专利名称：吲唑甲酰胺的制作方法
技术领域：
本发明属于药理学及有机合成化学领域，提供了一系列作为5-羟色胺5-HT4受体部分激动剂和拮抗剂的吲唑甲酰胺。
大脑及其它器官中涉及5-羟色胺作为神经递质的过程几十年来就是药理研究的一个主要领域。现已鉴定了大量取决于5-羟色胺的过程，影响这些过程的许多疗效化合物已广泛应用。已经鉴定出一打以上的受5-羟色胺影响的受体。这些受体的生理机制有一些已经确定，但另一些仍是广泛而活跃的研究对象。
最近确定的一种5-羟色胺受体叫做5-HT4。利用5-HT4受体的治疗方法由于缺少能影响5-HT4受体而对其它受体无明显作用的化合物而受到妨碍。本发明提供了在5-HT4受体处具有高亲合力和选择性的一系列新药剂。
本发明提供了式I化合物或其可药用的盐
其中R是氢，C1-C6烷基，C3-C6环烷基；R1是氢，卤素，C1-C4烷基，羟基，C1-C4烷氧基或烷硫基，氰基，三氟甲基，甲酰氨基，一或二(C1-C4烷基)甲酰氨基；m、n和o各自独立地为0-5，条件是m、n与o的总和为2-5；R2是氢或C1-C4烷基；R3和R4与它们所连接的氮原子一起形成1-吡咯烷基，1-哌嗪基，1，2，3，4-四氮-2-异喹啉基，2，3-二氢-1-吲哚基，4-吗啉基，1-哌啶基或1-六亚甲基亚胺基，上述基团被以下基团取代苯基、萘基、(苯基或萘基)(C1-C3烷基)、(苯基或萘基)(C1-C3烷酰基)、氨基、一或二(C1-C4烷基)氨基或者化学式为-NH-Y-R5的基团，条件是，哌嗪基或吗啉基不能被氨基、一或二(C1-C4烷基)氨基或-NH-Y-R5取代；其中的苯基或萘基是未取代的或是被1-3个卤原子、C1-C3烷基或C1-C3烷氧基取代；Y是羰基、磺酰基、氨基羰基或氧羰基；R5是C1-C6烷基，C3-C8环烷基，C6-C11二环或三环烷基，(苯基或萘基)(C1-C3烷基)，苯基或萘基；其中环烷基、二环或三环烷基、苯基或萘基是未取代的或者被1-3个羟基、卤原子、C1C3烷基或C1-C3烷氧基取代。
本发明还提供了含有以上化合物和一种可药用载体的药物组合物，提供了各种药学方法，这些方法中使用了式I化合物以及其中由R3和R4与它们所连接的氮原子一起形成的杂环基是未取代的其它化合物。
本发明的药学方法包括影响5-HT4受体的方法，特别是在该受体上提供部分激动剂和拮抗剂活性的方法。因此，本发明提供了用于治疗或预防由于5-HT4受体机能障碍而引起或影响的疾病的方法，以及将式I化合物用于上述目的。本发明化合物能够治疗或预防的疾病包括中枢神经系统病状，例如焦虑、疼痛、抑郁、神经分裂症，记忆障碍和痴呆；胃肠道的病状，如过敏性肠综合症、噁心、胃食管回流症、消化不良、胃肠活动紊乱及腹泻；心血管疾病，如心房纤维性颤动、心律不齐和心搏过速；以及生殖泌尿系统的疾病，如尿潴留，尿失禁和排尿疼痛。
本发明还提供了制备下述式I化合物或其可药用盐的方法，在这些化合物中，R3和R4与它们所连接的氮原子一起，形成被基团-NH-Y-R5取代的以下基团1-吡咯烷基，1，2，3，4-四氢-2-异喹啉基，2，3-二氢-1-吲哚基，1-哌啶基或1-六亚甲基亚胺基；Y是羰基；R5是C3-C8环烷基、C6-C11二环或三环烷基、(苯基或萘基)(C1-C3烷基)、苯基或萘基；其中环烷基、二环或三环烷基、苯基或萘基带有1-3个羟基取代基。所述的方法包括，使式I化合物与化学式为HO2C-R5的化合物在用于形成酰胺反应的偶合剂存在下反应，在该式I化合物中，R3和R4与它们所连接的氮原子一起形成氨基取代的1-吡咯烷基、1，2，3，4-四氢-2-异喹啉基、2，3-二氢-1-吲哚基、1-哌啶基或1-六亚甲基亚胺基。
在本说明书中，除非另外说明，所有的浓度、百分数、比值等均按重量单位表示，只有溶剂混合物是用体积单位表示。未另外说明的所有温度均用摄氏度表示。化合物在以上通式中，一般的化学术语具有其常用含义。例如，术语C1-C6烷基、C1-C4烷基和C1-C3烷基包括例如甲基、乙基、丙基、异丁基、异丙基、叔丁基、2-乙基丁基、己基、异己基等基团。术语C3-C6环烷基和C3-C8环烷基包括例如环丙基、环戊基、环己基和环辛基等基团。C1-C4烷氧基、C1-C4烷硫基和C1-C3烷氧基包括通过氧或硫原子连接的相应的烷基。术语C1-C3烷酰基包括羰基、乙酰基和丙酰基。
术语C6-C11二环或三环烷基包括例如二环[2.2.0]己基、二环[2.1.1]己基、二环[3.2.0]庚基、螺[3.4]辛基、二环[3.1.1]庚基、二环[4.2.0]辛基、螺[3.5]壬基、二环[5.2.0]壬基、二环[7.2.0]十一烷基、二环[3.3.0]辛基、降冰片烷基、螺[4.4]壬基、二环[4.3.0]壬基、二环[3.2.1]辛基、螺[4.5]癸基、二环
癸基、螺[4.6]十一烷基、金钢烷基、三环[1.3.3.0]壬基、三环[1.3.3.0]壬基、三环[3.3.0.0]辛基和螺〔环戊基-1，7′〕降冰片烷基。
术语卤素包括氯、氟、溴和碘。
吲唑基的六元环可以在四个可利用的位置中的任何一个上被一个R1基团取代，例如氟、乙基、羟基、丙氧基、甲硫基、氰基、三氟甲基、甲酰氨基、N-乙基甲酰氨基或N，N-二丙基甲酰氨基。
吲唑的1-位氮原子可以被一个R基团取代，例如甲基、丙基或环戊基。
亚烷基连接基团
可以被一个烷基R2基团取代，例如甲基或异丙基。可以看出，该连接基含有2-5个亚甲基，而且可以缺少任何一个亚甲基。因此，该连接基可以在各个亚甲基上被取代，或可以是未取代的，或者可以在基团中的任何位置上有一个烷基R2取代基。例如，合适的连接基团包括亚乙基、亚丙基、亚戊基和以下基团
在本发明新化合物和用于本发明治疗方法的化合物的构想中，基团R3和R4与它们所连接的氮原子一起形成一个杂环基。在本发明新化合物的构想中，这样形成的杂环基是被取代的，而在用于本发明方法的化合物的构想中，杂环基可以是未取代的或取代的。
作为杂环基上的取代基或杂环基上取代基的组分的环状基团，可以是未取代的或是被一个或多个以下基团取代氯、羟基、溴、甲基、甲氧基、乙基、丙氧基或并丙氧基。
因为由R3和R4形成的杂环基在取代方面可能有些复杂，所以下面示例说明一些典型的这类基团，以便保证读者充分理解。
3-苯基-1-哌啶基，3-(4-氯-6-乙基-2-萘基)-1-哌嗪基，5-〔2-(3-甲基苯基)乙基〕-1，2，3，4-四氢-2-异喹啉基，5-(2，4，6-三氯苯基)乙酰基-2，3-二氢-1-吲哚基，3-(2-降冰片烷基羰氨基)-1-吡咯烷基，3-(环辛基磺酰氨基)-1-哌啶基，3-(己氨基羰氨基)-1-六亚甲基亚胺基，4-〔2-(4-氯-3，5-二甲基苯基)乙基〕氧羰基氨基-1-哌啶基，2-(4-溴-3-氧基-1-萘基)羰氨基-1-吡咯烷基，4-(6-氟-8-丙基-2-萘基)甲磺酰基氨基-1-二氢吲哚基，3-(1-金刚烷基)氧羰基氨基-1-吡咯烷基，6-(4-乙基-2，6-二氟苯基)氨基羰基氨基-2，3-二氢-1-吲哚基，3-(3-苯基丙基)羰氨基-1-哌啶基，3-(4-羟基-2-降冰片烷基羰氨基)-1-吡咯烷基，3-(3-羟基环庚基磺酰氨基)-1-哌啶基，2-(4-羟基-2-氟-1-萘基)羰氨基-1-吡咯烷基。
如式I中所述，本发明包括由上式定义的化合物的可药用盐。本发明化合物与多种无毒的无机和有机酸中任何一种反应，形成可药用的盐。通常用于形成酸加成盐的酸是无机酸，如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、磷酸等，以及有机酸，如对甲苯磺酸、甲磺酸、草酸、对溴苯磺酸、碳酸、琥珀酸、柠檬酸、苯甲酸、乙酸等。这类可药用盐的实例有硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、磺化物、乙酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、己酸盐、庚酸盐、丙炔酸盐、草酸盐、丙二酸盐、丁二酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、丁炔-1，4-二酸盐、己炔-1，6-二酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、磺酸盐、二甲苯磺酸盐、苯基乙酸盐、苯基丙酸盐、苯基丁酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、γ-羟基丁酸盐、羟基乙酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、丙磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、扁桃酸盐等。优选的可药用酸加成盐是与诸如盐酸和氢溴酸等无机酸和与诸如马来酸及甲磺酸等有机酸形成的盐。
