状所述标题化合物(0.720g)；MSm/z＝545(M＋1)；元素分析C29H38Cl2N4O2计算值C，63.84；H，7.02；N，10.26；实测值C，63.95；H，6.95；N，10.15。
如下所述制备中间体4-(2-氧代-5，5-二甲基全氢嘧啶-1-基)哌啶。a. 1-苄氧羰基-4-(3-氨基-2，2-二甲基丙基氨基)哌啶用实施例3.a的方法，用2，2-二甲基-1，3-丙二胺代替乙二胺，得到粘稠油状所述标题化合物；NMR(CD3OD)7.34(m，5)，5.10(s，2)，4.08(m，2)，2.93(m，2)，2.57(m，1)，2.46(s，2)，2.44(s，2)，1.89(m，2)，1.27(m，2)，0.89(s，6)。b. 1-苄氧羰基-4-(2-氧代-5，5-二甲基全氢嘧啶-1-基)哌啶将所述二胺(3.02g)和1，1′-羰基二咪唑(2.19g)的氯仿(3.02g)溶液回流3小时。反应混合物用二氯甲烷稀释并依次用1N盐酸和碳酸氢钠水溶液洗涤。将分出的有机相干燥，蒸发，用乙醚研制，并且过滤，得到白色固体状所述的脲(1.72g)；MSm/z＝346(M＋1)；NMR(CD3OD)7.34(m，5)，5.10(s，2)，4.35(m，1)，4.23(m，2)，2.87(m，6)，1.58(m，4)，1.00(s，6)。c. 4-(2-氧代-5，5-二甲基全氢嘧啶-1-基)哌啶用实施例1.j的方法，用1-苄氧羰基-4-(2-氧代-5，5-二甲基全氢嘧啶-1-基)哌啶代替1-苄氧羰基-4-(2-氧代-1，3-氧氮杂环戊烷-3-基)哌啶，得到白色固体状所述哌啶；MSm/z＝212(M＋1)；NMR(CD3OD)4.28(m，1)，3.10(m，2)，2.92(m，2)，2.89(m，2)，2.66(m，2)，1.59(m，4)，1.03(s，6)。
实施例10(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(3-甲基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺柠檬酸盐将(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基苯甲酰胺(0.883g)的甲醇(10.0ml)溶液加入到4-(3-甲基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶(0.498g)和乙酸(0.145ml)的甲醇(10.0ml)溶液中。5分钟后，一次加入氰基硼氢化钠(0.159g)的甲醇(10.0ml)溶液。搅拌3.5小时后，反应混合物用碳酸氢钠水溶液稀释，搅拌30分钟并用二氯甲烷萃取。将分出的有机层干燥、蒸发并用二氯甲烷∶甲醇(95∶5)作洗脱剂进行色谱分离。将所得油状物(0.970g)和柠檬酸(0.352g)溶于甲醇并蒸发，得到一玻璃状物，以白色固体状刮出得到所述标题化合物(1.27g)；MSm/z＝531(M＋1)；元素分析C28H36Cl2N4O2·1.10 C6H8O7·0.30H2O计算值C，55.53；H，6.11；N，7.48；实测值C，55.55；H，6.04；N，7.46。
如下所述制备中间体4-(3-甲基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶。a. 1-苄氧羰基-4-(2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶将1-苄氧羰基-4-(3-氨基丙基氨基)哌啶(10.1g)和1，1′-羰基二咪唑(6.2g)的氯仿(250ml)溶液在回流状态下加热2小时。所述混合物用水洗涤，并将分出的有机相干燥，蒸发并用二氯甲烷/甲醇(90∶10)作洗脱剂进行色谱分离，得到白色固体状所述的脲(7.4g)；MSm/z＝318(M＋1)；NMR(CDCl3)7.35(m，5)，5.12(s，2)，4.75(m，1)，4.50(m，1)，4.26(m，2)，3.27(m，2)，3.13(m，2)，1.89(m，2)，1.63(m，4)。b. 1-苄氧羰基-4-(3-甲基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶将叔丁醇钾(19.3ml，1M四氢呋喃溶液)加入到1-苄氧羰基-4-(2-氧代全氢-嘧啶-1-基)哌啶(3.06g)的四氢呋喃(88ml)溶液中。然后加入碘甲烷(2.4ml)并将反应混合物搅拌30分钟。反应混合物用二氯甲烷稀释，用水洗涤并用二氯甲烷∶甲醇(98∶2，90∶10梯度液)作洗脱剂进行色谱分离。将产物用乙醚研制并过滤，得到白色固体状所述N-甲基化合物(2.78g)；MSm/z＝332(M＋1)；NMR(CDCl3)7.34(m，5)，5.12(s，2)，4.53(m，1)，4.26(m，2)，3.21(m，2)，3.11(m，2)，2.93(s，3)，2.86(m，2)，1.91(m，2)，1.60(m，4)。c. 4-(3-甲基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶用实施例1.j的方法，用1-苄氧羰基-4-(3-甲基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶代替1-苄氧羰基-4-(2-氧代-1，3-氧氮杂环戊烷-3-基)哌啶，得到粘稠油状所述哌啶；MSm/z＝198(M＋1)；NMR(CD3OD)4.19(m，1)，3.14(m，4)，2.98(m，2)，2.80(s，3)，2.53(m，2)，1.82(m，2)，1.48(m，4)。
