作为抗病毒剂的修饰的苯并咪唑核苷的制作方法

专利名称：作为抗病毒剂的修饰的苯并咪唑核苷的制作方法
本申请涉及U.S.申请号60/010,463，申请日1996年1月23日的美国申请中的相关内容。
本发明涉及具有抗病毒活性和改进代谢稳定性的核苷类似物。更具体地，本发明涉及修饰的苯并咪唑核苷，列举的化合物如具有氟化糖类部分的苯并咪唑核苷(例如，2’-氟-呋喃糖基部分或3’-氟-呋喃糖基部分)。
在整个本申请中，各种出版物，专利，及公开的专利申请涉及相同的引证；这些文献的全面引用可在说明书结尾即权利要求书之前找到。涉及本申请的出版物，专利及公开的专利申请的内容在此引作参考作为对本发明涉及的现有技术更详细的描述。
苯并咪唑核苷作为可能的抗病毒剂特别具有魅力，因为它们有能力避免生物活性嘌呤(双环)核苷失活的一些主要途径，例如，通过腺苷脱氨酶的脱氨化和用嘌呤核苷磷酸化酶的苷键裂解。例如，目前治疗HCMV包括使用药物如更昔洛韦(也称DHPG)，膦甲酸，和cidofovir。但是已经证明已知的苯并咪唑核苷如5，6-二氯-1-(β-D-呋喃核糖基)苯并咪唑(DRB)仅具有边缘水平活性或者通常不可接受的细胞毒性，或者两者兼而有之，因此，大大降低了其在治疗病毒感染中的应用。最近已经发现苯并咪唑化合物，如TCRB(2，5，6-三氯-1-(2’-β-D-呋喃核糖基)苯并咪唑)和2-溴-5，6-二氯-1-(2’-β-D-呋喃核糖基)苯并咪唑(BDCRB)对于抗HCMV感染是有用的，参见，Townsend等人，1993，1994，1995。
已经合成了许多苯并咪唑核苷并且在证实化合物的抗人巨细胞病毒(HCMV)活性优于更昔洛韦和膦甲酸试验的努力中试验其抗病毒活性和细胞毒性。前面已经描述了多取代苯并咪唑类如5，6-二氯-1-(β-D-呋喃核糖基)苯并咪唑(DRB)和一些密切相关的衍生物的抗病毒活性。它们对特定病毒，如RNA鼻病毒和DNA单纯性疱疹病毒1型和2型的活性也已经报道。
几种5’-脱氧核糖基苯并咪唑类似物，包括2，5，6-三氯-1-(β-D-呋喃核糖基)苯并咪唑(TCRB)在抑制病毒生长浓度的情况下对HCMV显示非常强的活性和低的细胞毒性。已经报道了TCRB和杂环及碳水化合物修饰的衍生物间的结构活性关系。参见，例如，Ravenkar等人，1968a，1968b；Townsend等人，1992年3月；Zou等人，1992；Saluja等人，1992。但是，这些公开没有公开本发明目的化合物的结构或合成。
杂环经过修饰已经得到比TCRB更具活性的类似物。但是，大多数这些类似物比TCRB细胞毒性更大，结果使化合物的治疗指数只得到一点儿改进。有人试图通过用阿拉伯糖，木糖或无环类似物取代核糖来修饰碳水化合物部分，但得到的化合物活性小于TCRB。多少有些令人惊奇地是，TCRB的5’-脱氧衍生物，2，5，6-三氯-(β-D-呋喃核糖基)苯并咪唑所显示的活性约是TCRB的10倍，而且具有比TCRB更好的治疗指数。
最近研究TCRB的药物动力学和代谢已经说明其在大鼠中的药物半衰期约为0.6小时及在猴中的药物半衰期为0.5-0.7小时(Good等人，1994)。短半衰期可能与化合物的代谢不稳定性有关，例如，从苯并咪唑中裂解糖部分。
本发明一方面涉及具有上述氟化糖类修饰的苯并咪唑核苷。在一个实例中，氟化糖类部分包括2’-氟-呋喃糖基部分或3’-氟-呋喃糖基部分。
本发明另一方面涉及治疗动物患者病毒感染的药物组合物，该组合物包括治疗有效量一种或多种上述本发明修饰的苯并咪唑核苷。
本发明再一方面涉及治疗动物病毒感染的方法，包括使用治疗有效量一种或多种上述本发明修饰的苯并咪唑核苷的步骤。
本发明还一方面涉及抑制病毒感染细胞中病毒(例如HCMV)增殖的方法，包括在适当的条件下将细胞与治疗有效量一种或多种上述本发明修饰的苯并咪唑核苷接触使病毒增殖被抑制。
本发明另一方面涉及预防性治疗易于病毒(例如HCMV)感染的细胞的方法，即在适当的条件下将细胞与治疗有效量一种或多种上述本发明修饰的苯并咪唑核苷接触使病毒感染得到预防。
显然，本发明一方面的优选特征和特点适用于本发明任何其它方面。


图1是说明具有氟化糖类部分修饰的苯并咪唑核苷的化学合成方法的流程图。
图2是说明具有氟化糖类部分修饰的苯并咪唑核苷的另一种化学合成方法的流程图。
图3是说明具有氟化糖类部分修饰的苯并咪唑核苷的另一种化学合成方法的流程图。A.本发明抗病毒化合物本发明涉及具有抗病毒活性，低毒性，改进的代谢稳定性和较长半衰期的修饰的苯并咪唑核苷。
本发明化合物可以被描述为“修饰的苯并咪唑核苷”，其中在取代的苯并咪唑的1-位的糖类部分(即R1)已经被衍生成，例如，氟化糖类部分。本发明化合物可由下式表示
其中R1是氟化糖类部分，及R2，R4，R5，R6和R7是苯并咪唑取代基。苯并咪唑取代基的实例包括-H，卤素(例如，-F，-Cl，-Br，-I)，-NO2，-NR2(其中R独立地为-H或具有1-6个碳原子的烷基)，-OR(其中R为-H或具有1-6个碳原子的烷基)，-SR(其中R为-H，具有1-10个碳原子的烃基)，及-CF3。
在一个实例中，本发明化合物可由上式表示，其中R1是氟化糖类部分，R2是-H，-F，-Cl，-Br，-I，或-NR2(其中R独立地为-H或具有1-6个碳原子的烷基)；R4，R5，R6和R7是独立地为-H，-F，-Cl，-Br，或-I。
在一个实例中，本发明化合物可由上式表示，其中R1是氟化糖类部分，R2是-H，-F，-Cl，-Br，-I，或-NR2(其中R独立地为-H或具有1-6个碳原子的烷基)；R5和R6是独立地为-H，-F，-Cl，-Br，或-I；及R4和R7是-H。
在另一个实例中，本发明化合物可由上式表示，其中R1是氟化糖类部分，R2，R5和R6是-H，-F，-Cl，-Br或-I；及R4和R7是-H。
在另一个实例中，本发明化合物可由上式表示，其中R1是氟化糖类部分，R2是-NR2(其中R独立地为-H或具有1-6个碳原子的烷基)；R5和R6是独立地为-H，-F，-Cl，-Br，或-I；及R4和R7是-H。
在另一个实例中，本发明化合物可由上式表示，其中R1是氟化糖类部分，R2，R5和R6是独立地为-H和-Cl；及R4和R7是-H。
此处所用术语“糖类部分”指单糖部分，优选的糖类部分为环状形式，例如，从呋喃糖型(5-员环)衍生的或从吡喃糖型(6-员环)衍生，但是更优选从呋喃糖型衍生的。糖类部分的实例包括呋喃苏糖基(从苏糖，四碳糖衍生)；呋喃赤藓糖基(从赤藓糖，四碳糖衍生)；呋喃核糖基(从核糖，五碳糖衍生)；呋喃阿糖基(也称为呋喃阿拉伯糖基，从阿拉伯糖，五碳糖衍生)；呋喃木糖基(从木糖，五碳糖衍生)。具有进一步修饰的糖类部分的实例包括“脱氧”，“酮基”，和“脱氢”衍生物，例如，2’-脱氧-呋喃核糖基；3’-脱氧-呋喃核糖基；3’-酮基-2’-脱氧-呋喃核糖基；2’，5’-二氢呋喃-2’-基；和2’，3’-二氢呋喃-2’-基。糖类部分可以是其任何对映异构体，非对映异构体，或立体异构体形式，包括，例如，D-或L-型。本发明修饰的苯并咪唑核苷可以是任何立体化学异构体，包括，例如，α-或β-异头物形式。
此处所用术语“氟化糖类部分”指已经衍生的至少包括一个氟原子(即-F)的糖类部分。例如，从戊糖(5-碳)衍生的呋喃糖基(5-员环)经常具有2’-羟基，3’-羟基，和5’-羟基。这种糖类的氟代衍生物可以通过，例如，用氟取代一个或多个羟基制备。氟化糖类部分的实例包括2’-氟-呋喃糖基和3’-氟-呋喃糖基。优选的氟化糖类部分的实例包括2’-氟-呋喃阿糖基和3’-氟呋喃木糖基。
此处所用术语“氟化糖类部分”还包括保护的氟化糖类部分。例如，氟化糖类部分可以包括一个或多个保护形式的2’-羟基，3’-羟基，和/或5’-羟基，例如，作为酯(例如，乙酸酯，-O(C＝O)CH3)，苯甲酸酯(即-OC(＝O)C6H5)，或醚(例如，三苯甲基醚，-OC(C6H5)3)。
在整个申请中公开的和要求保护的化合物的结构，命名或编号定义是一致的。本发明化合物包括但不限于下列化合物。
2，5，6-三氯-1-(2’-氟呋喃阿糖基)苯并咪唑(其中R1是2’-氟-呋喃阿糖基；R2是-Cl；R4是-H；R5是-Cl；R6是-Cl；和R7是-H) (例如化合物6)；2，5，6-三氯-1-(3’-氟呋喃木糖基)苯并咪唑(其中R1是3’-氟-呋喃木糖基；R2是-Cl；R4是-H；R5是-Cl；R6是-Cl；和R7是-H)(例如化合物7)；5，6-二氯-1-(2’-氟呋喃核糖基)苯并咪唑(其中R1是2’-氟-呋喃核糖基；R2是-H；R4是-H；R5是-Cl；R6是-Cl；和R7是-H)(例如化合物15)；2-溴-5，6-二氯-1-(2’-氟呋喃核糖基)苯并咪唑(其中R1是2’-氟-呋喃核糖基；R2是-Br；R4是-H；R5是-Cl；R6是-Cl；和R7是-H)(例如化合物19)。