本说明书中所述的所有该化合物都具有活性并且有用，但是某些类别的化合物特别有用，它们是优选的化合物。下列名单列出了几类优选的化合物。应该清楚，名单中的每一个都可以与其它的相组合，形成另外的、更宽或者更受限制的各类优选化合物a)R是氢。
b)R是C1-C3烷基或C5-C6环烷基。
c)R是氢或C1-C3烷基。
d)R是氢或C1-C6仲烷基。
e)R1是氢。
f)R1是氢、卤素、烷基或烷氧基。
g)R2是氢或甲基。
h)R2是氢。
i)m、n和o之和为2-4。
j)R3和R4与它们所连接的氮原子一起形成1-吡咯烷基、1-哌嗪基或1-哌啶基。
k)由R3、R4和氮原子形成的杂环基上的取代基是苯基、萘基或(苯基或萘基)(C1-C3烷基)。
1)由R3、R4和氮原子形成的杂环基上的取代基是氨基或者一或二(C1-C4烷基)氨基。
m)由R3、R4和氮原子形成的杂环基上的取代基是-NH-Y-R5。
n)Y是羰基或磺酰基。
o)Y是氨基羰基或氧羰基。
p)R5是烷基或环烷基。
q)R5是金刚烷基或降冰片烷基。
r)R5是苯基、萘基或(苯基或萘基)(C1-C3烷基)。
s)R5被1-3个羟基取代。
t)R5是被1-3个羟基取代的金刚烷基。
u)R5是被1-3个羟基取代的环烷基。
v)该化合物是一种可药用的盐。合成本发明化合物是由带有所要的R1取代基的1H-吲唑-3-羧酸制备的，这类酸是众所周知的化合物。合成过程中的基本反应是在吲唑羧酸和由连接基团和-N(R3)(R4)体系构成的胺类化合物之间形成甲酰胺。酰胺的形成容易按常规方式进行，例如用1，1′-羰基二咪唑作为活化剂在适中的温度下于任何惰性溶剂中进行。对于在约0°-约50℃、通常优选在环境温度下进行的过程，四氢呋喃通常是方便和优选的溶剂。
胺反应物的合成是常规反应，因为该反应物由常规使用而且容易反应的单元构成。应该清楚，带有自由氨基、羟基等基团的反应物在反应期间需要按常规方式加以保护，在分离产物之前将保护基团除掉。
另外，在结合了R3和R4的杂环基上的取代基常常可以方便地作为第二步加上，例如通过这类杂环基与例如芳酰卤反应以形成苯甲酰基或萘基羰基取代基。类似地，取代的磺酰卤化物可以作为反应物用来提供其中Y是磺酰基的取代的磺酰氨基取代基。
通常优选在分子的其余部分已经合成之后，在第二步中加上R取代基。在很强的碱(如氢化钠)存在下与所要的R取代基的磺取代的衍生物反应，容易形成所要的产物。反应最好是在约0℃至约环境温度的较冷温度下进行；二甲基甲酰胺常常是优选的溶剂。
本发明特别优选的方法在下面的实施例37和38中示例说明，它以出乎意料的简单方式形成了具有羟基取代的R5基团的式I化合物。专业技术人员会以为起始化合物的羟基必须保护以防止不良的聚合物形成。但是下面的实施例表明，与未加保护的羟基化合物的反应以优异的产率和纯度顺利进行。此过程可以在约0-80℃、优选从环境温度至约60℃的温度下，在质子溶剂例如卤代烃(如二氯甲烷、氯仿和二氯乙烯)、酰胺(如二甲基甲酰胺和二甲基乙酰胺)和醚类(如乙醚和四氢呋喃)中进行。不需要特别隔绝湿气或氧气。优选的偶合剂是羰基二咪唑，但是任何偶合剂，例如通常(尤其是在肽化学中)用来促进酰胺键形成的偶合剂，都是有效的。关于这类偶合剂，可参看例如“肽(ThePeptides)”，Gross和Meienhofer编，Academic Press(1979)，第二章。
关于本发明化合物的合成的进一步信息可以由以下制备实施例中得到。本领域的读者会明白，这些实施例是示例说明性的而不是限制性的，对于读者，还存在许多种可用的本发明方法的变型。
实施例1N-〔2-(1-哌啶基)乙基〕-1H-吲唑-3-甲酰胺盐酸盐的制备向1H-吲唑-3-羧酸(0.778g，4.8mmol)在25ml四氢呋喃中的溶液里加入1，1′-羰基二咪唑(0.778g，4.8mmol)。在室温下搅拌此溶液3小时。向其中逐滴加入1-(2-氨乙基)哌啶(0.615g，4.8mmol)在3.0ml四氢呋喃中的溶液。然后将该溶液在室温下搅拌18小时，蒸发，用水稀释。用乙酸乙酯萃取后用水和盐水洗，得到1.14g低熔点固体。自乙酸乙酯/甲醇中以盐酸盐的形式结晶，得到0.407g无色晶体，熔点252℃质谱，m+＝273。元素分析(C15H21ClN4O)，理论值C，58.34；H，6.85；N，18.14；实验值C，58.57；H，6.97；N，18.02。
实施例2N-〔2-(1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺盐酸盐的制备将实施例1游离碱的一部分(1.41g，5.17mmol)在室温下于二甲基甲酰胺中搅拌，同时加入氢化钠(0.207g，5.17mmol，60％矿物油分散体)。在室温下搅拌4小时后，将反应混合物在冰浴中冷却到15℃，逐滴加入2-碘丙烷(0.57ml，5.7mmol)。所形成的混合物在室温下搅拌18小时，蒸发溶剂，残余物溶在乙酸乙酯中。用10％碳酸钠溶液、水和盐水洗此乙酸乙酯溶液，然后蒸发得到1.76g油。快速层析〔硅胶，二氯甲烷/甲醇(85/15)〕得到1.35g油状物。自乙酸乙酯/甲醇中以盐酸盐形式结晶，得到1.109g无色晶体。熔点＞250℃。质谱，m+＝314。元素分析(C14H27ClN4O)，理论值C，61.61；H，7.76，N，15.97；实验值C，61.85；H，7.79；N，15.98。
实施例3N-〔3-(1-哌啶基)丙基〕-1H-吲唑-3-甲酰胺的制备按照实施例1中所述的同样步骤。反应物用量如下1H-吲唑-3-羧酸(0.65g，4mmol)，1，1′-羰基二咪唑(0.65g，4mmol)和1-(3-氨丙基)哌啶(0.57g，4mmol)。将乙酸乙酯萃取液蒸发成0.906g油状物。快速层析〔硅胶，二氯甲烷/甲醇/氢氧化铝(100/10/0.5)〕得到0.457g油状物。质谱，m+＝287。
实施例4N-〔3-(1-哌啶基)丙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺盐酸盐的制备按照实施例2中所述的同样步骤。反应物用量如下实施例3的产物(0.457g，1.6mmol)，氢化钠(0.064g，1.6mmol，60％矿物油分散体)和2-碘丙烷(0.18ml，1.76mmol)。快速层析〔硅胶，二氯甲烷甲醇/氢氧化铵(100/2.5/0.5)〕得到0.366g油状物。以盐酸盐形式自乙酸乙酯/甲醇中重结晶，得到0.145g无色晶体。熔点156-158℃。质谱，m+＝329。元素分析(C19H29ClN4O)，理论值C，62.54；H，8.01；N，15.35；实验值C，62.69；H，7.91；N，15.60。
实施例5N-〔4-(1-哌啶基)丁基〕-1H-吲唑-3-甲酰胺的制备向1H-吲唑-3-羧酸(0.745g，4.6mmol)在20ml二甲基甲酰胺中的溶液里加入1，1′-羰基二咪唑(0.745g，4.6mmol)。将此混合物在室温下搅拌4小时，向其中逐滴加入溶在3ml二甲基甲酰胺中的1-(4-氨基丁基)哌啶(0.718g，4.6mmol)。在室温下搅拌此溶液18小时，蒸走挥发物，残余物用水稀释。用乙酸乙酯萃取，随后用水和盐水洗，得到1.40g油状物，其纯度足以在下一步反应中使用。质谱，m+＝301。