实施例11(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(3-乙基-2-氧代全氢-嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺柠檬酸盐用实施例10的方法，用4-(3-乙基-2-氧代全氢-嘧啶-1-基)哌啶代替4-(3-甲基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶，得到白色固体状所述标题化合物；MSm/z＝545(M＋1)；元素分析C29H38Cl2N4O2·1.00C6H8O7计算值C，56.98；H，6.28；N，7.59；实测值C，56.66；H，6.31；N，7.57。
如下所述制备中间体4-(3-乙基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶。a. 1-苄氧羰基-4-(3-乙基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶用实施例10.b的方法，用碘乙烷代替碘甲烷，经乙醚研制得到白色状所述苄氧羰基化合物；MSm/z＝346(M＋1)；NMR(CDCl3)7.34(m，5)，5.12(s，2)，4.54(m，1)，4.26(m，2)，3.38(q，2，J＝7.1)，3.22(m，2)，3.11(m，2)，2.86(m，2)，1.90(m，2)，1.60(m，4)，1.10(t，3，J＝7.1)。b. 4-(3-乙基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶用实施例1.j的方法，用1-苄氧羰基-4-(3-乙基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶代替1-苄氧羰基-4-(2-氧代-1，3-氧氮杂环戊烷-3-基)哌啶，得到粘稠油状所述哌啶；MSm/z＝212(M＋1)；NMR(CDCl3)4.45(m，1)，3.38(q，2，J＝7.1)，3.17(m，6)，2.72(m，2)，2.15(m，1)，1.91(m，2)，1.62(m，4)，1.10(t，2，J＝7.1)。
实施例12(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(3-(N，N-二甲氨基甲酰基甲基)-2-氧代全氢-嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺柠檬酸盐用实施例10的方法，用4-(3-(N，N-二甲氨基甲酰基甲基)-2-氧代全氢-嘧啶-1-基)哌啶代替4-(3-甲基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶，得到白色固体状所述标题化合物；MSm/z＝602(M＋1)；元素分析C31H41Cl2N5O3·1.10 C6H8O7计算值C，55.48；H，6.16；N，8.60；实测值C，55.22；H，6.26；N，8.65。
如下所述制备中间体4-(3-(N，N-二甲氨基甲酰基甲基)-2-氧代全氢-嘧啶-1-基)哌啶。a. 1-苄氧羰基-4-(3-羧甲基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶将叔丁醇钾(5 2ml，1M叔丁醇溶液)加入到1-苄氧羰基-4-(2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶(15.0g)中并将所述溶液搅拌35分钟。然后加入溴代乙酸叔丁基酯(7.65ml)并将所述混合物搅拌过夜。反应混合物用四氢呋喃(20ml)和二氯甲烷(10ml)稀释，随后加入碘化叔丁基铵(1.74g)、叔丁醇钾(52ml，1M叔丁醇溶液)和溴代乙酸叔丁基酯(7.65ml)。搅拌过夜后，反应混合物用二氯甲烷稀释并用水洗涤。将分出的有机层干燥，蒸发，得一油状物，将其溶于1N盐酸(700ml)、四氢呋喃(200ml)和甲醇(200ml)中。搅拌过夜后，将反应混合物真空浓缩除去有机溶剂。所得水溶液用二氯甲烷萃取，用2N盐酸酸化至pH2，并用二氯甲烷萃取。将第一次有机萃取液浓缩，得到未反应的1-苄氧羰基-4-(2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶(7.0g)。将第二次有机萃取液用水洗涤，干燥并蒸发。粗产物用乙醚研制并过滤，得到白色固体状所述标题化合物(8.3g)；MSm/z＝376(M＋1)；NMR(CDCl3)7.35(m，5)，5.12(s，2)，4.48(m，1)，4.28(m，2)，4.02(s，2)，3.35(m，2)，3.18(m，2)，2.87(m，2)，1.97(m，2)，1.65(m，4)。b. 1-苄氧羰基-4-[3-(N，N-二甲氨基甲酰基甲基)-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶将1-苄氧羰基-4-(3-羧甲基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶(2.00g)、二甲胺盐酸盐(0.522g)、三乙胺(0.89ml)、4-二甲氨基吡啶(0.781g)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(1.23g)的二氯甲烷(55ml)溶液搅拌过夜。将反应混合物洗涤(1N盐酸，碳酸氢钠水溶液)，干燥并蒸发。