专利名称：碳环核苷半硫酸盐和它在治疗病毒性感染中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇的新的盐或者它的溶剂化物、含有这样化合物的药用制剂和它们在医学上特别是在治疗人免疫缺陷病毒(HIV)和乙型肝炎病毒(HBV)感染的用途。
在欧洲专利说明书第0434450号中描述了(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇(“该化合物”)和它的抗病毒尤其是抵抗HIV感染的用途，该专利也涉及该化合物的药学上可接受的衍生物，尤其是盐、酯和这样的酯的盐，并且特别描述了该化合物的盐酸盐。此外PCT专利申请号PCT GB95/02014描述了以上化合物的琥珀酸盐。
化合物(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇目前作为一种抗HIV药物正处于临床研究中。对于该化合物存在着在大规模生产中以易于分离的适合形式制备和对于给予人体易于配制成为可接受产品的需要。我们已经发现该化合物游离碱的制备产生了其捕集溶剂的非晶形固体，因此在没有另外的纯化方法情况下就不适宜于大规模纯化或者制剂。
而在PCT专利申请号PCT/GB95/02014中所描述的琥珀酸盐则在它的制备中具有有利条件，例如它从该酸和碱的化学计量比率的角度来说容易成盐并且很容易从溶液中结晶出来，对于药用制剂特别是制备片剂来说它并不是一个理想的对象。尤其是该化合物的琥珀酸盐团聚并形成了“多块的”团，其不易于倾倒并且因此不适宜于在商业压片机械中使用，以至于需要高能量研磨的额外加工步骤以得到均匀的颗粒体积。伴随该化合物琥珀酸盐制剂的另外的复杂性是它能以几种晶形存在，每一种晶形具有稍微不同的物理性质。该化合物的琥珀酸盐的制备需要密切关注以避免制备出不希望得到的晶形，如果一旦形成不希望得到的晶形，就要返工使之变成所要求的晶形。
我们已经发现优于所公开的盐酸盐和琥珀酸盐的该化合物的半硫酸盐，其使得半硫酸盐特别适合于和有利于大规模的制备，尤其是在用于制备药用制剂时。特别地该半硫酸盐形成了自由流动的粉末，该粉末缺乏任何不适当的团聚的倾向，并且该粉末易于倾倒和成形，因此对于在商业压片机中使用是理想的，且不需要研磨。该盐被确信作为单形态形式和晶形存在。该盐不易于水合或溶剂化(如在贮存中)。该盐易于过滤和干燥，因而有助于制备。另一个有利条件是该半硫酸盐与该琥珀酸盐相比具有较高的水溶性，这使得该半硫酸盐特别适宜于制备液体制剂。
我们已经发现该半硫酸盐通过盐交换方法进行制备，就是说通过转化(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇的前体盐特别是戊二酸盐或琥珀酸盐，在光学纯度方面超过该前体盐的富集是可达到的。因此，可以减少或省略任何另外的以增强该半硫酸盐产物的光学纯度的制备或纯化方法。
本发明的第一个方面，提供了(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇的半硫酸盐或它的溶剂化物包括其水合物，下文称之为本发明化合物。
为避免疑问，如在这里所使用的，(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇的半硫酸盐意指在(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇与硫酸之间以化学计量比2∶1形成的盐。
本发明另一方面包括a)本发明化合物在医学，特别是在治疗病毒性感染尤其是HIV或HBV感染中的用途。b)治疗病毒性感染特别是人HIV或HBV感染的方法，该方法包括给予病人有效量的本发明化合物。c)本发明化合物在治疗病毒性感染特别是HIV或HBV感染的药物制备中的用途。
本发明化合物特别用于治疗HIV感染。
本领域技术人员将意识到在此涉及的治疗扩展到预防以及已经确立的感染或症状的治疗。
由HIV感染引起的其可依据本发明进行治疗的临床疾病的实例包括获得性免疫缺陷综合征(AIDS)或经常在AIDS之前发生的症状、或者相关的临床疾病如AIDS相关综合征(ARC)、进行性全身性淋巴结病(PGL)、卡波济氏肉瘤、血小板减少性紫癜、AIDS相关的神经性疾病如多发性硬化症或局部下身轻瘫，并且也包括AIDS无症状患者的抗-HIV抗体阳性和HIV-阳性的情况。
本发明化合物可单独给药或与其它的适合于治疗HIV感染的药物如核苷逆转录酶抑制剂(NRTIs)例如齐多夫定、扎西他滨、拉米夫定、地达诺新、stavudine、5-氯-2′，3′-二脱氧-3′-氟尿苷、adefovir和(2R，5S)-5-氟-1-[2-(羟基甲基)-1，3-oxathiolan-5-基]胞嘧啶、lovaride，非-NRTIs如nevirapine、delavuridine、α-APA、HBY-1293和efavirenzHIV蛋白酶抑制剂如噻喹努佛(saquinavir)、indinavir、nelfinavir、ritonavir和VX-478，其它的抗HIV药物如可溶的CD4、免疫调节剂如白细胞介素II、erythyropoetin、tucaresol和干扰素如α-干扰素联合给药。另外本发明化合物可与适合于治疗HBV感染的其它治疗药物如拉米夫定、(2R，5S)-5-氟-1-[2-(羟基甲基)-1，3-oxathiolan-5-基]胞嘧啶、免疫调节剂和如上所描述的干扰素联合给药。这样的联合可一起或依次给药，条件是在给予每一个治疗药物之间的任何持续时间不会削弱它们的加和作用。