实施例6N-〔4-(1-哌啶基)丁基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺草酸盐的制备按照实施例2中所述的相同步骤。使用的数量如下实施例5的产物(1.40g，4.66mmol)，氢化钠(0.190g，4.66mmol，60％矿物油分散体)和2-碘丙烷(0.52ml，5.13mmol)。乙酸乙酯萃取液形成1.48g油状物。自2-丙醇中以草酸盐形式结晶两次，得到0.41g无色晶体。熔点143℃。质谱，m+＝343。元素分析(C22H32N4O5)，理论值C，61.09；H，7.46；N，12.95；实验值C，61.05；H，7.51；N，13.02。
制备例11-(2-氨乙基)-4-苄氧羰基氨基哌啶的制备在搅拌下向冷至10℃的4-氨基-1-苄基哌啶(15.2g，80mmol)、碳酸氢钠(9.54g，110mmol)、310ml四氢呋喃和155ml水的混合物中逐滴加入氯甲酸苄酯(14.0ml，98mmol)。所形成的混合物在5-10℃下搅拌2小时。将反应混合物倒在1000ml水上。用乙酸乙酯萃取，用盐水洗，干燥，蒸发掉乙酸乙酯，得到粘性油状物。与己烷一起研磨，得到18.56g固体。熔点74-76℃。质谱，m+＝324。
将以上中间体(18.5g，57mmol)在300ml 1，2-二氯乙烷中搅拌并在冰浴中冷却到5℃，其间逐滴加入氯甲酸1-氯乙酯(12.3ml，114mmol)。在室温下搅拌1小时后，蒸走1，2-二氯乙烷得到残余物。向此残余物中加入300ml甲醇，将溶液加热回流1小时。蒸走甲醇，加入300ml乙酸乙酯，过滤后得到15.67g黄色固体。熔点178℃，质谱，m+＝235。
将以上中间体(2.07g，7.6mmol)、N-(2-溴乙基)邻苯二甲酰亚胺(1.94g，7.6mmol)和碳酸钠(2.83g，26.6mmol)在40ml二甲基甲酰胺中一起于100℃下加热18小时。蒸走二甲基甲酰胺，用水稀释，用乙酸乙酯萃取后用水和盐水洗，干燥，蒸发后得到3.15g固体。自乙醇中结晶得到1.58g无色晶体。熔点159-161℃。质谱，m+＝407。元素分析(C23H25N3O4)，理论值C，57.80；H，6.18；N，10.31；实验值C，57.71；H，6.32；N，10.20。
将如上制得的中间体(11.9g，29.2mmol)在600ml乙醇中搅拌，同时加入15.8ml水合肼。将此混合物加热回流4小时。冷却后，将沉淀过滤，滤液蒸发得到残余物。向该残余物中小心地加入250ml 1N氢氧化钠溶液，随后加入固体氯化钠直到溶液饱和。用乙醚反复萃取，干燥并蒸发，得到8.19g油状物。质谱，m+＝278。
实施例7N-〔2-(4-苄氧羰基氨基-1-哌啶基)乙基〕-1H-吲唑-3-甲酰胺的制备按照实施例5中所述的相同步骤。反应物用量如下1H-吲唑-3-羧酸(4.70g，29mmol)，1，1′-羰基二咪唑(4.70g，29mmol)和制备例1中得到的中间体(8.10g，29mmol)。将乙酸乙酯萃取液蒸发，得到11.17g固体，其纯度足以在下一步反应中应用。熔点184-187℃。质谱，m+＝422。
实施例8N-〔2-(4-苄氧羰基氨基-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺草酸盐的制备按照实施例2中所述的相同步骤。反应物用量如下实施例7的产物(11.1g，26.3mmol)，氢化钠(1.05g，26.3mmol，60％矿物油分散体)和2-碘丙烷(2.90ml，29mmol)。快速层析〔硅胶，二氯甲烷/甲醇(95/5)〕得到10.60g油状物。自乙酸乙酯/甲醇中以草酸盐形式结晶，得到无色晶体。熔点149-151℃。质谱，m+＝463，元素分析(C28H35N5O7)，理论值C，60.75；H，6.37；N，12.65；实验值C，60.53；H，6.37；N，12.47。
实施例9N-〔2-(1-吡咯烷基)乙基〕-1H-吲唑-3-甲酰胺的制备按照实施例1中所述的相同步骤。反应物用量如下1H-吲唑-3-羧酸(0.65g，4mmol)，1，1′-羰基二咪唑(0.65g，4mmol)和1-(2-氨乙基)吡咯烷(0.458g，4mmol)。将乙酸乙酯萃取液蒸发至0.754g油状物。快速层析〔硅胶，二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵(100/10/0.5)〕得到0.421g油状物。质谱，m+＝258。
实施例10N-〔2-(1-吡咯烷基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺盐酸盐的制备按照实施例2中所述的相同步骤。反应物用量如下实施例9的产物(0.421g，1.63mmol)，氢化钠(0.065g，1.63mmol，60％矿物油分散体)和2-碘丙烷(0.18ml，1.77mmol)。将乙酸乙酯萃取液蒸发成0.526g油状物。快速层析〔硅胶，二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵(100/5/0.5)〕得到0.385g油状物。自乙酸乙酯/甲醇中以盐酸盐形式结晶，得到0.197g无色晶体。熔点210-212℃。质谱，m+＝300。元素分析(C17H25ClN4O)，理论值C，60.61；H，7.48；N，16.63；实验值C，60.44；H，7.21；N，16.58。
制备例2N-(2-氨乙基)六亚甲基亚胺的制备将六亚甲基亚胺(5.7ml，50mmol)、N-(2-溴乙基)邻苯二甲酰亚胺(12.7g，50mmol)和碳酸钠(13.3g，125mmol)一起在250ml二甲基甲酰胺中于100℃下加热18小时。蒸走二甲基甲酰胺，用水稀释，用乙酸乙酯萃取后依次用水和盐水洗，干燥和蒸发后得到12.71g油状物。自2-丙醇中以甲苯磺酸盐的形式结晶，得到13.29g无色晶体。熔点180-182℃。质谱，m+＝272。元素分析(C23H28N2O5S)，理论值C，62.14；H，6.35；N，6.30；实验值C，62.37；H，6.19；N，6.35。
将以上中间体(作为游离碱)(3.33g，12.2mmol)在220ml乙醇中搅拌，其间加入5.0ml水合肼。将此混合物回流加热4小时。冷却后将混合物过滤，滤液蒸发得到残余物。用1N NaOH溶液小心地稀释此残余物，随后用乙醚萃取，干燥和蒸发后得到1.33g油状物。此物质适合用于下一反应。
实施例11N-〔2-(1-六亚甲基亚胺基)乙基〕-1H-吲唑-3-甲酰胺的制备按照实施例5中所述的相同步骤。反应物用量如下制备例2中的中间体(1.33g，9.3mmoL)，1H-吲唑-3-羧酸(1.51g，9.3mmol)和1，1′-羰基二咪唑(1.51g，9.3mmol)。将乙酸乙酯萃取液蒸发形成固体。加入环己烷并过滤，得到2.46g固体。熔点104-115℃。质谱，m+＝287。
实施例12N-〔2-(1-六亚甲基亚胺基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺盐酸盐的制备按照实施例2中所述的同样步骤。反应物用量如下实施例11的产物(2.45g，8.55mmol)、氢化钠(0.342g，8.55mmol，60％矿物油分散体)和2-碘丙烷(0.94ml，9.4mmol)。将乙酸乙酯萃取液蒸发成3.0g油状物。快速层析〔硅胶，二氯甲烷/甲醇(85/15)〕得到1.39g油状物。自乙酸乙酯/甲醇中结晶，得到1.05g无色晶体。熔点216-218℃。质谱，m+＝328。元素分析(C19H29ClN4O)，理论值C，62.54；H，8.01；N，15.35；实验值C，62.52；H，8.09；N，15.48。
