专利名称：作为生长激素释放剂的2－羟基吲哚衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及用作生长激素释放剂等的2-羟基吲哚衍生物。
已知多种化合物能引起生长激素的释放，如精氨酸、L-3,4-二羟基苯丙氨酸(L-DOPA)、胰高血糖素、血管升压素和诱发低血糖的胰岛素。活动也能释放生长激素，如睡眠和运动。这些化合物和活动通过以各种方式作用在下丘脑而降低抑生长素分泌并增加已知的促分泌生长激素释放因子(GRF)或未知的内源性生长激素释放激素的分泌，从而间接地引起垂体中生长激素的释放。
可将供给外源性生长激素作为一种增加生长激素水平的途径。所用的生长激素来源于尸体脑垂体的提取物或者重组体生长激素。但是，所得到的生长激素非常昂贵，而且脑垂体的提取产物具有可能将与脑垂体源有关的疾病转移给该生长激素受体的危险性。由于口服困难，生长激素必须通过注射或鼻腔喷雾给药。
另一种增加生长激素水平的途径是给予能刺激内源性生长激素(如GRF或其衍生物)释放的化合物(Schoen W.R.等，“生长激素促分泌素”，药物化学年报Academic Press,28卷，19章，1993)和肽基化合物(US 4,411,890)。这些肽比生长激素小许多，但仍然对各种蛋白酶敏感。因此，它们的口服生物利用度较低。
WO 94/01369公开用作生长激素释放剂的非-肽化合物。虽然这些化合物在各种生理环境下稳定，并能非肠道、鼻腔内或口服给药，但是这些化合物尚未批准为药物。
J.Chem.Soc.Perkin Trans.I,1975-1979(1991)公开在酸催化剂存在下，通过加热2-羟基吲哚衍生物可形成苯并二氮芳辛衍生物。
Chem.Pharm.Bull.,21,960-971(1973)公开在苯环上没有任何取代基的2-羟基吲哚衍生物具有镇痛和抗炎作用。
发明详述本发明对生长激素释放剂进行了充分的研究，发现2-羟基吲哚衍生物或其前药以及其药学上可接受的盐是可用作药物的生长激素释放剂。由此完成了本发明。
本发明如下[1]式1的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐 其中R1、R2、R3和R4相同或不同，各自独立是氢、任选取代的烷基、任选取代的链烯基、任选取代的链炔基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、卤素、氰基、硝基、羟基、任选取代的氨基、烷氧基、链烷酰基、烷氧基羰基、任选取代的氨基磺酰基、任选取代的氨基甲酰基、烷硫基、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、烷基磺酰氨基或链烷酰基氨基，条件是R1、R2、R3和R4不同时为氢；R5是任选取代的芳基或任选取代的杂芳基；Z是-O-或-NH-；W1和W2其中之一是氢、烷基或-Y-CON(R10)R11；W1和W2的另一个是 n是1、2或3；m是0、1、2或3；Y是单键或C1-C3亚烷基；R6和R7相同或不同，各自独立是氢、任选取代的烷基或任选取代的环烷基；或者R6和R7与相邻的氮原子一起形成任选取代的饱和杂环；R8和R9相同或不同，各自独立是氢或任选取代的烷基；或者R8和R9与相邻的碳原子一起形成任选取代的环烷烃或任选取代的饱和杂环；R8和R6可一起形成C1-C5亚烷基，此时R7是氢、任选取代的烷基或任选取代的环烷基，R9是氢或任选取代的烷基；R10和R11相同或不同，各自独立是氢或烷基；或者R10和R11与相邻的氮原子一起形成任选取代的饱和杂环。
根据[1]的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R3和R4独立是氢、任选由卤素取代的烷基、任选取代的链烯基、任选取代的链炔基、任选取代的氨基甲酰基、卤素、氰基、硝基、链烷酰基、烷氧基羰基、烷基亚磺酰基或烷基磺酰基，条件是R1、R2、R3和R4不同时为氢。
根据[1]的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R3和R4独立是氢、三氟甲基、氨基甲酰基、卤素、4-氨基甲酰基-1-丁炔基、4-烷基氨基甲酰基-1-丁炔基、4-二烷基氨基甲酰基-1-丁炔基、4-吗啉代羰基-1-丁炔基、-C≡C-(CH2)k-Q，其中k是1或2；Q是羟基、烷基磺酰基、链烷酰基氨基、烷基脲基、2-氧代-1-咪唑烷基或2-氧代-1,3-噁唑啉-3-基，条件是R1、R2、R3和R4不同时为氢。
根据[3]的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐，其中R2和R4都是氢。
根据[1]的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐，其中R2和R4都是氢；R1是三氟甲基、氯或溴；R3是氨基甲酰基、卤素、4-氨基甲酰基-1-丁炔基、4-烷基氨基甲酰基-1-丁炔基、4-二烷基氨基甲酰基-1-丁炔基、4-吗啉代羰基-1-丁炔基、-C≡C-(CH2)k-Q，其中k和Q定义同上。
根据[1]的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐，其中R2和R4都是氢；R1是三氟甲基、氯或溴；R3是氨基甲酰基。
根据[1]-[6]中任一项的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐，其中R5是任选取代的苯基或任选取代的2-萘基。
根据[1]-[6]中任一项的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐，其中R5是由卤素和/或三氟甲基任选取代的苯基或者由卤素和/或三氟甲基任选取代的2-萘基。
根据[1]-[8]中任一项的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐，其中R6和R7独立是任选取代的烷基或任选取代的环烷基；或者R6和R7与相邻的氮原子一起形成任选取代的饱和杂环。
根据[1]-[9]中任一项的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐，其中W1和W2其中之一是氢或-CONHR10；W1和W2的另一个是 其中n、m、R6、R7、R8、R9和R10按[1]中定义。
根据[1]-[9]中任一项的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐，其中W1和W2其中之一是氢；W1和W2的另一个是 其中p是2-7的整数；R12和R13独立是任选取代的烷基。
根据[1]-[9]中任一项的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐，其中(1)W1是氢；W2是 或(2)W2是氢；W1是 其中p1是2-7的整数；p2是3-7的整数；R12和R13独立是任选取代的烷基。
根据[11]或[12]的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐，其中R12和R13独立是甲基或乙基。
根据[1]-[13]中任一项的2-羟基吲哚衍生物的光学异构体或其前药或其药学上可接受的盐，其C-3位构型与(+)-1-二乙氨基乙基-4-三氟甲基-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚构型等同。
药物，它含有根据[1]-[14]中任一项的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体或稀释剂。
根据[15]的药物，其中该药物是生长激素释放剂。
用于医疗的根据[1]-[14]中任一项的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐。
应用根据[1]-[14]中任一项的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐制备生长激素释放剂。
释放生长激素的方法，它包括给予需要此种治疗的人类或非人类的哺乳动物根据[1]-[14]中任一项的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐。
“烷基”包括直或支链的C1-C6烷基。典型的实例是甲基、乙基、丙基、1-甲基乙基、丁基、1-甲基丙基、2-甲基丙基、戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、1-乙基丙基、己基、1-甲基戊基、2-甲基戊基、1-乙基丁基等。“烷硫基”、“烷基亚磺酰基”、“烷基磺酰基”和“烷基磺酰氨基”中的烷基包括同上的基团。