尽管本发明化合物能够作为原料给药，但是以药用制剂形式提供本发明化合物是优选的和有利的，并且代表了本发明的又一个特征。该药用制剂包括本发明化合物及其一种或多种可接受的载体和任选的其它治疗药物。这些载体在与该制剂的其它成分相容的并且对于它的接受者是无害的意义上来说必须是“可接受的”。
本发明化合物可通过适宜于所要治疗疾病的任何途径给药，适宜的途径包括口服、直肠、鼻、局部(包括经皮、颊和舌下)、阴道和非肠道(包括皮下、肌内、静脉、皮内、鞘内和硬膜外)。应该理解该优选的途径可随着例如接受者的病情而改变。
对于以上表明的每一种用途和适应症来说，各个活性成分所需要的量将依多种因素包括所要治疗的疾病的严重程度和接受者的特性而定并将最后取决于主治医师的判断。然而，一般地对于每一种的这些用途和适应症而言，适宜的有效剂量为接受者每天每公斤体重1至120mg的范围内，优选地为每天每公斤体重3至90mg的范围内并且最优选地为每天每公斤体重5至60mg的范围内，如每天每公斤体重5至20mg。如果要求的话该剂量全天可作为二、三、四或更多的亚剂量以适宜的间隔来提供。
该制剂包括那些适合于口服、直肠、鼻、局部(包括颊和舌下)、阴道或非肠道(包括皮下、肌内、静脉、皮内、鞘内和硬膜外)的给药。该制剂可便利地以单位剂型提供并且可通过药学领域熟知的任何一种方法进行制备。这样的方法包括使活性组分与构成一种或多种辅助成分的载体混合。一般地该制剂通过使活性成分与液体载体或细分的固体载体均匀地和紧密地混合或者与该两种载体混合来制备，然后如果必要的话使产物成型。
适合于口服给药的本发明制剂可以分散的单位如每一种含有预先确定了活性成分量的胶囊剂、扁胶囊剂或片剂形式提供；作为粉剂或颗粒剂提供；作为溶液剂或在水溶性液体或非水溶性液体中的混悬剂提供；或作为水包油液体乳剂或油包水液体乳剂提供；该活性成分也可作为大丸制剂或膏剂提供或可包含在脂质体内。
片剂可与任选的一种或多种辅助成分通过压制或者模压来制备。压制片剂可通过在适宜的机械中任选地与粘合剂(例如聚乙烯吡咯烷酮、明胶、羟丙基甲基纤维素)、润滑剂、惰性稀释剂、崩解剂(例如羟基乙酸淀粉钠、交联聚乙烯吡咯酮、交联羧甲基纤维素)、表面活性剂或分散剂混合的以自由流动形式如粉末或颗粒存在的活性成分压制来制备。模压片剂可通过在适宜的机械中模压以惰性液体稀释剂湿润的粉末状化合物的混合物来制备。该片剂可任选地被包衣或刻痕并且可被配制以通过其中采用例如变化比例的羟丙基甲基纤维素以提供所要求的释放分布来提供活性成分的缓慢或控制释放。
胶囊剂可通过任选与一种或多种添加剂共同填充松散的或压制的粉末或通过适合的填充机械来制备。对于片剂的适宜的添加剂实例包括粘合剂如聚乙烯吡咯烷酮、明胶、润滑剂、惰性稀释剂、崩解剂。胶囊剂也可配制为含有小丸或分散的亚单位以提供概述成分的缓释或控制释放。这能通过压制和球磨该药物加上压制成型酸(例如微晶纤维素)加上稀释剂如乳糖的湿的混合物来得到。因此所产生的球状体能够用半渗透膜(例如乙基纤维素、Eudragit WE30D)包衣以产生持续释放的性质。
对于眼部或其它外部组织如口腔和皮肤的感染而言，该制剂优选地作为局部软膏剂或霜剂应用，它们含有一定量如0.075至20％w/w，优选为0.2至15％w/w和最优选为0.5至10％w/w的活性成分。当配制软膏剂时，该活性成分可与石蜡或与水混溶的膏剂基质一起使用。或者，该活性成分可用水包油霜剂基质或油包水基质配制成霜剂。
如果要求的话，该霜剂基质的水相可包括例如至少40-45％w/w的多元醇，即具有二个或多个羟基基团的醇如丙二醇、丁烷-1，3-二醇、甘露糖醇、山梨醇、甘油和聚乙二醇和它们的混合物。该局部制剂可合乎需要地包括可增强活性成分穿透皮肤或其它受感染的区域的吸收或渗透性的化合物。这样的皮肤渗透增强剂的实例包括二甲基亚砜和相关的类似物。
本发明乳剂的油相可从已知成分由已经知道的方式来构成。当该相仅包括乳化剂(另外称作利泄药(emulgent))时，其合乎需要地包括至少一种乳化剂与脂肪或油或者与脂肪和油两者的的混合物。优选地，亲水性乳化剂与作为稳定剂的亲脂性乳化剂包括在一起。它也优选地包括脂肪和油两者。乳化剂与(或无)稳定剂一起构成所谓的乳化蜡，并且该蜡与油和/或脂肪构成所谓的乳化软膏剂基质，该基质形成该霜剂制剂的油分散相。
适用于本发明制剂的泄出剂和乳化稳定剂包括吐温60、司盘80、cetostearyl醇、肉豆蔻醇、单硬脂酸甘油脂和十二烷基硫酸钠。
根据第一个方法A，本发明化合物可通过优选地在溶液中，更优选地在水溶性有机溶剂中，优选地在升高的温度下，更优选地在所选择的溶剂系统的回流温度下使硫酸与(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇以大约1∶2的化学计量比的混合来制备。在冷却下本发明化合物形成结晶。优选地结晶作用通过以小量的本发明化合物在溶液中“放入晶种”来实现。任选的洗涤和重结晶可用来改善该产物的纯度。
依据另一个方法B，本发明化合物可通过在溶液中使(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇单硫酸盐(1∶1的盐)与(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇以基本上1∶1的摩尔比例的混合来形成。
