诱导改善的免疫反应的疫苗的制作方法
【专利说明】诱导改善的免疫反应的疫苗
[0001]本申请是申请日为2011年12月17日、申请号为201180060887.8、发明名称为“诱导改善的免疫反应的疫苗”的发明专利申请的分案申请。
【技术领域】
[0002]本发明涉及一种诱导改善的免疫反应的疫苗组合物。
【【背景技术】】
[0003]最近，免疫佐剂备受瞩目，并以多种方式用作宫颈癌疫苗及流感疫苗等。此类免疫佐剂中细菌DNA从1960年代开始，作为抗癌剂受到瞩目，并直到现在，研宄仍在继续，但由于功效不足，无法单独用作抗癌剂(Glick，J.L.The specificity of inhibit1n of tumorcell viability by DNA.CancerRes.27:2338，1967)。但众所周知的是，细菌 DNA 无任何大的副作用，能够对多种免疫细胞进行活性化，尤其，作为佐剂具有很多优点(McCluskie MJ，etal..CpG DNA is a potent enhancer of systemic and mucosal immune responsesagainst hepatitis B surface antigen with intranasal administrat1n to mice.JImmunol.Novl ；161(9):4463-6.1998)0
[0004]对细菌DNA的此类效果，日本的Yamamoto等主张包括CG的序列起到重要的作用，并通过美国Krieg等的研宄广为流传(Yamamoto S.et al.Unique palindromicsequences in synthetic oligonucleotides are required to induce IFN andaugment IFN-mediated natural killer activity.J.Tmmunol.148:4072,1992 ；KriegAM， Antitumor applicat1ns of stimulating toll—like receptor 9 with CpGoligodeoxynucleotides.Curr.0ncol.Rep.Mar ；6 (2):88-95.2004)。尤其在 1990 年代中期以后，通过CPG公司相关研宄的结果，通过DNA抗癌剂确认了包含未甲基化的CG的合成DNA(CpG-ODN)的可能性，并研宄了用于抑制合成DNA的分解的二酯键中的S置换等。通过此类努力，CpG-ODN相关产品不仅作为佐剂，还能作为抗癌剂进行临床试验(http://www.coleypharma.com)。
[0005]但是，对CpG-ODN的二酯键的S置换的免疫原性问题及仍旧不足的抗癌效果等依旧成为有待解决的问题。现在，临床上所使用的CPG7909是引发ant1-DNA Ab的硫代磷酸寡核苷酸(Clin Immunol.200IAug ；100 (2): 157-63)，而这与系统性红斑狼疮(SLE, systemiclupus erythematosus)等自我免疫疾病具有密切的关系(J Clin Immunol.1986July ；6 (4): 292-8)。并且，众所周知，硫代磷酸结构起到TI Ag作用，混乱对感染的免疫防御功能(Mol Immunol.1998 Dec ;35 (18):1161-70)。
[0006]从1950年代开始广为流传其抗癌效果的脂多糖(LPS)的情况下，仅仅由于ng水准的污染，也能引起基于败血症的死亡的毒性，而很难使用。尤其，一般的意见是，LPS和DNA的结合呈现严重的毒性，并且，在有关DNA的医药品中，LPS的清除被理解为非常重要的过程(Gao JJ.et.al, Bacterial DNA and lipopolysaccharide inducesynergistic product1n of TNF—alpha through a post-transcript1nal mechanism.JImmunol 166 (11):6855-60, 2001) 0在功效方面，基于LPS的免疫增加虽然比基于DNA的更加强大，但由于不是抗癌的重要的T桢I型，而是T桢2型，因此，认为并不适合用作抗癌剂(Lebman DA et al Interleukin 4 causes isotype switching to IgE in Tcell-stimulated clonal B cell cultures.J Exp Med.Sep I ; 168 (3):853-62.1988) 0尤其，由于T桢2型的免疫活性抑制T桢I型的免疫活性，因此，LPS的此类特性更难使 LPS 用作抗癌剂(Rengarajan J et al.Transcript1nal regulat1n of Thl/Th2polarizat1n.1mmunol Today.0ct ；21 (10):479-83.2000)。
[0007]对LPS的减毒试图不断地研究，尤其，能够在通过聚糖链的清除或脂质A的脱酰基化来减少毒性方向获得成功(Katz SS et al Deacylat1n of lipopolysaccharidein whole Escherichia coli during destruct1n by cellular and extracellularcomponents of a rabbit peritoneal inflammatory exudate.J B1l Chem.Dec 17;274(51):36579-841999)。尤其，通过清除LPS聚糖链所获得的脂质A的磷酸化来获得的单磷酸脂质A(MPL，monophosphoryl lipid)的情况下，作为清除LPS的毒性的免疫抗癌剂来研发，但其效果微不足道(http://www.corixa.com) 0