“链烯基”包括直或支链的C2-C6链烯基。典型的实例是乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、3-戊烯基等。
“链炔基”包括直或支链的C2-C6链炔基。典型的实例是乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、3-丁炔基、2-戊炔基等。
“烷氧基”包括直或支链的C1-C6烷氧基。典型的实例是甲氧基、乙氧基、丙氧基、1-甲基乙氧基、丁氧基、1-甲基丙氧基、2-甲基丙氧基、戊氧基、1-甲基丁氧基、2-甲基丁氧基、1-乙基丙氧基、己氧基、1-甲基戊氧基、2-甲基戊氧基、1-乙基丁氧基等。“烷氧基羰基”中的烷氧基包括同上的基团。
“链烷酰基”包括直或支链的C1-C6链烷酰基。典型的实例是甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基等。“链烷酰基氨基”中的链烷酰基包括同上的基团。
“C1-C5亚烷基”包括直或支链的C1-C5亚烷基。典型的实例是亚甲基、亚乙基、亚丙基、1,3-亚丙基、1,4-亚丁基、1-甲基-1,3-亚丙基、2-甲基-1,3-亚丙基、1,5-亚戊基、1-甲基-1,4-亚丁基、2-甲基-1,4-亚丁基等。Y中“C1-C3亚烷基”包括直或支链的C1-C3亚烷基。典型的实例是亚甲基、亚乙基和1,3-亚丙基，优选亚甲基和亚乙基。
“取代的烷基”的取代基包括卤素、任选取代的氨基、烷氧基、烷氧基羰基、芳基、羟基、羧基、任选取代的氨基甲酰基、链烷酰基、芳基羰基、杂芳基羰基、饱和的杂环基羰基、链烷酰基氨基、烷基磺酰氨基、任选取代的脲基、烷氧基羰基氨基、任选取代的饱和杂环基、任选取代的氨基磺酰基等。
R1、R2、R3和R4中优选的取代烷基的实例是由卤素取代的烷基，如三氟甲基、五氟乙基、2-氯乙基等。
“取代的链烯基”和“取代的链炔基”的取代基包括卤素、任选取代的氨基、烷氧基、烷氧基羰基、芳基、羟基、羧基、任选取代的氨基甲酰基、链烷酰基、芳基羰基、杂芳基羰基、饱和的杂环基羰基、链烷酰基氨基、烷基磺酰氨基、任选取代的脲基、烷氧基羰基氨基、任选取代的饱和杂环基、任选取代的氨基磺酰基等。
R1、R2、R3和R4中优选的取代的链炔基实例是被极性取代基，如羟基、烷基磺酰氨基、链烷酰基氨基、烷基脲基、氧代-饱和的杂环基(如2-氧代-1-咪唑烷基、2-氧代-1,3-噁唑啉-3-基)、任选取代的氨基甲酰基等取代的C3-C61-链炔基。实例包括4-氨基甲酰基-1-丁炔基、4-烷基氨基甲酰基-1-丁炔基、4-二烷基氨基甲酰基-1-丁炔基、4-吗啉代羰基-1-丁炔基、-C≡C-(CH2)k-Q，其中k和Q定义同上。
“芳基”包括C6-C10芳基。典型实例是苯基、1-萘基、2-萘基等。“芳基羰基”中的芳基包括同上的基团。
“杂芳基”包括含有1-3个氮、硫和/或氧原子的5-7元单环或双环杂芳基。典型实例包括含有1-3个氮、硫和/或氧原子的5-7元单环杂芳基，如吡啶基、哒嗪基、异噻唑基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、咪唑基、嘧啶基、噻二唑基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、吡嗪基、异噻唑基、三嗪基、三唑基、咪唑烷基、噁二唑基、三唑基、三嗪基、四唑基等；含有1-3个氮、硫和/或氧原子的5-7元双环杂芳基，如吲哚基、苯并吡喃基、喹啉基、异喹啉基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并异噁唑基、苯并异噻唑基、苯并三唑基、苯并咪唑基等。“杂芳基羰基”中的杂芳基包括同上的基团。
“环烷基”包括C3-C8环烷基。典型的实例是环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基等。
“环烷烃”包括C3-C8环烷烃。典型的实例是环丙烷、环丁烷、环戊烷、环己烷、环庚烷、环辛烷等。
“饱和杂环”包括含有1-3个氮、硫和/或氧原子的5-7元单环饱和杂环。典型实例包括含有1-3个氮、硫和/或氧原子的5-元单环饱和杂环，如四氢呋喃、吡咯烷、吡唑啉、噻唑烷、噁唑烷等；含有1-3个氮、硫和/或氧原子的6-元单环饱和杂环，如哌啶、吗啉、硫代吗啉、哌嗪等；含有1-3个氮、硫和/或氧原子的7-元单环饱和杂环，如全氢氮杂等等。
“饱和杂环基”为从饱和杂环中除去氢形成的基团。“饱和杂环基-羰基”中的饱和杂环基包括同上的基团。
“取代的芳基”、“取代的苯基”、“取代的2-萘基”、“取代的杂芳基”、“取代的环烷基”、“取代的环烷烃”、“取代的饱和杂环”和“取代的饱和杂环基”的取代基包括卤素、芳基、杂芳基、任选取代的烷基、链烯基、链炔基、任选取代的氨基、氰基、硝基、羟基、巯基、烷氧基、链烷酰基、烷氧基羰基、羧基、任选取代的氨基磺酰基、任选取代的氨基甲酰基、烷基氨基磺酰基氨基、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、烷基磺酰氨基、链烷酰基氨基等。“取代的饱和杂环”和“取代的饱和杂环基”的取代基还包括氧代。“氧代-饱和杂环”和“氧代-饱和杂环基”的实例包括氧代-5-元饱和杂环或杂环基，如吡咯烷酮(基)、噻唑烷酮(基)、2-氧代-1,3-噁唑啉(基)、2-氧代-咪唑烷(基)等；氧代-6-元饱和杂环或杂环基，如哌啶酮(基)等。
R5中“取代的芳基”和“取代的杂芳基”的优选取代基实例是卤素、烷氧基、由卤素取代的烷基等，特别是氯、氟、甲氧基、三氟甲基等。
“卤素”包括氟、氯、溴和碘。
“取代的氨基”的取代基包括由羟基或烷氧基任选取代的烷基等。氨基可被两个取代基取代。
“取代的氨基磺酰基”、“取代的氨基甲酰基”和“取代的脲基”的取代基包括由羟基或烷氧基任选取代的烷基等。氨基磺酰基、氨基甲酰基和脲基可被两个取代基取代。当氨基磺酰基、氨基甲酰基或脲基被两个取代基取代时，这两个取代基可与相邻的氮原子一起形成饱和的杂环，如吗啉等。
“前药”包括Chemistry and Industry,1980,435；Advanced DrugDiscovery Reviews 3,39(1989)中说明的前药。典型的实例是生物上可水解的酯，如酰氧基甲酯、甘醇酸酯、乳酸酯和羧基的吗啉代乙酯；酚羟基的戊二酸单酯；N-吗啉基甲基酰胺；N-酰氧基甲胺；N-酰氧基烷氧基羰基胺。
2-羟基吲哚衍生物或其前药可以是纯的光学异构体、部分纯化的光学异构体、外消旋体、非对映体的混合物等形式。2-羟基吲哚衍生物的优选光学异构体是光学异构体，其C-3位构型与(+)-1-二乙氨基乙基-4-三氟甲基-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚的构型等同。光学异构体通常在HPLC(Chiralpak ODTM柱，异丙醇/己烷为洗脱剂)中有不同的保留时间。参比光学异构体一般比其对映体迟洗脱出。
2-羟基吲哚衍生物或其前药的药学上可接受的盐包括无机酸盐和有机酸盐。无机酸盐的典型实例是盐酸盐、氢溴酸盐、硝酸盐、硫酸盐、磷酸盐等。有机酸盐的典型实例是甲酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、丙酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、草酸盐、富马酸盐、马来酸盐、柠檬酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐等。当2-羟基吲哚衍生物具有酸性基团如羧基等时，其可与碱形成盐。该盐包括有机碱盐，如精氨酸盐、赖氨酸盐、三乙铵盐等；无机碱盐，如碱金属(钠、钾等)盐、碱土金属(钙、钡等)盐、铵盐等。2-羟基吲哚衍生物或其药学上可接受的盐可以是溶剂化物如水合物等形式。
例如可通过以下方法制备式1的2-羟基吲哚衍生物。方法A 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、Z、n和m定义同上。X是氯、溴、碘、甲亚硫酰基(sulfoxy)或甲苯亚硫酰基；M是锂、溴化镁、碘化镁或氯化镁；W3是氢、烷基或-Y-CON(R10)R11，其中R10和R11定义同上。