制备本发明化合物一个特别有利的方法(C)包括将(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇的盐转化为本发明化合物。对于该转化适宜的盐包括二羧酸盐如琥珀酸盐、戊二酸盐、半辛二酸盐(即由碱∶辛二酸为2∶1形成的盐)、己二酸盐、富马酸盐、半癸二酸盐(即由碱∶癸二酸为2∶1形成的盐)和庚二酸盐。可使用二羧酸盐的混合物。优选使用该琥珀酸盐和戊二酸盐。在PCT专利申请第PCT/GB95/02014号中描述了该琥珀酸盐的制备。用于转化为该半硫酸盐的(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇的其它的盐包括苯甲酸盐和水杨酸盐和它们的混合物。这样的盐代表了本发明的另一个特征。
在本发明一个优选的方面中，该转化可通过以适合的化学计量比使硫酸和(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇的除了半硫酸盐以外的盐混合来实现。为避免疑问，如果该盐是1∶1的盐(即(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇对酸的比率为1∶1)，该适合的化学计量比(即(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇的盐∶硫酸)则为2∶1，并且如果该盐是2∶1的盐(即(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇对酸的比率为2∶1)该适合的化学计量比则为1∶1。该混合优选在溶液中进行，更优选在水溶性有机溶剂中进行，优选在升高的温度下进行，更优选在所选择的溶剂系统的回流温度下进行。在冷却该反应混合物下任选地如先前所描述的用放入晶种的方法形成该半硫酸盐结晶。就此所得到的化合物的纯度而论这种盐互变的方法提供了有利条件。
使以上述及的盐转化为该半硫酸盐的方法的一个特别有利的特征为该转化结果导致光学纯度提高，即在因此所产生的本发明化合物中与起始的盐中相比具有更少量的不想要的(1R，4S)异构体。
用于本发明方法的适合的溶剂包括醇如乙醇或丙-2-醇。这样的溶剂可单独使用或混合使用，任选在另一种有机溶剂如丙酮或在水的存在下而形成水溶性有机溶剂混合物来使用。
按照欧洲专利说明书第0434450号或PCT专利申请第PCT/GB/9500225号能够合成化合物(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇，所述专利通过引用结合到本文中。
按照PCT专利申请第PCT/GB95/02014号能够合成化合物(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇的琥珀酸盐，所述专利通过引用结合到本文中。
本发明在以下实施例中进一步描述，这些实施例为本方明的举例说明形式并不局限于此。
如在下列实施例中所使用的，IMS意指工业甲基化酒精(变性乙醇)和IPA意指丙-2-醇。中间体1(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇的制备在工业甲基化酒精(800ml)中将(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-氯-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇盐酸盐(EP0434450(80 g))与环丙基胺(110ml)一起在回流下加热约5h。把该混合物冷却至70至75℃并将氢氧化钠水溶液(10M，55ml，2摩尔当量)滴加入内。生成的悬浮液冷却至20至25℃并过滤，所收集的固体用IMS洗涤(2×60ml)。合并的滤液和洗涤液以炭(8g)和助滤剂Harborlite J2(4g)处理，然后加热至40至50℃。大约0.5h后，把该混合物冷却至15至20℃，通过过滤除去固体，以IMS(2×160ml和1×80ml)洗涤，并且合并的滤液和洗涤液通过减压蒸馏浓缩至残余的体积为大约240ml。加入IMS(240ml)并将该混合物减压浓缩至残余的体积为大约240ml。该稀释和再浓缩重复进行，该生成的浓缩物以IMS(240ml)稀释并加热得到分为四个等份的完全的溶液。
将一份在减压下通过蒸馏浓缩至残余体积为大约60ml。加入丙酮(140ml)并且该混合物再次浓缩至大约60ml。这个稀释和再浓缩重复两次得到大约80ml的流体体积。生成的悬浮液冷至0到5℃并且过滤该产物，以冷的(0到5℃)丙酮洗涤(2×40ml)并真空于燥，得到橙色固体的标题化合物(16.8g，90％)；1H-NMR(D2O)δ7.71(s，1，嘌呤CH)，6.22(m，1，＝CH)，5.93(m，1，＝CH)，5.37(m，1，NCH)，3.61(m，2，OCH2)，3.04(br m，1，环丙基CH)，2.82(br m，1 CH)，2.80-2.70(m，1，CH)，1.58-1.50(m，1，CH)，0.90-0.60(m，4，环丙基2×CH2)。