黄蜀葵花生物总碱提取物及其制备方法与应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物医药领域，具体涉及黄蜀葵花生物总碱提取物及其制备方法，以 及在制备镇痛药物中的应用。 (二）
【背景技术】
[0002] 中成药在我国医药产业中有及其重要的地位。多数中药产品有制剂药效成分不清 楚、疗效不确切、制取工艺原始、质量难控制等问题。采用现代方法研宄，明确药效部位或有 效成分，通过二次开发，达到去粗取精，质量可控，安全有效，是中药现代化的必由之路。
[0003] 疼痛是临床疾病最常见的重要症状，给病人带来身体痛苦和精神重负，需要镇痛 药治疗。目前的化学镇痛药物主要由两大类组成，即以阿司匹林为代表的解热镇痛药和吗 啡为代表的成瘾性镇痛药，均有严重不足：解热镇痛药对严重疼痛药效差，而且有胃出血， 溃疡严重胃肠道毒副反应；成瘾性镇痛药疗效好但有成瘾、呼吸抑制等严重不良反应，因此 需要寻找、开发高效低毒新药以满足日益增长的临床需求。
[0004] 黄蜀葵（AbelmoschlmanihotLmedic)花为锦葵科植物黄蜀葵的干燥花。性 味甘寒滑，无毒，具有清利湿热，消炎解毒之功效，内服主治五淋，水肿；外用治疗痈疽肿 毒，烫伤，其花蕾在一些地方作为蔬菜食用，安全无毒。从黄蜀葵花中提取的总黄酮（范 丽，董六一.黄蜀葵花总黄酮镇痛作用研宄[J].中药药理与临床，2003, 19(1): 12-14.) 有良好的镇痛作用。其中黄酮类化合物金丝桃甙对口腔溃疡有良好镇痛作用（司徒曼 丽，马传庚，宋必卫，等.黄蜀葵结晶III对口腔溃疡镇痛作用的研宄[J].华西口腔 医学杂志，1985, 3(3): 129-31.)，被认为是其有效单体成分（宋必卫，马传庚，徐叔 云.金丝桃甙对抗缓激肽，钾离子和组织胺致痛作用的实验研宄[J].中国药理学通 报，1986, 2 (2) : 14-14.)。然而分离提取的金丝桃甙得率很低，成本昂贵；国内多个研宄单 位试图合成金丝桃甙，均因技术困难失败，故未能开发成药。 (三）
【发明内容】
[0005]本发明在研宄黄蜀葵花乙醇提取物、金丝桃甙粗提物（含金丝桃甙50-60% )、高 纯化的金丝桃甙（含金丝桃甙99% )的镇痛作用时发现，金丝桃甙粗提物镇痛作用明显比 高纯化的金丝桃甙效果好，且易于溶解，因此认为黄蜀葵花镇痛作用有效成分/部位不仅 仅是金丝桃甙，而是有多种。
[0006] 通过进一步的研宄，发现黄蜀葵花镇痛作用新的有效部位生物总碱。黄蜀葵花生 物总碱比其它部位镇痛作用更强，可以用于开发、生产高效低毒的新型镇痛药。
[0007]本发明的目的在于提供黄蜀葵花生物总碱提取物，及其制备方法，以及在制备镇 痛药物中的应用。
[0008] 为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
[0009] 一种黄蜀葵花生物总碱提取物，所述黄蜀葵花生物总碱提取物是按如下方法制备 得到的：
[0010] (a)超临界C02萃取：将黄蜀葵花粉末和55?99. 7 %乙醇（夹带剂）混合，在40? 70°C，10?30Mpa的条件下，进行超临界C02萃取1?2. 5h，所述0)2的流量为2?6kg/h， 萃取所得粗提液旋蒸除去乙醇，得到黄蜀葵花浸膏；
[0011] (b)有机溶剂萃取：将步骤（a)中所得黄蜀葵花浸膏先用水分散，再加入石油醚萃 取，分液得到石油醚层和水层，弃去石油醚层，取水层用乙醚萃取，分液得到乙醚萃取液；