可通过在碱存在下，使靛红衍生物(2)与化合物(3)反应制备化合物(4)。该反应可根据N-烷基化反应的常用条件进行。碱包括碱的氢化物，如氢化钠、氢化钾等；碱的氨化物，如氨化钠、氨化锂等；碱的烷氧化物，如叔丁醇钾、甲醇钠等。碱的量通常是每当量靛红衍生物(2)用1-10当量，优选1.5-5当量的碱。当使用化合物(3)的盐如盐酸盐等时，可加入过量的对应当量的碱。化合物(3)的量通常是每当量靛红衍生物(2)用1-3当量，优选1.2-2当量的化合物(3)。该反应溶剂包括惰性有机溶剂，如四氢呋喃(THF)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)等。反应温度可在0℃至溶剂的沸点范围内，优选在室温至80℃范围内。
化合物(6)可通过使化合物(4)与化合物(5)反应制备。可根据常用的方法进行化合物(4)与化合物(5)的反应。化合物(5)的量通常是每当量化合物(4)用1-2当量的化合物(5)。反应溶剂包括醚类，如乙醚、THF等。反应温度可在-78℃至室温的范围内。
如果需要，可将化合物(6)的羟基转化为氨基。将化合物(6)用亚硫酰氯氯化，然后叠氮化、还原得到对应的胺。该氯化反应通常可在无溶剂下、在室温至50℃之间温度下进行。该叠氮化反应如可在室温至80℃之间温度下，在惰性溶剂如THF和DMF中，在碱如三乙胺存在下，用碱的叠氮化物如叠氮化钠进行。还原剂包括氯化锡。反应溶剂包括醇类，如甲醇和乙醇。反应温度可在室温至溶剂沸点范围内。
如果需要，可将烷基或-Y-CON(R10)R11(其中R10和R11定义同上)引入到化合物(6)或对应的胺中而制备2-羟基吲哚衍生物(7)。可根据常用的方法进行引入烷基或-Y-CON(R10)R11的反应，如在有碱或无碱存在下，与卤代烷烃、X1-Y-CON(R10)R11，其中R10和R11定义同上；X1是氯、溴、碘、甲磺酰基或甲苯磺酰基，或者R10-NCO，其中R10定义同上，进行反应制备。碱包括碱的氢化物，如氢化钠、氢化钾等；碱的氨化物，如氨化钠、氨化锂等；有机碱，如三乙胺、乙基二异丙基胺等。碱的量通常是每当量化合物(6)或对应的胺用1-10当量的碱。卤代烷烃、X1-Y-CON(R10)R11或R10-NCO的量通常是每当量化合物(6)或对应的胺用1-10当量。反应溶剂包括惰性溶剂，如THF、DMF等。反应温度可在0℃至溶剂的沸点范围内，优选在室温至80℃范围内。
方法B 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、n、m、X、M和W3定义同上。
可按化合物(4)与化合物(5)反应相同的方法，使靛红衍生物(2)与化合物(5)反应制备化合物(8)。可按化合物(6)的羟基转化的相同方法，将化合物(8)的羟基转化为氨基。然后，如果需要，可按靛红衍生物(2)与化合物(3)反应相同的方法，使化合物(8)与化合物(3)反应，然后引入烷基或-Y-CON(R10)R11(其中R10和R11定义同上)而制备2-羟基吲哚衍生物(7)和(9)。该反应一般主要制备2-羟基吲哚衍生物(9)。
例如，靛红衍生物(2)制备如下。靛红衍生物制备法(方法C) 其中R1、R2、R3和R4定义同上。
根据Sandmeyer氏方法(Org.Synth.,Coll.1卷，321(1941))制备靛红衍生物(2)。通过在回流下，在水中使苯胺衍生物(10)与水合氯醛和羟胺反应得到化合物(11)，接着将该化合物顺次用酸和水处理制备靛红衍生物(2)。酸包括浓硫酸、多磷酸等。优选将该酸用作溶剂。用酸处理的温度可在50-100℃范围内。水处理可通过将反应混合液加入到水中进行。用水处理的温度优选在0℃至室温范围内。由于处理过程放热，可用冰代替水。
可通过使苯胺衍生物(10)与草酰氯反应，然后进行分子内Friedel-Crafts反应制备靛红衍生物(2)。这两个反应可在同一容器内同时进行。反应溶剂包括卤化溶剂，如二氯甲烷、1,2-二氯乙烷等。可无需溶剂进行该反应。在Friedel-Crafts反应中，可加入Lewis酸。Lewis酸包括氯化铝等。靛红衍生物制备法(方法D) 其中R1、R2、R3和R4定义同上；R14和R15独立是烷基。
根据Gassman氏方法(J.Am.Chem.Soc.,96,5508(1974))制备靛红衍生物(2)。通过将苯胺衍生物(10)氯化，接着加入化合物R14SCH2CO2R15，然后加入碱来制备化合物(12)。反应溶剂包括卤化溶剂，如二氯甲烷、1,2-二氯乙烷等。氯化剂包括磺酰氯、叔丁氧基氯等。氯化反应和加入化合物R14SCH2CO2R15的温度可在-20至-78℃范围内。碱包括有机碱，如三乙胺等。可通过将反应混合液温热至室温，再将混合液保持在室温下进行碱的加入。
将化合物(12)用酸处理制备化合物(13)。酸包括盐酸、硫酸、甲磺酸等。反应温度可为室温。该反应可在以上反应的相同容器中连续进行。
化合物(2)可通过化合物(13)的氧化制备。氧化剂包括氧化铜(Ⅱ)等。反应温度可在室温至溶剂的沸点温度范围内。反应溶剂包括惰性有机溶剂，如丙酮、乙腈等。靛红衍生物制备法(方法E) 其中R1、R2、R3和R4定义同上；R15和R16独立是烷基。
根据Reisert反应制备靛红衍生物(2)。例如，在醇性溶剂中，在金属醇盐存在下，硝基甲苯(14)与草酸二烷基酯进行Reisert反应得到酮酯(15)(J.Am.Chem.Soc.,78,221(1956))。草酸二烷基酯、金属醇盐和醇性溶剂的适当的组合是草酸二甲酯-甲醇钠-甲醇、草酸二甲酯-甲醇钾-甲醇和草酸二乙酯-乙醇钠-乙醇。在酸如高氯酸存在下，将酮酯(15)用过氧化氢水溶液处理(J.Org.Chem,16,1785(1951))，然后用甲醇-氯化氢或亚硫酰氯甲基化生成酯(16)。将硝基用Fe-乙酸、三氯化钛或氯化锡(Ⅱ)水溶液还原形成2-羟基吲哚(17)(Synthesis,1993,51)。通过用三溴吡啶鎓处理，然后用酸如氢溴酸水解，可实现2-羟基吲哚(17)向靛红(2)的两步转化(Tetrahedron Lett.,39,7679(1998))。
在以上反应中，如果需要，可将每个化合物中的官能团保护起来。保护基包括熟知的保护基(有机合成中的保护基团，T.w.Greene,A Wiley-Interscience Publication(1981)等)等。
根据以上方法制备的2-羟基吲哚衍生物(1)可能是异构体混合物。此时，可在最后步骤或在中间步骤中，通过适当的方法如硅胶色谱法等，分离各自的异构体。
可通过常用的光学拆分方法，如重结晶其与光学酸(如酒石酸等)的盐，而获得2-羟基吲哚衍生物(1)的光学异构体。
2-羟基吲哚衍生物(1)的前药可通过常用方法获得(见Chemistryand Industry,1980,435Advanced Drug Discovery Reviews 3,39(1989))。
2-羟基吲哚衍生物(1)或其前药的药学上可接受的盐可通过在溶剂如水、甲醇、乙醇、丙酮等中，将2-羟基吲哚衍生物(1)或其前药与药学上可接受的酸如盐酸、柠檬酸、甲磺酸等混合制备。
2-羟基吲哚衍生物的特别优选实例是1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2-氯-3-吡啶基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2-氯-3-噻吩基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(5-吲哚基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-[3-(3-甲基-2-氧代-1-咪唑烷基)-1-丙炔基]-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-[4-(3-甲基-2-氧代-1-咪唑烷基)-1-丁炔基]-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-[4-二甲基氨基甲酰基-1-丁炔基]-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-[5-二甲基氨基甲酰基-1-戊炔基]-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-二甲基氨基甲酰基乙炔基-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-氨基甲酰基乙炔基-3-羟基-3-(2-氯-4-溴苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-(2-氨基甲酰基乙烯基)-3-羟基-3-(2-氯-4-溴苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-(2-氨基甲酰基乙基)-3-羟基-3-(2-氯-4-溴苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