一种诱导免疫耐受的中药复方制剂及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及中药制剂技术领域，特别是涉及一种诱导免疫耐受的中药复方制剂及 其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002] 免疫排斥反应是组织器官移植、变态反应和自身免疫性疾病的瓶颈。目前在国内 外治疗免疫排斥反应的方法中，疗效最为确切的是免疫抑制剂。理想的免疫抑制剂具有高 效、低毒、方便和经济的特点，然而目前在临床使用的免疫抑制剂存在广泛而强烈的毒副作 用，长期使用可造成机体的免疫功能抑制，抗感染能力下降，对肝肾的毒性增加，甚至引起 致畸和不育。例如肝移植常用免疫抑制剂如CsA、FK506等药物的神经毒作用已屡见报道， 两者均可出现震颤、头痛、癫痫、皮质性失明、局灶性脑白质病等神经系统病变以及精神状 态改变（王丽馨，陈伟，杨沛，邹晓薇，罗中兰.肾移植术后患者环孢素A血药浓度的 监测.重庆医学.2008 ;37 (03) :243-246.贺智.他克莫司的临床应用与不良反应，河北 医药.2007 ;29 (03) :261-262)。而糖皮质激素其主要副作用为消化道出血（苏宝印，李立 伟.糖皮质激素治疗肾脏病所致副作用的中医药对策.中国中西医结合肾病杂志.2010; 11(11) :1015-1016)。因此，诱导机体产生针对移植物抗原、过敏原和自身抗原的免疫耐受 是治疗组织器官移植后免疫排斥、变态反应和自身免疫性疾病的理想措施。
[0003] 近年来，调节性树突状细胞（regulatorydendriticcells，DCregs)诱导的 免疫耐受作用备受关注，在组织器官移植后免疫排斥、变态反应和自身免疫性疾病的 治疗中具有潜在前景（Raich-RegueD，GlancyM，ThomsonAW.Regulatorydendritic celltherapy:fromrodentstoclinicalapplication.ImmunolLett.2014 ； 161 (2):216-221.；LiH，ShiB.Tolerogenicdendriticcellsandtheirapplications intransplantation.CellMolImmunol. 2015 ；12(1):24-30.；SchmidtSVjNino-Castro AC,SchultzeJL.Regulatorydendriticcells:thereismorethanjustimmune activation.FrontImmunol. 2012 ;3:274) D树突状细胞根据其分化成熟的不同状态可分 为不成熟树突状细胞和成熟树突状细胞。不成熟树突状细胞产生大量抗炎的细胞因子和 低表达共刺激分子，诱导免疫抑制，成熟树突状细胞和不成熟树突状细胞恰恰相反，高表达 共刺激分子，诱导适应性免疫应答。DOegs是一类具有负向免疫调节功能的DC亚群，高 表达CDllb/c分子、IL-10、TGF-3或者ID0,低表达共刺激分子CD80、CD86和HLA-DRjg 抑制T细胞的增殖并促进调节性T细胞的扩增，并能对抗促炎细胞因子诱导的分化成熟 (HuangH,Dawickiff,LuM,NayyarA,ZhangX,GordonJR.Regulatorydendriticcell expressionofMHCIIandIL-IOarejointlyrequisiteforinductionoftolerance inamurinemodelofOVA-asthma.Allergy. 2013 ;68 (9) :1126-1135)D因此，诱导 DOeg的产生已经成为治疗包括移植物抗宿主病在内的免疫相关疾病的一种新策略（Han YjChenZjYangYjJiangZjGuYjLiuYjLinCjPanZjYuYjJiangMjZhouMjCaoX.Human CD14+CTLA-4+regulatorydendriticcellssuppressT-cellresponsebycytotoxic T-Iymphocyte antigen-4-dependent IL-IO and indoleamine-2,3-dioxygenase production in hepatocellular carcinoma. Hepatology. 2014 ;59 (2):567-579)〇