实施例13N-〔2-(4-吗啉基)乙基〕-1H-吲唑-3-甲酰胺的制备按照实施例1中所述的相同步骤。反应物用量如下1H-吲唑-3-羧酸(0.65g，4mmol)，1，1′-羰基二咪唑(0.65g，4mmol)和4-(2-氨乙基)吗啉(0.52ml，4mmol)。将乙酸乙酯萃取液蒸发成0.468g固体。自乙酸乙酯中结晶，得到0.267g无色晶体。质谱，m+＝274。
实施例14N-〔2-(4-吗啉基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺盐酸盐的制备按照实施例2中所述的相同步骤。反应物用量如下实施例13的产物(0.267g，0.97mmol)，氢化钠(0.040g，0.97mmol，60％矿物油分散体)和2-碘丙烷(0.107ml，1.07mmol)。将乙酸乙酯萃取液蒸发成0.324g油状物。自乙酸乙酯/甲醇中以盐酸盐形式结晶二次，得到0.122g无色晶体。熔点201-203℃。质谱， m+＝316。元素分析(C17H25ClN4O2)，理论值C，57.87；H，7.14；N，15.88；实验值C，57.71；H，7.04；N，16.07。
制备例31-(2-氨乙基)-4-苄基哌嗪的制备将1-苄基哌嗪(8.81g，50mmol)、N-(2-溴乙基)邻苯二甲酰亚胺(12.7g，50mmol)和碳酸钠(13.25g，125mmol)一起在250ml二甲基甲酰胺中于100℃下加热18小时。蒸走二甲基甲酰胺，用水稀释并用乙酸乙酯萃取，随后依次用水和盐水洗，干燥蒸发后得到18.47g油状物。自甲醇中以二盐酸盐的形式结晶，得到8.70g无色晶体。熔点＞250℃。质谱，m+＝349。元素分析(C21H25Cl2N3O2)，理论值C，59.72；H，5.97；N，9.95；实验值C，60.04；H，6.00；N，10.04。
将上述中间体(8.48g，20mmol)在400ml乙醇中搅拌，同时加入10.0ml水合肼。将此混合物回流加热4小时。冷却后将混合物过滤，滤液蒸发后得残余物。将此残余物小心地用300ml 1N氢氧化钠溶液稀释，随后用乙醚萃取，干燥，蒸发，得到3.69g油状物。质谱，m+＝219。
实施例15N-〔2-(4-苄基-1-哌嗪基)乙基〕-1H-吲唑-3-甲酰胺的制备按照实施例5中所述的相同步骤。反应物用量如下1H-吲唑-3-羧酸(2.72g，16.7mmol)，1，1′-羰基二咪唑(2.72g，16.7mmol)和制备例3中的中间体(3.68g，16.7mmol)。将乙酸乙酯萃取液蒸发成5.72g固体。质谱，m+＝364。
实施例16N-〔2-(4-苄基-1-哌嗪基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺二盐酸盐的制备按照实施例2中所述的相同步骤。反应物用量如下实施例15中的产物(5.72g，15.7mmol)，氢化钠(0.630g，15.7mmol，60％矿物油分散体)和2-碘丙烷(1.73ml.17.3mmol)。将乙酸乙酯萃取液蒸发成7.24g油状物。快速层析〔硅胶，二氯甲烷/甲醇(93/7)〕得到2.85g油状物。自2-丙醇中以二盐酸盐的形式结晶，得到无色晶体。熔点242℃。质谱，m+＝405。元素分析(C24H33Cl2N5O)，理论值C，60.25；H，6.95；N，14.64；实验值C，60.04；H，7.01；N，14.53。
实施例17N-〔2-(1-哌嗪基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺的制备游离碱形式的实施例16产物(2.35g，5.8mmol)与氢气在5％Pd/C存在下于乙醇溶液中反应(40℃/18小时/60 PSI)。在滤除催化剂后，蒸走乙醇，得到1.49g油状物。快速层析〔硅胶，二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵(100/15/0.5)〕得到0.951g油状物。质谱，m+＝315。
实施例18N-〔2-(4-苯甲酰-1-哌嗪基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺草酸盐的制备将实施例17中的产物(0.315g，1mmol)和三乙胺(0.146ml，1.05mmol)在10.0ml四氢呋喃中搅拌并在冰浴中短时间冷却。向此混合物中逐滴加入苯甲酰氯(0.116ml，1mmol)，将所形成的混合物在室温下搅拌18小时，过滤，蒸发成油状物。自乙酸乙酯/甲醇中以草酸盐形式结晶，得到0.284g无色晶体。熔点105℃。质谱，m+＝419。准确的质量理论值，419.2321；实验值419.2315。
制备例41-(2-氨乙基)-4-苄基哌啶的制备将4-苄基哌啶(5.30ml，30mmol)、N-(2-溴乙基)邻苯二甲酰亚胺(7.6g，30mmol)和碳酸钠(7.95g，75mmol)一起在150ml二甲基甲酰胺中于100℃下加热18小时。将二甲基甲酰胺蒸发，用水稀释，用乙酸乙酯萃取，随后用水和盐水洗，干燥，蒸发后得到11.61g油状物。自乙醇中以甲苯磺酸盐的形式结晶，得到10.39g无色晶体。熔点194-196℃。质谱，m+＝348。元素分析(C29H32N2O5S)，理论值C，66.90；H，6.20；N，5.38；实验值C，66.68；H，6.40；N，5.16。
将游离碱形式的上述中间体(5.05g，14mmol)在225ml乙醇中搅拌，同时加入5.0ml水合肼。将此混合物回流加热4小时。冷却后将混合物过滤，滤液蒸发成残余物。用1N NaOH溶液小心地将残余物稀释，随后用乙醚萃取，干燥并蒸发，得到3.13g油状物。质谱，m+＝218。
实施例19N-〔2-(4-苄基-1-哌啶基)乙基〕-1H-吲唑-3-甲酰胺的制备按照实施例5中所述的相同步骤。反应物及其用量如下1H-吲唑-3-羧酸(1.62g，10mmol)，1，1′-羰基二咪唑(1.62g，10mmol)和制备例4的中间体(2.18g，10mmol)。将乙酸乙酯萃取液蒸发成固体。加入环己烷并过滤，得到3.52g固体。质谱，m+＝363。
实施例20N-〔2-(4-苄基-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺草酸盐的制备按照实施例2中所述的相同步骤。反应物用量如下实施例19的产物(3.50g，9.7mmol)，氢化钠(0.390g，9.7mmol，60％矿物油分散体)和2-碘丙烷(1.07ml，10.7mmol)。将乙酸乙酯萃取液蒸发成4.30g油状物。快速层析〔硅胶，二氯甲烷/甲醇(93/7)〕得到2.52g油状物。自乙醇中以草酸盐形式结晶，得到2.51g无色晶体。熔点149℃。质谱，m+＝404。元素分析(C27H34N4O5)，理论值C，65.57；H，6.93；N，11.33；实验值C，65.32；H，6.86；N，11.48。
制备例52-(2-氨乙基)-1，2，3，4-四氢异喹啉的制备将1，2，3，4-四氢异喹啉(3.76ml，30mmol)，N-(2-溴乙基)邻苯二甲酰亚胺(7.6g，30mmol)和碳酸钠(8.0g，75mmol)一起在150ml二甲基甲酰胺中于100℃下加热18小时。将二甲基甲酰胺蒸发，用水稀释，用乙酸乙酯萃取，随后依次用水和盐水洗，干燥，蒸发后得到10 46g油状物。自乙醇中以甲苯磺酸盐的形式结晶，得到10.30g无色晶体。熔点196-198℃。质谱，m+＝306。元素分析(C26H26N2O5S)，理论值C，65.26；H，5.48；N，5.85；实验值C，65.37；H，5.45；N，5.95。
将游离碱形式的上述中间体(3.06g，10mmol)在200ml乙醇中搅拌，同时加入5.0ml水合肼。将此混合物加热回流4小时。冷却后将混合物过滤，滤液蒸发成残余物。此残余物小心地用1N氢氧化钠溶液稀释，随后用乙醚萃取，干燥并蒸发，得到1.62g油状物。质谱，m+＝176。