-(4-氨基-1-丁炔基)-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-(4-乙酰氨基-1-丁炔基)-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-(5-羧基-1-戊炔基)-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-氨基磺酰基-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-甲基氨基磺酰基-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-二甲基氨基磺酰基-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-(4-氨基磺酰基-1-丁炔基)-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(1-萘基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-7-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-甲基-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-甲氧基-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-氟-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-氰基-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-羟基-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-5-三氟甲基-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-5-氯-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-5-氯-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-(2-哌啶基)乙基)-4-三氟甲基-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-(2-吡咯烷基)乙基)-4-三氟甲基-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-(N-甲基-2-吡咯烷基)乙基)-4-三氟甲基-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-哌啶基甲基)-4-三氟甲基-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(3-氨基-3-甲基丁基)-4-三氟甲基-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(3-氨基丁基)-4-三氟甲基-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(4-二甲氨基-3,3-二甲基丁基)-4-三氟甲基-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2,3-二氯苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2-氯-4-甲氧基苯基)-2-羟基吲哚，1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2-氯-4-溴苯基)-2-羟基吲哚，和1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2,3,4-三氯苯基)-2-羟基吲哚。
由于2-羟基吲哚衍生物能刺激垂体中生长激素的释放，所以本发明的2-羟基吲哚衍生物具有类似于生长激素的作用和用途。生长激素的作用和用途的实例如下刺激老年人生长激素的释放；治疗成人生长激素缺乏症；预防糖皮质激素的分解代谢副作用；预防和治疗骨质疏松症；刺激免疫系统；加速伤口愈合；加速骨折修复；治疗发育迟缓；治疗急性或慢性肾衰竭或功能不全；治疗生理性矮小身材，包括生长激素缺乏的儿童以及与慢性疾病有关的矮小身材；治疗肥胖症和与肥胖症有关的发育迟缓；治疗与Prader-Willi综合征和Turner氏综合征有关的发育迟缓；加速烧伤患者或大手术如胃肠道手术后的复原并降低住院期；治疗子宫发育迟缓、骨骼发育不良、皮质醇过多症和Cushing氏综合征；诱发搏动的生长激素释放；代替紧张下患者的生长激素；治疗骨软骨发育不良、Noonan氏综合征、精神分裂症、抑郁症、Alzheimer氏病、伤口愈合迟缓以及精神社会剥夺；治疗肺功能异常和换气机依赖性；减小大手术后蛋白质分解代谢的反应；治疗吸收障碍综合征；降低由于慢性病如癌症或AIDS引起的恶病质和蛋白质损失；加速患者体重的增加和对TPN(总胃肠外营养)的蛋白质累积；治疗血胰岛素过多症包括胰岛细胞增殖症；诱发排卵的辅助治疗以及预防和治疗胃溃疡和十二指肠溃疡；刺激胸腺发育；预防与年龄有关的胸腺功能衰退；辅助治疗慢性血液透析的患者；治疗免疫抑制的患者；增强对接种疫苗后的抗体反应；改善年老体弱人的肌肉张力和运动性；保持年老体弱人的皮肤厚度、代谢平衡、肾平衡；刺激年老体弱人的成骨细胞、骨质重建和软骨的生长；治疗神经疾病如外周的和药物诱发的神经病、Guillian-Barre综合征、肌萎缩性侧索硬化、多发性硬化、脑血管意外和脱髓鞘病；刺激伴随动物免疫系统；治疗伴随动物老龄疾病；促进家畜生长；刺激羊的羊毛生长等。尤其是，2-羟基吲哚衍生物可用于治疗由于生长激素缺乏引起的医学紊乱。
本发明的2-羟基吲哚衍生物不仅可用于人类，还可用于各种非人类的哺乳动物，如小鼠、大鼠、狗、牛、马、山羊、绵羊、兔、猪等。
本发明的2-羟基吲哚衍生物可通过口服或非肠道(肌内、静脉内、皮下、经皮、鼻腔内、通过栓剂、滴眼剂、注射入脑)给药。药物剂型包括一般接受的形式，如粉末剂、颗粒剂、细颗粒剂、片剂、胶囊剂、丸剂、糖浆剂、混悬剂、注射剂如溶液剂、乳剂、通过直肠给药的栓剂、皮肤制剂(软膏剂、霜剂、洗剂)等。
可根据一般的方法，用常用的载体或稀释剂制备这些组合物。固体组合物如片剂可通过将活性化合物与药学上可接受的常用载体或赋形剂如乳糖、蔗糖、玉米淀粉等；粘合剂如羟丙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等；崩解剂如羧甲基纤维素钠、羟基乙酸淀粉钠等；润滑剂如硬脂酸、硬脂酸镁等；或防腐剂等混合制备。对于非肠道给药如溶液剂和混悬剂，可将活性化合物溶于或混悬于生理上可接受的载体或稀释剂如水、生理盐水、油、葡萄糖溶液等中，如果需要，还可含有辅助剂如pH调节剂、缓冲液、稳定剂、助溶剂、乳化剂、影响渗透压的盐类等。
2-羟基吲哚衍生物或其前药或者其药学上可接受的盐的给药剂量和次数一般根据所治疗的个体、给药的途径、病情的严重程度、体重等变化。2-羟基吲哚衍生物、其前药以及其药学上可接受的盐的通常给药剂量为成人(体重60kg)每日约1mg-1g，优选约1mg-200mg，更优选约5mg-50mg，分一次或数次给药。还可2日至1周给药一次。治疗剂量未发现毒副作用。
