专利名称：：微生物调节的方法
技术领域：
：该发明涉及微生物调节过程的方法。具体地是包括呋喃酮(furanone)的方法和培养基，在微生物有机体调节过程中，这些呋喃酮对高丝氨酸内酯(HSL)和/或酰基化高丝氨酸内酯(AHL)起抑制作用。
背景技术：
：微生物有机体包括细菌，真菌和藻类对人类和动物机体的功能有重要的影响，在寻找控制微生物有机体的化合物和方法方面，人类己做了相当大的努力。为此目的，仍然需要继续寻找新的化合物和方法，这是由于，至少部分由于这类微生物有机体能够迅速突变，以防止这些化合物和方法对它们的抑制作用。广泛分布于细菌包括人类病原体中的一类重要调节剂称为高丝氨酸内酯(HSL)或酰基化高丝氨酸内酯(AHL)。细菌中的AHL调节系统是一个两组分调节系统，它调节应答于环境条件和细胞外信号分子的胞间活性。这个系统首先在生物发光的海洋细菌哈氏弧菌(Vibrioharveyi)和费氏弧菌(V.fischeri)中发现的。它可用于控制生物发光的表达。原则上讲，该系统含有两种蛋白质-LuxR和LuxI。LuxI酶由一个LuxI基因编码，并产生被称为高丝氨酸内酯的相关的信号分子家族。这些信号分子与LuxR调节剂相结合，促使其激活，它既是编码生物发光有关酶类结构基因的正调节剂，又是LuxI基因本身的正调节剂。整个系统通过自身诱导方式进行放大，另外的分子作为LuxR-LuxI系统的调节剂。虽然该系统最初是在生物发光的细菌中发现的，在许多其它微生物类中现己发现此调节系统，并参与细菌的各种活性(Swiftetal1994，Fuquaetal1994)。这些活性包括，但并不局限于此，植物病原体胡萝卜软腐欧文氏菌(Erwiniacarotovora)和绿脓假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)，囊性纤维变性病原体中胞外酶的产生，以及从根癌土壤杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)转移到植物中的Ti质粒的产生。在所有例子中，酰基化高丝氨酸内酯或高丝氨酸内酯样化合物都是自身调节的诱导剂。由于这些调节系统广泛分布于细菌体内，并且控制细菌侵入宿主有机体的过程。看来某些有机体会产生抵抗这类系统的防御机制，但现在还没有发现。本发明人现己研制出一些抑制微生物生长的方法，其中使用的化合物是高丝氨酸内酯家族调节化合物的模拟物。
发明内容本发明的第一方面是由在微生物内，抑制高丝氨酸内酯(HSL)和/或酰基化高丝氨酸内酯(AHL)的调节过程的一种方法组成。包括将微生物与一种呋喃酮化合物相接触来抑制这种调节过程。其优选的方法，该呋喃酮化合物是从藻类Deliseapulchra产生的，或其化学修饰物或其衍生物。更优选的方法该呋喃酮化合物选自式1和式2的化合物，还有更好的方法，此化合物选自图3所示的化合物。呋喃酮化合物常用的浓度大于10ng/ml，优选的方法中其浓度为100ng～1mg/ml，更优选的方法中，其浓度为1μg～100μg/ml。可被本发明所抑制的HSL和AHL调节过程包括游动性，丛集性，游泳性，胞外酶生成性，靛兰生成性，粘附性，附着性和发光性。本领域的技术人员应当了解，其它的AHL和/或HSL调节过程也可被本发明方法所抑制。为了抑制微生物有机体的游动或丛集生长，体外培养时，本发明的呋喃酮可加入培养基中，当游动的微生物在培养基里或表面生长时，它们的游动或丛集过程会受到抑制。本发明在下列情况下特别有用当在半固体琼脂培养基平板上进行微生物混合培养时，由于一种游动微生物在整个平板上丛集生长时，防碍混合培养基中其它非游动微生物的分离或选择。