阿育魏果提取物在制备治疗前列腺癌药物中的应用_2

文档序号:8911635阅读:来源:国知局
于所述阿育魏果提取物与恩杂鲁胺的重量份数比为:阿育魏果提取物20份恩杂鲁胺1.5份。
[0018]本发明的阿育魏果提取物可有效抑制PC-3M的细胞增殖(P〈0.01),并促进癌细胞凋亡。同时能显著减少Cyclin Dl的表达以及下调内源性p-ERKl/2水平(P〈0.01)。阿育魏果提取物与恩杂鲁胺均可抑制DU-145细胞增殖,诱导其凋亡,呈剂量、时间依赖性;二者联合应用有协同作用,其作用可能与Bcl- 2介导有关。
【具体实施方式】
[0019]下面通过具体实验例和实施例对阿育魏果提取物在制备治疗前列腺癌药物中的应用做进一步说明,但不限于本发明。
[0020]实施例1:阿育魏果提取物的制备
(O阿育魏果12kg,用30%乙醇为溶剂,提取温度零下5°C,提取次数为2次,每次提取时间为10小时,每次溶剂用量为阿育魏果重量的15倍,滤过,提取液冷冻干燥,得阿育魏果粗提物A ;
(2)将步骤(I)得到的阿育魏果粗提物A,经过MCI凝胶柱色谱纯化,先用份数比5:95的甲醇-水洗脱,再用份数比30:70的甲醇-水洗脱,收集份数比30:70的甲醇-水洗脱部分,回收甲醇,干燥,得阿育魏果粗提物B ;
(3)将步骤(2)得到的阿育魏果粗提物B,经过重量份数比3:1混合均匀的MCI凝胶-硅胶混合色谱柱,用石油醚-丙酮梯度洗脱,以硅胶G薄层层析检测,合并相同流份,并收集份数比10:1-3:1的石油醚-丙酮洗脱液合并,回收溶剂,干燥,即得阿育魏果提取物。
[0021]实施例2:阿育魏果提取物的制备
(1)阿育魏果15kg,用80%乙醇为溶剂,提取温度零下10°C,提取次数为6次,每次提取时间为4小时,每次溶剂用量为阿育魏果重量的10倍,滤过,提取液冷冻干燥,得阿育魏果粗提物A ;
(2)将步骤(I)得到的阿育魏果粗提物A,经过MCI凝胶柱色谱纯化,先用份数比3:97的甲醇-水洗脱,再用份数比6:94的甲醇-水洗脱,收集份数比6:94的甲醇-水洗脱部分,回收甲醇,干燥,得阿育魏果粗提物B ;
(3)将步骤(2)得到的阿育魏果粗提物B,经过重量份数比1:3混合均匀的MCI凝胶-硅胶混合色谱柱,用石油醚-丙酮梯度洗脱,以硅胶G薄层层析检测,合并相同流份,并收集份数比10:1-3:1的石油醚-丙酮洗脱液合并,回收溶剂,干燥,即得阿育魏果提取物。
[0022]实施例3:阿育魏果提取物的制备
(O阿育魏果10kg,用60%乙醇为溶剂,提取温度零下5°C,提取次数为6次,每次提取时间为4小时,每次溶剂用量为阿育魏果重量的10倍,滤过,提取液冷冻干燥,得阿育魏果粗提物A ;
(2 )将步骤(I)得到的阿育魏果粗提物A,经过MCI凝胶柱色谱纯化,先用份数比4:96的甲醇-水洗脱,再用份数比20:80的甲醇-水洗脱,收集份数比20:80的甲醇-水洗脱部分,回收甲醇,干燥,得阿育魏果粗提物B ;
(3)将步骤(2)得到的阿育魏果粗提物B,经过重量份数比2:1混合均匀的MCI凝胶-硅胶混合色谱柱,用石油醚-丙酮梯度洗脱,以硅胶G薄层层析检测,合并相同流份,并收集份数比10:1-3:1的石油醚-丙酮洗脱液合并,回收溶剂,干燥,即得阿育魏果提取物。
[0023]实施例4:阿育魏果提取物的制备
(O阿育魏果,用50%乙醇为溶剂,提取温度零下7°C,提取次数为2次,每次提取时间为10小时,每次溶剂用量为阿育魏果重量的15倍,滤过,提取液冷冻干燥,得阿育魏果粗提物A ;
(2)将步骤(I)得到的阿育魏果粗提物A,经过MCI凝胶柱色谱纯化,先用份数比4.5:95.5的甲醇-水洗脱,再用份数比25:75的甲醇-水洗脱,收集份数比25:75的甲醇-水洗脱部分,回收甲醇,干燥,得阿育魏果粗提物B ;