2-异丙氨基-5，6-二氯-1-(2’-氟呋喃核糖基)苯并咪唑(其中R1是2’-氟-呋喃核糖基；R2是-NH(CH(CH3)2)；R4是-H；R5是-Cl；R6是-Cl；和R7是-H) (例如化合物20)。
本发明化合物用于以下提供的方法中或者用作制备本发明其它化合物的中间体。应当理解，即使没有特别说明，有关上述任何本发明化合物将包括其可药用盐及其结合物。B.本发明抗病毒化合物的使用方法如下所述，本发明化合物是有效的抗病毒药物，并且对HCMV和HSV-1特别有效，同样，当与载体结合时，提供试管内、体外或体内抑制病毒再生和增殖的组合物。例如，化合物可以与任何液体载体结合，如无菌或水溶液以及下述可药用载体。
本发明化合物可以与其它抗病毒药物结合提供一种有效的结合物。“有效结合物”将包括本发明化合物与其它本发明化合物或者本发明化合物与其它本发明以外的化合物(如更昔洛韦，AZT，和膦甲酸)的化学上配伍的结合物，只要这种结合不消弱本发明化合物的抗病毒活性。
本发明化合物可以用于已经使用抗病毒药物齐多夫定(AZT)的AIDS患者中HCMC和HSV-1感染的治疗。与AZT的结合治疗可以提供比更昔洛韦和AZT的结合治疗更低的毒性的优点。本发明化合物与AZT的结合可以在人培养细胞中产生比单独使用这些药物小的细胞毒性(即拮抗)。相反，更昔洛韦与AZT的结合可以在人细胞中产生比单独使用这些药物高的细胞毒性。
本发明还提供降低或抑制HCMV或HSV-1感染的细胞或细胞群中HCMV或HSV-1的复制和增殖的方法，即将细胞或细胞群与有效量的本发明化合物在适当条件下接触，使病毒复制和增殖受到抑制。本领域技术人员可以通过记录病毒滴度的减少或感染细胞存活数的增加与未处理，感染细胞比较，很容易地确定HCMV或HSV-1复制和增殖是否减少或被抑制。测定细胞浓度的方法是本领域技术人员已知的并且列举如下。应当理解，通过抑制和减少病毒复制和增殖也可以抑制和减少病毒感染性，而且，适于对HCMV或HSV-1感染的细胞进行处理。
为了本发明目的，“细胞”将包括但不限于哺乳动物细胞，例如小鼠细胞，大鼠细胞，土拨鼠细胞，猿细胞，或人细胞。用本发明化合物，组合物和方法有效治疗的病毒包括DNA和RNA病毒，特别是疱疹病毒。疱疹病毒，或herpesviridae的实例是单纯性疱疹病毒1(HSV-1)，单纯性疱疹病毒2(HSV-2)，水痘-带状疱疹(VZV)，EB病毒(EBV)，人巨细胞病毒(HCMV)，人疱疹病毒6(HHV-6)，人疱疹病毒7(HHV-7)，和人疱疹病毒8(HHV-8)。本发明化合物特别适用于治疗HCMV和HSV-1感染。
有效量很容易由本领域技术人员确定并可根据细胞，发作的病毒和治疗目的变化。例如，在细胞培养中使用药物，重要的是药量对细胞没有细胞毒性。
“适当条件”包括玻璃试管内，体外或体内。当本方法在玻璃试管内进行时，通过用抗病毒有效量的化合物培养细胞可以达到有效接触的目的，进而有效地抑制细胞或细胞培养物中病毒的复制和增殖。可以直接将化合物加到培养基中或在加入细胞中之前与载体合并。玻璃试管内，该方法特别适用于抑制病毒复制，增殖以及实验室内细胞培养物的感染。在体外，化合物用于给病人输入血液和血浆前抑制病毒的复制和增殖。
本发明化合物和方法在玻璃试管内的用途还提供了筛选新药或化合物(提供类似的或提高的抗病毒活性)的强有力的生物检测方法。使用下述方法，在如本发明化合物相同条件下检测要试验的药物。试验药物的抗病毒和细胞毒性可以与本发明化合物比较。
尽管下面所示本发明化合物对HCMV和HSV-1特别有效，但是本领域技术人员可以通过使用这里所述方法及其它本领域技术人员熟知的方法很容易地确定用本发明化合物有效治疗的其它病毒。属于本发明范围的可治疗的其它病毒包括但不限于人免疫缺陷病毒(HIV)和肝炎病毒。
当该方法在患者如人体内实施时，可将化合物加到可药用载体中并且系统或局部给药于患者，如患者为人或哺乳动物如小鼠，大鼠，土拨鼠，或猿。
该组合物还可以给药于易于或有感染病毒，如HCMV或HSV-1感染危险的患者或个体。因此，本发明还提供了抑制宿主病毒复制，增殖和/或病毒感染的预防方法，即在适当条件下给宿主使用预防有效量的化合物或组合物使病毒复制，增殖和感染受到抑制。“预防有效量”指能够抑制受到病毒威胁的宿主的病毒感染，复制和增殖的并且对所要治疗的细胞和宿主没有毒性的量。
应当理解，通过预防或抑制患者或个体的病毒增殖，感染和复制，本发明组合物和方法还提供治疗，预防或改善与病毒感染相关的症状或失调，所包括的疾病如，失明，单核细胞增多症，再狭窄(HCMV)；水痘，带状疱疹(水痘-带状疱疹病毒)；传染性单核细胞增多症，小腺，发烧，和Burkittis淋巴瘤(EB病毒)；感冒疮(单纯性疱疹病毒1)；生殖器疱疹(单纯性疱疹病毒2)；玫瑰感染(infantum)蔷薇疹(人疱疹病毒6，人疱疹病毒7)；卡波济肉瘤(人疱疹病毒8)。因此，本发明还提供了改善，预防或治疗与病毒感染如HCMV或HSV-1感染相关的失调或综合征，例如，再狭窄，机会致病菌感染(如视网膜感染，胃肠感染，肺炎，CNS感染)和子宫感染的方法，即在适当条件下给治疗对象施用有效量的本发明化合物，使失调或综合征得以改善，预防或治疗。
在整个治疗过程中，可以连续或间歇式在体内单剂量给药。确定最有效给药方式和剂量的方法是本领域技术人员已知的，并且将依据治疗使用的组合物，目标病毒，治疗目的，要治疗的细胞，及要治疗的患者而变化。单次或多次给药的剂量和方案由治疗医生选择。化合物给药的适当剂型和方法可以在下面找到。
本发明所有氟代苯并咪唑核苷都显示抗HCMV和HSV-1活性，并且许多具有可接受的细胞毒性。应当理解，相对细胞毒性而言显示相当高抗病毒活性(即好的选择性)的本发明化合物是优选的。还应当理解，本发明的抗病毒治疗包括治疗病毒感染，以及在某些情况下需要的预防性治疗，例如，免疫下降患者，如骨髓和器官移植患者以及特别易于感染HCMV或HSV-1的HIV携带者。
本发明化合物和组合物可用于药物的制备和根据常规方法，例如，作为药物组合物中的活性成分给人或其它动物给药进行抗病毒治疗。本发明化合物可作为可药用制剂和/或“前药”提供，包括但不限于酯，特别是羧酸酯(优选C1至C20)，如5’-乙酰基和2’，3’，5’-三乙酰基前药和可药用盐如硫醇盐，柠檬酸盐和乙酸盐。
本发明药物组合物可以片剂，锭剂，粒剂，囊剂，丸剂，安瓿，栓剂或喷雾剂形式进行表面，口服，鼻内，胃肠外或吸入给药。它们还可以是活性成分在水性或非水性稀释剂，浆液，颗粒或粉末中形成的软膏，凝胶，糊剂，乳膏，喷剂，洗液，悬浮液，溶液和乳液形式。除了本发明化合物之外，药物组合物中还可以含有其它药物活性化合物或许多本发明化合物。
更具体地，这里所指作为活性成分的本发明制剂中的化合物在治疗中可以适当途径给药，包括经口，直肠，鼻，表面(包括皮肤，吸入，颊和舌下)，阴道，胃肠外(包括皮下，肌肉内，静脉内和皮肤)和肺给药。还应该理解，优选的的途径将根据患者的病情和年龄，所要治疗的病毒和感染的性质而改变。
适于上述各种病毒感染如HCMV和HSV-1治疗的剂量一般在每天每公斤患者体重约0.1-250mg范围，优选的范围约为每天每公斤患者体重1-100mg，最优选在每天每公斤患者体重约5-20mg范围。除非另有说明，活性成分的所有重量按本发明制剂的母化合物的盐或酯的重量计算，因此重量按比例增加。优选在一天中将所需剂量按适当间隔分成两，三，四，五，六或更多次给药。这些子剂量可以单位剂量形式给药，例如，每单位剂量形式可以含有约10-1000mg，优选约20-500mg，最优选约100-400mg活性成分。应该理解，本发明化合物和组合物的合适剂量取决于病毒感染的种类和严重性，而且患者与患者之间有所不同。最佳剂量的确定一般考虑到本发明抗病毒治疗的治疗效果的水平与任何危险或有害的副作用的平衡。
理想地，活性成分给药后应使血浆中活性化合物的峰值浓度达到约2-100μM，优选约5-70μM，最优选约1-50μM。这是可以达到的，例如，通过静脉注射约0.1-5％活性成分的盐水(任意)溶液，或口服给药含有0.1-250mg/kg活性成分的片剂，囊剂或糖浆。通过连续滴注(约为0.01-5.0mg/kg/h)保持理想的血液浓度，或以约0.4-15mg/kg活性成分的量断续滴注。有效结合的使用被认为可以提供这样的治疗结合物，其要求每种抗病毒剂成分的总剂量比单独使用单个治疗化合物或药物所要求的剂量低，因此减少了副作用如细胞毒性。
虽然活性成分可以单独给药，但最好在药物制剂中至少含有一种上述活性成分和一种或多种可药用载体以及任意含有其它治疗剂。每种载体在与制剂中其它成分的相容性方面必须是“可接受的”，而且对患者是无害的。