一种或多种呋喃酮化合物加入培养基中，使在此培养的任何由HSL和/或AHL调节的微生物的游动或丛集生长受到抑制。本发明方法可用于植物，动物和人体内微生物病原体的抑制过程。典型的植物病原体包括SerratiaLiquiaciens和胡萝卜软腐欧文氏菌，动物病原体包括哈氏弧菌和Vibrioanguillarum和从人类病原体包括绿脓假单胞菌和Proteusmirabilis。认为本发明方法将可通过直接或间接地应用呋喃酮处理微生物的方法进行。例如给予或应用呋喃酮于植物，动物或人体，以抑制感兴趣的微生物在动植物或人体中HSL和/或AHL调节过程。呋喃酮的调节作用是减少或抑制感兴趣的调节过程，而不期望对于HSL和/或AHL途径本身的特殊作用。第二方面，本发明包括一个微生物培养基。该培养基用于在微生物中抑制高丝氨酸内酯(HSL)和/或酰基化高丝氨酸内酯(AHL)的调节过程。该培养基包括生长和/或维持成分和呋喃酮化合物。其优选方式中，呋喃酮化合物是从藻类Deliseapulchra得到的或化学修饰物或其衍生物。更优选的方式，呋喃酮化合物是选自化合物式1和式2，甚至更优选的方式，呋喃酮化合物是选自图3中的化合物。呋喃酮化合物，在标准培养基中应用的最终浓度要大于10ng/ml，在优选方法中，呋喃酮化合物的终浓度为100ng～1mg/ml，更优选的方法中，呋喃酮化合物的终浓度为1μg～100μg/ml。这里所用术语“式1的化合物”其含意是图1中所示呋喃酮结构化合物，其中R1是一个氢原子，一个羟基，酯或醚基团，而R2和R3可各为一个氢原子或卤素原子。这里所用术语“式2的化合物”其含义是图2中所示呋喃酮结构化合物，其中R1，R2，R3和R4可分别为一个氢原子，卤素，甲基，烷基，羟基，酯和醚基团，或这些基团的组合。本发明所用的化合物包括一系列结构相关的呋喃酮。图1中一些化合物己在以前发表的文献中描述过，其中部分是本发明者所描述的(Kazlauskasetal1977；deNysetal1992，deNysetal1993)。在其文章中，它们的分子结构已经用核磁波谱，质谱法，紫外和红外光谱和旋光性法(OCD)进行了阐述和表征。这些化合物全具有一个基本的碳骨架，包括一个呋喃酮部分和在基本结构的3位置处有一个烷基侧链。其优选的结构式，在R1位置处由氢，羟基和乙酰氧基所取代，在R2，R3位置处氢、溴、氯和碘，以及由此而产生的一系列结构相关的代谢产物(图1)。在这些位置处，最可行的取代组合可产生30个可能的结构，而其中13个已经表征。此外，本发明者观已检测若干个这些化合物合成的类似物(图2和图3)，虽然它们具有基本的呋喃酮骨架，但其烷基侧链的长度不同。本发明包括图1中所有30个化合物的使用，以及图2和图3中所示这些结构的扩展。呋喃酮化合物是AHL调节剂家族中一些结构相近的类似物(高丝氨酸内酯和相关的调节分子己在Swiftetal1994和Fuquaetal1994年文章中阐述)。事实上，这些化合物都是高丝氨酸内酯调节化合物的模拟物，呋喃酮广泛被用于这些调节系统中竞争性抑制剂。为了更好地理解本发明，下列附图中所举例子可以作为参考附图的简述图1表示Deliseapulchra呋喃酮的结构式1，图2表示Deliseapulchra呋喃酮结构式2。图3表示检测过的呋喃酮结构(检测化合物1-5，8，10和12-16)。图4表示在呋喃酮对AHL调节Serratialiquifaciens丛集的抑制作用。图5表示呋喃酮化合物4对于(a)含有1.5％琼脂的LB10丛集，(b)0.3％琼脂LB10游泳(c)Proteusmirabilus37℃生长情况的作用；和图6表示Delisea粗提液铺在塑料平板上抵抗下列情况的作用结果，(a)实验中六个细菌菌种(b)在该领域中细菌的粘附作用。