实施例A(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇半硫酸盐的制备把搅拌中的水(25ml)和IPA(100ml)混合物加热至45到55℃并加入(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇琥珀酸盐(WO 96/06844(50g))，且以IPA(12.5ml)冲洗。该混合物回流下加热约0.5h得到澄清的溶液，然后冷却至65到75℃把在水(12.5ml)中的浓硫酸(6.07g)溶液加入其中。加入IPA(37.5ml)和水(12.5ml)的混合物，然后该溶液冷却至45到55℃，随后加入可靠的(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇半硫酸盐的晶种。在该温度范围内搅拌大约1h后使结晶形成，加入另一份IPA(300ml)，维持该混合物的温度在45到55℃范围内。把该悬浮液冷至0到5℃大约2h，过滤该产物，以IPA(2×75ml)洗涤并在40到55℃真空干燥，得到浅黄褐色粉末的标题化合物(34.3g，90％)；m.p.224-225℃(分解)；1H-NMR(DMSO-d6)δ10.76(br m，1，嘌呤NH)，8.53(vbr m，1，NH)，7.80(s，1，嘌呤CH)，6.67(br m，1，NH2)，6.13(m，1，＝CH)，5.87(m，1，＝CH)，5.40(m，1，NCH)，3.45(d，J＝5.8Hz，2，OCH2)，2.96(br m，1，环丙基的CH)，2.87(m，1，CH)，2.67-2.57(m，1，CH)，1.65-1.55(m，1，CH)，0.84-0.64(m，4，环丙基的2×CH2)。实施例B(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇半硫酸盐的制备把搅拌下的在工业甲基化酒精(IMS)(7000ml)中的(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇的琥珀酸盐(WO 96/06844(1000g))的悬浮液回流下加热约0.5h得到澄清的溶液。该溶液冷却至大约70℃，然后向其中加入在IMS(1000ml)中的浓硫酸(121g)溶液。在用可靠的(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇半硫酸盐放入晶种之后，该混合物在大约70℃下搅拌使该产物结晶。大约0.5h后，该混合物冷至20到30℃大约2h。过滤该混合物，滤饼以IMS(2×2000ml)洗涤并在40到55℃下真空干燥，得到浅黄褐色粉末的标题化合物(764g，92％)，波谱与实施例A的产物相一致。实施例C(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇半硫酸盐的制备把在工业甲基化酒精(IMS)(30ml)和水(5ml)中的(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇琥珀酸盐(10g)的悬浮液回流下加热约0.5h得到澄清溶液。该溶液冷却至55至65℃并向其中加入在水(2.5ml)中的浓硫酸(1.21g)溶液，随后加入IMS(7.5ml)和水(2.5ml)的混合物。该溶液进一步冷却到45至55℃并在这个温度范围内用超过0.25h时间向该混合物中加入丙酮(80ml)。该生成的悬浮液冷却到0至5℃大约1h。过滤该产物，以丙酮(2×10ml)洗涤。并在40到45℃下真空干燥，得到浅黄褐色粉末的标题化合物(6.28g，82％)，其波谱与实施例A的产物相一致。实施例D(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇半硫酸盐的制备把(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇(中间体1)(5.98g)悬浮于IMS(40ml)中，并且该悬浮液回流下加热约0.5h。该混合物冷却到70至75℃，然后向其内滴加入在IMS中的浓硫酸(10M，1.03ml，0.5摩尔当量)溶液和IMS(10ml)的混合物。该酸以另一份IMS(10ml)冲洗并将生成的悬浮液冷到0至5℃。通过过滤分离该产物，以IMS(2×12ml)洗涤并在40到45℃下真空干燥，得到浅黄色固体的标题化合物(6.15g，88％)，波谱与实施例A的产物相一致。实施例E(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇半硫酸盐的制备把另一份中间体1的IMS溶液加热到75至80℃以确保完全溶解。将该混合物冷却到70至75℃然后向其内滴加入在IMS(30ml)中的浓硫酸(3.90g)溶液，得到橙色悬浮液。该混合物冷却至0到5℃下约2h，过滤，以IMS(2×40ml)洗涤并在40到45℃下真空干燥，得到黄色/橙色固体的标题化合物(17.7g，76％)，波谱与实施例A的产物相一致。