制剂包括那些适于经口，直肠，鼻，表面(包括皮肤，吸入，颊和舌下)，阴道，胃肠外(包括皮下，肌肉内，静脉内和皮肤)和肺给药的制剂。制剂一般可以单位剂量形式存在并可用药物学领域任何已知方法制备。这些方法包括将活性成分与一种或多种辅助成分构成的载体缔合的步骤。总之，制剂是通过均一和最佳地将活性成分与液体载体或精细粉碎的固体载体或两者混合制备的，如果必要，将产物成形。
适于口服给药的本发明制剂可以是分散的单元，如囊剂，扁囊剂或片剂，每个含有预先确定量的活性成分；粉剂或粒剂；溶液或水性或非水性液体悬浮液；油包水液体乳剂或水包油液体乳剂。活性成分也可以药团，药糖剂或糊剂形式存在。
片剂可以通过任意与一种或多种补充成分一起压缩或铸模压制而成。压缩的片剂可以在适当机器中用自由流动如粉末或颗粒形状的活性成分制成，其中可以任意混入结合剂(如聚维酮，明胶，羟丙基甲基纤维素)，润滑剂，惰性稀释剂，防腐剂，崩解剂(如甘醇酸钠淀粉，交叉连接的聚维酮，交联的羧甲基纤维素钠)，表面活性剂或分散剂。铸模压制的片剂可以在适当机器中用惰性液体稀释剂湿润粉状化合物然后铸压而成。可以任意将片剂包衣或修饰，并可用多种比例的，例如，羟丙基甲基纤维素将活性成分制成缓慢或控制释放的制剂，使其按照所要求的方案释放。片剂也可以是肠包衣形式，使活性成分在部分肠道内释放而不是在胃中释放。
适于在口腔内局部给药的制剂包括含有活性成分的糖锭剂，其中调味剂，通常为蔗糖和阿拉伯胶或黄著胶，为基本原料；含有活性成分并以惰性物质如明胶和甘油，或蔗糖和阿拉伯胶为基本原料的锭剂；以及在适当液体载体中含有活性成分的漱口液。
本发明局部给药的药物组合物可以制成软膏，乳膏，悬浮液，洗液，粉剂，溶液，糊剂，凝胶，喷雾剂，气熔胶或油的形式。或者，制剂可以包括浸有活性成分和任意一种或多种赋形剂或稀释剂的补片或包扎物如绷带或橡皮膏。
对于眼或其它外部组织如嘴和皮肤感染，制剂最好制成含有适量，例如，约0.075-20％w/w，优选约0.2-25％w/w，最优选约0.5-10如，约0.075-20％w/w，优选约0.2-25％w/w，最优选约0.5-10％w/w，活性成分的局部用软膏或乳膏。如果要制成软膏，既可以将活性成分与石蜡也可以与不溶于水的软膏基质混合。或者，将活性成分与水包油乳膏基质混合制成乳膏。
如果需要，乳膏基质中的水相可以是，例如，至少30％w/w多元醇，即有两个或多个羟基的醇，如丙二醇，丁-1，3-二醇，甘露糖醇，山梨糖醇，甘油和聚乙二醇，以及它们的混合物。表面制剂最好含有能提高活性成分通过皮肤或其它受作用部位吸收和穿透性能的化合物。这种提高穿透皮肤能力的化合物的实例包括二甲亚砜及其相关类似物。
本发明乳剂中的油相可以用已知方法由已知成分构成。虽然该相可以只含一种乳化剂，但最好是由至少一种乳化剂与脂肪或油或二者的混合物构成。优选亲水乳化剂与作为稳定剂的亲油乳化剂混合。还优选含油和脂两者的乳化剂。乳化剂与或不与稳定剂一起形成所谓的乳化蜡，而且，蜡与油和/或脂一起形成所谓的软膏基，软膏基构成乳膏制剂的油状分散相。
适用于本发明制剂的乳化剂和乳化稳定剂包括Tween 60，Span 80，十六基十八烷醇，十四烷醇，甘油一硬脂酸酯和月桂基硫酸钠。
因为活性化合物在可用于乳化的药物制剂的大多数油中的稳定性很低，所以，制剂所用的合适的油或脂要根据能否达到所需的润肤性能进行选择。因此，乳膏应该最好是非油脂，未着色和具有适当稠度的可洗产物，以避免从管或其它容器中漏出。可以使用直链或支链的单-或二元烷基酯如二异己二酸酯，硬脂酸异鲸蜡酯，可可油脂肪酸的丙二醇二酯，肉豆蔻酸异丙酯，油酸癸酯，棕榈酸异丙酯，硬脂酸丁酯，棕榈酸2-乙基己酯或一种称为Crodamol CAP的支链酯，其中最后三种酯是优选的。它们可以根据性质需要单独使用，或结合使用。或者使用高熔点脂类如白软石蜡和/或液体石蜡或其它矿物油。
适于眼局部给药的制剂还包括滴眼剂，其中活性成分溶解于或悬浮于适当载体中，水性溶剂尤其适合于活性成分。在这种制剂中活性成分的浓度优选约为0.5-20％，约0.5-10％更好，最好是约1.5％w/w。
直肠给药的制剂可以是用适当基质如可可油或水杨酸盐制成的栓剂。
适于阴道给药的制剂可以是除含有活性成分外还含有本领域技术人员已知的载体的阴道栓剂，塞剂，乳膏，凝胶，糊剂，泡沫或喷剂。
适于鼻内给药且载体为固体的制剂包括粒径约为20-500μm的粗糙粉末，它以吸入的方式给药，即将装有粉末的容器拿近鼻子，使粉末迅速通过鼻通道被吸入。载体为液体的制剂适合于，例如，喷鼻，滴鼻给药，或用喷雾器进行喷雾给药，这些制剂包括活性成分的水性或油性溶液。
适于胃肠外给药的制剂包括水性或非水性等渗灭菌注射液，其中可以含有抗氧化剂，缓冲剂，抑菌剂和使制剂在患者的血液中等渗的溶质；水性或非水性灭菌悬浮液，包括悬浮剂和增稠剂，脂质体或其它微粒系统，它使化合物到达血液或者一个或多个器官。该制剂可以装在单剂量或多剂量密封容器中，例如，安瓿和小瓶中，并可以储存在冻干条件下，在使用前只需要当即加入无菌液体载体如注射用水即可使用。当场(制成的)注射溶液或悬浮液可以由前面所述各种无菌粉末，颗粒或片剂制成。
优选的单位剂量制剂是含有上述日剂量或单位，日亚剂量或适当活性成分的制剂。
应该理解，除了上面特别提到的成分外，本发明制剂还可以含有本领域常用的其它试剂，只要它们适合于制剂类型，例如，适于口服给药的制剂另外可以含有甜味剂，增稠剂和调味剂。
本发明各式化合物还可以兽用的制剂形式使用，例如，它可用本领域常规方法制备。C修饰的糖取代苯并咪唑的制备一般化学步骤在Thomas-Hoover Unimelt仪上测到的熔点是未经修正的。在360或300MHz得到Bruker WP 360 SY或Bruker 300 SY的核磁共振(NMR)谱。元素分析由密执安大学化学系分析实验室完成。质谱由密执安大学化学系质谱实验室完成。快速柱色谱用硅胶60(230-400目，ICN)和Still等人所述技术(Still等人，1978)完成。薄层色谱(TLC)在预洗过的(prescored)硅胶GHLF板(Analtech，Newark，DE，USA)上进行。用UV光(243nm)照射或喷洒20％甲醇硫酸，接着在热盘中焦化使化合物可见。除非另有说明，蒸发过程在40℃以下水浴中减压(水吸气器)进行。
氟化核苷通常用两种不同的途径之一合成。一种途径是将氟引入适当保护的核苷，而另一种途径是将杂环与氟化的糖衍生物缩合(例如，化学或酶催化)。这两种方案都经过研究。苯并咪唑核苷的氟化修饰的苯并咪唑核苷的一种合成方法如图1所示。在此方法中，苯并咪唑核苷，如2，5，6-三氯-1-呋喃糖基-苯并咪唑，用三苯甲基氯(即TrCl)，二甲氨基吡啶(DMAP)和吡啶在80℃处理4天，得到2’，5’-二(三苯甲基化)物和3’，5’-二(三苯甲基)化合物。2’，5’-二(三苯甲基化)化合物与DAST(即SF3NEt2)的吡啶和二氯甲烷(即CH2Cl2)反应，接着与三氟乙酸(即CF3COOH)反应，得到3‘-脱氧-3’-氟化合物，2，5，6-三氯-1-(3’-脱氧-3’-氟-呋喃糖基)苯并咪唑。在一个实例中，化合物是2，5，6-三氯-1-(3’-脱氧-3’-氟-β-呋喃木糖基)苯并咪唑(化合物7)。类似地，用DAST(即SF3NEt2)的吡啶和二氯甲烷(即CH2Cl2)处理3’，5’-二(三苯甲基)化合物，接着用三氟乙酸(即CF3COOH)处理，得到2‘-脱氧-2’-氟化合物，2，5，6-三氯-1-(2’-脱氧-2’-氟-呋喃糖基)苯并咪唑。在一个实例中，化合物是2，5，6-三氯-1-(2’-脱氧-2’-氟-β-呋喃阿糖基)苯并咪唑(化合物6)。
几种嘌呤与2’-脱氧-2’-氟-阿拉伯呋喃糖基衍生物的糖基化作用已经测定(Chu等人，1989；Pankiewicz等人，1992)。正如本文所述，人们对化合物1的适当保护的衍生物与二烷基氨基三氟化硫(DAST)的氟化作用也有所研究。虽然已有报道说DAST会是几种核苷的有效氟化剂，但众所周知保护的呋喃糖部分的构造对获得想要的来自β-边的弱亲核氟的攻击是至关重要的(Krezeminski等人，1991；Pankiewicz等人，1993)。由于离去基团在2’-位的置换，呋喃糖环呈现不利于反-消去作用的构型是重要的。这样的构型可以通过在C-5’和C-3’使用庞大的保护基引入(Theim等人，1985)。