用于完成本发明的方法方法为了下面叙述的检测方法，Deliseapulchra代谢产物(呋喃酮化合物)按下法进行提取该种藻类由澳大利亚，新南威尔士，Cape菌种银行得到，冰冻保存，该组织基本上冻干，用二氯甲烷抽提，粗提液真空浓缩(reduce)，经真空液相层析，再经高分辨率液相层析将代谢产物进行分离，纯化(deNysetal，1993)。纯化代谢产物的结构描述是结合应用核磁共振波谱和质谱技术来进行的。图3中所列Delisea代谢产物和合成类似物以前己经表征过，现用于生物检测。呋喃酮化合物和它们的类似物的抵御微生物有机体的检测如下面所述。所有检测(生物检测)在控制条件下的实验室中完成的。细菌高丝氨酸内酯介导系统的抑制作用丛集，胞外酶，靛兰生成，生物发光。所有细菌都在室温下在LB液体培养基或LB平板上进行预培养。SerratiaLiqufaciens(丛集和胞外酶)检测SerratiaLiqufaciens在室温液体LB培养基中生长到450nm处光密度为0.3和稳定，接种到LB琼脂(0.7％琼脂)平板上，平板30℃培养和经常观察丛集生长行为。呋喃酮化合物对丛集生长作用的检测，是向平板中加入浓度范围5-100μg/ml化合物1-13(图3)(琼脂是经灭菌和冷却后)。SerratiaLiquifaciens外切蛋白酶生成的检测，该菌种如上面所述进行培养和接种到LB液体培养基中，加入化合物3和4(图3)100μg/ml检测呋喃酮化合物的作用。从培养基中抽取小样，离心和过滤灭菌。60微升上清液加到脱脂奶琼脂平板的样品孔中(在M9培养基中含有1.5％脱脂奶)。平板于室温培养和观察样品孔周围清晰区域的情况。呋喃酮化合物对SerratiaLiquifaciens生长的作用在LB培养基中进行如下测定，比较加入与未加入呋喃酮化合物的培养物的生长情况(图3中的呋喃酮化合物1-13，100μg/ml加入不同的培养物中)用450nm处光密度测定其生长情况和跟踪测定48小时。紫色色杆菌(ChromobacteriumViolencia)靛兰检测对HSL自身诱导剂呈阴性的紫色色杆菌突变体用于此检测中。该菌种以高密度被加到LB培养基中，当培养基凝结后，凿出样品孔，各种HSL菌种无菌过滤上清液被加到各个样品孔中，平板30℃培养，观察样品孔周围紫色区域(由于靛兰的产生)形成。图3中呋喃酮化合物1和2的作用，是在LB培养基平板上，对含有浓度为100μg/ml的各种呋喃酮化合物进行检测。这些化合物对色杆菌菌种生长的影响如上所述进行检测。绿杆假单胞菌(弹性蛋白酶法)检测预培养的该菌种经划线法接种到蛋白胨-胰蛋白酶大豆琼脂培养基上，其中含有0.3％弹性蛋白，平板37℃培养和观测弹性蛋白水解的情况。呋喃酮化合物作用的检测是加化合物1-4(100μg/m1)到平板上，比较平板里加入和未加入该化合物水解区域的大小。胡萝卜软腐欧文氏菌(胞外酶法)检测预培养的E.carotovora接种到土豆片上，比较在土豆片上加入或未加入呋喃酮化合物(3和4)，土豆降解情况(软化和褐色生成)。费氏弧菌和哈氏弧菌(生物发光法)检测两种菌株(Vibrio)开始检测方法是划线接种在LB琼脂平板上(含有2％NaCl)，其加入和未加入5-100μg/ml呋喃酮化合物1-4，室温培养24小时后，目测检查平板生物发光的程度。进一步的检测是，两种菌种都生长于含有呋喃酮的液体培养基中，通过发光仪检测生物发光的程度。呋喃酮对两种菌种生长的作用如上所述进行检测。表面游动和粘附的抑制作用除了特异地影响已良好确定的AHL介导的细菌特性外，呋喃酮化合物也抑制细菌的其它特性，特别是表面游动性和粘附作用。象它们干扰其他AHL系统一样，呋喃酮干扰或抑制表面游动和丛集，同时并不必须抑制生长作用或其它微生物作用。