br>[0476] 从Janvier (法国）购入85只小鼠（8周龄，75只db/db和10只db/+)。在整个实 验期间，将动物饲养在28个通风的笼（530cm2X20cm)中。动物的衬垫每周更新两次。将 小的设备放置在笼子中以改进环境（小鼠住宿处和纤维素附加物（cellulose plugs))。在 正常的12小时光照循环（在下午7点灭灯）、22±2°C、55± 10%的相对湿度下，将小鼠安置 为两组。小鼠具有至少14天的适应期，在此期间，用标准食物R04饮食（SAFE-Augy法国） 饲喂小鼠，并且小鼠自由获取水。
[0477]在适应12天后并在开始处理前2天（DO)，对所有小鼠进行称重，并从上午08:00 至下午02:00禁食6小时。随后，随着研宄的进行每天测量体重。
[0478] 在异氟烷麻醉下，从球后窦收集血液（200 y L/EDTA)。使用酶法和免疫-酶法分别 对血浆葡萄糖和血浆胰岛素进行定量，从而使动物在同质组中随机化。
[0479] 在第0天，就在管饲法前，从尾静脉采集一滴血，以使用血糖仪（SmartCheckK) 测量未经禁食的血糖。
[0480] 测试组
[0481] 根据小鼠的体重和空腹血糖将小鼠分组（N = 8只小鼠/组）：
[0482]-用溶媒处理的瘦的对照（db/+小鼠）（经口服，每日两次）。
[0483] _用溶媒处理的肥胖阴性对照（db/db小鼠）（经口服，每日两次）。
[0484] _用二甲双胍以300mg/kg处理的肥胖阳性对照（db/db小鼠）（经口服，每日一 次）。
[0485]-用本发明的化合物或组合物处理的肥胖动物（db/db小鼠）。
[0486] 处理
[0487] 处理研宄持续6周。通过管饲法每天用溶媒、参照化合物或PXT化合物以10mL/kg 的剂量（最大上至20mL/kg/天）在上午08:00和下午04:00对小鼠处理两次。
[0488] 将灌胃体积依早晨记录的体重个性化地调整。
[0489] 在处理期间，对食物和水的消耗进行监测和记录。每日对食物摄入进行测量和记 录（连续两天之间的差）。平均食物摄入以各动物每天消耗的食物的克数表示，将平均食物 摄入分配至所考虑的笼中的所有小鼠。每周两次使用相同的方法对水的摄取进行评价。
[0490] 每周一次，正好在管饲法之前的第7天、第13天、第21天、第27天、第35天和第 41天，从尾静脉采集一滴血，以使用血糖仪（SmartCheck?)测量未经禁食的血糖。
[0491] 在第14天、第28天和第42天，在上午08:00移除食物。在下午02:00,在麻醉状 态下从球后窦收集血液（200 y L/EDTA)，以测量空腹血糖。
[0492] 葡萄糖的定量
[0493] 在葡萄糖氧化酶存在的情况下，基于葡萄糖的酶促氧化，通过比色法确定血浆葡 萄糖浓度。在通过过氧化物酶催化的反应中，所生成的过氧化氢与苯酚和4-氨基非那宗反 应，从而形成红_紫色醌亚胺染料作为指示剂。最终颜色的强度与葡萄糖浓度直接成正比， 并在505nm处对最终颜色的强度进行测量。
[0494] 结果
[0495] 本发明的组合物在处理的第28天时即已降低了 db/db小鼠血浆中的血糖（未 示出）。图23显示出在第42天，当与用溶媒给予的动物相比时，用D-甘露糖（5mg/kg)、 (RS)-巴氯芬（6mg/kg)和二甲双胍（150mg/kg)的组合进行给予使葡萄糖浓度显著降低 (P<0. 001) 〇
[0496] 值得注意的是，当药物单独使用时不会诱导任何显著的血糖降低。更显著的是，可 将本发明的化合物视为是目前已知的用于治疗糖尿病的有效增强剂，由此允许减少剂量， 并因此预期降低的副作用。