实施例21N-〔2-(1，2，3，4-四氢-2-异喹啉基)乙基〕-1H-吲唑-3-甲酰胺的制备按照实施例5中所述的相同步骤。反应物用量如下1H-吲唑-3-羧酸(1.49g，9.2mmol)，1，1′-羰基二咪唑(1.49g，9.2mmol)和制备例5中的中间体(1.62g，9.2mmol)。将乙酸乙酯萃取液蒸发成固体。加入环己烷，过滤，得到2.73g固体。质谱，m+＝321。
实施例22N-〔2-(1，2，3，4-四氢-2-异喹啉基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺草酸盐的制备按照实施例2中所述的相同步骤。反应物用量如下实施例21的产物(2.70g，8.5mmol)，氢化钠(0.340g，8.5mmol，60％矿物油分散体)和2 碘丙烷(0.94ml，9.4mmol)。将乙酸乙酯萃取液蒸发成3.28g油状物。快速层析〔硅胶，二氯甲烷/甲醇(97/3)〕得到2.62g油状物。自乙醇中以草酸盐形式结晶，得到2.47g无色晶体。熔点191℃。质谱，m+＝362。元素分析(C24H28N4O5)，理论值C，63.70；H，6.24；N，12.38；实验值C，63.96；H，6.47；N，12.26。
实施例23N-〔2-(4-氨基-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺二草酸盐的制备游离碱形式的实施例8产物(8.71g，18.8mmol)与氢气在5％Pd/C存在下于乙醇溶液中反应(25℃/18小时/60 PSI)。滤除催化剂后，将乙醇蒸发，得到5.0g油状物。自甲醇/水中以二草酸盐的形式结晶，得到无色晶体。熔点232℃。质谱，m+＝329。元素分析(C22H31N5O9)，理论值C，51.86；H，6.13；N，13.75；实验值C，51.61；H，6.04；N，13.48。
实施例24N-〔2-(4-甲磺酰氨基-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺草酸盐的制备将游离碱形式的实施例23的产物(0.330g，1mmol)和三乙胺(0.15ml，1.05mmol)在10.0ml四氢呋喃中搅拌，在冰浴中短时间冷却。向此混合物中逐滴加入甲磺酰氯(0.08ml，1mmol)，所形成的混合物在室温下搅拌18小时。将混合物过滤，滤液蒸发成0.401g油状物。快速层析〔硅胶，二氯甲烷/甲醇(90/10)〕得到0.147g油状物，自乙酸乙酯/甲醇中以草酸盐形式结晶得到0.149g无色晶体。熔点204℃。质谱，m+＝407。准确的质量理论值，408.2069；实验值408.2066。
实施例25N-〔2-(4-苯甲酰氨基-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺草酸盐的制备将游离碱形式的实施例23的产物(0.330g，1mmol)和三乙胺(0.15ml，1.05mmol)在10.0ml四氢呋喃中搅拌并在冰浴中短时间冷却。向此混合物中逐滴加入苯甲酰氯(0.116ml，1mmol)，所形成的混合物在室温下搅拌18小时，过滤，将滤液蒸发成0.498g油状物。自乙酸乙酯/甲醇中以草酸盐形式结晶，得到0.265g无色结晶，熔点130℃。质谱，m+＝433。元素分析(C27H33N5O6)，理论值C，61.94；H，6.35；N，13.38；实验值C，61.73；H，6.35；N，13.33。
实施例26N-〔2-(4-苄基羰氨基-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺草酸盐的制备将游离碱形式的实施例23的产物(0.310g，0.94mmol)和三乙胺(0.13ml，0.94mmol)在10.0ml四氢呋喃中搅拌并在冰浴中短时间冷却。向此混合物中滴加苯乙酰氯(0.12ml，0.94mmol)，所形成的混合物在室温下搅拌18小时，过滤。将滤液蒸发成油状物。自乙酸乙酯/甲醇中以草酸盐形式结晶，得到0.176g无色晶体。熔点168℃。质谱，m+＝447。元素分析(C28H35N5O6)，理论值C，62.56；H，6.56；N，13.03；实验值C，62.61；H，6.65；N，12.83。
实施例27N-〔2-(4-(1-金刚烷基羰基氨基)-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺草酸盐的制备将游离碱形式的实施例23的产物(0.330g，1mmol)和三乙胺(0.15ml，1.05mmol)在10.0ml四氢呋喃中搅拌并在冰浴中短时间冷却。向此混合物中分批加入1-金刚烷酰氯(0.199g，1mmol)，所形成的混合物在室温下搅拌18小时，过滤，滤液蒸发成0.565g油状物。自乙酸乙酯/甲醇中以草酸盐形式结晶，得到0.267g无色晶体，熔点228℃。质谱，m+＝491。元素分析(C31H43N5O6)，理论值C，64.01；H，7.45；N，12.04；实验值C，63.89；H，7.53；N，12.12。
实施例28N-〔2-(4-乙酰氨基-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺草酸盐的制备将游离碱形式的实施例23的产物(0.330g，1mmol)和三乙胺(0.15ml，1.05mmol)在10.0ml四氢呋喃中搅拌并在冰浴中短暂冷却。向此混合物中逐滴加入乙酰氯(0.071ml，1mmol)，所形成的混合物在室温下搅拌18小时，过滤，将滤液蒸发成0.360g油状物。自乙酸乙酯/甲醇中以草酸盐形式结晶，得到0.243g无色晶体。熔点176℃。质谱，m+＝371。元素分析(C22H31N5O6)，理论值C，57.25；H，6.77；N，15.17；实验值C，56.95；H，6.74；N，14.99。
实施例29N-〔2-(4-丙酰氨基-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺草酸盐的制备游离碱形式的实施例23的产物(0.310g，0.94mmol)和三乙胺(0.13ml，0.94mmol)在10.0ml四氢呋喃中搅拌并在冰浴中短暂冷却。向此混合物中滴加丙酰氯(0.08ml，0.94mmol)，所形成的混合物在室温下搅拌18小时，过滤，将滤液蒸发形成油状物。自乙酸乙酯/甲醇中以草酸盐形式结晶，得到0.168g无色晶体。熔点169℃。质谱，m+＝385。元素分析(C23H33N5O6)，理论值C，58.09；H，6.99；N，14.73；实验值C，57.79；H，6.93；N，14.46。
实施例30N-〔2-(4-丁酰氨基-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺草酸盐的制备将游离碱形式的实施例23的产物(0.330g，1mmol)和三乙胺(0.15ml，1.05mmol)在10.0ml四氢呋喃中搅拌并在冰浴中短暂冷却。向此混合物中逐滴加入丁酰氯(0.1ml，1mmol)，所形成的混合物在室温下搅拌18小时，过滤，将滤液蒸发得到0.389g油状物。自乙酸乙酯/甲醇中以草酸盐形式结晶，得到0.149g无色晶体。熔点122℃。质谱，m+＝399。元素分析(C24H35N5O6)，理论值C，58.88；H，7.21；N，14.32；实验值C，58.60；H，7.15；N，14.30。
实施例31N-〔2-(4-戊酰氨基-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺的制备将游离碱形式的实施例23的产物(0.330g，1mmol)和三乙胺(0.15ml，1.05mmol)在10.0ml四氢呋喃中搅拌并在冰浴中短暂冷却。向此混合物中逐滴加入戊酰氯(0.12ml，1mmol)，所形成的混合物在室温下搅拌18小时，过滤，将滤液蒸发得到0.385g油状物。自乙醚中结晶得到0.176g无色晶体。熔点107-109℃。质谱，m+＝413。元素分析(C23H35N5O2)，理论值C，66.80；H，8.53；N，16.93；实验值C，66.59；H，8.66；N，17.04。