Proteusmirabilis和若干个已表征的海洋分离菌种(但未作分类学上表征)用于这种检测试验。Proteusmirabilis和若干个海洋分离菌种(丛集检测)其检测方法和SerratiaLiquifacieas所述方法相同(上面)，呋喃酮对这些细菌生长抑制作用，检测方法也如上面所述。海洋分离菌种(粘附检测)从悉尼附近海岸水底表面分离的六个海洋细菌菌株，如上所述，在LB培养基(含有2％NaCl)进行培养。粘附检测法是通过两种方法来进行的。第一种，不同浓度的呋喃酮铺于不同的塑料平皿上，这些平皿附上框架，每个框架加入含有107/ml，6种海洋菌种之一的培养基，2小时后，除去框架，彻底洗涤，用DAPI进行染色，每个平皿上粘附细菌的数目，可通过萤光显微镜进行计数。第二种，粘附的抑制作用，其检测是将呋喃酮和菌种预保温，以便细菌吸收呋喃酮化合物，应用三个不同的预保温时间1/2，3和10小时，预保温结束时，洗涤菌体细胞，107/ml浓度放入实验容器中，塑料平板(未铺层)放入容器内。2小时后，框架和平板全除去，洗涤，如上所述对粘附细胞进行计数。式2化合物对细菌和真菌生长的抑制作用除了上述检测外，被选用的通式2化合物对细菌，一种酵母菌(Candidaalbicans)和一种真菌(Helminthosporiumsp)生长的作用进行检测。细菌生长于含有不同浓度呋喃酮的液体培养基中，并通过光密度(OD)的改变来检测菌体生长情况。真菌检测是用孢子接种于琼脂平板上，这些平板的样品孔中含有不同浓度的呋喃酮化合物，48小时后，检测样品孔周围抑制区域的大小。生物检测的结果对AHL介导过程的作用呋喃酮对AHL依赖表型和生长的作用，用于AHL的检测的一系列菌种，列于表1中。在所有实验中，有些呋喃酮在不抑制生长的浓度下影响AHL依赖表型。最完整的实验结果是从SerratiaLiquifaciens，一个兼性植物病原体获得的。被检测的呋喃酮无一抑制这种微生物的生长或游泳行为。被检测的所有化合物，在不同程度上抑制菌体的丛集，这是一个AHL依赖行为。(图4a，4b和表1)这表明存在一种机制，它可以干扰细胞和细胞之间的通讯，而限制细菌表面定居，但却不影响细菌的生长或存活。以一种类似的方式，不同浓度化合物3和4抑制Serratiaexoproteases外切蛋白酶的产生，而不影响其生长。(在100μg/ml，该化合物无一抑制SerratiaLiquifaciens的生长)。紫色色杆菌靛兰生成是一个HSL调节系统，化合物1和2(表2)能抑制之，这两种化合物并不影响该细菌的生长。紫色色杆菌靛兰阴性突变株，在应答加入的化合物1和2时并不产生色素(如化合物不能刺激靛兰的产生)。就Serratia而言，这些化合物看来特异地干扰一个AHL介导的过程，而对该微生物没有显著的影响(如生长的抑制作用)。在这两种情况下，其结果可推测发明的这些化合物对HSL类化合物有竞争性抑制作用。Chromobacterium的生长可被100μg/ml化合物4所抑制，但同样浓度的化合物1-3对其没有影响。该类化合物也能影响下列两种重要病原体的AHL介导过程，它们是人类病原体绿脓假单胞菌(囊性纤维变性)和植物病原体胡萝卜软腐欧文氏菌(软腐病)的。化合物1和2可刺激弹性蛋白酶的产生，此蛋白酶是绿脓杆菌AHL介导毒力因子，但又被化合物3和4所抑制。化合物2和4未检测出对生长的影响，结构上非常类似的化合物(1和2对3和4)在弹性蛋白酶产生上却有完全相反的作用。这种观察的结果再一次表明该化合物在这种HSL介导的系统上具有非常特异的作用。对于胡萝卜软腐欧文氏菌，化合物4减少外切酶的产生，不抑制其生长。化合物3既不影响生长也不影响胞外酶的生成，进一步证明这类代谢物具有特异的作用。