将粗产物用二氯甲烷∶甲醇(98∶2，80∶20梯度液)作洗脱剂进行色谱分离，用乙醚研制并过滤，得到白色固体状所述的酰胺(2.00g)；MSm/z＝403(M＋1)；NMR(CDCl3)7.35(m，5)，5.12(s，2)，4.50(m，1)，4.27(m，2)，4.12(m，2)，3.35(m，2)，3.18(m，2)，3.01(s，3)，2.95(s，3)，2.84(m，2)，1.98(m，2)，1.64(m，4)。c. 4-(3-(N，N-二甲氨基甲酰基甲基)-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶用实施例1.j的方法，用1-苄氧羰基-4-[3-(N，N-二甲氨基甲酰基甲基)-2-氧代全氢嘧啶-1-基]哌啶代替1-苄氧羰基-4-(2-氧代-1，3-氧氮杂环戊烷-3-基)哌啶，经乙醚研制得到白色固体状所述哌啶；MSm/z＝269(M＋1)；NMR(CDCl3)4.40(m，1)，4.12(s，2)，3.35(m，2)，3.24(m，2)，3.11(m，2)，3.02(s，3)，2.95(s，3)，2.69(m，2)，2.14(m，1)，1.98(m，2)，1.64(m，4)。
实施例13(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(3-(N-甲氨基甲酰基甲基)-2-氧代全氢-嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺柠檬酸盐用实施例10的方法，用4-(3-(N-甲氨基甲酰基甲基)-2-氧代全氢-嘧啶-1-基)哌啶代替4-(3-甲基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶，得到白色固体状所述标题化合物；MSm/z-588(M＋1)；元素分析C30H39Cl2N5O3·1.10 C6H8O7·0.40H2O计算值C，54.46；H，6.06；N，8.67；实测值C，54.49；H，6.10；N，8.64。
如下所述制备中间体4-(3-(N-甲氨基甲酰基甲基)-2-氧代全氢-嘧啶-1-基)哌啶。a. 1-苄氧羰基-4-[3-(N-甲氨基甲酰基甲基)-2-氧代全氢嘧啶-1-基]哌啶用实施例12.b的方法，用甲胺盐酸盐代替二甲胺盐酸盐，得到树胶状所述的酰胺；MSm/z＝389(M＋1)；NMR(CDCl3)7.35(m，5)，6.59(m，1)，5.12(s，2)，4.47(m，1)，4.28(m，2)，3.92(s，2)，3.34(m，2)，3.16(m，2)，2.86(m，2)，2.80(s，1.5)，2.79(s，1.5)，1.96(m，2)，1.63(m，4)。b. 4-[3-(N-甲氨基甲酰基甲基)-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶用实施例1.j的方法，用1-苄氧羰基-4-[3-(N-甲氨基甲酰基甲基)-2-氧代全氢嘧啶-1-基]哌啶代替1-苄氧羰基-4-(2-氧代-1，3-氧氮杂环戊烷-3-基)哌啶，得到树胶状所述哌啶；MSm/z＝255(M＋1)；NMR(CDCl3)6.70(m，1)，4.38(m，1)，3.92(s，2)，3.35(m，2)，3.2 3(m，2)，3.14(m，2)，2.81(s，1.5)，2.79(s，1.5)，2.72(m，2)，2.10(m，1)，1.97(m，2)，1.64(m，4)。
实施例14(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(3-(N-苄氨基甲酰基甲基)-2-氧代全氢-嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺柠檬酸盐用实施例10的方法，用4-(3-(N-苄氨基甲酰基甲基)-2-氧代全氢-嘧啶-1-基)哌啶代替4-(3-甲基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶，得到白色固体状所述标题化合物；MSm/z＝664(M＋1)；元素分析C36H43Cl2N5O3·1.10 C6H8O7·0.60H2O计算值C，57.69；H，6.02；N，7.89；实测值C，57.65；H，6.00；N，7.90。
如下所述制备中间体4-[3-(N-苄氨基甲酰基甲基)-2-氧代全氢-嘧啶-1-基)哌啶a. 1-苄氧羰基-4-[3-(N-苄氨基甲酰基甲基)-2-氧代全氢嘧啶-1-基]哌啶用实施例12.b的方法，用苄胺代替二甲胺盐酸盐并省略三乙胺，得到树胶状所述的酰胺；MSm/z＝465(M＋1)；NMR(CD3OD)7.34(m，5)，7.28(m，5)，5.10(s，2)，4.38(s，2)，4.33(m，1)，4.22(m，2)，3.99(s，2)，3.30(m，2)，3.20(m，2)，2.85(m，2)，1.95(m，2)，1.60(m，4)。b. 4-[3-(N-苄氨基甲酰基甲基)-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶用实施例1.j的方法，用1-苄氧羰基-4-[3-(N-苄氨基甲酰基甲基)-2-氧代全氢嘧啶-1-基]哌啶代替1-苄氧羰基-4-(2-氧代-1，3-氧氮杂环戊烷-3-基)哌啶，得到粘稠油状的所述哌啶；MSm/z＝331(M＋1)；NMR(CD3OD)7.29(m，5)，4.39(s，2)，4.30(m，1)，4.00(s，2)，3.30(m，4)，3.16(m，2)，2.73(m，2)，1.98(m，2)，1.68(m，4)。