实施例32N-〔2-(4-异丁酰氨基-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺草酸盐的制备将游离碱形式的实施例23的产物(0.330g，1mmol)和三乙胺(0.15ml，1.05mmol)在10.0ml四氢呋喃中搅拌并在冰浴中短暂冷却。向此混合物中逐滴加入异丁酰氯(0.10ml，1mmol)，所形成的混合物在室温下搅拌18小时后过滤，滤液蒸发得到0.417g油状物。自2-丙醇中以草酸盐形式结晶，得到0.194g无色晶体。熔点193℃。质谱，m+＝399。元素分析(C24H35N5O6)，理论值C，58.88；H，7.21；N，14.30；实验值C，58.60；H，6.95；N，14.11。
实施例33N-〔2-(4-三甲基乙酰氨基-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺草酸盐的制备将游离碱形式的实施例23的产物(0.330g，1mmol)和三乙胺(0.15ml，1.05mmol)在10.0ml四氢呋喃中搅拌并在冰浴中短暂冷却。向此混合物中逐滴加入三甲基乙酰氯(0.12ml，1mmol)，所形成的混合物在室温下搅拌18小时后过滤，蒸发滤液得到0.384g油状物。自2-丙醇中以草酸盐形式结晶，得到0.297g无色晶体。熔点194℃。质谱，m+＝413。元素分析(C25H37N5O6)，理论值C，59.63；H，7.41；N，13.91；实验值C，59.47；H，7.62；N，13.63。
实施例34N-〔2-(4-苄氨基羰基氨基-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺草酸盐的制备将游离碱形式的实施例23的产物(0.330g，1mmol)在8ml四氢呋喃中搅拌并在冰浴中冷却到10℃。向此混合物中逐滴加入异氰酸苄酯(0.12ml，1mmol)，所形成的混合物在室温下搅拌1.5小时，蒸发成油状物。自乙醇中以草酸盐形式结晶，得到0.319g无色晶体。熔点168℃。质谱，m+＝463。准确的质量理论值463.2821；实验值463.2838。
实施例35N-〔2-(4-苯氨基羰基氨基-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺草酸盐的制备将游离碱形式的实施例23的产物(0.330g，1mmol)在8ml四氢呋喃中搅拌并在冰浴中冷却到10℃。向此混合物中逐滴加入异氰酸苯酯(0.11ml，1mmol)，所形成的混合物在室温下搅拌1.5小时，蒸发成油状物。自乙醇中以草酸盐形式结晶，得到0.299g无色晶体。熔点198℃。质谱，m+＝449。元素分析(C27H34N6O6)，理论值C，60.21；H，6.36；N，15.60；实验值C，60.42；H，6.60；N，15.47。
实施例36N-〔2-(4-(4-氟苯基氨基羰基氨基)-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺草酸盐的制备将游离碱形式的实施例23的产物(0.330g，1mmol)在8ml四氢呋喃中搅拌并在冰浴中冷却到10℃。向此混合物中逐滴加入异氰酸4-氟苯酯(0.11ml，1mmol)，所形成的混合物在室温下搅拌1.5小时，过滤，滤液蒸发成油状物。自乙酸乙酯/甲醇中以草酸盐形式结晶得到0.147g无色晶体。熔点158℃。质谱，m+＝466。元素分析(C27H33FN6O6)，理论值C，58.27；H，5.98；N，15.10；实验值C，58.48；H，6.23；N，14.94。
实施例37N-〔2-(4-(3-羟基-1-金刚烷基羰基氨基)-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺草酸盐的制备将1.07g(5.45mmol)3-羟基-1-金刚烷基羧酸和0.88g(5.45mmol)1，1′-羰基二咪唑在10ml二甲基甲酰胺中的混合物在环境温度下搅拌2小时。向此溶液中逐滴加入在7ml二甲基甲酰胺中的1.80g(5.45mmol)实施例23的产物。将反应混合物搅拌18小时，然后真空浓缩，用二氯甲烷稀释，过滤除去固体。粗产物用层析法纯化(硅胶，9∶1二氯甲烷/甲醇)，得到1.30g(47％)所要的产物，为泡沫体。在20ml乙醇中用0.23g(2.62mmol)草酸对产物作进一步处理，浓缩溶液后得到1.51g草酸盐(LSN 343031)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)d 8.51(t，1H)，8.19(d，1H)，7.9(br s，3H)，7.78(d，1H)，7.44(t，1H)，7.40(d，1H)，7.27(t，1H)，5.06(m，1H)，3.84(m，1H)，3.72(m，2H)，3.52(m，2H)，3.24(br t，2H)，3.07(br t，2H)，2.11(br s，2H)，1.82(m，4H)，1.64(m，6H)，1.55(m，10H)，1.48(br s，2H).
实施例38N-〔2-(4-(4-羟基-1-金刚烷基羰基氨基)-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺草酸盐的制备将0.50g(2.55mmol)4-羟基-1-金刚烷基羧酸和0.44g(2.71mmol)1，1′-羰基二咪唑在10ml二甲基甲酰胺中的混合物于环境温度下搅拌2小时。向此溶液中逐滴加入在7ml二甲基甲酰胺中的0.90g(2.75mmol)实施例23的产物。将反应混合物搅拌18小时后真空浓缩，用二氯甲烷稀释，过滤除去固体。粗产物用层析法纯化(硅胶，9∶1二氯甲烷/甲醇)，得到0.71g(55％)所要的产物，为泡沫状物。在15ml乙醇中用88mg草酸对500mg产物作进一步处理，在将溶液浓缩后，得到580mg草酸盐(LSN 343032)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)d8.47(t，1H)，8.11(d，1H)，7.75(d，1H)，7.40(t，1H)，7.28(d，1H)，7.21.(t，1H)，6.3(br s，3H)，5.04(m，1H)，3.74(m，1H)，3.59(m，3H)，3.40(m，2H)，3.13(m，2H)，2.95(m，2H)，1.95(d，2H)，1.69(m，13H)，1.47(d，6H)，1.25(d，2H).治疗对本发明的代表性化合物作了生物试验以证实它们与5-HT4受体的相互作用。试验是在刚从每只重250-300g的雄性Wistar鼠上取下的食管平滑肌中进行的。用断颈法杀死鼠，取出食管，割去相连的组织。食管作为纵向试样使用，从每只动物得到两个试样。将各组织的两端用线扎紧，下端捆在一根固定的玻璃棒上，上端则捆在一个力传感器上。
将各组织试样放入器官浴中，浴内含有10ml改性的Krebs溶液，其成分如下(毫摩尔)NaCl 118.2；KCl 4.6；CaCl2·2H2O 1.6；KH2PO41.2；MgSO41.2；葡萄糖10.0；NaHCO324.8。组织浴溶液的温度保持为37℃，用95％的O2-5％CO2充气。将组织试样置于1g的最佳支撑力下，在接触药物之前先平衡1小时。在装有Sensotec(Columbus，Ohio)MBL 5514 02型传感器的Modular仪器公司(Malvern，Pa)M 4000型数据收集系统上以力的充数变化的形式记录等长收缩。