2，5，6-三氯-1-(3，5-二-O-三苯甲基-β-D-呋喃核糖基)苯并咪唑(化合物2)是在类似文献(Blank等人，1970)所述反应条件下合成的。用TrCl和DMAP的吡啶在80℃对化合物1进行三苯甲基化反应4天，以38％综合产率得到双三苯甲基衍生物2，5，6-三氯-1-(3，5-二-O-三苯甲基-β-D-呋喃核糖基)苯并咪唑(化合物2)和2，5，6-三氯-1-(2，5-二-O-三苯甲基-β-D-呋喃核糖基)苯并咪唑(化合物3)的混合物。试图通过增加反应时间，反应温度或用碱代替DMAP催化反应来改进产率，但没有成功。化合物2和3不可能用快速柱色谱法分离，但可以用薄层色谱法分离(EtOAc/己烷1∶2，侵入四分之三)。这些化合物从乙醚中进行分级结晶更容易分离，得到比例为1∶3的化合物3和2。证实化合物3是2，5-二-O-三苯甲基衍生物，化合物2是3，5-二-O-三苯甲基衍生物是根据同核去偶实验得出的结论。
虽然所要的3，5-二-O-三苯甲基衍生物(化合物2)只能以10％的产率从化合物1得到，但其异构体2，5-二-O-三苯甲基衍生物(化合物3)却能以30％的产率得到。用DAST和吡啶的CH2Cl2对化合物3进行氟化可以71％的产率得到2，5，6-三氯-1-(2，5-二-O-三苯甲基-3-脱氧-3-氟-β-D-呋喃木糖基)苯并咪唑(化合物5)。用相同的条件对化合物2进行氟化可以63％的产率得到2，5，6-三氯-1-(3，5-二-O-三苯甲基-2-脱氧-2-氟-β-D-阿拉伯呋喃糖基)苯并咪唑(化合物4)。用10％CF3COOH的CHCl3对化合物4和5二者进行脱保护，可以良好的产率分别得到脱保护核苷2，5，6-三氯-1-(2-脱氧-2-氟-β-D-阿拉伯呋喃糖基)苯并咪唑(化合物6)和2，5，6-三氯-1-(3-脱氧-3-氟-β-D-呋喃木糖基)苯并咪唑(化合物7)。
由于氟代衍生物6和7是用DAST从先形成的β-呋喃核糖基核苷(化合物1)合成的，所以，它们分别是β-呋喃阿拉伯糖基和β-呋喃(Herdewijn等人，1989)。对化合物6和7分别被称为β-阿拉伯呋喃糖基和β-呋喃木糖基衍生物的进一步支持要追溯到以下事实二者都显示出C7-H和F之间的远程偶合，化合物6这种偶合作用(J＝1.9Hz)比化合物7(J＝1.7Hz)稍微大一些。这表明氟和杂环是在呋喃糖环的同一面。最后，对于阿拉伯糖衍生物化合物6，1’-H和F之间的偶合是17.7Hz，这种偶合作用指出1’-H和F之间的邻位反关系(Wright等人，1969)。化合物2和32，5，6-三氯-1-(3，5-二-O-三苯甲基-β-D-呋喃核糖基)苯并咪唑(2)和2，5，6-三氯-1-(2，5-二-O-三苯甲基-β-D-呋喃核糖基)苯并咪唑(3)将化合物1(5.0g，0.014mol)，DMAP(1.25g，0.014mol)和TrCl(12.0g，0.043mol)的无水吡啶(100mL)混合物在80℃加热3天。在第2天和第3天加入TrCl(12.0g，0.043mol)。3天后用MeOH(60mL)淬灭反应。减压浓缩反应混合物，并与甲苯(3×100mL)共蒸发。将所得剩余物在甲苯(150mL)中搅拌，过滤，并将滤液蒸发至干。所得黄色泡沫经快速色谱纯化(甲苯0.5L，然后是甲苯/EtOAc 20∶1，5cm×20cm)。合并含有双三苯甲基化合物的馏分和减压除去溶剂之后得到化合物2和3的混合物(4.5g，38％)。从EtOEt重结晶得到几乎全为化合物3的物质，但滤液中化合物2居多。从EtOEt中再结晶两次将化合物3进一步纯化成基本纯的物质，得到3.0g(25％)化合物3为白色晶体。将几乎只含化合物2的滤液蒸发至干，然后从EtOAc/己烷重结晶，得到1.0g(8.4％)纯化合物2为白色晶体。
化合物2mp 174-175℃；Rf0.19(甲苯/EtOAc 20∶1)；Rf0.62(EtOAc/己烷1∶2)；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.06(s，1H)，8.02(s，1H)，7.13-7.42(m，30H，三苯甲基)，6.24(d，1H，2’-OH，J2’，OH＝6.2Hz)，6.18(d，1H，1’-H，J1’，2’＝8.3Hz)，4.76(m，1H，2’-H，用D2O冲洗变成四重峰J1’，2’＝7.9Hz，J2’，3’＝5.3Hz)，4.23(d，1H，3’-H，J2’，3’＝5，4Hz)，2.93(m，1H，4′-H)，2.86(dm，1H，5’-H)，2.64(dm，1H，5’-H).C50H39Cl3N2O4的元素分析计算值 C，71.65；H，4.69；N，3.34；实测值 C，71.50；H，4.85；N，3.24。
化合物3mp 193-195℃；Rf0.19(甲苯/EtOAc 20∶1)；Rf0.62(EtOAc/己烷1∶2)；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ7.93(s，1H)，7.54(s，1H)，7.01-7.41(m，30H，三苯甲基)，6.22(d，1H，1’-H，J1’，2’＝8.4Hz)，5.39(d，1H，3’-OH，J3’，OH＝6.0Hz)，4.50(dd，1H，2’-H，J1’，2’＝8.4Hz，J2’，3’＝4.4Hz)，4.09(m，1H，4’-H)，3.58(t，1H，3’-H，J3’，OH＝6.0Hz，J2’，3’＝4.4Hz用D2O冲洗变成双峰 J2’，3’＝4.4Hz)，3.04(dd，1H，5’-H)，3.18(dd，1H，5’-H).C50H39Cl3N2O4·1/2H2O的元素分析计算值C，70.88；H，4.76；N，3.31；实测值C，70.93；H，4.80；N，3.31。化合物42，5，6-三氯-1-(3，5-二-O-三苯甲基-2-脱氧-2-氟-β-D-阿拉伯呋喃糖基)苯并咪唑(4)将3’，5’-二-O-三苯甲基化合物(化合物2)(0.3g，0.36mmol)溶解于无水CH2Cl2(10mL)。在溶液中加入吡啶(0.3mL，3.6mmol)和DAST(0.24mL，1.8mmol)，并在室温搅拌反应混合物24hr。再在反应混合物中加入CH2Cl2(200mL)，并用饱和NaHCO3(100mL)萃取混合物，用水(100mL)洗涤。有机相用硫酸镁干燥，过滤并真空除去溶剂。所得浆液经快速色谱纯化(EtOAc/己烷1∶2，2cm×15cm)，收集含有产物的馏分并真空除去溶剂，从EtOH重结晶后得到0.20g(67％)化合物4为白色固体。
化合物4mp 145℃；Rf0.57(EtOAc/己烷1∶2)；1H-NMR(360MHz，CDCl3)δ7.65(d，1H，C7-H，J＝3.7Hz，远程偶合到F)，7.62(s，1H，C4-H)，7.19-7.45(m，30H，Tr)，6.10(dd，1H，1’-H，J1’，F＝24.7Hz，J1’，2’＝2.3Hz)，4.57(m，1H，4’-H)，4.28(dm，1H，3’-H，J3’，F＝15.9Hz)，3.60(dd，1H，2’-H，J2’，F＝50.3Hz，J1’，2’＝2.3Hz)，3.50(m，1H，5’-H)，3.27(m，1H，5’-H).C50H38Cl3FN2O3的HRMSm/z分析，计算值838.1932；实测值838.1949。C50H38Cl3FN2O3的元素分析计算值 C，71.47；H，4.56；N，3.33；实测值 C，71.15；H，4.72；N，3.37。化合物52，5，6-三氯-1-(2，5-二-O-三苯甲基-3-脱氧-3-氟-β-D-呋喃木糖基)苯并咪唑(5)将2’，5’-双三苯甲基化合物(化合物3)(1.2g，1.44mmol)溶解于无水CH2Cl2(30mL)。在溶液中加入吡啶(1.1mL，14.4mmol)和DAST(1.0mL，7.2mmol)，并在室温搅拌反应混合物24hr。再在反应混合物中加入CH2Cl2(200mL)，并用饱和NaHCO3(100mL)萃取混合物，用水(100mL)洗涤。有机相用硫酸镁干燥，过滤并真空除去溶剂。所得浆液经快速色谱纯化(EtOAc/己烷1∶2，4cm×15cm)，合并含有产物的馏分并减压除去溶剂，从EtOH重结晶后得到0.85g(70％)化合物5为白色固体。
化合物5mp＞240℃(分解)；Rf0.6(EtOAc/己烷1∶2)1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ7.73(s，1H)，7.17-7.40(m，31H，C4-H和三苯甲基)，6.17(d，1H，1’-H，J1’，2’＝4.5Hz)，4.54(dd，1H，2’-H，J1’，2’＝4.5Hz，J2’，F＝20.9Hz)，4.14(dm，1H，4’-H，J4’，F＝31.4Hz)，3.99(dd，1H，3’-H，J3’，F＝50.6Hz，J3’，4’＝2.1Hz)，3.50(m，1H，5’-H)，3.27(m，1H，5’-H).C50H38Cl3FN2O3的HRMS m/z分析，计算值838.1924；实测值838.1957。C50H38Cl3FN2O3·1/2H2O的元素分析计算值C，70.72；H，4.63；N，7.88；实测值C，70.82；H，4.77；N，3.35。化合物62，5，6-三氯-1-(2-脱氧-2-氟-β-D-阿拉伯呋喃糖基)苯并咪唑(6)