把该产物5.0g悬浮于异丙醇(IPA)(40ml)和水(10ml)的混合物中并且在回流下加热约0.5h，然后使之冷却到55至60℃，随后加入可靠的(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇半硫酸盐的晶种。该悬浮液进一步冷却到0至5℃并将该温度保持约1h。过滤该固体，以IPA(2×5ml)洗涤并在40到45℃下真空干燥，得到浅褐黄色粉末的标题化合物(4.4g，88％)，波谱与实施例A的产物相一致。实施例F(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇苯甲酸盐在IMS(700ml)中使(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-氯-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇盐酸盐(EP0434450)(70g)与环丙胺(94.5ml)回流下加热约4h。该溶液冷却到45至50℃并以助滤剂Harborlite J2(3.5g)和活性炭(7g)处理。大约0.5h后，把该混合物冷却至20至25℃并过滤。固体以IMS(2×140ml)洗涤并将合并的滤液和洗涤液通过减压下蒸馏浓缩至体积为大约210ml。在用IMS(490ml)稀释后，该溶液再次浓缩至大约210ml。此稀释和再浓缩重复一次，并将最终浓缩物分成七个等份。
把一份以IMS(80ml)稀释并且温热至得到完全的溶液。苯甲酸(4.85g)作为单独一份加入，该混合物在70至75℃下加热得到完全的溶液，然后使之缓慢冷却。在40至45℃下以可靠的(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇苯甲酸盐放入晶种，并将该混合物进一步冷却到0至5℃。过滤该固体，以IMS(2×20ml)洗涤并在40到45℃下真空干燥，得到白色固体的标题化合物(8.7g，64％)，mpt156-157℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ7.95(m，2，苯甲酸盐CH)，7.63(m，1，苯甲酸盐CH)，7.61(s，1，嘌呤CH)，7.50(m，2，苯甲酸盐CH)，7.28(br m，1，NH)，6.11(m，1，＝CH)，5.86(m，1，＝CH)，5.81(br m，1，OH)，5.39(m，1，NCH)，3.45(d，J＝6.0Hz，2，OCH2)，3.04(br m，1，环丙基的CH)，2.87(m，1，CH)，2.65-2.55(m，1，CH)，1.63-1.53(m，1，CH)，0.70-0.54(m，4，环丙基的2×CH2)。实施例G(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇半硫酸盐的制备把在IPA(25ml)中的(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇苯甲酸盐(5g)的悬浮液温热至60至65℃。加入在水(1.25ml)中的浓硫酸(0.64g)的溶液并且把生成的混浊的悬浮液温热至70至75℃。将该混合物冷却到20至25℃并过滤。以IPA(2×10ml)洗涤该固体并在40到45℃下真空干燥，得到白色固体的标题化合物(3.57g，87％)，波谱与实施例A的产物相一致。实施例H(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇戊二酸盐的制备将在IMS(250ml)中的(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-氯-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇盐酸盐(EP0434450)(25g)与环丙胺(30ml)回流下加热约4h。将该溶液冷却到45至50℃，以IMS(75ml)稀释并以活性炭(1g)和助滤剂Harborlite J2(0.5g)处理。大约1h后，把该混合物冷却到20至25℃并过滤。以IMS(50ml)洗涤该固体并将合并的滤液和洗涤液以IMS(150ml)稀释，并通过减压下蒸馏浓缩至大约75ml。该混合物以IMS(90ml)稀释，并且再次浓缩至大约75ml。此稀释和再浓缩过程重复两次，最终浓缩物用IMS(75ml)稀释并加热到70至75℃得到溶液。将预先加热到70至75℃的在IMS(75ml)中的戊二酸(13g)溶液加入其中。该混合物进一步以IMS(25ml)稀释并冷却至约25℃大约2小时。该混合物再进一步冷却到0至5℃，搅拌约2小时并过滤。以IMS(2×50ml)洗涤该产物并在约45℃下真空干燥，得到亮棕色固体的标题化合物(27.1g，78％)；mp.184-188℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ7.60(s，1，嘌呤CH)，7.27(br m，1，NH)，6.10(m，1，＝CH)，5.86(m，1，＝CH)，5.82(br m，1，OH)，5.39(m，1，NCH)，3.44(d，J＝5.9Hz，2，OCH2)，3.04(br m，1，环丙基的CH)，2.87(br m，1，CH)，2.65-2.55(m，1，CH)，2.24(t，J＝7.2Hz，4，戊二酸盐2×CH2)，1.70(m，J＝7.2Hz，2，戊二酸盐CH2)，1.62-1.54(m，1，CH)，0.68-0.54(m，4，环丙基的2×CH2)。实施例I(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇半硫酸盐的制备把在IPA(80ml)和水(20ml)混合物中的(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇戊二酸盐(20g)的悬浮液加热至回流得到溶液。