阿育魏果提取物在制备治疗前列腺癌药物中的应用
【技术领域】
[0001]本发明属于生物医药领域，涉及一种中药材提取物在制备治疗前列腺癌药物中的应用，具体是涉及一种阿育魏果提取物在制备治疗前列腺癌药物中的应用。
【背景技术】
[0002]在癌症的分类上，前列腺癌是全球第六大癌症，又是全球男性第二大癌症。在中国，前列腺癌发病率约为2.41/10万人口，前列腺癌发现时已多为晚期，它有可能成为我国男性的第一大杀手。前列腺癌的药物治疗主要分为两个阶段，激素依赖性肿瘤细胞为主阶段和激素抵抗性肿瘤细胞为主阶段。
[0003]未经治疗的前列腺癌(prostate cancer，PCa)细胞多为雄激素依赖性，睾酮与其表面雄激素受体(androgenreceptor，AR)结合后，活化信号转导入胞核内调控细胞生长。内分泌治疗通过阻断雄激素促使雄激素依赖性癌细胞凋亡，从而达到治疗目的。
[0004]去势治疗的目的是减少或消除人体内雄激素的分泌，从而抑制前列癌细胞的增长。包括手术去势和药物去势两种方法。手术去势主要为双侧睾丸切除，可迅速有效地降低体内雄激素水平。但睾丸切除后，肾上腺还能产生一定量的雄激素。若同时切除肾上腺则并发症较多，一般不联合应用。药物去势的优点在于无手术危险及因手术给患者造成的心理影响。去势药物可分为两大类:①雌激素及其类似物。雌激素可抑制垂体促黄体生成素(LH)释放，使血中睾酮含量下降，从而发挥治疗作用。②黄体生成素释放激素(LHRH)药物。包括LHRH激动剂(LHRH-α)及LHRH拮抗剂。LHRH-a为临床最广泛使用的去势药物，是欧美国家转移性前列腺癌内分泌治疗首选的一线去势药物。LHRH-a应用第一周，血清睾酮一过性升高，随后通过负反馈效应引起睾酮急剧下降，3?4周可达到去势水平(血清睾酮降低5%?10%)。但LHRH-a于肾上腺不产生作用。目前临床常用的药物有戈舍瑞林、亮丙瑞林、曲普瑞林。由于应用初期会导致睾酮释放的增加，故在注射此类药物时应同时给予抗雄激素药物2周。LHRH拮抗剂作用机制与LHRH- a相似，能直接对抗LHRH的作用。使用后不会导致一过性血清睾酮明显升高及因此带来的副反应。常用药物为阿巴瑞克(abarelix)，有研宄比较阿巴瑞克和激动剂亮丙瑞林的临床疗效，结果显示前者的去势治疗效果优于后者。但是，随着使用时间的延长，阿巴瑞克引发的组胺释放可能产生严重过敏反应，因此，FDA仅批准晚期PC在无其他可选去势方法的情况下使用。
[0005]虽然内分泌治疗可以使大多数患者的病情得到控制和改善，但在经过中位时间为18?30个月的缓解期后，绝大多数患者会发展为激素抵抗性前列腺癌。此类患者生存率较低，其中位生存期仅为18-24个月。因此，对于此类病人进行有效地管理与治疗，就成为了临床工作的难点。
[0006]阿育魏果为伞形科植物细叶糙果序(Trachyspermum ammi (L.) Sprague.)的成熟果实，维吾尔语名称“ Juwine ”，音译为“居维纳”，汉语通用名称为“阿育魏果”，是维吾尔医常用的药材品种，收载于《卫生部药品标准:维吾尔药分册》。阿育魏果所含的麝香草酚对口腔、咽喉黏膜细菌和真菌有抑制作用，对龋齿有防腐、局麻作用，还可用于皮肤化脓性感染及真菌和放线菌病，此外有驱钩虫作用。阿育魏果油可毒害蚯蚓，其醇提取物(1Vo)对葡萄糖球菌、大肠杆菌有抑制作用，稀释后可作祛痰剂。有关研宄表明阿育魏果乙醇提取物中含有麝香草酚、槲皮素、β-谷留醇、豆留醇、胡萝卜苷、东莨菪内酯、山奈素、羟基桂皮酸、4-羟基薄荷-1-烯-7-酸、6-羟基麝香草酚6-0-β-D葡萄糖等。目前有关阿育魏果的基础研宄尚十分有限，尚未见阿育魏果或阿育魏果提取物治疗前列腺癌作用研宄的报道。