实施例15(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(3-(乙氧羰基甲基)-2-氧代全氢-嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺柠檬酸盐用实施例10的方法，用4-(3-(N-乙氧羰基甲基)-2-氧代全氢-嘧啶-1-基)哌啶代替4-(3-甲基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶，得到白色固体状所述标题化合物；MSm/z＝603(M＋1)；元素分析C31H40Cl2N4O4·1.10 C6H8O7计算值C，55.41；H，6.04；N，6.88；实测值C，55.28；H，6.11；N，6.86。
如下所述制备中间体4-(3-(乙氧羰基甲基)-2-氧代全氢-嘧啶-1-基)哌啶。a. 1-苄氧羰基-4-[3-(乙氧羰基甲基)-2-氧代全氢嘧啶-1-基]哌啶将1-苄氧羰基-4-(3-羧甲基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶(1.51g)、2-乙氧基-1-乙氧羰基-1，2-二氢喹啉(1.64g)和碳酸氢铵(1.43g)的氯仿(30ml)溶液搅拌4小时。反应混合物用二氯甲烷稀释，用1N盐酸(5次)洗涤，干燥并蒸发。将粗产物用二氯甲烷∶甲醇(98∶2，90∶10梯度液)作洗脱剂进行色谱分离并用乙醚研制，得到白色固体状所述的酯(1.25g)；MSm/z＝404(M＋1)；NMR(CDCl3)7.34(m，5)，5.11(s，2)，4.49(m，1)，4.26(m，2)，4.18(q，2，J＝7.1)，4.06(s，2)，3.31(m，2)，3.17(m，2)，2.84(m，2)，1.97(m，2)，1.64(m，4)，1.26(t，3，J＝7.1)。b. 4-[3-(乙氧羰基甲基)-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶用实施例1.j的方法，用1-苄氧羰基-4-[3-(乙氧羰基甲基)-2-氧代全氢嘧啶-1-基]哌啶代替1-苄氧羰基-4-(2-氧代-1，3-氧氮杂环戊烷-3-基)哌啶，得到粘稠油状所述哌啶；MSm/z＝270(M＋1)；NMR(CDCl3)4.41(m，1)，4.19(q，2，J＝7.1)，4.07(s，2)，3.32(m，2)，3.24(m，2)，3.12(m，2)，2.70(m，2)，2.09(m，1)，1.98(m，2)，1.63(m，4)1.27(t，3，J＝7.1)。
实施例16(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氢-嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-乙基苯甲酰胺柠檬酸盐用实施例10的方法，用4-(2-氧代全氢-嘧啶-1-基)哌啶代替4-(3-甲基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶并且用(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧代丁基]-N-乙基苯甲酰胺代替N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基苯甲酰胺，得到白色固体状所述标题化合物；MSm/z＝531(M＋1)；元素分析C28H36Cl2N4O2·1.10 C6H8O7·0.30H2O计算值C，55.53；H，6.11；N，7.48；实测值C，55.51；H，6.19；N，7.47。
如下所述制备中间体(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧代丁基]-N-乙基苯甲酰胺。a. (S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-羟基丁基]-N-苯甲酰胺于0℃下将苯甲酸酐(14.6g)的二氯甲烷(50ml)溶液滴加到(S)-2-(3，4-二氯苯基)-4-羟基丁胺(15.0g)和三乙胺(9.0ml)的二氯甲烷(200ml)溶液中。于0℃下搅拌1小时并在环境温度下搅拌1小时后，将反应混合物进行洗涤(1N盐酸，饱和碳酸氢钠水溶液)并将分出的有机相干燥并蒸发。粗产物用二氯甲烷/甲醇(98∶2，90∶10梯度液)作洗脱剂进行色谱分离，得到淡黄色树胶状所述的酰胺(17.5g)；m/z＝338(M＋1)；NMR(CDCl3)7.65(m，2)，7.48(m，1)，7.38(m，3)，7.33(d，1，J＝2.1)，7.07(dd，1，J＝2.1，8.2)，6.44(m，1，NH)，3.83(m，1)，3.70(m，1)，3.58-3.41(m，2)，3.13(m，1)，2.47(m，1，0H)，1.99(m，1)，1.84(m，1)。b. (S)-N-[4-乙酰氧基-2-(3，4-二氯苯基)丁基]苯甲酰胺于0℃下将乙酰氯(4.6ml)滴加到(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-羟基丁基]苯甲酰胺(17.5g)和吡啶(8.4ml)的二氯甲烷(400ml)溶液中。于室温搅拌过夜后，将反应混合物进行洗涤(水，饱和硫酸铜(II)水溶液)并将分离的有机相干燥并蒸发，得到淡黄色油状所述乙酰基-化合物；MSm/z＝380(M＋1)；NMR(CDCl3)7.63(m，2)，7.48(m，1)，7.39(m，3)，7.32(d，1，J＝2.1)，7.06(dd，1，J＝2.1，8.2)，6.21(m，1，)，4.03(m，1)，3.87(m，2)，3.41(m，1)，3.07(m，1)，2.09(m，1，)，1.98(s，3)，1.92(m，1)。