以保持反应温度在50-70℃的速度，将以上产物(20.13g)分次加入到快速搅拌的浓硫酸(72mL)中。在80℃下，将得到的溶液搅拌10分钟，然后冷却至室温。将冷却的混合液小心倒入冰(约300g)中。将该冰混合液放置1小时。过滤形成的橙色沉淀，用H2O(300mL)洗涤，然后干燥得到4,6-二氯靛红。1H NMR(DMSO-d6,270MHz):δ11.34(brs,1H),7.25(d,J=1.6Hz,1H),6.89(d,J=1.6Hz,1H)。参考实施例24-溴靛红和6-溴靛红混合物根据参考实施例1中说明的相同方法，用3-溴苯胺代替3,5-二氯苯胺，制备该混合物(2.5∶1)。4-溴靛红1H NMR(CDCl3,270MHz):δ11.17(brs,1H),7.46(dd,J=8.0,80Hz,1H),7.22(dd,J=0.7,8.0Hz,1H),6.89(dd,J=0.7,8.0Hz,1H)。6-溴靛红1H NMR(CDCl3,270MHz):δ11.10(brs,1H),7.47(d,J=7.9Hz,1H),7.26(dd,J=1.7和7.9Hz,1H),7.08(d,J=1.7Hz,1H)。参考实施例37-溴靛红根据参考实施例1中说明的相同方法，用2-溴苯胺代替3,5-二氯苯胺，制备该化合物。1H NMR(CDCl3,270MHz):δ7.94(brs,1H),7.71(d,J=7.9Hz,1H),7.59(d,J=7.9Hz,1H),7.06(dd,J=7.9和7.9Hz,1H)。参考实施例44,6-二甲基靛红根据参考实施例1中说明的相同方法，用3,5-二甲基苯胺代替3,5-二氯苯胺，制备该化合物。1H NMR(CDCl3,270MHz):δ7.72(brs,1H),6.69(s,1H),6.51(s,1H),2.53(s,3H),2.36(s,3H)。参考实施例54-碘-6-氯靛红和4-氯-6-碘靛红混合物根据参考实施例1中说明的相同方法，用3-氯-5-碘苯胺(J.Med.Chem.,1991,34,1243)代替3,5-二氯苯胺，制备该混合物(2.4∶1)。4-碘-6-氯靛红1H NMR(DMSO-d6,270MHz):δ11.17(brs,1H),7.57(brm,1H),6.94(brm,1H)。4-氯-6-碘靛红1H NMR(DMSO-d6,270MHz):δ11.25(brs,1H),7.53(brm,1H),7.20(brm,1H)。参考实施例64-三氟甲基靛红在-78℃下，向3-三氟苯胺(3.29g,10mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液中加入硫酰氯(1.2eq)。将反应溶液搅拌30分钟。然后向混合液中加入甲基硫代乙酸乙酯(1.2eq)，在-78℃下再继续搅拌2小时。再加入三乙胺(7mL)。然后将该混合液温热至室温。向混合液中加入过量的1N HCl，将混合液搅拌过夜。分离有机层，经MgSO4干燥，浓缩。经硅胶层析(3∶1己烷/乙酸乙酯)纯化得到3-甲硫基-4-三氟甲基-2-羟基吲哚。1H NMR(CDCl3,270MHz):δ8.35(brs,1H),7.50(d,1H),7.38(d,1H),7.14(s,1H),4.32(1H,s),2.07(s,3H)。
向3-甲硫基-4-三氟甲基-2-羟基吲哚(1mmol)的丙酮(6mL)溶液中加入氯化铜(Ⅱ)(1.5eq)和氧化铜(Ⅱ)(1.5eq)。室温下，将该混合液搅拌3小时。向得到的混合液中加入1N HCl，然后加入乙酸乙酯。分离乙酸乙酯层，再用1N盐酸和盐水洗涤，然后经无水MgSO4干燥。过滤后，蒸发溶剂得到定量的4-三氟甲基靛红。1H NMR(DMSO-d6,270MHz):δ8.61(brs,1H),7.72(m,1H),7.41(m,1H),7.17(d,1H)。参考实施例75-溴-4-氯靛红和5-溴-6-氯靛红混合物根据参考实施例1中说明的相同方法，用3-氯苯胺代替3,5-二氯苯胺，制备该4-氯靛红和6-氯靛红混合物(1∶1)。4-氯靛红1H NMR(DMSO-d6):δ11.2(1H,s),7.55(1H,J=8Hz,t),7.06(1H,J=0.5,8.0Hz,dd),6.85(1H,J=0.5,8.0Hz,dd)。6-氯靛红1H NMR(DMSO-d6):δ11.2(1H,s),7.53(1H,J=8.0Hz,d),7.11(1H,J=2.0,8.0Hz,dd),6.94(1H,J=2.0Hz,d)。
将该4-氯靛红和6-氯靛红混合物(1∶1,1.03g,5.67mmol)和N-溴代琥珀酰亚胺(1.23g,6.91mmol)溶于DMF(10mL)中，在60℃下，将该混合液搅拌3小时，然后冷却至室温。向反应混合液中加入饱和的NaHCO3水溶液，混合液用甲苯和乙酸乙酯(1∶1)的混合物提取。将有机层用盐水洗涤，经无水MgSO4干燥得到标题混合物(1∶1)。5-溴-4-氯靛红1H NMR(DMSO-d6,270MHz):δ11.3(1H,s),7.90(1H,J=8.5Hz,d),6.82(1H,J=8.5Hz,d)。5-溴-6-氯靛红1H NMR(DMSO-d6,270MHz):δ11.3(1H,s),7.88(1H,s),7.13(1H,s)。参考实施例81-(2-二乙氨基乙基)-4,6-二氯靛红搅拌下，向参考实施例1化合物(1.00g,4.63mmol)的DMF(10mL)溶液中加入60％NaH(1.67g,10.2mmol)，然后加入2-二乙氨基乙基氯盐酸盐(876.4mg,5.09mmol)。在60℃下，将该混合液搅拌9小时，然后冷却至室温。加入水，将混合液用甲苯和乙酸乙酯混合物(1∶1)提取。有机相用盐水洗涤，然后经MgSO4干燥。浓缩后，经硅胶层析(乙酸乙酯)纯化得到标题化合物。1H NMR(CDCl3,270MHz):δ7.05(d,J=1.5Hz,1H),6.91(d,J=1.5Hz,1H),3.77(t,J=6Hz,2H),2.68(t,J=6Hz,2H),2.54(q,J=7Hz,4H),0.97(t,J=7Hz,6H)。参考实施例91-(2-二异丙基氨基乙基)-4,6-二氯靛红按参考实施例8所述相同的方法,但用2-二异丙基氨基乙基氯盐酸盐代替2-二乙氨基乙基氯盐酸盐，制备该化合物。1H NMR(CDCl3,270MHz):δ7.04(d,J=1.3Hz,1H),6.87(s,1H),3.69(t,J=6.6Hz,2H),3.03(七重峰，J=6.6Hz,2H),2.70(t,J=6.3Hz,2H),0.96(d,J=6.3Hz,12H)。参考实施例101-(2-二乙氨基乙基)-4-溴靛红和1-(2-二乙氨基乙基)-6-溴靛红按参考实施例8相同的方法，但用参考实施例2的混合物(2.5∶1)代替参考实施例1化合物，制备这些化合物。经硅胶层析(己烷∶乙酸乙酯，1∶1至0∶1梯度洗脱)分离1-(2-二乙氨基乙基)-4-溴靛红和1-(2-二乙氨基乙基)-6-溴靛红。1-(2-二乙氨基乙基)-4-溴靛红1H NMR(CDCl3,270MHz):δ7.44(d,J=7.7Hz,1H),7.25(dd,J=1.5,7.7Hz,1H),7.17(d,J=1.5Hz,1H),3.77(t,J=6.6Hz,2H),2.69(t,J=6.6Hz,2H),2.55(q,J=7.1Hz,4H),0.97(t,J=7.1Hz,6H)。1-(2-二乙氨基乙基)-6-溴靛红1H NMR(CDCl3,270MHz):δ7.39(dd,J=7.8,7.8Hz,1H),7.23(d,J=7.8Hz,1H),6.90(d,J=7.8Hz,1H),3.80(t,J=6.8Hz,2H),2.68(t,J=6.8Hz,2H),2.56(q,J=7.1Hz,4H),0.97(t,J=7.1Hz,6H)。参考实施例111-(3-二甲氨基乙基)-4-溴靛红按参考实施例8相同的方法，但用3-二甲氨基乙基氯盐酸盐代替2-二乙氨基乙基氯盐酸盐，并用参考实施例2的混合物(2.5∶1)代替参考实施例1化合物，制备此化合物。经硅胶层析(己烷∶乙酸乙酯，1∶1至0.1∶1梯度洗脱)纯化。1H NMR(CDCl3,270MHz):δ7.40(dd,J=7.9,7.9Hz,1H),7.24(d,J=7.9Hz,1H),6.89(d,J=7.9Hz,1H),3.83(t,J=6.8Hz,2H),2.57(t,2H,J=6.8Hz,2H),2.29(s,6H)。参考实施例121-(3-二甲氨基丙基)-4-溴靛红按参考实施例8相同的方法，但用3-二甲氨基丙基氯盐酸盐代替2-二乙氨基乙基氯盐酸盐，并用参考实施例2的混合物(2.5∶1)代替参考实施例1化合物，制备此化合物。经硅胶层析(己烷∶乙酸乙酯，1∶1至0.1∶1梯度洗脱)纯化。1H NMR(CDCl3,270MHz):δ7.39(dd,J=7.8,7.8Hz,1H),7.23(d,J=7.8Hz,1H),6.97(d,J=7.8 Hz,1H),3.81(t,J=6.8Hz,2H),2.33(t,J=6.8Hz,2H),2.18(s,6H)1.84(dt,J=6.8,6.8Hz,2H)。参考实施例131-(2-二乙氨基乙基)-7-溴靛红按参考实施例8相同的方法，但用参考实施例3化合物代替参考实施例1化合物，制备该化合物。1H NMR(CDCl3,270MHz):δ7.70(dd,J=1.3,8.2Hz,1H),7.58(dd,J=1.3,7.3Hz,1H),6.98(dd,J=7.3,8.2Hz,1H),4.27(t,J=6.8Hz,2H),2.69(t,J=6.8Hz,2H),2.51(q,J=7.1Hz,4H),0.89(t,J=7.1Hz,6H)。