[0008]对此，本申请人已研发过一种补充上述多个免疫佐剂的缺点的新免疫佐剂(韩国专利授权第 0740237 号(2007.07.10))。
[0009]本说明书全文参照了多篇论文及专利文献，并表示了其引用。所引用的论文及专利文献的公开内容全部插入到本说明书中作为参照，从而更加明确地说明本发明所属技术领域的水准及本发明的内容。
【
【发明内容】
】
[0010]【发明要解决的技术课题】
[0011]本发明者为了研发一种能够解决现有疫苗的问题，尤其，能够增强疫苗的功效的新疫苗组合物而付出了努力。其结果，本发明者在利用多种病原体的抗原的免疫化过程中，作为免疫佐剂将脱酰基化非毒性脂寡糖(L0S，Lipooligosaccharide)用作免疫佐剂的情况下，已确认能够诱导比现有的疫苗得到大大改善的免疫反应，成为用于预防多种疾病的优秀的疫苗，从而完成了本发明。
[0012]因此，本发明的目的在于，提供一种疫苗药剂学组合物。
[0013]本发明的另一目的在于，提供一种树突状细胞的成熟化诱导用组合物。
[0014]本发明的其他目的及优点通过下述的
【发明内容】
，权利要求书及附图将会变得更加明确。
[0015]【解决课题的技术方案】
[0016]根据本发明的一实施方式，本发明提供一种疫苗药剂学组合物。该疫苗药剂学组合物包含:
[0017](a)病原体衍生抗原，其选自结核菌抗原、炭疽菌抗原、甲型肝炎病毒(HAV，Hepatitis A virus)的抗原、乙型肝炎病毒(HBV，Hepatitis B virus)的抗原、丙型肝炎病毒(HCV，Hepatitis C virus)的抗原、人类免疫缺陷病毒(HIV，human immunodeficiencyvirus)的抗原、流感病毒的抗原、单纯性疱瘆病毒(HSV，Herpes simplex virus)的抗原、B型流感嗜血杆菌(Hib，Haemophilus influenzae type b)的抗原、脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitidis)的抗原、白喉棒状杆菌(Corynebacterium diphtheria)的抗原、百日咳杆菌(Bordetella pertussis)的抗原、破伤风梭菌(Clostridium tetani)的抗原及水痘病毒(Varicella virus)的抗原组成的组中选择；
[0018](b)脱酰基化非毒性脂寡糖(LOS，Lipooligosaccharide);及
[0019](c)药剂学上接受的载体。
[0020]本发明者为了研发一种能够解决现有疫苗的问题，尤其，能够增强疫苗的功效的新疫苗组合物而付出了努力。其结果，本发明者在利用多种病原体的抗原的免疫化过程中，作为免疫佐剂将脱酰基化非毒性脂寡糖(LOS，Lipooligosaccharide)用作免疫佐剂的情况下，已确认能够诱导比现有的疫苗得到大大改善的免疫反应，能够成为用于预防多种疾病的优秀的疫苗。
[0021]本发明对引发结核的结核菌的疫苗有用。
[0022]本发明的结核疫苗中所利用的结核菌抗原包含以往公知的多种结核菌的衍生抗原，优选为选自65kD热休克蛋白(HSP65)、抗原85A(Ag85A)、抗原85B、抗原85C、ESAT-6、Des蛋白、MPT32、MPT51、MPT63、MPT64、HspX及磷酸盐结合蛋白I的组中的至少I种抗原。
[0023]更优选地，本发明的结核疫苗所利用的结核菌抗原是选自抗原85A(Ag85A)、ESAT-6、HspX及磷酸盐结合蛋白I (Phosphate binding protein I)的组中的至少I种抗原。
[0024]并且，本发明对引发炭疽病的炭疽疫苗有用。
[0025]本发明的炭疽疫苗中所利用的炭疽菌抗原包含以往公知的多种炭疽菌的衍生抗原，优选为保护性抗原(PA，protective antigen)、致死抗原(LF，lethal antigen)或水肿抗原(EA，edema antigen)，更优选为保护性抗原(PA，protective antigen)。
[0026]并且，本发明对引发A型肝炎的HAV疫苗有用。本发明的HAV疫苗中所利用的HAV抗原包含以往公知的多种HAV衍生抗原，优选为选自活减毒HAV、惰性减毒HAV、VPU VP2、VP3、VP4、2A、2B、2C、3A、3B、3C及3D蛋白的组中的抗原，更优选为惰性减毒HAV。
[0027]本发明对引发B型肝炎的HBV疫苗有用。本发明的HBV疫苗中所利用的HBV抗原包含以往公知的多种HBV衍生抗原，优选地，适合本发明的HBV抗原是HBV核心抗原(HBcAg，core antigen of HBV)或 HBV 表面抗原(HBsAg，surface antigen of HBV)，更优选为 HBV表面抗原(HBsAg，surface antigen of HBV) 0
[0028]本发明对引发C型肝炎的HCV疫苗有用。本发明的HCV疫苗中所利用的HCV抗原包含以往公知的多种HCV衍生抗原，优选地，适合本发明的HCV抗原是El、E2、NS3或NS3/4a抗原，更优选为NS3。
[0029]本发明对引发AIDS的HIV疫苗有用。本发明的HIV疫苗中所利用的HIV抗原包含以往公知的多种HIV衍生抗原，优选地，适合本发明的HIV抗原是Gag(p55gag)、Pol、Vif、Vpr> Tat、Rev、Vpu、Env或Nef抗原，更优选为Env抗原。
[0030]本发明对引发流感等的流感疫苗有用。本发明的流感疫苗中所利用的流感病毒的抗原包含以往公知的多种流感病毒衍生抗原，优选地，适合本发明的流感病毒的抗原是包膜糖蛋白HA或NA，更优选为HA。
[0031]本发明对引发单纯疱瘆的HSV疫苗有用。本发明的HSV疫苗中所利用的HSV的抗原包含以往公知的多种HSV衍生抗原，优选地，适合本发明的HSV抗原是糖蛋白gB、gD或gH，更优选为gB或gD。
[0032]本发明对引发髓膜炎等的Hib疫苗有用。本发明的Hib疫苗中所利用的Hib的抗原包