c. (S)-N-[4-乙酰氧基-2-(3，4-二氯苯基)丁基]-N-乙基苯甲酰胺将(S)-N-[4-乙酰氧基-2-(3，4-二氯苯基)丁基]苯甲酰胺(4.2g)的四氢呋喃(15ml)悬浮液用导管引入到氢化钠(0.58g，60％矿物油分散液)和碘乙烷(1.0ml)的四氢呋喃(5ml)溶液中。搅拌过夜后，将反应混合物真空浓缩，溶于二氯甲烷并用水洗涤。将分出的有机层干燥、蒸发并用二氯甲烷∶乙醚(10∶1)作洗脱剂进行色谱分离，得到油状N-乙基化合物(3.7g)；MSm/z＝408(M＋1)。d. (S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-羟基丁基]-N-乙基苯甲酰胺将(S)-N-[4-乙酰氧基-2-(3，4-二氯苯基)丁基]-N-乙基苯甲酰胺(3.7g)的1N氢氧化钠(27ml)、四氢呋喃(70ml)、水(20ml)和甲醇(15ml)溶液搅拌3小时。将反应混合物真空浓缩，溶于二氯甲烷并用水洗涤。将分出的有机层干燥并蒸发，得到油状所述的醇(3.2g)；MSm/z＝366(M＋1)。e. (S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧代丁基]-N-乙基苯甲酰胺于-78℃下向草酰氯(1.3ml)的二氯甲烷(30ml)溶液中加入二甲亚砜(2.1ml)的二氯甲烷(10ml)溶液，随后于5分钟内加入(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-羟基丁基]-N-乙基苯甲酰胺(3.2g)的二氯甲烷(15ml)溶液。15分钟后，加入三乙胺(8.2ml)，并令反应混合物温热至环境温度。所述混合物用二氯甲烷稀释，并用稀盐酸水溶液、水和碳酸氢钠水溶液洗涤。将分出的有机层干燥，蒸发并用二氯甲烷∶乙醚∶己烷(2∶1∶1)作洗脱剂进行色谱分离，得到油状所述的醛(2.5g)；MSm/z＝364(M＋1)。
实施例17(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氢-嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-4-氟-N-甲基苯甲酰胺柠檬酸盐于-30℃下将4-氟代苯甲酰氯(0.115ml)加入到(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氢-嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲胺(0.400g)和吡啶(0.16ml)的二氯甲烷(10ml)溶液中。令反应混合物温热至环境温度并搅拌1小时。反应混合物用二氯甲烷稀释，洗涤(碳酸氢钠水溶液，饱和硫酸铜(II)水溶液)，干燥并蒸发。将粗产物用二氯甲烷∶甲醇(98∶2，80∶10梯度液)作洗脱剂进行色谱分离。将纯化的产物(0.350g)和柠檬酸(0.126g)溶于甲醇并蒸发，得到一玻璃状物，刮出产物得到白色固体状所述标题化合物(0.450g)；MSm/z＝535(M＋1)；元素分析C27H33Cl2FN4O2·1.10 C6H8O7·0.10(C2H5)2O·0.70H2O计算值C，53.25；H，5.80；N，7.30；实测值C，53.22；H，5.70；N，7.30。
如下所述制备中间体(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氢-嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基胺a. (S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-羟基丁基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯在30分钟内将二碳酸二叔丁酯(21.6g)的二氯甲烷(125ml)溶液滴加到(S)-N-甲基-2-(3，4-二氯苯基)-4-羟基丁胺(25.0g)的二氯甲烷(125ml)溶液中。搅拌3小时后，将反应混合物进行洗涤(0.1N盐酸，碳酸氢钠水溶液)，干燥并蒸发。将粗产物用二氯甲烷∶乙醚(2∶1)作洗脱剂进行色谱分离，得到油状所述的叔丁基酯(33.0g)，将其静置析晶。b. (S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯用实施例16.e的方法，用(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-羟基丁基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯代替(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-羟基丁基]-N-乙基苯甲酰胺，得到油状所述的醛，将此粗产物用于下一步反应。c. (S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯用实施例10的方法，用4-(2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶代替4-(3-甲基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶并用(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯代替(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基苯甲酰胺，得到树胶状所述标题化合物。