呋喃酮能抑制费氏弧菌和哈氏弧菌两菌种AHL调节的生物发光作用，但并不抑制该两菌种的生长。表1呋喃酮化合物对酰基化高丝氨酸内酯表型各种细菌的作用。</tables>表(1续)</tables>表2Deliseapulchra粗提液最小抑制浓度和呋喃酮化合物对4种不利相关的表型游泳，附着，生长和丛集的抑制作用，所用菌种是从D.pulchra和岩石表面分离得到的菌种化合物抑制四种表型的D.pulchra菌粗提液的抑制或呋喃酮化合物1-4游泳附着生长(2)丛集(μg/ml)(μg/cm2)(μg/ml)(μg/ml)R12DCnd(1)0.01ndndD1＞50nd＞505D2＞50nd＞505D350nd＞505D425nd255R86DCnd0.01ndndD150nd＞5025D2＞50nd＞505D3＞50nd＞505D425nd255R130DCnd0.01ndndD1＞50nd＞5025D2＞50nd＞5025D3＞50nd2525D425nd255V21DCnd1.0ndndD125nd255D225nd255D325nd55D45nd55V54DCnd1.0ndndD15nd＞5025D25nd＞505D35nd255D45nd255V55DCnd1.0ndndD15nd＞505D25nd＞505D35nd55D45nd255(1)nd未做(2)在液体培养基中表面游动和粘附的抑制作用Delisea粗提液和化合物4都可抑制机会型病原体Proteusmirabilis的丛集。抑制其丛集的浓度的化合物4并不影响生长和游泳(图5)。所有6种海洋菌种的丛集作用被并不抑制其生长的浓度呋喃酮所抑制(表2)。当Delisea非极性粗提液被铺于实验室检测所制备的人工表面上，它可以抑制所有6种海洋分离菌种的粘附作用。甚至浓度低到10ng/cm2，仍存在对有些菌种抑制作用。6个菌种中有5个可被1ug/cm2所抑制(图6A)，细菌粘附作用大田检测(fieldassay)结果与这些结果相符。Delisea粗提液以1μg/cm2铺于表面，可降低该大田细菌粘附作用的90％以上(图6B)。用Delisea非极性粗提液的细菌预温孵，接着洗涤细胞，也能大大抑制细菌对(未铺)无生命表面的粘附作用。这种结果特别说明，上面所述AHL调节系统抑制作用的结果与此相关。这也因为预温孵实验表明，呋喃酮并不是简单地改变表面特性而抑制其粘附作用。这些化合物被细胞所摄取，进而引起粘附作用抑制，这都表明一个调节系统受影响，引起粘附素生产的减少。关于受影响的调节系统为AHL所驱动的进一步的证据是下面实验观察所得到的。(数据未显示)在此观察中，细胞与AHLs预温孵，粘附作用增加。虽然用Delisea粗提液己进行了多种粘附作用的检测，本领域技术人员应当充分了解，这种作用是由于抽提液中所含的呋喃酮引起的。式2化合物对真菌生长的抑制作用所有化合物在至少一个检测量中可以抑制Candidaalbicans或Helminthosporiumsp.(表3)。这类化合物在某些活性方面，对Helminthosporium比市场销售的两性霉素B更加有效。在高含量检测中，Helminthosporium的生长被4种呋喃酮类完全抑制。在这一点上和两性霉素B不同。这里应当强调的是，这些检测法过低估算了这种化合物相对于市场售产品相比较的作用。这是因为这类化合物在琼脂中的扩散比水溶性的两性霉素B低得多。这些结果清楚的表明天然呋喃酮和合成的类似物(i)特异地干扰被高丝氨酸内酯或酰基化高丝氨酸内酯调节系统所调节的细菌特性。在此受影响的已知由AHL所调节的特性包含丛集，胞外酶的产生，生物发光，和色素的产生。粘附作用能被加入的AHL类所刺激，它也可能被AHL所调节，也能被检测的呋喃酮类所抑制。