该溶液冷却至大约75℃并加入在水(5ml)中的浓硫酸(2.4g)溶液。所生成的溶液以IPA(16ml)和水(4ml)的混合物稀释，然后以IPA(20ml)稀释。该溶液冷至50到55℃，以可靠的(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇半硫酸盐放入晶种并搅拌约30分钟。在约15分钟内向所生成的悬浮液加入IPA(160ml)，然后该悬浮液冷至约25℃约2小时，随后冷至0-5℃。又搅拌2小时后，过滤该产物，以IPA(2×40ml)洗涤并在大约45℃下真空干燥，得到亮棕色固体的标题化合物(14.98g，93％)，波谱与实施例A的产物相一致。实施例J在其对映体存在下从琥珀酸盐制备(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇半硫酸盐把具有如手性HPLC(洗脱剂为在0.05M磷酸钾缓冲水溶液的1.0v/v乙腈，pH6.5；柱为ChromTech Chiral-AGP，100×4.0mm；流量为1.0ml/min；在220nm检测)显示对映体比例为97.5∶2.5的(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇的琥珀酸盐与它的对映体(134g)的混合物悬浮在异丙醇(IPA)(302ml)和水(67ml)中，并加热至回流得到澄清的溶液。该溶液冷却到75至80℃并加入在水(33.5ml)中的浓硫酸(16.26g)溶液，该溶液通过热过滤使之澄清，随后用IPA和水(3∶1，134ml)的混合物冲洗滤器。把滤液和洗涤液冷却到45至50℃，并用可靠的(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇半硫酸盐放入晶种。在此温度范围内加入另一份IPA(804ml)并使生成的悬浮液冷至0到5℃。过滤该悬浮液并以IPA(2×200ml)洗涤该产物，并且在40到45℃下真空干燥，得到白色结晶固体的标题化合物(75g，68％)。
经过手性HPLC(条件如上)对该产物的分析结果显示该对映体的比例为99.2∶0.8。
以相同的实验原始记录在8g规模下使用的不同比例的琥珀酸盐对映体进料来进行一个范围内的相似实验。该结果以表格形式概述如下
实施例K在其对映体存在下从戊二酸盐制备(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇半硫酸盐把具有如手性HPLC显示对映体比例为98.6∶1.4(条件如以上实施例J)的(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇的戊二酸盐和它的对映体(100g)的混合物悬浮在异丙醇(IPA)(400ml)和水(100ml)中，并加热至回流得到澄清溶液。该溶液冷却到70至75℃并加入在水(25ml)中的浓硫酸(12.01g)溶液，随后依次加入IPA和水(4∶1，100ml)的混合物和IPA(100ml)。把该溶液冷却到50至55℃，用可靠的(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇半硫酸盐放入晶种。在此温度范围内加入另一份IPA(800ml)并使生成的悬浮液冷至0到5℃。过滤该悬浮液并以IPA(2×200ml)洗涤该产物并在40到45℃下真空干燥，得到白色结晶固体的标题化合物(72g，90％)。
经过手性HPLC(条件如以上实施例J)对该产物的分析结果显示对映体的比例为99.6∶0.4。实施例L(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇水杨酸盐的制备把在IMS(大约25ml)中的(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇(中间体1)(1g)和水杨酸(0.482g)加热直到形成透明的溶液。使之冷却至大约20℃并过滤该生成的悬浮液，该固体产物在大约40℃下真空干燥，得到白色固体的标题化合物(1.163g，78％)；m.pt195-198℃；1H-NMR(dmso-d6)δ7.78(d中d，J＝7.7Hz，J＝1.7Hz，1H，芳香CH)，7.66(s，1H，嘌呤CH)，7.66(br m，1H，NH)，7.43-7.48(m，1H，芳香CH)，6.85-6.92(m，2H，2×芳香CH)，6.11(m，1H，＝CH)，6.11(br m，1H，OH)，5.87(m，1H，＝CH)，5.40(m，1H，NCH)，3.45(m，2H，OCH2)，3.03(br m，1H，环丙基的CH)，2.87(m，1H，CH)，2.55-2.65(m，1H，CH)，1.63-1.55(m，1H，CH)，0.73-0.58(m，4，环丙基的2×CH2)。