d. (S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基胺将三氟乙酸(7.5ml)加入到(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(5.1g)的二氯甲烷(200ml)溶液中。30分钟后，加入另外的三氟乙酸(7.5ml)，并将反应混合物搅拌4小时。将所述混合物用1N氢氧化钠(250ml)洗涤，干燥并蒸发，得到树胶状所述标题化合物(3.8g)；MSm/z＝413(M＋1)。
实施例18(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-4-甲基-N-甲基苯甲酰胺柠檬酸盐除了用对甲苯酰氯代替4-氟代苯甲酰氯以外，用实施例17所述相似的方法，得到白色固体状所述标题化合物；MSm/z＝531(M＋1)；元素分析C28H36Cl2N4O2·1.10 C6H8O7·0.10(C2H5)2O·0.30H2O计算值C，55.63；H，6.18；N，7.41；实测值C，55.58；H，6.17；N，7.52。
实施例19(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-4-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺柠檬酸盐用实施例17所述相同的方法，但4-甲氧基苯甲酰氯代替4-氟代苯甲酰氯，得到白色固体状所述标题化合物；MSm/z＝547(M＋1)；元素分析C28H36Cl2N4O3·1.10 C6H8O7·0.10(C2H5)2O·0.70H2O计算值C，53.92；H，6.10；N，7.19；实测值C，53.93；H，5.99；N，7.19。
实施例20(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-4-羟基-N-甲基苯甲酰胺柠檬酸盐将(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基胺(1.22g)、4-乙酰氧基苯甲酸(0.640g)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(0.682g)的二氯甲烷(30ml)溶液搅拌过夜。反应混合物用二氯甲烷稀释，洗涤(水，碳酸氢钠水溶液)，干燥并蒸发。将所述粗产物用二氯甲烷∶甲醇(95∶5，80∶20梯度液)作洗脱剂进行两次色谱分离。将纯化的产品(0.190g)和柠檬酸(0.069g)溶于甲醇并蒸发，得到一玻璃状物，刮出产物得到白色固体状所述标题化合物(0.220g)；MSm/z＝533(M＋1)；元素分析C27H34Cl2N4O3·1.10 C6H8O7·0.6OH2O计算值C，53.40；H，5.86；N，7.41；实测值C，53.45；H，6.13；N，7.26。
实施例211-[(S)-N-苯甲酰基-3-(3，4-二氯苯基)-N-甲基-4-氨基丁基]-4-(2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶1-氧化物于0℃下将3-氯代过氧苯甲酸(0.700g)的二氯甲烷(16ml)溶液滴加到(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺(1.31g)的二氯甲烷(12ml)溶液中。搅拌1小时后，反应混合物用二氯甲烷稀释，用碳酸氢钠水溶液洗涤，干燥并蒸发。将粗产物用二氯甲烷∶甲醇(98∶2，70∶30梯度液)作洗脱剂进行色谱分离。将纯化的产物(0.592g)和对甲苯磺酸一水合物(0.232g)溶于二氯甲烷∶甲醇中并蒸发，得到白色固体状所述标题化合物(0.824g)；MSm/z＝533(M＋1)；元素分析C27H34Cl2N4O3·1.10 C6H8O3S·1.10H2O计算值C，56.11；H，6.10；N，7.54；实测值C，55.85；H，5.96；N，7.33。
实施例22N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(3-甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺盐酸盐向氢化钠(30mg，60％油分散液)的四氢呋喃(1ml)悬浮液中加入N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代咪唑烷-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺(152mg)的四氢呋喃(2ml)溶液。30分钟后，加入碘甲烷(0.021ml)，并将反应混合物搅拌2.5小时。所述混合物用二氯甲烷稀释并用水洗涤。将分出的有机层干燥并蒸发，得一油状物，将其溶于最少量的二氯甲烷中并用氯化氢的乙醚溶液令其沉淀出，蒸除溶剂，得到一灰白色固体(104mg)；MSm/z＝517(M＋1)；元素分析C27H34N4O2Cl2·1.2 HCl·0.1(C2H5)2O计算值C，57.83；H，6.42；N，10.05；实测值C，57.85；H，6.41；N，9.85。