为研究部分激动剂或拮抗剂，将组织试样用载体或拮抗剂预温育45分钟。所有的药物均逐日配制在去离子水中，在实验期间保存于冰上。组织试样通过用10-7-10-5M氨甲酰胆碱温育而发生收缩，通过加入10-8-10-10M的5-羟色胺而松弛，这一处理使组织松弛并减小由氨甲酰胆碱引起的收缩。加入本发明化合物能拮抗5-羟色胺响应并减小所观察到的组织松弛。各化合物以不同的浓度进行重复试验，计算出使松弛曲线发生两倍移动时的浓度。这里以负对数值的形式列出该浓度值。在每种情形里，部计算并列出了数据的平均标准误差，还列出了用每种化合物进行的实验次数。化合物实施例号-Log KB1 7.5±.01(4)2 8.0±.3(9)4 8.1±.4(3)6 8.2±.1(5)8 8.8±.2(15)107.7±.1(3)128.0±.6(4)147.6±.2(7)168.0±.3(6)187.5±.4(4)207.3±.2(5)228.0±.3(4)236.8±.1(4)247.9±.6(4)258.6±.2(8)268.4±.2(8)279.9±.4(6)288.3±.3(4)298.5±.2(3)307.8±.3(4)317.7±.4(4)
328.6±.2(5)338.5±.3(3)348.3±.4(3)358.0±.2(3)367.6±.05(3)378.9388.7以上数据表明，本发明化合物对5-HT4受体有极强的亲合性。另外，已发现本发明化合物在体内的有效期长，特别是与目前已知的对5-HT4受体有高亲合性的西沙必利相比。另外很显然，本发明化合物在其与5-HT4受体的亲合性方面比它的其它活性和与其它受体的亲合性都要强得多；这种选择性常由在达到同样的结合效能时浓度差别可高达两个或更多数量级所证实。
因此，本发明方法在影响5-HT4受体，特别是在该受体处提供拮抗剂作用方面十分有效。本发明的实施方法是使在5-HT4受体处需要这种作用或需要治疗或预防5-HT4受体机能障碍或失调的对象，服用有效剂量的上述化合物。在本发明的考虑中，有效剂量是足以提供所要求的作用或足以治疗所述病症的化合物数量。一般来说，相当低剂量的化合物就有效，而且在相当大的剂量范围内有效。有效的剂量范围通常是每天每千克体重约0.001-约30mg。如同药物治疗中常用作法一样，日剂量可以根据主治医生的判断以单个大丸药的形式用药或是分剂量多次用药。更优选的剂量范围是每天每千克体重约0.1-约3.0mg。读者应该清楚，对于指定的对象，剂量总是根据主治医师的判断来决定，而且剂量要根据患者的身材、胖瘦、所选择的特定化合物的特性、患者症状或疾病涉及的严重程度、以及或许会影响患者生理响应的心理因素作出修改。
本发明对于具有5-HT4受体的哺乳动物有效；优选的对象是人。
如上面简述的，许多生理功能受5-HT4受体的影响。因此，本发明的方法包括治疗或预防各种病症的方法，这些病症包括中枢神经系统疾病，如焦虑、疼痛、抑郁、精神分裂、记忆障碍和痴呆；胃肠道疾病，如过敏性肠综合症、噁心、胃食管回流症、消化不良、胃肠活动紊乱及腹泻；心血管疾病，如心房纤维性颤动、心律不齐和心搏过速；以及生殖泌尿系疾病，如尿潴留、尿失禁和排尿疼痛。用于治疗上述疾病的剂量率是刚刚提到对于封闭5-HT4受体有效的剂量，因为治疗或预防是通过在该受体上的活性实现的。药物组合物通常配制服用的药物，以便控制剂量和产物在运输和存贮中的稳定性，常用的配制方法完全适用于式I化合物。这些组合物含有至少一种可药用的载体，由于其中存在式I化合物而有效并且是新的药物组合物。虽然药物化学家充分认识到有很多配制药物的有效方法可用于本发明，但为读者方便，下面仍给出对这一问题的某些讨论。
药物科学中使用的常用配制方法和常见的组合物类型均可使用，包括片剂、可咀嚼的片剂、胶囊剂、溶液、非肠道用药的溶液、鼻内喷雾剂或粉剂、锭剂、栓剂、透皮贴剂和悬浮剂。一般来说，组合物中含总计约0.5-约50％的化合物，这取决于所要求的剂量和要使用的组合物的类型。但是，化合物的数量最好限定为有效数量，即，对需要这种治疗的患者提供理想剂量的化合物数量。化合物的活性与组合物的本性无关，因此组合物只是从方便和经济角度来选择和配制。任何组合物均可配制成任何所要的组合物形式。下面将提供对不同组合物的某些讨论及某些典型的制剂。
胶囊的制备方法是将化合物与合适的稀释剂混合并将适当数量的混合物装入胶囊。常用的稀释剂包括惰性粉状物质，如很多不同种类的淀粉、粉状纤维素、尤其是晶态和微晶态纤维素，糖类如果糖、甘露糖醇和蔗糖，粒状谷粉及类似的可食性粉末。
片剂是用直接压片、湿法造粒或干法造粒制备。它们的配方中除化合物外常常掺加稀释剂、粘合剂、润滑剂和崩解剂。典型的稀释剂包括例如各种类型的淀粉，乳糖，甘露糖醇，高岭土，磷酸钙或硫酸钙，无机盐如氯化钙以及粉状糖。粉状的纤维素衍生物也可应用。典型的片剂粘合剂是诸如淀粉、明胶及糖类(如乳糖、果糖、葡萄糖等)等物质。天然及合成的胶类也适用，包括阿拉伯树胶、藻酸盐、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮等。聚乙二醇、乙基纤维素和蜡也可作为粘合剂使用。
在片剂配方中必须有一种润滑剂以防止药片和冲头粘在冲模上，润滑剂由滑性固体中选择，例如滑石粉、硬脂酸镁和钙、硬脂酸及氢化的植物油。
片剂崩解剂是这样一种物质，它们在潮湿时膨胀，使药片破裂并释放出化合物。这类物质包括淀粉、粘土、纤维素、藻胶及树胶。更具体地说，可以使用例如玉米和土豆淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、木质纤维素、粉状天然海绵、阳离子交换树脂、藻酸、瓜尔胶、柑桔果泥和羧甲基纤维素等以及十二烷基硫酸钠。
常常用肠溶制剂来保护活性组分免受胃内强酸性内容物的作用。这类制剂的制法是用一种在酸性环境中不溶而在碱性环境中溶解的聚合物薄膜包覆固体剂型。这类薄膜的实例有乙酸邻苯二甲酸纤维素、聚乙酸邻苯二甲酸乙烯酯、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素和乙酸丁二酸羟丙基甲基纤维素。
片剂常常包覆糖作为矫味剂和密封剂，或者包覆成膜的保护剂以调节药片的溶解性能。也可以像现已完全成熟的工艺一样，通过在配方中使用大量的可口物质(如甘露糖醇)将化合物配制成可咀嚼的片剂。速溶性片状制剂现在也常常使用，以保证患者完全吸收，并避免困扰某些患者的在吞咽固体物品方面的困难。
在希望组合物以栓剂形式用药时，可以使用常用的基料。可可脂是传统的栓剂基料，它可以加入蜡使熔点略微升高来进行改性。与水可混溶的栓剂基料也有广泛应用，其中特别包括各种分子量的聚乙二醇。
透皮贴剂近来变得普遍流行。通常它由一种树脂状组合物构成，药物溶于或部分溶于其中，贴剂通过一层保护组合物的薄膜与皮肤保持接触。此领域近来已出现很多专利。其它更复杂的贴剂组合物也在使用，特别是那些有一个利了许多孔的薄膜的贴剂，药物在渗透压作用下通过这些孔被吸收。
提供以下的典型制剂供药物科学家关心和参考。
制剂1用以下成分配制硬明胶胶囊数量(mg/胶囊)实施例27化合物 20mg干淀粉 200mg硬脂酸镁10mg总计230mg
制剂2用以下成分配制片剂数量(mg/片)实施例28的化合物10mg微晶纤维素 400mg二氧化硅，烘制 10mg硬脂酸 5mg总计 425mg将各化合物掺混并压制成片，每片重425mg。
制剂3每片含10mg活性成分的片剂制造如下数量(mg/片)实施例8化合物 10mg淀粉45mg微晶纤维素 35mg聚乙烯吡咯烷酮 4mg(10％水溶液)羧甲基淀粉钠 4.5mg硬脂酸镁 0.5mg滑石粉 1mg总计 100mg将活性组成、淀粉和纤维素通过45目美国筛并充分混合。将聚乙烯吡咯烷酮水溶液与所形成的粉未混合，然后使混合物通过14目美国筛。将这样形成的颗粒在50℃下干燥，通过18目美国筛。然后将预先通过60目美国筛的羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁和滑石粉加到颗粒中，混合后在压片机上压制成片，每片重100mg。
制剂4每只含30mg活性组分的胶囊制备如下