类似地，Proteusmirabilis和一些海洋分离菌种的丛集作用，也可被呋喃酮所抑制。应当指出的是，其它AHL调节过程或在此未检测的特性，也可能被呋喃酮所抑制。其中包括鱼类病原体Vibrioanguillarum的病毒性，根癌农杆菌质粒转移特性。(ii)一些被检测化合物(式2)也抑制细菌和真菌的生长和/或杀死它们。表3呋喃酮对真菌生长的抑制作用。数据是用抑制区域宽度(mm)来表示Candidaalbicans加入的量(μg)1001010.1化合物对照无抑制作用乙醇无抑制作用两性霉素B1.146-105-72-4化合物11-2000化合物22-3000化合物32-31-200化合物53-8100化合物80000化合物131000Helminthosporiumsp加入的量(μg)1001010.1化合物对照无抑制作用乙醇无抑制作用两性霉素B7-106-862化合物1202-500化合物2202-400化合物36-206-900化合物5209-132-40化合物820000化合物130000因此这类化合物，作为整体来看，能干扰微生物有机体AHL驱动的系统，并抑制一些菌种的生长。作用是高度特异的，并依赖于呋喃酮化合物的浓度，检测的菌种、呋喃酮的结构和给定的AHL有关系统。在不抑制生长的情况下，呋喃酮能特异地用于抑制HSL系统，或者用于抑制生长。由于细菌中广泛存在HSL介导的动能，呋喃酮在许多应用方面是很有用的，不仅仅限于生物医学，农业和防治污染方面的应用。应当指出的是，作为生物杀虫剂，对这类化合物的活性己做了不少研究，特别是Reichelt和Borowitzka(1984)所报导的结果。他们的结果表明呋喃酮式1中一些化合物抑制细菌的生长，但是并没有指出或谈到呋喃酮能影响特异的调节系统。本发明者己发现呋喃酮强烈地抑制一些细菌的特性(胞外酶产生，丛集作用等)。这类化合物能够在体外和体内各种系统中用于影响这些特性。本领域技术人员应当理解的是对于具体实施方案所示的本发明可以做出多种变动和修改而不偏离泛文描述的本发明的精神和范围。因而本发明的实施例在各方面应被认为是说明性而非限制性的。参考文献deNys，R.，Coll，J.C.，BoWden，B.F.(1992)。DeliseaPulchra(cf.fimbriata)revisited.来自红藻Deliseapulchra的两种新代谢产物的结构确定。Aus.J.Chem.451625-1632。deNys，R.，Wright，A.D.，Konig，G.M.，Sticher，O.(1993)。来自海藻Deliseapulchra的新的卤代呋喃酮(cf.fimbriata)。四面体4911213-11220。Fletcher，R.L.(1989)。使用海洋污染绿藻Enteromorpha的生物分析技术。Int.Biodeterioration25407-422。Fuqua，W.C.，Winans，S.C.，Greenderg，细菌中法定人数检测细胞密度应答的转录调节因子的LuxR-LuxI家族。J.Bacteriology176269-275。Jefford，C.W.，Jaggi，D.，Boukouvalas，J(1988)J.Chem，Soc.，Chem.Comm.1595Jefford，C.W.，Jaggi，D.，Sledeski，A.W.，Boukouvalas，J.(1989)Stud.Nat.Prod.Chem.，3157。Kazlauskas，R.，Murphy，P.T.，Quinn，R.J.，Wells，R.J.(1977)。一类新的来自于红藻Deliseafimbrata(Bonnemaisoniaceae)的卤代内酯.Tet.Lett.137-40。