将化合物4(0.10g，0.12mmol)溶解于10％CF3COOH的CHCl3(10mL)，并在塞好的烧瓶中于室温搅拌60分钟。真空蒸发反应混合物至干，所得油状剩余物经快速色谱纯化(EtOAc/己烷5∶1，2cm×15cm)，收集所要馏分并真空除去溶剂，将白色剩余物从MeOH/H2O结晶后得到25mg(60％)化合物6为白色晶体。
化合物6mp 223℃；Rf0.43(EtOAc/己烷5∶1)；1H-NMR(360MHz，DMSO-d6)δ8.29(d，1H，C7-H，J＝1.9Hz，远程偶合到 F)，7.93(s，1H，C4-H)，6.44(dd，1H，1’-H，J1’，F＝17.7Hz，J1’，2’＝4.5Hz)，6.02(d，1H，3’-OH，D2O可交换)，5.31-5.35(m，1.5H，5’-OH和0.5 of2’-H，5’-OHD2O 可交换)，5.25(dm，0.5H，2’-H，J2’，F＝53.2Hz，J2’，3’＝2.7Hz)，4.42(dm，1H，3′-H，D2O冲洗变成dddJ3’，F＝24.2Hz，J2’，3’＝2.7Hz 和J3’，4’＝5.9Hz)，3.71-3.86(m，3H，4’-H和5’-H)；13C-NMR(90MHz，DMSO-d6)δ140.81，140.60，134.07，126.07，125.68，119.88，115.61，97.38(2’C，J2’C，F＝192.5Hz)，84.98(1’C，J1’C，F＝17.4Hz)，82.89(4’C)，73.25(3’C，J2’C，F＝24.4Hz)，59.05(5’C，J5’C，F＝9.9Hz)；C12H10Cl3FN2O3的HRMS m/z分析，计算值353.9741；实测值353.9735。C12H10Cl3FN2O3的元素分析计算值 C，40.53；H，2.83；N，7.88；实测值 C，40.55；H，2.94；N，7.48。化合物72，5，6-三氯-1-(3-脱氧-3-氟-β-D-呋喃木糖基)苯并咪唑(7)将化合物5(0.28g，0.32mmol)溶解于10％CF3COOH的CHCl3(20mL)，并在塞好的烧瓶中于室温搅拌45分钟。真空蒸发反应混合物至干，所得油状剩余物经快速色谱纯化(EtOAc/己烷5∶1，2cm×15cm)，收集所要馏分并蒸发至干，从MeOH/H2O结晶后得到85mg(74％)化合物7为白色晶体。
化合物7mp 238℃；Rf0.42(EtOAc/己烷5∶1)；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.01(s，1H，C4-H)，7.93(d，1H，C7-H，J＝1.7Hz，远程偶合到 F)，6.29(d，1H，2’-OH，D2O可交换)，5.91(d.1H，1’-H，J1’，2’＝4.6Hz)，5.17(dd，1H，3’-H，J3’，F＝52.8Hz)，5.14(t，1H，5’-OH，D2O可交换)，4.63(dm，1H，2’-H，J2’，F＝22.6Hz，用D2O冲洗变成dd J2’F＝22.6Hz和J1’，2’＝4.6Hz)，4.30(dm，1H，4’-H，J4’，F＝28.5Hz)，3.69-3.84(m，2H，5’-H)；13C-NMR(90MHz，DMSO-d6)δ141.80，140.94，132.19，125.967，120.40，113.61，113.53，96.90(3’C，J3’C，F＝184.1Hz)，91.14(1’C，J1’C，F＝4.6Hz)，80.46(4’C，J4’C，F＝19.8Hz)，77.81(2’C，J2’C，F＝26.89Hz)，57.71(5’C，J5’C，F＝9.96Hz)；C12H10Cl3FN2O3的HRMS m/z分析，计算值353.9741；实测值353.9747。C12H10Cl3FN2O3的元素分析计算值 C，40.53；H，2.83；N，7.88；实测值 C，40.77；H，2.88；N，7.56。氟化糖与苯并咪唑的偶合修饰的苯并咪唑核苷的另一种合成方法如图2所示。在该方法中氟化的糖类化合物被合成，然后与苯并咪唑反应形成所要的化合物。例如，2’，3’-和5’-位被苯甲酰基保护(即-OC(＝O)C6H5)和1’-位被乙酸基保护(即-OC(＝O)CH3)的呋喃糖被转化成1’-脱氧-1’-溴-2’-脱氧-2’-氟-3’，5’-苯甲酰基-呋喃糖(见Howell等人，1995)。这种溴代呋喃糖与苯并咪唑如2，5，6-三氯苯并咪唑在有4埃分子筛的1，2-二氯乙烷(即ClCH2CH2Cl)中于80℃反应2天，生成2，5，6-三氯-1-(2’-脱氧-2’-氟-3’，5’-苯甲酰基-呋喃糖基)苯并咪唑异构体的混合物，接着用氨(即NH3)的甲醇(即CH3OH)脱保护，得到2，5，6-三氯-1-(2’-脱氧-2’-氟-呋喃糖基)苯并咪唑。在一个实例中化合物是2，5，6-三氯-1-(2’-脱氧-2’-氟-β-呋喃阿糖基)苯并咪唑(化合物6)。
我们通过将氟化的阿拉伯呋喃糖化合物(如化合物8和9)偶合成苯并咪唑(如2，5，6-三氯-苯并咪唑，化合物6)对化合物6的合成进行了研究。最初，我们试图用Vorbruggen条件和试图将化合物6的碱性盐糖基化，但没有成功。用类似Montgomery等人(Montgomery等人，1986)所述条件却成功地完成了化合物6与1-溴-3，5-二-O-苯甲酰基-2-脱氧-2-氟-α-D-阿拉伯呋喃糖(化合物9；Tann等人，1985；Howell等人，1988)的缩合。即，在80℃在4埃分子筛存在下将化合物6与化合物9在二氯乙烷中缩合，得到所要的2，5，6-三氯-1-(3，5-二-O-苯甲酰基-2-脱氧-2-氟-β-阿拉伯呋喃糖基)苯并咪唑(化合物12)及其α-异构体(化合物11)。化合物12之所以被称作β-异头物以及化合物11被称作α-异头物部分地是由于它们的质子谱。化合物17的氟和1’-H之间的偶合常数是J1’，F＝23.1Hz，表示质子与氟的邻位反关系。对于化合物16该常数是J1’，F＝17.4Hz，表示质子与氟的邻位顺关系(Wright等人，1969；Tann等人，1985；Howell等人，1988；Reichman等人，1975)。对异头物命名的另一个根据可追溯到以下事实化合物16中为7.91ppm的C7-H通过与氟的远程偶合分裂(由于C7-H和F之间的偶合使信号为双重峰，J＝3.2Hz)，在化合物17的7.79ppm处的C7-H观察不到这种情况(这种条件下信号是单峰)。
对缩合条件的进一步研究表明异头物的比例很大程度上取决于缩合条件。在非极性溶剂如二氯乙烷和苯中，上述缩合条件下得到的几乎都是β-异头物化合物17(α/β之比为1/5-1/10)。但是，在极性较强的溶剂如乙腈和硝基甲烷中α-异头物化合物16(α/β之比为5/1-10/1)是主要产物。在非极性溶剂如二氯乙烷中的产率(80％，β/α＝8/1)明显好于在极性溶剂如乙腈中的产率(9％，β/α＝1/7)。
在甲醇氨中的化合物12经过脱保护得到与上述化合物6性质一致的化合物。因此，已经开发出合成化合物6的另一途径，该方法可以近50％的产率由杂环(化合物6)和溴代糖(化合物15)得到化合物6，而用以前方法只能有近5％的产率。化合物11和122，5，6-三氯-1-(3，5-二-O-三苯甲基-2-脱氧-2-氟-β-D-阿拉伯呋喃糖基)苯并咪唑(12)及其α-异构体(11)将2-氟代糖化合物8(1.20g，2.6mmol；Tann等人，1985)溶解于CH2Cl2(10mL)，然后加入33％HBr的CH3COOH溶液(2.64mL，10.4mmol)。将反应混合物在塞好的烧瓶中搅拌6hr。在反应混合物中加入CH2Cl2(100mL)，然后依次用冰冷的饱和NaHCO3(100mL)和冰冷的水(100mL)洗涤有机相。CH2Cl2溶液经硫酸镁干燥，过滤和减压除去溶剂，得到化合物9的无色浆液。