【发明内容】
[0007]本发明的目的在于提供一种阿育魏果提取物在制备治疗前列腺癌药物中的应用。
[0008]本发明是通过如下技术方案实现的:
本发明所用阿育魏果为伞形科植物细叶糙果序(Trachyspermum ammi (L.) Sprague.)的成熟果实。
[0009]阿育魏果提取物在制备治疗前列腺癌药物中的应用，所述阿育魏果提取物是按如下方法制备得到:
(1)阿育魏果，用30%-80%乙醇为溶剂，提取温度零下5°C-零下10°C，提取次数为2-6次，每次提取时间为4-10小时，每次溶剂用量为阿育魏果重量的10-15倍，滤过，提取液冷冻干燥，得阿育魏果粗提物A ;
(2)将步骤(I)得到的阿育魏果粗提物A，经过MCI凝胶柱色谱纯化，先用份数比3:97-5:95的甲醇-水洗脱，再用份数比6:94-30:70的甲醇-水洗脱，收集份数比6:94-30:70的甲醇-水洗脱部分，回收甲醇，干燥，得阿育魏果粗提物B ;
(3)将步骤(2)得到的阿育魏果粗提物B，经过重量份数比3:1-1:3混合均匀的MCI凝胶-硅胶混合色谱柱，用石油醚-丙酮梯度洗脱，以硅胶G薄层层析检测，合并相同流份，并收集份数比10:1-3:1的石油醚-丙酮洗脱液合并，回收溶剂，干燥，即得阿育魏果提取物。
[0010]优选的阿育魏果提取物制备方法:
(O阿育魏果，用60%乙醇为溶剂，提取温度零下5°C，提取次数为6次，每次提取时间为4小时，每次溶剂用量为阿育魏果重量的10倍，滤过，提取液冷冻干燥，得阿育魏果粗提物A ;
(2 )将步骤(I)得到的阿育魏果粗提物A，经过MCI凝胶柱色谱纯化，先用份数比4:96的甲醇-水洗脱，再用份数比20:80的甲醇-水洗脱，收集份数比20:80的甲醇-水洗脱部分，回收甲醇，干燥，得阿育魏果粗提物B ;
(3)将步骤(2)得到的阿育魏果粗提物B，经过重量份数比2:1混合均匀的MCI凝胶-硅胶混合色谱柱，用石油醚-丙酮梯度洗脱，以硅胶G薄层层析检测，合并相同流份，并收集份数比10:1-3:1的石油醚-丙酮洗脱液合并，回收溶剂，干燥，即得阿育魏果提取物。
[0011]优选的阿育魏果提取物制备方法:
(O阿育魏果，用50%乙醇为溶剂，提取温度零下7°C，提取次数为2次，每次提取时间为10小时，每次溶剂用量为阿育魏果重量的15倍，滤过，提取液冷冻干燥，得阿育魏果粗提物A ;
(2)将步骤(I)得到的阿育魏果粗提物A，经过MCI凝胶柱色谱纯化，先用份数比4.5:95.5的甲醇-水洗脱，再用份数比25:75的甲醇-水洗脱，收集份数比25:75的甲醇-水洗脱部分，回收甲醇，干燥，得阿育魏果粗提物B ; (3)将步骤(2)得到的阿育魏果粗提物B，经过重量份数比2:1混合均匀的MCI凝胶-硅胶混合色谱柱，用石油醚-丙酮梯度洗脱，以硅胶G薄层层析检测，合并相同流份，并收集份数比10:1-3:1的石油醚-丙酮洗脱液合并，回收溶剂，干燥，即得阿育魏果提取物。
[0012]本发明的阿育魏果提取物与化学药或中药组成治疗前列腺癌的药物。
[0013]本发明的阿育魏果提取物通过加入药剂学允许的各种辅料制成药剂学上的片剂、颗粒剂或胶囊。
[0014]本发明的阿育魏果提取物与恩杂鲁胺组成的治疗前列腺癌药物。
[0015]阿育魏果提取物与恩杂鲁胺组成的治疗前列腺癌药物，其特征在于所述阿育魏果提取物与恩杂鲁胺的重量份数比为:阿育魏果提取物15份恩杂鲁胺2份。
[0016]阿育魏果提取物与恩杂鲁胺组成的治疗前列腺癌药物，其特征在于所述阿育魏果提取物与恩杂鲁胺的重量份数比为:阿育魏果提取物10份恩杂鲁胺I份。
[0017]阿育魏果提取物与恩杂鲁胺组成的治疗前列腺癌药物，其特征在