用实施例3中所述相似的方法并且在其中的分步骤中用N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基苯甲酰胺替代分步骤3.d中所用的(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基苯甲酰胺，制得中间体N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代咪唑烷-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺。
分子式
序列表(2)SEQ ID NO1的资料(i)序列特征(A)链长15个碱基对(B)类型核酸(C)链型单股(D)拓扑结构线性(xi)序列描述SEQ ID NO1GCGCAAGCTT ATGGG1 5(2)SEQ ID NO2的资料(i)序列特征(A)链长18个碱基对(B)类型核酸(C)链型单股(D)拓扑结构线性(xi)序列描述SEQ ID NO2GTCCCCATAA GCTTGCGC 18
权利要求
1.下列式I化合物 其中m为2或3；D为下列式Ia或式Ib残基， 其中Q为可带有一个或两个取代基的苯基，所述取代基独立地选自卤素、三氟甲基、羟基、(1-3C)烷氧基、(1-3C)烷基和亚甲二氧基；或者Q为噻吩基、咪唑基、苯并[b]噻吩基或萘基，其中任何一个基团都可带有卤素取代基；或者Q为联苯基；或者Q为在1-位上可带有苄基取代基的碳-键连的吲哚基；Qa为氢、(1-4C)烷基或式-(CH2)q-NR5R6基团，其中q为2或3以及R5和R6独立地为(1-4C)烷基或者NR5R6为哌啶子基或4-苄基哌啶子基；R1为氢、甲基或可带有末端氨基基团的(2-6C)正-烷基；R2为-C(＝O)R3、-C(＝O)OR3或-C(＝J1)NHR3，其中J1为氧和硫并且R3为氢、(1-6C)烷基、苯基(1-3C)烷基(其中所述苯基可以带有一个或多个卤素、羟基、(1-4C)烷氧基或(1-4C)烷基取代基)、吡啶基(1-3C)烷基、萘基(1-3C)烷基、吡啶硫基(1-3C)烷基、苯乙烯基、1-甲基咪唑-2-基硫基(1-3C)烷基、芳基(其可以带有一个或多个卤素、羟基、(1-4C)烷氧基或(1-4C)烷基取代基)、杂芳基(其可以带有一个或多个卤素、羟基、(1-4C)烷氧基或(1-4C)烷基取代基)，或者(当R2为-COR3时)为α-羟基苄基；n为0、1、2或3；p为1或2，并且当p为2时，n为1和J2为两个氢；J2为氧或两个氢；L6为羰基或亚甲基；r为0、1、2或3；和R4为可带有一个或多个卤素、三氟甲基、(1-4C)烷基、羟基或(1-4C)烷氧基取代基(并且特别是一个或多个氯或氟取代基)的苯基；可带有一个或多个卤素、三氟甲基、(1-4C)烷基或羟基取代基的萘基；吡啶基；噻吩基；吲哚基；喹啉基；苯并噻吩基或咪唑基；或者当L6为羰基时，所述基团-(CH2)r-R4可表示芳基、杂芳基或者带有α-取代基的苄基，所述α-取代基选自羟基、(1-4C)烷氧基和(1-4C)烷基，并且其中所述芳基、杂芳基或者所述苄基的苯基部分可带有一个或多个取代基，所述取代基独立地选自卤素、三氟甲基、(1-4C)烷基、羟基和(1-4C)烷基、羟基和(1-4C)烷氧基(并且特别是一个或多个氯或氟取代基)；G表示单键、双键或二价烃基；当G表示双键时，J表示通过单键与所述环连接的基团，否则，J表示通过双键连接的基团；M表示杂原子或被取代的杂原子；和L表示其中1-位与M相连接的烃基，其中G、J、M和L选自(a)G为单键；J为氧代或硫代；M为氧、硫或NR12；和L为L1；(b)G为单键；J为NR8；M为NR7；和L为L1；(c)G为双键；J为OR7、SR7或NR9R10；M为氮；和L为L1；(d)G为亚甲基，其可以带有一个或两个甲基取代基；J为氧代、硫代或NR11；M为氧、硫、亚磺酰基、磺酰基或NR7；和L为L2；(e)G为单键；J为氧代、硫代或NR11；M为氮；和L为L3；(f)G为次甲基，其可以带有(1-3C)烷基取代基；J为氧代、硫代或NR11；M为氮；和L为L4；和(g)G为顺-1，2-亚乙烯基，其可以带有一个或两个甲基取代基；J为氧代、硫代或NR11；M为氮；和L为L5；其中R7为氢或(1-3C)烷基；R8为氢、(1-3C)烷基、氰基、(1-3C)烷基磺酰基或硝基；R9和R10独立地为氢或(1-3C)烷基或者基团NR9R10为吡咯烷-1-基、哌啶子基、吗啉代、硫代吗啉代(或其S-氧化物)或哌嗪-1-基(在其4-位上可带有(1-3C)烷基取代基)；R11为氢或(1-3C)烷基；R12为氢、(1-3C)烷基、RaOC(＝O)CH2-或RbRcNC(＝O)CH2-；Ra为氢或(1-3C)烷基；Rb和Rc独立地为氢、(1-3C)烷基、苯基或苄基；L1为1，2-亚乙基、顺-1，2-亚乙烯基、三亚甲基或四亚甲基，其中基团L1本身可以带有一个或两个甲基取代基；L2为1，2-亚乙基或三亚甲基，其中基团L2本身可以带有一个或两个甲基取代基；L3为1，3-亚丙-2-烯基，其中基团L3本身可以带有一个或两个甲基取代基；L4为顺-1，2-亚乙烯基，其中基团L4本身可以带有一个或两个甲基取代基；L5为次甲基，其中基团L5本身可以带有(1-3C)烷基取代基；或者所述式I化合物的由Δ标引的哌啶子基氮原子的N-氧化物；或者所述式I化合物或所述N-氧化物的药物上可接受的盐；或者所述式I化合物的季铵盐，其中由Δ标引的哌啶子基氮原子为四配价铵氮原子，其中所述氮原子上的第四个基团为(1-4C)烷基或苄基并且所述有关的抗衡离子为药物上可接受的阴离子。