参考实施例141-(2-二乙氨基乙基)-5-溴靛红按参考实施例8相同的方法，但用5-溴靛红代替参考实施例1化合物，制备该化合物。1H NMR(CDCl3,270MHz):δ7.69(d,J=2Hz,1H),7.69(dd,J=9,2Hz,1H),6.88(d,J=9Hz,1H),3.78(t,J=6.5Hz,2H),2.68(t,J=6.5Hz,2H),2.55(q,J=7Hz,4H),0.96(t,J=7Hz,6H)。参考实施例151-(2-二乙氨基乙基)-5-氯靛红按参考实施例8相同的方法，但用5-氯靛红代替参考实施例1化合物，制备该化合物。1H NMR(CDCl3,270MHz):δ7.55(d,J=2Hz,1H),7.54(dd,J=9,2Hz,1H),6.92(d,J=9Hz,1H),3.79(t,J=7Hz,2H),2.69(t,J=7Hz,2H),2.55(q,J=7Hz,4H),0.97(t,J=7Hz,6H)。参考实施例161-(3-二乙氨基丙基)-5-氯靛红按参考实施例8相同的方法，但用3-二乙氨基丙基氯盐酸盐代替2-二乙氨基乙基氯盐酸盐，并用5-氯靛红代替参考实施例1化合物，制备该化合物。参考实施例171-(2-二乙氨基乙基)-4,6-二甲基靛红按参考实施例8相同的方法，但用参考实施例4化合物代替参考实施例1化合物，制备该化合物。1H NMR(CDCl3,270MHz):δ6.67(s,1H),6.54(s,1H),3.76(t,J=7.0Hz,2H),2.68(t,J=7.0Hz,2H),2.58(q,J=7.1Hz,4H),2.52(s,3H),2.37(s,3H),1.00(t,J=7.1Hz,6H)。参考实施例181-(2-二乙氨基乙基)-4-碘-6-氯靛红和1-(2-二乙氨基乙基)-6-碘-4-氯靛红混合物按参考实施例8相同的方法，但用参考实施例5的混合物代替参考实施例1化合物，制备该混合物(3∶1)。1-(2-二乙氨基乙基)-4-碘-6-氯靛红1H NMR(DMSO-d6,270MHz):δ7.53(d,J=1.5Hz,1H),6.99(d,J=1.5Hz,1H),3.77(t,J=6.4Hz,2H),2.67(t,J=6.4Hz,2H),2.55(q,J=7.1Hz,4H),0.97(t,J=7.1Hz,6H)。1-(2-二乙氨基乙基)-6-碘-4-氯靛红1H NMR(DMSO-d6,270MHz):δ7.46(s,1H),7.30(s,1H),3.77(t,J=6.4Hz,2H),2.67(t,J=6.4Hz,2H),2.55(q,J=7.1Hz,4H),0.97(t,J=7.1Hz,6H)。参考实施例191-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基靛红按参考实施例8相同的方法，但用参考实施例6化合物代替参考实施例1化合物，制备该化合物。1H NMR(CDCl3,270MHz):δ7.73(t,J=9Hz,1H),7.40(d,J=8.1Hz,1H),7.31(m,1H),3.87(t,J=6.0Hz,2H),2.85(t,J=6.0Hz,2H),2.60(q,J=6.3Hz,4H),1.03(t,J=6.3Hz,6H)。参考实施例201-(2-二乙氨基乙基)-5-溴-4-氯靛红和1-(2-二乙氨基乙基)-5-溴-4-氧靛红混合物按参考实施例8相同的方法,但用参考实施例7的混合物代替参考实施例1化合物,制备该混合物(1.8∶1)。1-(2-二乙氨基乙基)-5-溴-4-氯靛红1H NMR(CDCl3,270MHz):δ7.79(d,J=8.5Hz,1H),6.81(d,J=8.5Hz,1H),3.79(t,J=6.5Hz,2H),2.68(t,J=6.5Hz,2H),2.56(q,J=7Hz,4H),0.96(t,J=7Hz,6H)。1-(2-二乙氨基乙基)-5-溴-4-氯靛红1H NMR(CDCl3,270MHz):δ7.79(1H,s),7.15(1H,s),3.77(t,J=6.5Hz,2H),2.69(t,J=6.5Hz,2H),2.55(q,J=7Hz,4H),0.96(t,J=7Hz,6H)。参考实施例211-(2-二乙氨基乙基)-4-氯-6-(3-叔丁基二甲基甲硅烷基氧基-1-丙炔基)靛红和1-(2-二乙氨基乙基)-6-氯-4-(3-叔丁基二甲基甲硅烷基氧基-1-丙炔基)靛红混合物向参考实施例18混合物(3∶1,392.0mg,0.96mmol)和双(三苯膦)氯化钯(Ⅱ)(33.7mg,20mol％)的三乙胺(4.0mL)溶液中加入叔丁基二甲基甲硅烷基(2-丙炔基氧基)硅烷(244.8mg,1.5eq)和碘化铜(Ⅰ)(8.3mg,22mol％)。在60℃下，将该混合液搅拌1.5小时。冷却后，加入水，将混合液用乙酸乙酯提取。有机相经无水MgSO4干燥，浓缩。经硅胶层析(己烷∶乙酸乙酯，1∶1至1∶1.5梯度洗脱)纯化得到所要求的混合物(2∶1)。1-(2-二乙氨基乙基)-4-氯-6-(3-叔丁基二甲基甲硅烷基氧基-1-丙炔基)靛红1H NMR(CDCl3,270MHz):δ7.08(d,J=1.7Hz,1H),6.93(d,J=1.7Hz,1H),4.63(s,2H),3.76(t,J=6.4Hz,2H),2.67(t,J=6.4Hz,2H),2.55(q,J=7.1Hz,4H),0.97(t,J=7.1Hz,6H),0.93(s,9H),0.18(s,6H)。1-(2-二乙氨基乙基)-6-氯-4-(3-叔丁基二甲基甲硅烷基氧基-1-丙炔基)靛红1H NMR(CDCl3,270MHz):δ7.06(s,1H),6.87(s,1H),4.56(s,2H),3.78(t,J=6.4Hz,2H),2.67(t,J=6.4Hz,2H),2.55(q,J=7.1Hz,4H),0.97(t,J=7.1Hz,6H),0.95(s,9H),0.17(s,6H)。参考实施例221-(2-二乙氨基乙基)-4-氯-6-(4-叔丁基二甲基甲硅烷基氧基-1-丁炔基)靛红和1-(2-二乙氨基乙基)-6-氯-4-(4-叔丁基二甲基甲硅烷基氧基-1-丁炔基)靛红混合物按参考实施例21相同的方法，用叔丁基二甲基甲硅烷基(3-丁炔基氧基)硅烷代替叔丁基二甲基甲硅烷基(2-丙炔基氧基)硅烷，制备该混合物(3.7∶1)。1-(2-二乙氨基乙基)-4-氯-6-(4-叔丁基二甲基甲硅烷基氧基-1-丁炔基)靛红1H NMR(CDCl3,270MHz):δ7.03(d,J=1.7Hz,1H),6.88(d,J=1.7Hz,1H),3.88(t,J=7.0Hz,2H),3.75(t,J=6.6Hz,2H),2.74(t,J=7.0Hz,2H),2.67(t,J=6.6Hz,2H),2.54(q,J=7.1Hz,4H),0.97(t,J=7.1Hz,6H),0.91(s,9H),0.09(s,6H)。1-(2-二乙氨基乙基)-6-氯-4-(4-叔丁基二甲基甲硅烷基氧基-1-丁炔基)靛红1H NMR(CDCl3,270MHz):δ7.03(s,1H),6.82(s,1H),3.88(t,J=7.0Hz,2H),3.83(t,J=6.6Hz,2H),2.74(t,J=7.0Hz,2H),2.67(t,J=6.6Hz,2H),2.54(q,J=7.1Hz,4H),0.97(t,J=7.1Hz,6H),0.92(s,9H),0.10(s,6H)。参考实施例234,6-二氯-3-羟基-3-(2-萘基)-2-羟基吲哚在-78℃下，向2-溴代萘(2.952g)的无水THF(25mL)溶液中分次加入正丁基锂的正己烷溶液(1.55N,10.12mL)。将反应溶液搅拌30分钟。然后用50分钟，向混合液中分次加入4,6-二氯靛红(1.54g)的无水THF(25mL)溶液。将该反应混合液搅拌2小时。然后将混合液温热至室温。向混合液中加入1N HCl，用乙酸乙酯提取。分离有机层，用1N HCl和盐水洗涤，经MgSO4干燥，浓缩。经硅胶层析(己烷∶乙酸乙酯，2∶1至1∶1梯度洗脱)纯化得到标题化合物(0.652g，收率27％)。1H NMR(DMSO-d6,300MHz):δ6.93(1H,s),6.96(1H,d,J=1.7Hz,),7.12(1H,d,J=1.7Hz,),7.23(1H,m),7.49(2H,m),7.80-7.94(4H,m),10.80(1H,brs)。参考实施例241-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-碘靛红按参考实施例8相同的方法，用4-三氟甲基-6-碘靛红和6-三氟甲基-4-碘靛红的混合物代替参考实施例18化合物，制备该化合物。经硅胶层析纯化。1H NMR(CDCl3):δ7.71(s,1H),7.68(s,1H),3.80(t,2H,J=6.1Hz,),2.69(t,2H,J=6.1Hz,),2.55(q,4H,J=7.1Hz,),0.97(t,6H,J=7.1Hz)。