Reichelt，J.L.，Borowitzka，M.A.(1984)来自海藻的抗微生物活性；大规模筛选结果。Hydrobiologia116/117158-168。Swift，S.，Bainton，N.J.Winson，M.K.(1994)。N-乙酰高丝氨酸内酯的革兰氏阳性细菌通讯一种通用语言吗？TrendsinMicrobiology2193-198。权利要求1.一种在微生物中，抑制高丝氨酸内酯(HSL)和/或酰基化高丝氨酸内酯(AHL)调节过程的方法包含将微生物有机体经呋喃酮化合物处理，以便抑制调节过程。2.根据权利要求1的方法，呋喃酮化合物是从藻类Deliseapulchra得到的或化学修饰物或衍生物。3.根据权利要求2的方法，呋喃酮化合物选自上面定义的式1和式2的化合物。4.根据权利要求3的方法，呋喃酮化合物选自图3的化合物。5.根据权利要求1-4之任一的方法，其中调节过程选自游动，丛集，游泳，胞外酶，靛兰生成，发光，粘附，附着。6根据权利要求1-5之任一的方法，其中呋喃酮化合物所用的浓度大于10ng/ml。7.根据权利要求6的方法，呋喃酮化合物所用浓度是10ng～1mg/ml。8.根据权利要求7的方法，呋喃酮化合物所用浓度是1μg～100μg/ml。9.根据权利要求5的方法，其中调节过程是游动性或丛集性，呋喃酮化合物参入进微生物培养基中，其浓度要大于10ng/ml，以便微生物有机体的游动性和丛集性基本上得到抑制。10.根据权利要求9的方法，呋喃酮化合物参入进培养基中其浓度为1μg～100μg/ml。11.根据权利要求5的方法，该调节过程是粘附作用或附着作用和呋喃酮化合物浓度大于1ng/cm2用于表面，以便微生物对表面的粘附作用或附着作用基本受到抑制。12.根据权利要求11的方法，用于表面的呋喃酮化合物浓度为10ng～10μg/cm2。13.根据权利要求1-12中任何一项要求所提出的方法，其中微生物有机体是植物，甲壳类，鱼，动物或人类的病原体。14.根据权利要求13的方法，植物病原体选自SerratiaLiquiaciens和胡萝卜软腐欧文氏菌。15.根据权利要求13的方法，甲壳类病原体是哈氏弧菌。16.根据权利要求13的方法，鱼类病原体是Vibrioanguillarum。17.根据权利要求13的方法，人类病原体选自绿脓假单胞菌和Proteusmirabilis。18.一种用于抑制微生物有机体高丝氨酸内酯(HSL)和/或酰基化高丝氨酸内酯(AHL)调节过程的微生物培养基，该培养基含有生长和/或维持成分和一个呋喃酮化合物。19.根据权利要求18的培养基，其中呋喃酮化合物是从藻类Deliseapulchra中得到的或化学修饰物或其衍生物。20.根据权利要求19的培养基，该培养基中，呋喃酮化合物选自上文所定义的式1和式2化合物。21.根据权利要求20的培养基，其呋喃酮化合物选自图3的化合物。22.根据权利要求18～21之任一的培养基，其呋喃酮化合物包含在培养基中，给出的最终浓度要大于10ng/ml。23.根据权利要求22中的培养基，其呋喃酮化合物具有的最终浓度为100ng～1mg/ml。24.根据权利要求23的培养基，其呋喃酮化合物的最终浓度为1μg～100μg/ml。全文摘要一个方法和一个微生物培养基,其在微生物有机体中应用呋喃酮化合物来抑制高丝氨酸内酯(HSL)和/或酰基化高丝氨酸内酯(AHL)的调节过程。文档编号A61K31/365GK1185173SQ96194117公开日1998年6月17日申请日期1996年3月25日优先权日1995年3月23日发明者S·谢尔贝里,P·斯丁贝里,P·C·德赖斯,R·马思米利恩,M·马内费尔德,M·古斯科夫,L·格拉姆申请人:单一检索有限公司