2.权利要求1所定义的化合物，所述化合物为下列式Ic化合物 其中Qb为可带有一个或两个取代基的苯基，所述取代基独立地选自卤素、三氟甲基、羟基、(1-3C)烷氧基、(1-3C)烷基和亚甲二氧基；或者Qb为噻吩基、咪唑基、苯并[b]噻吩基或萘基，它们中的任何一个基团都可带有卤素取代基；或者Qb为联苯基；或者Qb为可在1-位带有苄基取代基的碳-键连的吲哚基；T和U独立地为氢、羟基、(1-3C)烷基或(1-3C)烷氧基；W为(1-3C)烷基；和G、J、L和M如权利要求1中所定义；或者所述式Ic化合物的由Δ标引的哌啶子基氮原子的N-氧化物；或者所述式Ic化合物或所述N-氧化物的药物上可接受的盐；或者所述式Ic化合物的季铵盐，其中由Δ标引的哌啶子基氮原子为四配价铵氮原子，其中所述氮原子上的第四个基团为(1-4C)烷基或苄基并且所述有关的抗衡离子为药物上可接受的阴离子。
3.根据权利要求2所定义的化合物，其中R12为氢或(1-3C)烷基；T和U为氢和W为甲基；或其药物上可接受的盐。
4.根据权利要求2或3所定义的化合物，其中G为单键或亚甲基；J为氧代、硫代、亚氨基、甲基亚氨基或乙基亚氨基；M为氧、硫或NH；L为1，2-亚乙基、顺-1，2-亚乙烯基或三亚甲基并且Qb为可带有一个或两个选自卤素、三氟甲基和亚甲二氧基取代基的苯基；或者所述式Ic化合物的由Δ标引的哌啶子基氮原子的N-氧化物；或者所述式Ic化合物或所述N-氧化物的药物上可接受的盐；或者所述式Ic化合物的季铵盐，其中由Δ标引的哌啶子基氮原子为四配价铵氮原子，其中所述氮原子上的第四个基团为(1-4C)烷基或苄基并且所述有关的抗衡离子为药物上可接受的阴离子。
5.根据权利要求2-4中任一权利要求所定义的化合物，其中G为单键；J为氧代或硫代；M为氧或NH；L为1，2-亚乙基或三亚甲基并且Qb为3，4-二氯苯基或3，4-亚甲二氧基苯基；或者所述化合物的由Δ标引的哌啶子基氮原子的N-氧化物；或者所述化合物或所述N-氧化物的药物上可接受的盐；或者所述化合物的季铵盐，其中由Δ标引的哌啶子基氮原子为四配价铵氮原子，其中所述氮原子上的第四个基团为(1-4C)烷基或苄基并且所述有关的抗衡离子为药物上可接受的阴离子。
6.根据权利要求1所定义的化合物，其中所述化合物为(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺；(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(3-甲基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺；(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(3-乙基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺或(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-乙基苯甲酰胺或其药物上可接受的盐。
7.根据权利要求1所定义的化合物，其中所述化合物为(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺或其药物上可接受的盐。
8.根据权利要求1所定义的化合物，其中所述化合物为(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(3-乙基-2-氧代全氢嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺或其药物上可接受的盐。
9.一种药物组合物，所述药物组合物含有如权利要求1-8中任一权利要求所定义的式I化合物；或者所述式I化合物的由Δ标引的哌啶子基氮原子的N-氧化物；或者所述式I化合物或所述N-氧化物的药物上可接受的盐；或者所述式I化合物的季铵盐(其中由Δ标引的哌啶子基氮原子为四配价铵氮原子，其中所述氮原子上的第四个基团为(1-4C)烷基或苄基并且所述有关的抗衡离子为药物上可接受的阴离子)和药物上可接受的稀释剂或载体。
10.一种制备如权利要求1-8中任一权利要求所定义的式I化合物；或者所述式I化合物的由Δ标引的哌啶子基氮原子的N-氧化物；或者所述式I化合物或所述N-氧化物的药物上可接受的盐；或者所述式I化合物的季铵盐(其中由Δ标引的哌啶子基氮原子为四配价铵氮原子，其中所述氮原子上的第四个基团为(1-4C)烷基或苄基并且所述有关的抗衡离子为药物上可接受的阴离子)的方法，其特征在于(a)用下列式IV的醛经还原烷基化或者用下列式V的烷基化剂将下列式II的哌啶进行烷基化， 其中Y为离去基团；(b)为了制备其中G为单键；J分别为氧代或硫代；M为氧、硫或NR7以及L为L1的式I化合物，分别用碳酸的二活化衍生物或二活化的硫代羰基衍生物将下列相应的式III化合物进行环合； (c)将下列式VIII的胺与适宜的酰氯进行反应； (d)将式VIII的胺与活化的羧酸衍生物进行反应；(e)为了制备式I化合物的Δ标引的哌啶子基氮原子的N-氧化物，将式I化合物中Δ标引的哌啶子基氮原子氧化；(f)为了制备其中R12不是氢的式I化合物，将其中R12是氢的相应的式I化合物进行烷基化；或者(g)为了制备式I化合物的季铵盐，将式I化合物的Δ标引的哌啶子基氮原子进行烷基化。
11.如权利要求1中所定义的式I化合物的药物上可接受的盐。
全文摘要
其中G、J、L、M、m和D如说明书中所定义的式(I)化合物、它们的N-氧化物以及它们药物上可接受的盐是神经激肽A的非肽类拮抗剂并且可用于治疗哮喘等。本发明还公开了药物组合物，所述式(I)化合物的制备方法以及中间体化合物。
文档编号A61K31/454GK1129449SQ9419315
公开日1996年8月21日 申请日期1994年8月15日 优先权日1993年8月17日
发明者S·C·米勒 申请人:曾尼卡有限公司