数量(mg/胶囊)实施例11化合物30mg淀粉 59mg微晶纤维素59mg硬脂酸镁 2mg总计 150mg将活性组分、纤维素、淀粉和硬脂酸镁掺混，通过45目美国筛，装入硬明胶胶囊中，每只150mg。
制剂5每只含5mg活性组分的栓剂制备如下数量(mg/栓剂)实施例21化合物 5mg饱和脂肪酸甘油酯2000mg总计2005mg将活性组分通过60目美国筛并悬浮在必要时利用微热预先熔化的饱和脂肪酸甘油酯中。然后将混合物倒入标称容量2g的栓剂模具中并令其冷却。
制剂6每5ml剂量中含10mg活性组分的悬浮液制备如下数量(mg/5ml)实施例6化合物 10mg羧甲基纤维素钠50mg糖浆1.25ml苯甲酸溶液 0.10ml矫味剂适量着色剂适量纯水至总量为 5ml使活性组分通过45目美国筛并与羧甲基纤维素钠和糖浆混合形成均匀的糊状物。将苯甲酸溶液、矫味剂和着色剂用一部分水稀释，在搅拌下加入。然后加入足量的水以达到所要求的体积。
制剂7静脉内制剂可制备如下数量(mg/1000ml)实施例32化合物 10mg等渗盐水 1000ml
权利要求
1.式I化合物或其可药用的盐
其中R是氢，C1-C6烷基，C3-C6环烷基；R1是氢，卤素，C1-C4烷基，羟基，C1-C4烷氧基或烷硫基，氰基，三氟甲基，甲酰氨基，一或二(C1-C4烷基)甲酰氨基；m、n和o各自独立地为0-5，条件是m、n和o之和为2-5；R2是氢或C1-C4烷基；R3和R4与它们所连接的氮原子一起形成1-吡咯烷基，1-哌嗪基，1，2，3，4-四氢--异喹啉基，2，3-二氢-1-吲哚基，4-吗啉基，1-哌啶基或1-六亚甲基亚胺基，上述基团可带有以下取代基苯基、萘基、(苯基或萘基)(C1-C3烷基)、(苯基或萘基)(C1-C3烷酰基)、氨基、一或二(C1-C4烷基)氨基，或化学式为-NH-Y-R5的基团；条件是，哌嗪基或吗啉基不能被氨基、一或二(C1-C4烷基)氨基或-NH-Y-R5取代；其中的苯基或萘基是未取代的或者被13个卤原子、C1-C3烷基或C1-C3烷氧基取代；Y是羰基、磺酰基、氨基羰基或氧羰基；R5是C1-C6烷基，C3-C8环烷基，C6-C11环或三环烷基，(苯基或萘基)(C1-C3烷基)，苯基或萘基；其中环烷基、二或三环烷基、苯基或萘基是未取代的或者被1-3个羟基、卤原子、C1-C3烷基或C1-C3烷氧基取代。
2.权利要求1的化合物，其中m+n+o是2-4。
3.权利要求2的化合物，其中R是氢或烷基。
4.权利要求3的化合物，其中R1是氢、卤素、烷基或烷氧基。
5.权利要求4的化合物，其中由R3和R4与它们所连接的N原子一起形成的基团被苯基、萘基、(苯基或萘基)(C1-C3烷基)或者(苯基或萘基)(C1-C3烷酰基)取代。
6.权利要求4的化合物，其中由R3和R4与它们所连接的N原子一起形成的基团被化学式为-NH-Y-R5的基团取代。
7.权利要求1的化合物，它是N-〔2-(4-(3-羟基-1-金刚烷基羰氨基)-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺或N-〔2-(4-(4-羟基-1-金刚烷基羰氨基)-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺或它们的可药用的盐。
8.权利要求1的化合物，它是N-〔2-(4-苄氧羰基氨基-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺或其可药用盐。
9.权利要求1的化合物，它是N-〔2-(4-乙酰氨基-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺或其可药用盐。
10.权利要求1的化合物，它是N-〔2-(4-(1-金刚烷基羰氨基)-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺或其可药用盐。
11.一种药物组合物，其中含有可药用的载体和权利要求1的化合物。
12.一种药物组合物，其中含有可药用的载体和权利要求3的化合物
13.一种药物组合物，其中含有可药用的载体和权利要求4的化合物
14.一种药物组合物，其中含有可药用的载体和权利要求10的化合物。
15.一种影响5-HT4受体的方法，该方法包括使需要这种治疗的患者服用有效数量的化学式如下的化合物或其可药用盐
其中R是氢，C1-C6烷基，C3-C6环烷基；R1是氢，卤素，C1-C4烷基，羟基，C1-C4烷氧基或烷硫基，氰基，三氟甲基，甲酰氨基，一或二(C1-C4烷基)甲酰氨基；m、n和o各自独立地为0-5，条件是m、n和o之和为2-5；R2是氢或C1-C4烷基；R3和R4与它们所连接的氮原子一起形成1-吡咯烷基，1-哌嗪基，1，2，3，4-四氢-2-异喹啉基，2，3-二氢-1-吲哚基，4-吗啉基，1-哌啶基或1-六亚甲基亚胺基，它们是未取代的或被以下基团取代苯基、萘基、 (苯基或萘基)(C1-C3烷基)、(苯基或萘基)(C1-C3烷酰基)、氨基、一或二(C1-C4烷基)氨基，或化学式为-NH-Y-R5的基团，条件是哌嗪基或吗啉基不可以被氨基、一或二(C1-C4烷基)氨基或-NH-Y-R5取代；其中苯基或萘基是未取代的或者被1-3个卤原子、C1-C3烷基或C1-C3烷氧基取代；Y是羰基、磺酰基、氨基羰基或氧羰基；R5是C1-C6烷基，C3-C8环烷基，C6-C11二环或三环烷基，(苯基或萘基)(C1-C3烷基)，苯基或萘基；其中环烷基、二或三环烷基、苯基或萘基是未取代的或者被1-3个羟基、卤原子、C1-C3烷基或C1-C3烷氧基取代。
16.权利要求15的方法，其中该化合物的m+n+o为2-4，R为氢或烷基。
17.权利要求16的方法，其中该化合物是N-〔2-(4-(1-金刚烷基甲酰氨基)-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺或其可药用盐。
C3烷基或C1-C3烷氧基取代。
19.权利要求18的方法，其中该化合物的m+n+o为2-4，R是氢或烷基。
20.权利要求19的方法，其中的化合物是N-〔2-(4-(1-金刚烷基羰基氨基)-1-哌啶基)乙基〕-1-(2-丙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺或其可药用的盐。
21.一种制备式I化合物或其可药用盐的方法
其中R是氢，C1-C6烷基，C3-C6环烷基；R1是氢，卤素，C1-C4烷基，羟基，C1-C4烷氧基或烷硫基，氰基，三氟甲基，甲酰氨基，一或二(C1-C4烷基)甲酰氨基；m、n和o各自独立地为0-5，条件是m、n和o之和为2-5R2是氢或C1-C4烷基；R3和R4与它们所连接的氮原子一起形成1-吡咯烷基，1，2，3，4四氢-2-异喹啉基，2，3-二氢-1-吲哚基，1-哌啶基或1-六亚甲基亚胺基，它们被基团-NH-Y-R5取代；Y是羰基；R5是C3-C8环烷基，C6-C11二环或三环烷基，(苯基或萘基)(C1-C3烷基)，苯基或萘基；其中环烷基、二环或三环烷基、苯基或萘基有1-3个羟基取代基；所述的方法包括，使式I化合物与化学式为HO2C-R5的化合物在用于形成酰胺反应的偶合剂存在下反应，该式I化合物中，R3和R4与它们所连接的氮原子一起形成氨基取代的1-吡咯烷基、1，2，3，4-四氢-2-异喹啉基、2，3-二氢-1-吲哚基、1-哌啶基或1-六亚甲基亚胺基。
22.权利要求21的方法，其中式I化合物的R5是羟基取代的环烷基、二环或三环烷基。
23.权利要求22的方法，其中式I化合物的R5是羟基取代的金刚烷基。
全文摘要
使用吲唑甲酰胺作为5－羟色胺受体5－HT
文档编号A61K31/47GK1183041SQ96193677
公开日1998年5月27日 申请日期1996年3月14日 优先权日1995年3月16日
发明者J·T·卡特罗, M·L·科汉, M·J·马尔丁艾利, J·M·肖斯, S·P·斯丸森, D·C·汤姆森, T·M·维尔森 申请人:伊莱利利公司