1H NMR(CDCl3,270MHz):δ8.61(d,J=7.6Hz,1H),7.74-7.66(m,2H),7.51(dd,J=7.6,7.6Hz,1H),6.91(s,1H),6.84(s,1H),3.52-3.57(m,2H),2.83-2.90(m,2H),2.60(s,6H),2.53-2.72(m,4H),1.01(t,J=7.1Hz,6H)。
以下为实施例1-50中得到的化合物的结构。 实施例1:Ar1=2-萘基实施例2:Ar1=3-氟苯基实施例3:Ar1=4-氟苯基实施例4:Ar1=4-甲氧基苯基实施例5:Ar1=3,4-二氟苯基实施例6:Ar1=2-氟苯基实施例7:Ar1=2-氯苯基实施例8:Ar1=2-三氟甲基苯基实施例9:Ar1=3,4-二氯苯基实施例10:Ar1=2-二甲氨基磺酰基苯基 实施例11:Ar2=2-萘基 实施例16:Ar3=2-萘基实施例12:Ar2=3-氯苯基实施例17:Ar3=2-甲氧基苯基实施例13:Ar2=2-三氟甲基苯基实施例14:Ar2=2-二甲氨基磺酰基苯基实施例15:Ar2=3,4-二氯苯基 实施例18:Ar4=2-氟苯基实施例21:Ar5=2-氟苯基实施例19:Ar4=2-甲氧基苯基实施例22:Ar5=2-甲氧基苯基实施例20:Ar4=2-萘基 实施例23:Ar5=2-萘基实施例24:Ar5=4-联苯基实施例37:Ar5=3-氟苯基实施例38:Ar5=4-氟苯基实施例39:Ar5=4-甲氧基苯基实施例40:Ar5=3,4-二氟苯基 实施例26:Ar6=2-氟苯基实施例29:Ar7=2-氟苯基实施例27:Ar6=2-萘基 实施例30:Ar7=2-萘基实施例28:Ar6=4-联苯基 实施例33:Ar8=2-萘基 实施例35:Ar9=2-萘基实施例34:Ar8=3,4-二氟苯基实施例36:Ar9=3,4-二氟苯基 实施例25 实施例30 实施例31 实施例32 实施例41 实施例42 实施例46 实施例47 实施例48 实施例511-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-(4-吗啉代羰基-1-丁炔基)-3-羟基-3-(2-萘基)-2-羟基吲哚(1)吗啉基羰基-1-丁炔室温下，将4戊炔酸(210mg,2.14mmol)、吗啉盐酸盐(265mg,2.14mmol)、1-羟基苯并三唑(338mg,2.50mmol)、WSC HCl(484mg,2.52mmol)和三乙胺(0.37ml,2.65mmol)的DMF(7mL)混合液搅拌1小时。加入H2O。将该混合液用乙酸乙酯-甲苯提取，提取液用水洗涤，经MgSO4干燥，浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用1∶1至1∶5己烷/乙酸乙酯洗脱得到标题化合物(325mg,91％)。1H NMR(CDCl3):δ3.64-3.70(m,6H),3.48-3.50(m,2H),2.56(s,2H),2.56(s,2H),1.97(s,1H)。(2)1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-(4-吗啉代羰基-1-丁炔基)-3-羟基-3-(2-萘基)-2-羟基吲哚根据参考实施例21中说明的类似方法，用实施例48的1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-碘-3-羟基-3-(2-萘基)-2-羟基吲哚(35mg,0.0616mmol)和4-吗啉代羰基-1-丁炔制备标题化合物(26.1mg)。用4NHCl的二氧六环溶液处理，然后浓缩至干得到标题化合物的盐酸盐。1H NMR(DMSO-d6盐酸盐)δ10.31(brs,1H),7.79-7.91(m,4H),7.73(s,1H),7.48-7.51(m,2H),7.36(s,1H),7.17-7.25(m,1H),7.03(s,1H),4.17(m,2H),3.08-3.57(m,14H),2.71(s,4H),1.20(t,6H,J=7.1Hz)。
以下为实施例51-111中得到的化合物的结构。 实施例51:Q1=4-吗啉代羰基-1-丁炔基实施例52:Q1=3-二甲氨基-1-丙炔基实施例53:Q1=4-二乙基氨基甲酰基-1-丁炔基实施例54:Q1=4-羧基-1-丁炔基实施例55:Q1=氰基实施例58:Q1=吗啉基羰基实施例65:Q1=4-氨基甲酰基-1-丁炔基实施例66:Q1=3-氨基-1-丁炔基实施例67:Q1=3-乙基脲基-1-丙炔基实施例68:Q1=3-甲磺酰氨基-1-丙炔基实施例69:Q1=4-(2-羟基乙基氨基甲酰基)-1-丁炔基实施例71:Q1=吗啉基羰基-乙炔基实施例79:Q1=乙氧基羰基实施例80:Q1=二甲基氨基甲酰基实施例81:Q1=(2-羟乙基)氨基甲酰基实施例82:Q1=羟甲基实施例83:Q1=甲基氨基甲酰基 实施例70:Q2=4-吗啉代羰基-1-丁炔基实施例75:Q2=3-甲磺酰氨基-1-丙炔基实施例77:Q2=4-(2-羟基乙基氨基甲酰基)-1-丁炔基实施例89:Q2=3-(2-氧代-1-咪唑烷基)-1-丙炔基实施例90:Q2=3-(2-氧代-1,3-噁唑啉-3-基)-1-丙炔基实施例93:Q2=3-乙基脲基-1-丙炔基 实施例84:Q3=氨基甲酰基实施例85:Q3=3-乙基脲基-1-丙炔基实施例86:Q3=3-(2-氧代-1-咪唑烷基)-1-丙炔基实施例87:Q3=3-(2-氧代-1,3-噁唑啉-3-基)-1-丙炔基 实施例56:Ar10=2-萘基 实施例97:Ar11=3-吡啶基实施例78:Ar10=2-氯苯基 实施例98:Ar11=3-喹啉基实施例91:Ar10=2,4-二氯苯基 实施例99:Ar11=2-苯并[b]噻吩基实施例92:Ar10=2,4-二氟苯基 实施例100:Ar11=2-苯并[b]呋喃基实施例94:Ar10=2,5-二氯苯基 实施例101:Ar11=3-苯并[b]噻吩基实施例107:Ar10=2-氟苯基实施例102:Ar11=3-噻吩基实施例103:Ar11=3-呋喃基实施例104:Ar11=2-吲哚基实施例105:Ar11=3-苯并噻唑基 实施例62:Ar12=2-氟苯基实施例63:Ar12=2-三氟苯基实施例109:Ar12=苯基 实施例64 实施例88 实施例95 实施例96 实施例106实施例108 实施例110实施例111实验1生物实验根据文献中说明的方法(R.G.Smith等，Science,260,1640(1993))，对本发明化合物进行体外大鼠垂体细胞生长激素释放活性评估。
将从7周龄的wistar/ST雄性大鼠中摘除的脑垂体用HBSS(Hank氏平衡盐溶液)洗涤3次，然后用剪刀剪成小碎块(约1mm2)。将这些组织转移至15mL圆底离心管中，用HBSS(10mL×3)洗涤。加入酶溶液(每脑垂体0.1mL)，在37℃水浴中进行细胞分散约20-30分钟，期间每5分钟通过用移液管连续将该混悬液吸上吸下来混合该消化混合液。室温下，以1200rpm速度，将得到的细胞混悬液离心2-3分钟，弃去上清液。加入培养基，在室温下，以1200rpm速度，将得到的细胞混悬液离心2-3分钟，弃去上清液。再将该过程重复2次。以每孔2×104细胞的量，将一等份(0.1mL)所得到的细胞混悬液加入到96-孔滴定板的每孔中，然后在37℃、5％CO2下，孵育5日。
弃去培养基，加入试验培养基(0.1ml)。继续孵育1.5小时，用试验培养基洗涤细胞。加入试验化合物溶液(0.1mL)，在孵育器内的5％CO2下，在37℃进行反应15分钟。回收上清液，通过RIA(放射性免疫试验)测定存在的GH含量。将一等份该溶液用RIA缓冲液稀释至0.05mL,RIA缓冲液由含有1％BSA、0.1％NaN3和25mM EDTA的PBS(pH7.3)组成。将稀释的溶液、[125I]-标记的GH溶液(0.05mL,约10,000cpm)和抗大鼠GH兔抗血清(1∶10,000)(0.05mL)加入到96-孔滴定板的每孔中进行RIA，在4℃下，将混合液孵育3日。加入含有蛋白质A的细胞膜部分，再将该混合液放置20分钟，离心。弃去上清液，沉淀用RIA缓冲液洗涤。测定沉淀中125I含量。从通过用GH标准品制得的标准曲线中计算样品中GH浓度。
从以下方程中，用回归计算确定试验化合物的EC50值，其中X是试验化合物的浓度，Y是试验中GH的浓度，B是EC50值。C是指在无试验化合物下回归计算出的GH浓度，A+C指当最大量的试验化合物存在时，回归计算出的GH浓度。