根据类似于在实施例G中描述的将该苯甲酸盐转化为半硫酸盐的方法可把所形成的水杨酸盐转化为要求的半硫酸盐。实施例M(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇单硫酸盐的制备把在工业甲基化酒精(IMS)(40ml)中的(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇(10.00g)的搅拌下的悬浮液加热到60℃以得到澄清的溶液。滴加入在IMS(15ml)中的浓硫酸(6.99g)溶液，且将该混合物在回流下加热0.25h并再次得到澄清的溶液。使该混合物冷却到20至30℃约1小时，在此冷却过程中生成结晶。该悬浮液进一步冷至0到5℃大约0.25h并在此温度范围内搅拌大约1小时。过滤该产物，以IMS(2×15ml)洗涤并在40至45℃下真空干燥，得到细白色粉末的标题化合物(9.07g，67.5％)。1H-NMR(DMSO-d6)δ0.78(2H，m)，0.93(2H，m)，1.10(3H，t，J 7.1Hz)(乙醇)，1.63(1H，dt，J 13.8，5.5Hz)，2.64(1H，dt，J 13.8，8.8Hz)，2.8-3.0(3H，宽谱带M)，3.46(2H，m)，3.74(2H，q，J 7.1Hz)(乙醇)，5.42(1H，m)，5.88(1H，m)，6.17(1H，m)，5.4-7.8(宽谱带，可交换)，8.0(1H，s)。实施例N(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇半硫酸盐的制备把在异丙醇(IPA)(30ml)和水(10ml)中的(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇单硫酸盐(5.00g)和(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇(3.725g)的搅拌下的悬浮液回流下加热大约0.25h，得到澄清的溶液。该溶液冷却到大约50至55℃，在约0.25h内加入IPA(40ml)并保持温度在50至55℃。在加入期间析出结晶。该混合物冷却到20至30℃约1小时，然后进一步冷至0到5℃大约0.25h并在此温度范围内搅拌大约1小时。过滤该产物，以IPA(2×10ml)洗涤并在40至45℃下真空干燥，得到细白色粉末的标题化合物(5.17g，59.1％)。波谱与实施例A的产物相一致。实施例1片剂配制下列制剂A、B和C通过以聚乙烯吡咯烷酮溶液使该成分湿法制粒，随后加入硬脂酸镁并压片来制备。制剂Amg/片 mg/片(a) 活性成分 250250(b) 乳糖B.P. 210 26(c) 聚乙烯吡咯烷酮B.P. 15 9(d) 羟基乙酸淀粉钠 20 12(e) 硬脂酸镁5 3500300制剂Bmg/片 mg/片(a) 活性成分 250250(b) 乳糖 150 -(c) 微晶纤维素PH10160 26(d) 聚乙烯吡咯烷酮B.P. 15 9(e) 羟基乙酸淀粉钠 20 12(f) 硬脂酸镁5 3500300制剂C1(控释制剂)该制剂通过下列成分与聚乙烯吡咯烷酮溶液湿法制粒，随后加入硬脂酸镁并压片来制备。
mg/片(a) 活性成分 500(b) 羟基丙基甲基纤维素112(Methocel K4M Premium)(c) 乳糖B.P. 53(d) 聚乙烯吡咯烷酮B.P.C. 28(e) 硬脂酸镁7700胶囊剂通过使该活性成分分散在卵磷脂和花生油中并把该分散物填充进入软的弹性明胶胶囊来制备。制剂C(控释胶囊剂)下列控释胶囊制剂通过使用挤压机来挤压成分a、b和c，随后通过该挤压物的球磨作用和干燥来制备。干燥后的小丸然后用控制释放膜(d)包衣并填充进入两节的硬明胶胶囊中。
mg/胶囊(a) 活性成分 250(b) 微晶纤维素 125(c) 乳糖BP 125(d) 乙基纤维素13513制剂D(薄膜包衣片)下列薄膜包衣片使用直接压制方法来制备。该(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇的半硫酸盐被筛分并与微晶纤维素和羟基乙酸淀粉钠混合。然后筛分硬脂酸镁和胶态二氧化硅并与其它成分混合。使该混合物压制成为片剂，该片剂然后使用标准薄膜包衣技术进行包衣。
mg/片片芯(a)半硫酸盐 351.0(b)微晶纤维素414.6(c)羟基乙酸淀粉钠 24.0(d)硬脂酸镁 8.0(e)胶态二氧化硅 2.4总芯片重 800.0片包衣(f)OpadryTMYellow 24.0(g)(g)纯水USPq.s.总片重 824.0存在于该片芯的胶态二氧化硅的量可变化至如0.8mg。实施例2可注射制剂活性成分 0.200g无菌、无热原磷酸盐缓冲液(pH 7.0) 至10ml将该活性成分溶解在大部分该磷酸盐缓冲液中(35-40℃)，然后配制到体积并经过灭菌微孔滤膜滤至无菌的10ml琥珀玻璃小瓶(1型)中，以无菌罩密封并且再密封(overseals)。实施例E肌内注射液活性成分 0.20g苄醇 0.10gGlycofurol 75 1.45g注射用水q.s. 至3.00ml将该活性成分溶解于Glycofurol中。然后加入苄醇并使之溶解，然后加水至3ml。然后该混合物经过灭菌微孔滤膜过滤并封闭在无菌的3ml玻璃小瓶(1型)中。实施例4糖浆混悬剂活性成分 0.2500g山梨醇溶液 1.5000g甘油 2.0000g可分散纤维素 0.0750g苯甲酸钠 0.0050g矫味剂，Peach 17.42.3169 0.0125ml纯净水q.s. 至5.0000ml将苯甲酸钠溶解于一份纯净水中并加入山梨醇溶液。加入该活性成分并使之分散。在甘油中使该增稠剂(可分散纤维素)分散。使两个分散物混合并以纯净水配制到所需要的体积。实施例5栓剂mg/栓剂活性成分 250硬脂肪，BP(Witepsol H1 5-Dynamit Nobel) 7701020该活性成分作为粉末使用，其中至少90％的粒子具有63μm的直径或更小。