[0012] (c)生物总碱分离：在步骤（b)所得乙醚萃取液中，加入0. 5 %?2 %HC1溶液萃 取，分液得到酸层和乙醚层，弃去乙醚层，所得酸层用5%?25%NaOH溶液滴定至中性，再 经旋蒸除水，即得黄蜀葵花生物总碱。
[0013] 本发明黄蜀葵花生物总碱提取物，推荐步骤（a)中所述乙醇的体积用量以黄蜀葵 花粉末的质量计为〇. 5?3.OmL/g。
[0014] 推荐步骤（b)中所述用于分散的水的体积用量以黄蜀葵花浸膏的质量计为10? 20mL/g;所述石油醚的体积用量以黄蜀葵花浸膏的质量计为60?100mL/g;所述水层与用 来萃取的乙醚的体积比为1 :4?8。
[0015] 推荐步骤（c)中所述乙醚萃取液与所述HC1溶液的体积比为1 :1?2。
[0016] 本发明还提供了一种药物组合物，所述药物组合物中含有本发明所述的黄蜀葵花 生物总碱提取物和药用可接受的载体。
[0017] 所述药物组合物可以为口服剂、外用剂、注射剂或复方制剂。
[0018] 本发明所述的黄蜀葵花生物总碱提取物可作为有效成分，用于制备治疗临床疼痛 (如头痛、牙痛、关节痛，外伤疼痛等）的镇痛药物。
[0019] 本发明的创新点为：（1)首次提出并证明黄蜀葵花生物总碱提取物的镇痛作用； (2)所述黄蜀葵花生物总碱提取物的制备方法简单，成本低。
[0020] 本发明的有益效果在于：本发明黄蜀葵花生物总碱与现有技术中的黄蜀葵花总黄 酮及其单体金丝桃甙相比，有以下优势：（1)高效：以最大镇痛效果的剂量比较，黄蜀葵花 生物总碱的效价强度分别是总黄酮的100倍、金丝桃甙的20倍以上，其镇痛活性与吗啡类 药物曲马多相当；（2)黄蜀葵花生物总碱的有效剂量很小，对小鼠口服的有效剂量胃lmg/ kg左右，相当于成人口服剂量5?10mg，应用方便；（3)黄蜀葵花生物总碱溶解性好，可水 溶，而总黄酮难溶于水，金丝桃甙更难溶于水，因此黄蜀葵花生物总碱更方便药厂生产制成 不同的剂型；(4)黄酮类在肠道极难吸收，是药学专业的基本知识，因此黄蜀葵花生物总碱 应该有更好的生物利用度；（5)黄蜀葵花生物总碱制取过程工艺较简单，C02超临界萃取技 术基本无污染（以C02为溶剂），药物废渣可作为肥料使用，夹带剂乙醇可回收循环使用，大 大降低成本，污染小，制得浸膏体积很小，后续过程只需乙醚和盐酸，因为量少故污染小，且 乙醚可回收循环使用；(6)药典记载黄蜀葵花无毒，部分地区以黄蜀葵花蕾为菜食用，故黄 蜀葵花生物总碱相对安全，开发风险小。 (四）
【附图说明】
[0021] 图1是黄蜀葵花生物总碱提取物的制备流程图；
[0022] 图2是盐酸纳洛酮对黄蜀葵花生物总碱提取物镇痛作用的影响。 (五）
【具体实施方式】
[0023] 实施例1黄蜀葵花生物总碱提取物的制备
[0024] (a)超临界0)2萃取：将黄蜀葵花粉末（100g)和95%乙醇（250mL，夹带剂）混合， 在50°C，20Mpa的条件下，进行超临界C02萃取2h，所述C0 2的流量为4kg/h，萃取所得粗提 液旋蒸除去乙醇，得到黄蜀葵花浸膏4. 2g;
[0025] (b)有机溶剂萃取：将步骤（a)中所得黄蜀葵花浸膏10g先用100mL水分散，再 加入石油醚萃取（100mLX8)，分液得到石油醚层和水层，弃去石油醚层，取水层用乙醚萃取 (100mLX8)，分液得到乙醚萃取液；
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