将该浆液溶解于ClCH2CH2Cl(10mL)，并加到事先制好的含有2，5，6-三氯-苯并咪唑(化合物10)(0.6g，2.6mmol)和活化的4埃分子筛的ClCH2CH2Cl(10mL)溶液中。将所得混合物在80℃和惰性气体中加热2天，然后在反应混合物中加入CH2Cl2(100mL)和饱和NaHCO3溶液(100mL)。分离有机相并用水(100mL)洗涤，硫酸镁干燥，过滤并真空除去溶剂。所得固体经快速色谱纯化(EtOAc/己烷1∶2，4cm×15cm)。收集快速流出的含有核苷的馏分，浓缩至干并从MeOH/H2O结晶，然后从EtOH重结晶，得到0.12g(8％)化合物11为白色晶体。缓慢流出的含有核苷的馏分中掺杂有少量化合物10。收集这些掺杂的馏分，浓缩至干并在第二个柱上重新色谱分离(5％MeOH的CHCl3，4cm×15cm)。收集适当馏分并减压除去溶剂后得到白色固体，将其从MeOH/H2O重结晶，得到1.0g(72％)化合物12。
化合物11mp78-80℃；Rf0.60(EtOAc/己烷1∶2)；Rf0.9(5％MeOH于CHCl3)；1H-NMR(360MHz，CDCl3)δ8.12和8.00(2m，4H)，7.79(s，1H)，7.72(s，1H)，7.24-7.63(m，6H，苯甲酰基)，6.64(dd，1H，1’-H，J1’，2’＝3.9Hz，J1’，F＝17.4Hz)，5.82(dd，1H，2’-H，J2’，F＝18.7Hz，J2’，3’＝1.9Hz)，5.63(dm，1H，3’-H，J3’，F＝49.3Hz)，4.94(m，1H，4’-H)，4.88(dd’1H，5’-H)，4.67(dd，1H，5’-H)；C26H18Cl3FN2O5的HRMS m/z分析，计算值562.0265；实测值562.0276。C26H18Cl3FN2O5的元素分析计算值C，55.39；H，3.22；N，4.97；实测值 C，55.74；H，3.23；N，4.87。
化合物12mp 88-90℃；Rf0.36(EtOAc/己烷1∶2)；Rf0.67(5％MeOH于CHCl3)；1H-NMR(360MHz，CDCl3)δ8.07-8.18(m，4H)，7.91(d，1H，C7-H，J＝3.2Hz远程偶合到F)，7.43-7.73(m，7H，苯甲酰基和C4-H)，6.40(dd，1H，1’-H，J1’2’＝2.7Hz，J1’，F＝23.1Hz)，5.78(dd，1H，3’-H，J3’，F＝19.0Hz，J3’，4’＝3.8Hz)，5.39(dd，1H，2’-H，J1’，2’＝2.7Hz，J2’，F＝50.3Hz)，4.91(m，2H，5′-H)，4.57(q，1H，4’-H，J3’，4’＝3.6Hz)；C26H18Cl3FN2O5的HRMS m/z分析，计算值562.0265；实测值562.0254。C26H18Cl3FN2O5的元素分析计算值C，55.39；H，3.22；N，4.97；实测值C，55.38；H，3.23；N，4.83。化合物62，5，6-三氯-1-(2-脱氧-2-氟-β-D-阿拉伯呋喃糖基)苯并咪唑(6)将化合物12(0.5g，0.9mmol)溶解于甲醇氨，并将溶液在室温搅拌6hr。真空除去溶剂，剩余物经快速色谱纯化(EtOAc/己烷5∶1，2cm×15cm)。收集适当馏分并蒸发至干，从MeOH中结晶后得到与前面化合物6性质一致的0.23g(74％)白色固体。
修饰的苯并咪唑核苷的另一种合成方法如图3所示。在该方法中含有氟化的糖类部分的尿苷衍生物与苯并咪唑在酶N-脱氧呋喃核糖基转移酶存在下反应，生成所要的化合物。该化合物的苯并咪唑部分可以进一步被衍生，例如在2-位，得到2-取代的苯并咪唑核苷(例如，2-Br，2-NR2)。化合物155，6-二氯-1-(2-脱氧-2-氟-β-D-呋喃核糖基)苯并咪唑(15)将用Codington等人(Codington等人，1968)所述方法制备的2’-脱氧-2’-氟代尿苷(化合物13)(0.99g，4mmol)溶解于800mL柠檬酸盐缓冲液(50mM，pH6.0)。加入用Townsend等人(Townsend等人，1970)所述方法制备的5，6-二氯苯并咪唑(化合物14)(0.30g，1.6mmol)，然后将反应置于50℃的水浴。加入N-脱氧-呋喃核糖基转移酶(60,000单位，见Cook等人，1990)，然后将反应混合物轻柔摇动过夜。再加入5，6-二氯苯并咪唑(化合物14)(0.30g，1.6mmol)，并继续反应2天。加入Celite(50-60g)，然后过滤反应混合物。通过在80℃加热，接着冷却到室温，得到酶的沉淀。用乙酸乙酯(3×)萃取产物。真空除去乙酸乙酯，剩余物在75g碱性氧化铝上继续色谱纯化，用95∶5(v/v)至9∶1(v/v)至2∶1(v/v)至1∶1(v/v)的氯仿/甲醇梯度洗脱。合并含有产物的馏分并真空除去溶剂，得到0.54g(67％)化合物15。
化合物15MS(FAB+)m/z，321，M+1.1H-NMR(DMSO-d6)δ8.62(s，1H，H-2)，8.19(s，1H，Ar-H)，7.96(s，1H，Ar-H)，6.35(dd，1H，H-1’，J1’，2’＝3.5Hz，J1’ F＝14.9Hz)，5.74(br s，1H，OH)，5.23(dt，1H，H-2’，J1’，2’＝3.5Hz，J2’，3’＝4.4Hz，J2’，F＝52.4Hz)，5.23(brs，1H，OH)，4.35(dt，1H，H-3’，J2’，3’＝4.4Hz，J3’，4’＝5.3Hz，J3’，F＝15.9Hz)，3.98(m，1H，H-4’)，3.66(dd，2H，H-5’，J＝3.4Hz，J＝12.5Hz).化合物165，6-二氯-1-(2-脱氧-2-氟-3，5-二乙酰基-β-D-呋喃核糖基)苯并咪唑(16)将化合物15(0.45g，1.4mmol)溶解于吡啶(20mL)并煮沸除去水。将溶液在冰浴中冷却到0℃。加入乙酸酐(260μL，2.9mmol，2当量)，允许反应混合物升至室温同时搅拌过夜。加入甲醇(3mL)并真空除去溶剂。与甲苯(3×)共蒸发除去残余的吡啶。剩余物在水和乙酸乙酯之间分配。乙酸乙酯溶液经硫酸镁干燥，过滤和真空除去溶剂后得到0.56g(98％)化合物16。该产物无需进一步纯化即可使用。
化合物16MS(FAB+)m/z，405，M+1.1H-NMR(DMSO-d6)δ 8.59(s，1H，H-2)，8.05(s，1H，Ar-H)，8.01(s，1H，Ar-H)，6.45(dd，1H，H-1’，J1’，2’＝4.8Hz，J1’，F＝14.8Hz)，5.75(dt，1H H-2’，J＝5.2Hz，J2’，F＝51Hz)，5.40(m，1H，H-3’)，4.43(m，1H，H-4’)，4.28(m，2H，H-5’)，2.13(s，3H，乙酰基-CH3)，2.02(s，3H，乙酰基-CH3).化合物17，18和192-溴-5，6-二氯-1-(2-脱氧-2-氟-3，5-二乙酰基-β-D-呋喃核糖基)苯并咪唑(17)，2-溴-5，6-二氯-1-(2-脱氧-2-氟-5-二乙酰基-β-D-呋喃核糖基)苯并咪唑(18)，和2-溴-5，6-二氯-1-(2-脱氧-2-氟-β-D-呋喃核糖基)苯并咪唑(19)将化合物16(0.55g，1.4mmol)溶解于二噁烷(25mL)并煮沸除去水。将溶液在120℃油浴中加热回流。加入N-溴琥珀酰亚胺(NBS，0.48g，2.8mmol，2当量)，并将反应混合物回流4分钟。加入第二批NBS(0.48g，2.8mmol，2当量)，并将继续回流6分钟。将反应混合物拿离热源，用氯仿(40mL)稀释，并冷却到室温。溶液用饱和碳酸氢钠洗涤(2×)，硫酸镁干燥并过滤。真空除去溶剂，剩余物在75g硅胶上色谱纯化，用乙酸乙酯/己烷(1∶1，v/v)洗脱。合并含有产物的馏分并真空除去溶剂，得到化合物17。通过在甲醇和乙醇(各17mL)中用溶解于4.2mL水的碳酸钠(0.22g，2.1mmol，2当量)处理完成乙酰基的水解。将反应混合物在室温搅拌过夜。用水(40mL)稀释溶液。用乙酸乙酯萃取产物(2×)。乙酸乙酯溶液用硫酸镁干燥，过滤并真空除去溶剂。剩余物在75g硅胶上色谱纯化，用乙酸乙酯/己烷(1∶4，v/v)然后是(1∶2，v/v)梯度洗脱。较快洗脱出的产物是5’-乙酰基化合物(化合物18，0.17g)，第二种洗脱的产物是二羟基化合物(化合物19，0.03g)。
化合物18MS(FAB+)m/z，399，M+1.1H-NMR(DMSO-d6)δ8.46(s，1H，Ar-H)，7.95(s，1H，Ar-H)，6.22(dd，1H，H-1’，J1’，2’＝5.4Hz，J1’，F＝14.5Hz)，5.82(d，1H，OH-3’，J＝5.6Hz)，5.45(t，1H，OH-5’，J＝4.5Hz)，5.29(dt，1H，H-2’，J＝5.2Hz，J2’，F＝53Hz)，4.3(m，1H，H-3’)，4.0(m，1H，H-4’)，3.7(m，2H，H-5’).