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【主权项】
1. 一种用于对有需要的哺乳动物中的糖尿病或相关紊乱进行治疗的组合物，所述组合 物包含选自下述化合物中的至少两种化合物：艾芬地尔、阿坎酸、阿米三嗪、氮卓斯汀、巴氯 芬、喷托维林、西那卡塞、右溴苯那敏、乙胺嗪、D-甘露糖、芬司匹利、左西孟旦、美西律、尼麦 角林、托芬那酸、托哌酮、托拉塞米和氨苯喋啶。2. 根据权利要求1所述用途的组合物，其中，所述组合物包含艾芬地尔和选自下述化 合物中的至少一种化合物：阿坎酸、阿米三嗪、氮卓斯汀、巴氯芬、喷托维林、西那卡塞、右溴 苯那敏、乙胺嗪、D-甘露糖、芬司匹利、左西孟旦、美西律、尼麦角林、托芬那酸、托哌酮、托拉 塞米和氨苯蝶啶。3. 根据权利要求1所述用途的组合物，其中，所述组合物包含阿坎酸和选自下述化合 物中的至少一种化合物：阿米三嗪、氮卓斯汀、巴氯芬、喷托维林、西那卡塞、右溴苯那敏、乙 胺嗪、D-甘露糖、芬司匹利、艾芬地尔、左西孟旦、美西律、尼麦角林、托芬那酸、托哌酮、托拉 塞米和氨苯蝶啶。4. 一种用于对有需要的哺乳动物中的糖尿病或相关紊乱进行治疗的组合物，所述组 合物包含：i)选自下述化合物中的至少一种化合物：阿坎酸、阿米三嗪、氮卓斯汀、巴氯芬、 喷托维林、西那卡塞、右溴苯那敏、乙胺嗪、D-甘露糖、芬司匹利、艾芬地尔、左西孟旦、美西 律、尼麦角林、托芬那酸、托哌酮、托拉塞米和氨苯蝶啶；ii)与所述i)中的化合物相组合的 选自下述化合物中的至少一种不同的化合物：阿坎酸、阿米三嗪、氨来咕诺、氮卓斯汀、巴氯 芬、喷托维林、西那卡塞、右溴苯那敏、乙胺嗪、D-甘露糖、芬司匹利、非索非那定、艾芬地尔、 美西律、尼麦角林、托哌酮、托拉塞米、氨苯喋啶、托芬那酸、吡贝地尔、左西孟旦、西咪替丁、 二氢丙茶碱、艾地苯醌和利美尼定。5. 根据权利要求1-4中任一项所述用途的组合物，其中，所述组合物包含以下化合物 组合中的至少一种： -艾芬地尔和阿坎酸； -艾芬地尔和巴氯芬； _D_甘露糖和巴氯芬； -巴氯芬和阿坎酸； -美西律和西那卡塞； -美西律和托拉塞米； -磺胺异噁挫和托拉塞米； -氮卓斯汀和尼麦角林； -艾地苯醌和尼麦角林； -喷托维林与尼麦角林； -阿米三嗪和尼麦角林； -西咪替丁和尼麦角林； -乙胺嗪和尼麦角林； -艾芬地尔和尼麦角林； -氮卓斯汀和艾地苯醌； -阿坎酸和尼麦角林； -氮卓斯汀和喷托维林； -氮卓斯汀和阿米三嗪； -艾地苯醌和喷托维林； -艾地苯醌和阿米三嗪； -氨苯蝶啶和尼麦角林； -D-甘露糖和尼麦角林； -艾地苯醌和乙胺嗪； -艾芬地尔和芬司匹利； -艾芬地尔和托拉塞米； -艾芬地尔和氨苯蝶啶； -艾芬地尔和托芬那酸； -芬司匹利和托拉塞米； -芬司匹利和氨苯蝶啶； -芬司匹利和托芬那酸； -托拉塞米和氨苯蝶啶； -托拉塞米和托芬那酸；或 -氨苯蝶啶和托芬那酸。6. -种用于对有需要的哺乳动物中的糖尿病或相关紊乱进行治疗的组合物，所述组合 物包含与至少一种另外的抗糖尿病药剂组合的选自下述化合物中的至少一种化合物：阿坎 酸、阿米三嗪、氮卓斯汀、巴氯芬、喷托维林、西那卡塞、右溴苯那敏、乙胺嗪、D-甘露糖、芬司 匹利、艾芬地尔、左西孟旦、美西律、尼麦角林、托芬那酸、托哌酮、托拉塞米和氨苯蝶啶。7.根据权利要求6所述用途的组合物，其中，所述至少一种另外的抗糖尿病药剂选自： 阿卡波糖、醋磺己脲、阿格列汀、小檗碱、苯扎贝特、溴隐亭、丁双胍、氨磺丁脲、氯磺丙脲、吡 啶甲酸铬、环丙贝特、氯贝丁酯、考来维仑、右芬氟拉明、度格列汀、艾塞那肽、非诺贝特、吉 非罗齐、吉格列汀、格列本脲、格列波脲、格列他尼、格列齐特、格列美脲、格列吡嘆、格列喹 酮、格列生脲、格列吡脲、咪达普利、胰岛素、菊粉、硫辛酸、利拉利汀、利拉鲁肽、甲钴胺、二 甲双胍、米格列醇、米格列奈、那格列奈、奥利司他、苯乙双胍、吡格列酮、普兰林肽、瑞格列 奈、罗格列酮、沙格列汀、西他列汀、妥拉磺脲、甲苯磺丁脲、维格列汀或伏格列波糖。