Y=AX/(B+X)+C此处所用的培养基由含有10％马血清、2.5％牛胎血清、1％非必需氨基酸、0.01％链霉素和青霉素(100IU/mL)的DMEM(Dulbecco氏改良Eagle氏培养基)组成。通过加入25mM HEPES缓冲液，将上述培养基调节至pH7.3，将得到的溶液用作试验培养基。将一定量的试验化合物溶于DMSO中，在该阶段化合物的浓度比试验的终浓度高1000倍，将一等份(0.001mL)加入到试验培养基(1mL)中。将得到的混合液用作试验化合物溶液。将胶原酶(400mg)、Ⅰ型脱氧核糖核酸酶(1mg)和BSA(1g)溶于含有0.8％NaCl、0.037％KCl、0.9％葡萄糖、0.01％链霉素、青霉素(100IU/mL)和0.7mM Na2HPO4的25mMHEPES缓冲液(pH7.4,40mL)和10mg/mL CaCl2水溶液(0.226mL)中。通过加入25mM HEPES缓冲液，将得到的溶液调节至终体积50mL，通过0.00022mm滤膜过滤除菌。将得到的混合液用作酶溶液。
在以上说明的条件下，评估实施例21、70、74和91化合物的GH释放效能，其EC50值分别为4、5、0.5和1.2nM。实验2生物活性给11周龄的F344/N大鼠(6/组)口服实施例74化合物(10mg/kg/日×2)9日，测定每只大鼠体重增加量。服药组表明其体重有明显增加19.5±2.1g(p＜0.01)，而服蒸馏水组为13.5±2.3g。制剂实施例片剂制备将实施例91化合物(10mg)、乳糖(72.5mg)、玉米淀粉(30mg)和羧甲基纤维素钙(5mg)混合，用羟丙基纤维素(2mg)的水溶液制团，然后与硬脂酸镁混合。将得到的混合物压成120mg片剂。
工业适用性本发明可提供用作生长激素释放剂的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐。
权利要求
1．式Ⅰ的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐 其中R1、R2、R3和R4相同或不同，各自独立是氢、任选取代的烷基、任选取代的链烯基、任选取代的链炔基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、卤素、氰基、硝基、羟基、任选取代的氨基、烷氧基、链烷酰基、烷氧基羰基、任选取代的氨基磺酰基、任选取代的氨基甲酰基、烷硫基、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、烷基磺酰氨基或链烷酰基氨基，条件是R1、R2、R3和R4不同时为氢；R5是任选取代的芳基或任选取代的杂芳基；Z是-O-或-NH-；W1和W2其中之一是氢、烷基或-Y-CON(R10)R11；W1和W2的另一个是 n是1、2或3；m是0、1、2或3；Y是单键或C1-C3亚烷基；R6和R7相同或不同，各自独立是氢、任选取代的烷基或任选取代的环烷基；或者R6和R7与相邻的氮原子一起形成任选取代的饱和杂环；R8和R9相同或不同，各自独立是氢或任选取代的烷基；或者R8和R9与相邻的碳原子一起形成任选取代的环烷烃或任选取代的饱和杂环；R8和R6可一起形成C1-C5亚烷基，此时R7是氢、任选取代的烷基或任选取代的环烷基，R9是氢或任选取代的烷基；R10和R11相同或不同，各自独立是氢或烷基；或者R10和R11与相邻的氮原子一起形成任选取代的饱和杂环。
2．根据权利要求1的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R3和R4独立是氢、任选由卤素取代的烷基、任选取代的链烯基、任选取代的链炔基、任选取代的氨基甲酰基、卤素、氰基、硝基、链烷酰基、烷氧基羰基、烷基亚磺酰基或烷基磺酰基，条件是R1、R2、R3和R4不同时为氢。
3．根据权利要求1的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R3和R4独立是氢、三氟甲基、氨基甲酰基、卤素、4-氨基甲酰基-1-丁炔基、4-烷基氨基甲酰基-1-丁炔基、4-二烷基氨基甲酰基-1-丁炔基、4-吗啉代羰基-1-丁炔基、-C≡C-(CH2)k-Q，其中k是1或2；Q是羟基、烷基磺酰基、链烷酰基氨基、烷基脲基、2-氧代-1-咪唑烷基或2-氧代-1,3-噁唑啉-3-基，条件是R1、R2、R3和R4不同时为氢。
4．根据权利要求3的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐，其中R2和R4都是氢。
5．根据权利要求1的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐，其中R2和R4都是氢；R1是三氟甲基、氯或溴；R3是氨基甲酰基、卤素、4-氨基甲酰基-1-丁炔基、4-烷基氨基甲酰基-1-丁炔基、4-二烷基氨基甲酰基-1-丁炔基、4-吗啉代羰基-1-丁炔基、-C≡C-(CH2)k-Q，其中k和Q按权利要求3中定义。
6．根据权利要求1的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐，其中R2和R4都是氢；R1是三氟甲基、氯或溴；R3是氨基甲酰基。
7．根据权利要求1-6中任一项的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐，其中R5是任选取代的苯基或任选取代的2-萘基。
8．根据权利要求1-6中任一项的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐，其中R5是由卤素和/或三氟甲基任选取代的苯基或者由卤素和/或三氟甲基任选取代的2-萘基。
9．根据权利要求1-8中任一项的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐，其中R6和R7独立是任选取代的烷基或任选取代的环烷基；或者R6和R7与相邻的氮原子一起形成任选取代的饱和杂环。
10．根据权利要求1-9中任一项的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐，其中W1和W2其中之一是氢或-CONHR10；W1和W2的另一个是 其中n、m、R6、R7、R8、R9和R10按权利要求1中定义。
11．根据权利要求1-9中任一项的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐，其中W1和W2其中之一是氢；W1和W2的另一个是 其中p是2-7的整数；R12和R13独立是任选取代的烷基。
12．根据权利要求1-9中任一项的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐，其中(1)W1是氢；W2是 或(2)W2是氢；W1是 其中p1是2-7的整数；p2是3-7的整数；R12和R13独立是任选取代的烷基。
13．根据权利要求11或12的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐，其中R12和R13独立是甲基或乙基。
14．根据以上权利要求中任一项的2-羟基吲哚衍生物的光学异构体或其前药或其药学上可接受的盐，其C-3位构型与(+)-1-(2-二乙氨基乙基)-4-三氟甲基-6-氨基甲酰基-3-羟基-3-(2-氯苯基)-2-羟基吲哚构型等同。
15．药物，它含有根据以上权利要求中任一项的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体或稀释剂。
16．根据权利要求15的药物，其中该药物是生长激素释放剂。
17．用于医疗的根据权利要求1-14中任一项的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐。
18．应用根据权利要求1-14中任一项的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐制备生长激素释放剂。
19．释放生长激素的方法，它包括给予需要此种治疗的人类或非人类的哺乳动物根据权利要求1-14中任一项的2-羟基吲哚衍生物或其前药或其药学上可接受的盐。
全文摘要
式(1)的2－羟基吲哚或其前药或其药学上可接受的盐可用作生长激素释放剂,其中R
文档编号A61K31/428GK1313853SQ99809857
公开日2001年9月19日 申请日期1999年8月18日 优先权日1998年8月20日
发明者德永辉久, 梅染卓志, W·E·胡梅, 永田龙, 冈崎一彦, 植木靖之, 熊谷和夫 申请人:住友制药株式会社