化合物191H-NMR(DMSO-d6)δ8.00(s，1H，Ar-H)，7.90(s，1H，Ar-H)，6.25(dd，1H，H-1’，J1’，2’＝5.1Hz，J1’，F＝16.5Hz)，5.95(d，1H，OH-3’，J＝6Hz)，5.40(dt，1H，H-2’，J＝5.3Hz，J2’，F＝53Hz)，4.4-4.1(m，4H，H-3’，4’，5’)，2.13(s，3H，CH3-乙酰基).化合物20 2-异丙氨基-5，6-二氯-1-(2-脱氧-2-氟-β-D-呋喃核糖基)苯并咪唑(20)将化合物18(0.06g，0.14mmol)溶解于乙醇(4mL)，并加入异丙胺(1.3mL)。将溶液封闭在90℃油浴中加热17hr。真空除去溶剂，剩余物在6g硅胶上色谱纯化，用氯仿/甲醇(95∶5，v/v)洗脱。合并含有产物的馏分并真空除去溶剂，得到化合物20(0.03g，57％)。
化合物20MS(APCH+)m/z，378，M+1.1H-NMR(DMSO-d6)δ7.66(s，1H，H-2)，7.37(s，1H，Ar-H)，6.92(d，1H，NH J＝7.7Hz)，6.17(dd，1H，H-1’，J1’，2’＝5.3Hz，J1’，F＝15.4Hz)，5.73(d，1H，OH-3’，J＝5.7Hz)，5.63(t，1H，OH-5’，J＝4.3Hz)，5.12(dt，1H，H-2’，J＝5.3Hz，J2’，F＝53Hz)，4.29(dt，1H，H-3’)，4.02(m，1H，CH)，3.94(m，1H，H-4’)，3.68(m，2H，H-5’)，1.16(d，6H，CH3，J＝6.5Hz).D.抗病毒活性和细胞毒性的测定细胞和病毒将KB细胞(利用American Type Culture Collection(ATCC)12301Parklawn Drive，Rockport，MD20852(ATCC CCL 17))，一种由表皮口腔癌衍生的建立的人细胞系，在Hanks盐(MEM(H))并补充有5％胎牛血清构成的最小基本培养基(MEM)(Sigma)中培养。人前皮纤维细胞(HFF细胞)(由密执安大学医院提供)和非洲绿猴肾细胞(BSC-1) (ATTC CCL 26)在Earl盐(MEM(E))并补充有10％胎牛血清构成的MEM中培养。根据常规方法和Shipman等人(Shipman等人，1976)所述方法让细胞传代繁殖。简而言之，根据常规方法用0.05％胰蛋白酶加0.02％EDTA在HEPES缓冲的盐溶液中将细胞传代到1∶2-1∶10稀释度。HFF细胞只传到1∶2稀释度。
将衣阿华大学Dr.Mark Stinski赠送的HCMV的Towne菌株的纯分离菌斑块P0用于所有实验。还用到康涅狄格大学Dr.Sandra K.Weller提供的HSV-1的KOS菌株。HCMV和HSV-1存储形式的制备和滴定按本领域技术人员已知的以及Turk等人(Turk等人，1987)和Shipman等人(Shipman等人，1990)所述方法进行。简而言之，高滴定HSV-1储藏液可制备如下。将KB细胞的几乎融合的单层培养物在装有25mM HEPES并补充有5％胎牛血清和0.127g/升L-精氨酸(VGM，病毒生长基)MEM(E)缓冲液的32oz.玻璃瓶中培养。以低输入复杂度使培养物感染以减少残缺病毒的形成。当细胞的细胞病理学达到“3-4+”后通过剧烈摇动收集细胞，并通过离心(800×g，5min.)浓缩。将所得病毒池储存在-76℃，直到实验时恢复使用。
用BSC-1细胞的单层培养物滴定HSV-1。用6孔一组的盘子以3×105细胞/孔的配置培植细胞。补充有10％胎牛血清的MEM(E)被用作培养基。22-24hr后90％的细胞融合，用至少3个10倍稀释度的0.2mL病毒悬浮液给3倍量的细胞接种以便测定，并在潮湿的4％CO2-90％空气中孵化1小时以利于病毒吸收。病毒吸收后用5％血清加0.5％甲基纤维素(4000CPS)的5mL MEM(E)覆盖细胞形成的膜，并继续孵化2-3天。用0.1％紫晶的20％甲醇固定细胞和给细胞着色，用肉眼清点斑块个数。
通过以较少感染度(m.o.i.)，即每个细胞形成0.01个斑块单位(p.f.u.)，感染HFF细胞来制备HCMV储藏液。细胞生长基每4天更换一次直到所有细胞的细胞病理学明显(将近21天)。上清液作为病毒储藏液保存。4天后经过3个冻-化循环使细胞分裂，细胞加培养基作为另一种病毒源被保留，在液氮中贮存。
将HCMV滴定到24孔一组的盘中，按5×104HFF细胞/孔培植，培养方法如上。当细胞达到70-80％融合时每个孔中加入0.2mL病毒悬浮液，吸收过程如上所述。使用至少3个将每个制品稀释10倍的制品。病毒吸收后在维持培养基[1.1g/升NaHCO3，100单位/mL青霉素G，100μg/mL链霉素和5％胎牛血清构成的MEM(E)]中用0.5％甲基纤维素(4000CPS)覆盖细胞形成的膜，并在潮湿的4％CO2-90％空气中孵化1小时孵化培养物。用至少放大10倍的量感染5-7天后可见病毒斑块。感染后7-12天将细胞暴露于0.1％紫晶的20％甲醇溶液10分钟以固定细胞和给细胞着色。用Nikon Profile Projector显微镜放大20倍清点斑块个数。抗病毒活性的测定采用类似作为参考的上述病毒滴度实验和Townsend等人(Townsend等人，1995)所述方法用HFF细胞的单层培养物进行HCMV斑块和降低产率实验。化合物抗HSV-1活性用Townsend等人(Townsend等人，1995)所述ELISA测定法进行评估。
化合物对HCMV复制的作用用斑块和产率降低测定法进行测量。对于前者，采用上述方法用每孔约50p.f.u.HCMV感染24孔培养盘中的HFF细胞。病毒吸收后将溶解于生长基中的化合物以4-6倍所选浓度加到两倍孔中。在37℃孵化7-10天后按上述方法对细胞形成的膜进行固定，着色和通过显微镜清点斑块个数。药物的作用用斑块数量减少的百分比计算，即在各种药物浓度下的斑块数量与无药物时的斑块数量之比。DHPG(9-(1，3-二羟-2-丙氧甲基)鸟嘌呤)在所有实验中被用作阳性对照。产率降低测定法按Townsend等人(Townsend等人，1995)所述方法进行。
Townsend等人(Townsend等人，1995)所述的ELISA方法被用来测定抗HSV-1活性。药物的作用用病毒滴度减少的百分比计算，即在各种药物浓度下的病毒滴度与无药物时的滴度之比。在所有实验中阿昔洛韦被用作阳性对照。细胞毒性的测定用两种不同的方法评价化合物的细胞毒性。第一种，通过对未受用于斑块测定的病毒影响的细胞的显微检测测定二次(固定)HFF细胞的细胞毒性。第二种，通过紫晶着色和分光光度法定量分析从着色细胞上洗脱的颜色测定两个繁殖双倍时间内化合物对KB细胞的作用。这种方法被用来分析9-(1，3-二羟-2-丙氧甲基)鸟嘌呤和叠氮胸苷(见Prichard等人，1991)。
本发明两种氟化糖苯并咪唑核苷的抗病毒活性和细胞毒性数据，以及与已知抗病毒剂TCRB和9-(1，3-二羟-2-丙氧甲基)鸟嘌呤的比较数据列于表1。
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本发明三种氟化糖苯并咪唑核苷的抗病毒活性和细胞毒性数据列于表2。
将HCMV菌株AD169在96孔盘内的单层人胚胎肺细胞(MRC5细胞)中培养。以每个细胞约0.01个感染病毒颗粒的比例注入细胞后以6种不同浓度一式三份地在相应孔中加入试验化合物。相同浓度的化合物也加到含有单层未感染的细胞的孔中以便评价细胞毒性。将盘培养5天，通过显微检测估计最小细胞毒剂量。通过印迹和定量的具体DNA杂交法(类似于Gadler方法(见Gadler，1983))对各孔中的HCMV DNA进行测量以估算抗病毒效果IC50。
简而言之，杂交用的探针用粘粒pC7531和pCS37(见Sullivan等人，1993)制成。粘粒分别含有102,000-143,300核苷和51,600-92,900核苷构成的HCMV AD169序列。该探针是用核酸酶Xbal切割之后由α-[32P]-dCTP采用随机引物和T7 DNA聚合酶(Pharmacia)标记的两个粘粒的1∶1混合物。该探针经过在99℃加热2分钟改性，并经过无菌Corning0.45μm滤膜(25933-200)过滤。
膜的预杂交过程在45℃的6X SSPE (SSPE0.18M NaCl，10mMNaPO4(pH7.7)，1mM EDTA)，1％Ficoll，1％聚乙烯基吡咯烷，1％BSA，0.5％SDS和50μg/mL鲑鱼血清DNA中进行2-12hr。
用含有各加热变性的探针为1×106cpm/mL的杂交溶液(6XSSPE，0.5％SDS，50μg/mL鲑鱼血清DNA)代替预杂交溶液。杂交过程在65℃进行16hr，然后洗涤该膜如下6X SSPE及0.5％SDS，室温，2×2分钟；1X SSPE及0.5％SDS，65℃，2×15分钟；0.1XSSPE及0.5％SDS，65℃，一次1小时。
将膜涂干，并用PhosphoImager(Molecular Dynamics，Sunnyvale，CA)包成定量分析用的Saran包。将PhosphoImager的屏幕暴露于印迹16-24小时。每个样品的粗计数用ImageQuant软件(MolecularDynamics，Sunnyvale，CA)计算，通过减去局部膜本底得到净计数。
将药物稀释孔的计数与未处理对照孔的计数比较得到响应曲线，用来计算IC50值。根据Hill方程进行加权线性回归计算IC50值。