8.根据权利要求7所述用途的组合物，其中，所述至少一种另外的抗糖尿病药剂为二 甲双胍。9.根据权利要求8所述用途的组合物，其中，所述组合物包含与下述化合物组合中的 至少一种相组合的二甲双胍： _D_甘露糖和巴氯芬； -艾芬地尔和阿坎酸； -艾芬地尔和巴氯芬； -巴氯芬和阿坎酸； -美西律和西那卡塞； -美西律和托拉塞米； -磺胺异噁挫和托拉塞米； -氮卓斯汀和尼麦角林； -艾地苯醌和尼麦角林； -喷托维林与尼麦角林； -阿米三嗪和尼麦角林； -西咪替丁和尼麦角林； -乙胺嗪和尼麦角林； -艾芬地尔和尼麦角林； -氮卓斯汀和艾地苯醌； -阿坎酸和尼麦角林； -氮卓斯汀和喷托维林； -氮卓斯汀和阿米三嗪； -艾地苯醌和喷托维林； -艾地苯醌和阿米三嗪； -氨苯蝶啶和尼麦角林； -D-甘露糖和尼麦角林； -艾地苯醌和乙胺嗪； -艾芬地尔和芬司匹利； -艾芬地尔和托拉塞米； -艾芬地尔和氨苯蝶啶； -艾芬地尔和托芬那酸； -芬司匹利和托拉塞米； -芬司匹利和氨苯蝶啶； -芬司匹利和托芬那酸； -托拉塞米和氨苯蝶啶； -托拉塞米和托芬那酸；或 -氨苯蝶啶和托芬那酸。10. 根据前述权利要求中任一项所述用途的组合物，其中，所述化合物控制糖尿病患者 中的血糖水平。11. 权利要求1-10中任一项所述的组合物用于如下方面的用途：在哺乳动物受试者 中、特别是在患有糖尿病或相关紊乱的哺乳动物受试者中，增加或刺激脂肪细胞和/或肌 细胞中的葡萄糖摄取。12. 权利要求1-10中任一项所述的组合物用于如下方面的用途：在哺乳动物受试者 中、特别是在患有糖尿病或相关紊乱的哺乳动物受试者中，减少胰腺0细胞的细胞凋亡。13.根据前述权利要求中任一项所述用途的组合物，其中，所述糖尿病为2型糖尿病。14.权利要求1-10中任一项所述的组合物用于如下方面的用途：在患有2型糖尿病的 哺乳动物受试者中降低胰岛素抵抗。15.根据前述权利要求中任一项所述用途的组合物，其中，所述组合物进一步包含药学 上可接受的载体或赋形剂。16.根据前述权利要求中任一项所述用途的组合物，其中，所述组合物中的化合物共同 配制或给予、分别配制或给予、或者依次配制或给予。17.根据前述权利要求中任一项所述用途的组合物，其中，将所述组合物重复给予所述 受试者。
【专利摘要】本发明涉及用于对有需要的哺乳动物中的血糖进行控制的组合物和方法。本发明涉及用于治疗糖尿病和相关紊乱的组合物和方法。具体而言，本发明涉及糖尿病和相关紊乱的新的疗法或组合疗法，所述新的疗法或组合疗法基于控制血糖水平的组合物。
【IPC分类】A61K31/216, A61K31/519, A61K31/7004, A61K31/197, A61P5/48, A61K31/53, A61K31/55, A61K31/437, A61K31/16, A61K31/122, A61K31/44, A61K31/445, A61K31/422, A61K31/138
【公开号】CN104981240
【申请号】CN201380069483
【发明人】丹尼尔·科恩, 伊利亚·丘马克威, 赛尔格·纳比洛克基恩, 鲁道夫·哈吉
【申请人】法奈克斯公司
【公开日】2015年10月14日
【申请日】2013年10月30日
【公告号】CA2888576A1, EP2727587A1, EP2914252A1, US20150231123, WO2014068007A1