(3)将步骤(2)得到的阿育魏果粗提物B,经过重量份数比2:1混合均匀的MCI凝胶-硅胶混合色谱柱,用石油醚-丙酮梯度洗脱,以硅胶G薄层层析检测,合并相同流份,并收集份数比10:1-3:1的石油醚-丙酮洗脱液合并,回收溶剂,干燥,即得阿育魏果提取物。
[0024]实施例5:阿育魏果提取物片的制备
取实施例2阿育魏果提取物35g,加入淀粉10g,混匀,制粒,干燥,过筛,加微晶纤维素4g,硬脂酸镁lg,混匀,压制成100片,即得阿育魏果提取物片。
[0025]实施例6:阿育魏果提取物颗粒的制备
取实施例3阿育魏果提取物35g,加入糊精20g,蔗糖15g,混勾,制粒,干燥,整粒,即得阿育魏果提取物颗粒。
[0026]实施例7:阿育魏果提取物胶囊的制备
取实施例4阿育魏果提取物30g,加淀粉30g,混勾,制粒,干燥,整粒,装胶囊100粒,即得阿育魏果提取物胶囊。
[0027]实施例8:阿育魏果提取物与恩杂鲁胺组成的治疗前列腺癌药物
(O阿育魏果,用60%乙醇为溶剂,提取温度零下5°C,提取次数为6次,每次提取时间为4小时,每次溶剂用量为阿育魏果重量的10倍,滤过,提取液冷冻干燥,得阿育魏果粗提物A ;
(2 )将步骤(I)得到的阿育魏果粗提物A,经过MCI凝胶柱色谱纯化,先用份数比4:96的甲醇-水洗脱,再用份数比20:80的甲醇-水洗脱,收集份数比20:80的甲醇-水洗脱部分,回收甲醇,干燥,得阿育魏果粗提物B ;
(3)将步骤(2)得到的阿育魏果粗提物B,经过重量份数比2:1混合均匀的MCI凝胶-硅胶混合色谱柱,用石油醚-丙酮梯度洗脱,以硅胶G薄层层析检测,合并相同流份,并收集份数比10:1-3:1的石油醚-丙酮洗脱液合并,回收溶剂,干燥,即得阿育魏果提取物;
(4)取步骤(3)所得阿育魏果提取物15g与恩杂鲁胺2g混匀,即得阿育魏果提取物与恩杂鲁胺组成的治疗前列腺癌药物。
[0028]实施例9:阿育魏果提取物与恩杂鲁胺组成的治疗前列腺癌药物
(O阿育魏果,用60%乙醇为溶剂,提取温度零下5°C,提取次数为6次,每次提取时间为4小时,每次溶剂用量为阿育魏果重量的10倍,滤过,提取液冷冻干燥,得阿育魏果粗提物A ;
(2 )将步骤(I)得到的阿育魏果粗提物A,经过MCI凝胶柱色谱纯化,先用份数比4:96的甲醇-水洗脱,再用份数比20:80的甲醇-水洗脱,收集份数比20:80的甲醇-水洗脱部分,回收甲醇,干燥,得阿育魏果粗提物B ;
(3)将步骤(2)得到的阿育魏果粗提物B,经过重量份数比2:1混合均匀的MCI凝胶-硅胶混合色谱柱,用石油醚-丙酮梯度洗脱,以硅胶G薄层层析检测,合并相同流份,并收集份数比10:1-3:1的石油醚-丙酮洗脱液合并,回收溶剂,干燥,即得阿育魏果提取物;
(4)取步骤(3)所得阿育魏果提取物1g与恩杂鲁胺Ig混匀,即得阿育魏果提取物与恩杂鲁胺组成的治疗前列腺癌药物。
[0029]实施例10:阿育魏果提取物与恩杂鲁胺组成的治疗前列腺癌药物
(O阿育魏果,用60%乙醇为溶剂,提取温度零下5°C,提取次数为6次,每次提取时间为4小时,每次溶剂用量为阿育魏果重量的10倍,滤过,提取液冷冻干燥,得阿育魏果粗提物A ;
(2 )将步骤(I)得到的阿育魏果粗提物A,经过MCI凝胶柱色谱纯化,先用份数比4:96的甲醇-水洗脱,再用份数比20:80的甲醇-水洗脱,收集份数比20:80的甲醇-水洗脱部分,回收甲醇,干燥,得阿育魏果粗提物B ;
(3)将步骤(2)得到的阿育魏果粗提物B,经过重量份数比2:1混合均匀
当前第2页1 2 3 4 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1