上述本发明实例是为了说明本发明，而不是为了也不应该以任何方式构成对下面权利要求书所要求的发明的限制。另一方面，在本发明范围之内的提高和改进对本发明所涉及的领域中的技术人员都将是显而易见的。E.参考文献下列作为参考的出版物，专利及公开的专利申请的内容在此引作本发明公开的参考，以对本发明涉及的现有技术进行更详细的描述。Blank，H.U.；Frahne，D.；Myles，A.；Pfleiderer，W.，“Uber dieTrityllierung von Adenosin-Derivate.”，《利比希化学年鉴》，1970年，第742卷，第34-42页Chu，C.K.；Matulic-Adamic，J.Huang，J.-T.；Chou，T.-C.；Burchenal，J.H.；Fox，J.J.；Watanabe，K.A.，“核苷135，一些9-(2-脱氧-2-氟-β-D-阿拉伯呋喃糖基)-9H-嘌呤的合成及其生物活性”，《化学药物公告》，1989年，第37卷，第336页Codington，J.F.；Doerr，I.L.；Fox，J.J.，《有机化学杂志》，1964年，第29卷，第558页Cook等人，《生物化学杂志》，1990年，第265卷，第2682页Devivar，R.V.等人，《医药化学杂志》，1994年，第37卷，第2942-2949页Gadler，《抗生素化学(Antimicrob.Agent Chemother.)》，1983年，第24卷，第370-374页Good等人，《抗病毒剂研究(增刊1)》，1994年，第23卷，第103页Herdewijn，P.；Aerchot，A.；Kerremans，L.，“糖部分氟化的核苷的合成；二乙氨基三氟化硫在氟化核苷合成中的应用”，《核苷和核苷酸》，1989年，第8卷，第65-96页，以及其中的参考文献Howell等人，《有机化学杂志》，1995年，第50卷，第3644-3647页Howell，H.G.；Brodfuehrer，P.R.；Brundige，S.P.；Benigne，，D.A.；Sapino，C.，“抗病毒核苷；一种立体特异的全部合成的2’-氟-2’-脱氧-β-D-阿拉伯呋喃糖基核苷”，《有机化学杂志》，1988年，第53卷，第85-88页Krezeminski，J.；Nawrot，B.；Pankiewicz，K.W.；Watahabe，K.A.，“9-(2-脱氧-2-氟-β-D-阿拉伯呋喃糖基)次黄嘌呤的合成；在制备嘌呤核苷方法中首次直接引入2’-β-氟取代基；直接对2’-脱氧-2’-取代的阿拉伯核苷合成的研究”，《核苷和核苷酸》，1991年，第19卷，第781-798页Montgomery，J.A.；Shortnacy，A.T.；Carson，D.A.；Secrist III，J.A.，“9-(2-脱氧-2-氟-β-D-阿拉伯呋喃糖基)鸟嘌呤2’-脱氧鸟苷的一种代谢稳定的细胞毒类似物”，《医药化学杂志》，1986年，第29卷，第2389-2392页Pankiewicz，K.W.；Krezeminski，J.；Ciszewski，L.A.；Ren，W.Y.；Watanabe，K.A.，“9-(2-脱氧-2-氟-β-D-阿拉伯呋喃糖基)腺嘌呤和次黄嘌呤的合成；C3’-内至C2’-内形成的漂移对2‘-羟基与DAST反应过程的影响”，《有机化学杂志》，1992年，第57卷，第553-559页Pankiewicz，K.W.；Watanabe，K.A.，《一种通过直接接近合成2’-氟-和3’-氟取代的嘌呤核苷的方法；作为抗肿瘤剂和抗病毒剂的核苷》，Chu，C.K.；Baker，D.C.编辑，Plenum出版社，纽约，1993年，第55-71页Prichard，M.N.等人，《抗病毒综述》，1991年，第35卷，第1060-1065页Reichman，U.；Watanabe，K.A.；Fox，J.J.，“2-脱氧-2-氟-D-阿拉伯呋喃糖衍生物的实用合成方法”《碳水化合物综述》，1975年，第42卷，第233-240页Revenkar，R.G.和Townsend，L.B.，《杂环化学杂志》，1968年，第5卷，第477-483页Revenkar，R.G.和Townsend，L.B.，《杂环化学杂志》，1968年，第5卷，第615-620页Saluja，S.等人，“某些2-取代的-5，6-二氯苯并咪唑无环核苷的合成和抗病毒活性”，Poster#146，医药化学专业，第204届美国化学学会年会，华盛顿特区，1992年8月23-28日Shipman，C.，Jr.等人，《抗生素化学》，1976年，第9卷，第120页Shipman，C.，Jr.等人，《病毒学方法杂志》，1990年，第28卷，第101-106页Still，W.C.；Kahn，M.；Mitra，A.，“用调节溶液进行制备性分离的快速色谱技术”，《有机化学杂志》，1978年，第43卷，第2923-2925页Tamm，I.，《科学》，1954年，第120卷，第847-848页Tann，C.H.；Brodfuehrer，P.R.；Brundige，S.P.；Sapino，C.；Howell，H.G.，“氟代碳水化合物在合成中的应用；1-(2-脱氧-2-氟-β-D-阿拉伯呋喃糖基)-5-碘尿嘧啶(β-FMAU)和1-(2-脱氧-2-氟-β-D-阿拉伯呋喃糖基)-5-碘尿嘧啶(β-FIAU)胸腺嘧啶(β-FMAU)的有效合成”，《有机化学杂志》，1985年，第50卷，第3644-3647页Thiem，J.；Rash，D.，“尿苷衍生物的合成和Perkow反应”，《核苷和核苷酸》，1985年，第4卷，第487页Townsend和Revankar，《化学综述》，1970年，第70卷，第389页Townsend，L.B.和Drach，J.C.，第5届抗病毒研究国际会议，温哥华，British Columbia，1970年3月Townsend，L.B.等人，《医药化学杂志》，1995年，第38卷，第4098-4105页Townsend，L.B.等人，美国专利5,248,672，公开于1993年9月28日Townsend，L.B.等人，美国专利5,360,795，公开于1994年11月1日Turk，，S.R.等人，《抗生素化学》，1987年，第31卷，第544-550页V.Sullivan，K.K.Biron，C.L.Talarico，S.C.Stanat，M.G.Davis，L.S.Pozzi和D.M.Coen，《抗生素化学》，1993年，第37卷，第19-25页Wright，J.A.；Taylor，N.F.；Fox，J.J.，核苷LX，氟代碳水化合物XXII，“2-脱氧-2-氟-D-阿拉伯糖和9-(2-脱氧-2-氟-α和β-阿拉伯呋喃糖基)腺嘌呤的合成”，《有机化学杂志》，1969年，第34卷，第2632-2636页Zou，R.等人，“一些在苯部分改性的TCRB类似物的设计，合成和抗病毒评价”，Poster#142，医药化学专业，第204届美国化学学会年会，华盛顿特区，1992年8月23-28日
权利要求
1.下面结构式所示修饰的苯并咪唑核苷及其可药用盐，
其中R1是氟化糖类部分；R2是-H，-F，-Cl，-Br，-I或-NR2，其中R独立地为-H或具有1-6个碳原子的烷基；R4是-H，-F，-Cl，-Br或-I；R5是-H，-F，-Cl，-Br或-I；R6是-H，-F，-Cl，-Br或-I；R7是-H，-F，-Cl，-Br或-I。
2.权利要求1的修饰的苯并咪唑核苷，其中所说氟化糖类部分包括2’-氟-呋喃糖基部分或3’-氟-呋喃糖基部分。
3.权利要求2的修饰的苯并咪唑核苷，其中所说氟化糖类部分包括选自以下基团的部分2’-氟-呋喃苏糖基；3’-氟-呋喃苏糖基；2’-氟-呋喃赤糖基；3’-氟-呋喃赤糖基；2’-氟-呋喃核糖基；3’-氟-呋喃核糖基；2’-氟-呋喃阿糖基；3’-氟-呋喃阿糖基；2’-氟-呋喃木糖基；及3’-氟-呋喃木糖基。
4.权利要求3的修饰的苯并咪唑核苷，其中所说氟化糖类部分包括选自以下基团的部分2’-氟-呋喃核糖基；2’-氟-呋喃阿糖基；及3’-氟-呋喃木糖基。
5.权利要求4的修饰的苯并咪唑核苷，其中所说氟化糖类部分具有一个或多个保护形式的羟基。
6.权利要求1的修饰的苯并咪唑核苷，其中R1是2’-氟-呋喃阿糖基；R2是-Cl；R4是-H；R5是-Cl；R6是-Cl；及R7是-H。
7.权利要求1的修饰的苯并咪唑核苷，其中R1是3’-氟-呋喃木糖基；R2是-Cl；R4是-H；R5是-Cl；R6是-Cl；及R7是-H。
8.权利要求1的修饰的苯并咪唑核苷，其中R1是2’-氟-呋喃核糖基；R2是-H；R4是-H；R5是-Cl；R6是-Cl；及R7是-H。
9.权利要求1的修饰的苯并咪唑核苷，其中R1是2’-氟-呋喃核糖基；R2是-Br；R4是-H；R5是-Cl；R6是-Cl；及R7是-H。
10.权利要求1的修饰的苯并咪唑核苷，其中R1是2’-氟-呋喃核糖基；R2是-NH(CH(CH3)2)；R4是-H；R5是-Cl；R6是-Cl；及R7是-H。
11.含有根据权利要求1-10任何一个中的化合物和可药用载体的组合物。
12.根据权利要求1-10任何一个中的化合物的用途，包括单独或结合用于抑制或防止病毒感染药物的制备。
13.一种抑制病毒感染的细胞中病毒增殖的方法，包括在适当条件下将所说细胞与有效量的权利要求1-10任何一个中的化合物接触，使病毒增殖得到抑制。
14.一种抑制HCMV感染的细胞中HCMV增殖的方法，包括在适当条件下将所说细胞与有效量的权利要求1-10任何一个中的化合物接触，使HCMV增殖得到抑制。
15.一种预防性治疗易感染病毒细胞的方法，包括在适当条件下将所说细胞与有效量的权利要求1-10任何一个中的化合物接触，使病毒感染得到预防。
16.一种预防性治疗易感染HCMV细胞的方法，包括在适当条件下将所说细胞与有效量的权利要求1-10任何一个中的化合物接触，使HCMV感染得到预防。
全文摘要
本发明涉及具有抗病毒活性和改善了代谢稳定性的核苷类似物。更具体地,本发明涉及修饰的糖类苯并咪唑核苷,列举的化合物如具有氟化糖类部分的苯并咪唑核苷(例如,2’－氟－呋喃糖基部分或3’－氟－呋喃糖基部分),可用式(Ⅰ)表示,其中R
文档编号C07H19/052GK1258300SQ97192559
公开日2000年6月28日 申请日期1997年1月22日 优先权日1997年1月22日
发明者L·B·汤森德, J·C·达拉克, G·A·弗里曼 申请人:密歇根大学董事会, 格拉克索集团有限公司