[0004] 诱导DCregs产生的方法包括药物制剂如免疫抑制剂（Hackstein H, Thomson Aff. Dendritic cells:emerging pharmacological targets of immunosuppressive drugs. Nat Rev Immunol. 2004 ;4 (I) : 24-34.)，生理性的介质如基质细胞、抗炎的细 胞因子如IL-10,以及基因工程技术如降低共刺激分子表达、促进抗炎细胞因子表达 如 TGF-P 等（Cai Z，Zhang W，Li M，Yue Y，Yang F，Yu L，Cao X，Wang J.TGF-betal gene-modified, immature dendritic cells delay the development of inflammatory bowel disease by inducing CD4 (+)Foxp3(+)regulatory T cells. Cell Mol Immunol. 2010 ;7 (I) : 35-43)，但存在不良反应和并发症多或者价格昂贵的缺点。因此，寻找 一种经济、安全的获得DCreg的方法具有良好的临床开发价值。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的旨在克服上述不足之处，根据多年的临床实践和民间秘方，反复临 床验证拆方组方，提供一种安全有效经济的诱导免疫耐受的中药复方制剂及其制备方法， 应用于治疗组织器官移植后免疫排斥、变态反应和自身免疫性疾病。
[0006] -种诱导免疫耐受的中药复方制剂及其制备方法和应用。
[0007] 为实现本发明的目的所采用的技术方案是：一种诱导免疫耐受的中药复方制剂， 其特征在于，按重量份数计，由以下的组份组成：2~30份的柴胡、3-31份的牡丹皮、4-32 份的白芍、5-33份的郁金、6-35份的甘草。
[0008] 优选的，上述中药复方制剂按照质量份数计，由以下组份组成：10-28份的柴胡、 17-22份的牡丹皮、11-30份的白芍、19-29份的郁金、10-30份的甘草。
[0009] 更进一步的，上述中药复方制剂按照质量份数计，由以下组份组成：10-20份的柴 胡、18-22份的牡丹皮、11-24份的白芍、19-23份的郁金、10-28份的甘草。
[0010] -种诱导免疫耐受的中药复方制剂的制备方法，包括备料和粉碎步骤，其特征在 于还需依次进行如下操作：
[0011] ⑴水提：将粉碎后的柴胡、牡丹皮、白苟、郁金、甘草进行混合，放入30-KKTC沸 水中浸泡10-60分钟，再加入1-8倍的水，在80-100°C条件下浸提1-3小时，在升温过程中 不断搅拌，最后将所得浸提液合并；
[0012] (2)除杂：将步骤⑴得到的浸提液采用过滤，离心方法除杂；
[0013] (3)干燥：将除杂后的浸提液经50°C旋转蒸发，冻干后即得该中药复方制剂。
[0014] 将诱导免疫耐受的中药复方制剂制成为符合药剂学要求的口服剂型。
[0015] 上述一种诱导免疫耐受的中药复方制剂的配伍原理为：少阳肝胆，病机为正邪相 争，调理肝胆，使邪证两孤立，则可诱导机体免疫系统对病邪的免疫耐受。此方以柴胡为君， 疏肝解表，白芍、郁金为臣，疏肝活血，肝藏血，佐以牡丹皮凉血，甘草调和诸药为使。肝体 阴而用阳，白芍养肝之体，柴胡助肝之用；肝主气而藏血，柴胡理气，郁金活血；气有余便是 火，更加牡丹皮凉血清热。纵观全方，攻补皆施，气血同调，实为调理肝胆以诱导免疫耐受之 良方。
[0016]本发明的有益效果及作用机理是：
[0017] (1)能有效抑制免疫排斥反应
[0018] 免疫排斥反应是组织器官移植、变态反应和自身免疫性疾病的瓶颈。免疫抑制剂 尽管临床疗效确切，但是因为多数药物具有毒性或者对机体免疫功能的抑制，患者容易出 现严重的不良反应和并发症。生物制剂因价格昂贵致使大多数患者难以维持使用。相比之 下该制剂不仅能诱导受体小鼠对同种异基因移植皮肤的耐受，而且对受体小鼠的肝肾生化 功能没有影响，受体小鼠移植皮肤、肝脏和肾脏结构完整、无炎性细胞浸润。而且该制剂价 格低廉，患者可以长期使用。
[0019] (2)能有效诱导DCregs的产生
[0020] DCregs介导的免疫耐受作用在免疫相关疾病的治疗中备受关注。通过药物治疗获 得DCregs因其具有广泛的临床应用价值而备受青睐。该