使五分之一的Witepsol H15在45℃最大温度下于夹套蒸汽锅中熔融。该活性成分通过200μm的筛来筛分，并使用配备的切头的银匙伴随混合把它加入到该熔融的基质中，直到得到均匀的分散物。保持该混合物在45℃下，将余下的Witepsol H15加到该悬浮液中并搅拌以确保均匀混合。使整个悬浮液通过250μm不锈钢筛，并在连续搅拌下使之冷却至45℃。在38℃至40℃温度下把该混合物2.02g填充到适合的塑料模具中。使该栓剂冷却至室温。实施例6阴道栓剂mg/阴道栓剂活性成分 250无水葡萄糖 380马铃薯淀粉 363硬脂酸镁71000该活性成分作为粉末使用，其中至少90％的粒子具有63μm的直径或更小。
以上成分直接混合并且通过直接压制所生成的混合物来制备阴道栓剂。实施例7局部制剂霜剂活性化合物5.00g甘油 2.00gCetostearyl醇混合物 6.75g十二烷基硫酸钠0.75g白软石蜡 2.50g液体石蜡 5.00g氯甲酚0.10g纯净水至100.00g将该活性化合物溶解于纯净水和甘油的混合物中并加热至70℃。将余下的成分在70℃下加热。把这两部分加在一起并且使之乳化。冷却并填充进入容器。
权利要求
1.(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇的半硫酸盐或它的溶剂化物。
2.权利要求1中要求保护的水合物形式的化合物。
3.治疗人体宿主的病毒性感染的方法，该方法包括给予所述宿主有效量的权利要求1或者权利要求2的化合物。
4.权利要求1或者权利要求2所要求保护的化合物在医学中的用途。
5.权利要求1或者权利要求2的化合物在治疗病毒性感染的药物制备中的用途。
6.权利要求5的化合物的用途，其中所述病毒性感染为HIV或HBV感染。
7.权利要求1或者权利要求2的化合物的制备方法，该方法包括使硫酸和(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇以化学计量比为大约1∶2混合。
8.权利要求1或者权利要求2的化合物的制备方法，该方法包括在溶液中使(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇硫酸盐(1∶1的盐)和(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基-2-环戊烯-1-甲醇以基本上1∶1的摩尔比例混合。
9.权利要求1或者权利要求2的化合物的制备方法，该方法包括使硫酸和(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇的除了半硫酸盐以外的盐混合。
10.权利要求9的方法，其中所述硫酸和所述盐以形成该化合物所需要的大约的化学计量比例存在。
11.权利要求9或10的方法，其中(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇的盐为与二羧酸形成的盐。
12.权利要求11的方法，其中所述的与二羧酸形成的盐选自琥珀酸盐、戊二酸盐、半辛二酸盐、己二酸盐、富马酸盐、半癸二酸盐和庚二酸盐和任何它们的混合物。
13.权利要求9或10的方法，其中(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇的盐选自苯甲酸盐和水杨酸盐和任何它们的混合物。
14.权利要求9至13中任一项的方法，其中该半硫酸盐的光学纯度大于原料盐的光学纯度。
15.包含权利要求1或权利要求2的化合物和药学上可接受的载体的药用制剂。
16.片剂、胶囊剂或液体制剂形式的权利要求15的药用制剂。
17.权利要求15的药用制剂适合于非肠道给药。
18.权利要求15至17中的任一项的药用制剂另外包括一种或多种选自核苷逆转录酶抑制剂、非核苷逆转录酶抑制剂、蛋白酶抑制剂、免疫调节剂和干扰素的治疗药物。
19.(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇的二羧酸盐，其中所述二羧酸盐选自戊二酸盐、半辛二酸盐、己二酸盐、富马酸盐、半癸二酸盐和庚二酸盐。
20.(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇的戊二酸盐。
21.(1S，4R)-顺式-4-[2-氨基-6-(环丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-2-环戊烯-1-甲醇的单硫酸盐、苯甲酸盐或水杨酸盐。
全文摘要
描述了(1S,4R)－顺式－4－[2－氨基－6－(环丙基氨基)－9H－嘌呤－9－基]－2－环戊烯－1－甲醇的半硫酸盐或它的溶剂化物。也描述了制备该半硫酸盐的制备途径和原料化合物。该半硫酸盐在医学尤其是治疗病毒性感染上是有用的。
文档编号A61K31/52GK1263529SQ98807073
公开日2000年8月16日 申请日期1998年5月14日 优先权日1997年5月17日
发明者A·C·布洛蒂, M·F·琼斯, J·F·西格, C·J·瓦利斯 申请人:葛兰素集团有限公司