含有硫化和非硫化聚阴离子多糖的藻类提取物及其应用
【专利说明】含有硫化和非硫化聚阴离子多糖的藻类提取物及其应用
[0001] 本发明涉及一种含有硫化和非硫化聚阴离子多糖的藻类提取物、一种制备藻类提 取物的方法及其治疗性和预防性应用。
[0002] 石莼种（石莼目，绿藻门）是在潮间带或前滩区域发现的丰富藻类。它们移居在 坚硬的基质上，利用附着盘固定，但有些种类也形成自由移动的生存形式。石莼藻类是生长 迅速的藻类，且对于空间和营养的吸收伺机而动。在富含营养的沿海水域以及泻湖中可以 特别观察到其在水柱中的生长，其中石莼种以"绿潮"（Fletcher，1996)的形式增殖。通常 大量的生长和大串（植物），因此，在其堆积时会产生有害气体（Morand和Briand，1996)。 直至现在，这样的生物量鲜有附加价值，除了用作肥料（Maz6等，1993,Cuomo等，1995)、 生产甲烷（Briand和Morand，1997)、作为人类食品消费（P6rez，1997)或作为造纸的基料 (Nicolucci和Monegato, 1993)以外的利用途径或许可以提供将其特殊性质利用至最佳的 可能性。
[0003]目前，绿藻的利用基本基于为开发将绿藻作为非需要品去除的新路径而提供可能 性的应用。预期的应用路径涉及到生物气（Briand和Morand1997，Morand和Briand1999， Morand等，2006)、生物材料（生物塑料）（Chiellini等，2008)、生物可降解杯子（Sassi 等，2008)、纸张和用于打包的硬纸板（Nicolucci&Monegata等，1993)、充电纳米复合物 (Demais等，2006a，2006b)的生产，动物营养学：动物的无毒饲料（Demais等，2006)、养鱼业 的偏好因素（DeBose等，2008，KutGuroy等，2007)以及化妆品（表面活性剂）（Ranson等， 2008)〇
[0004] 这些藻类中含有的聚多糖的化学及理化性质使得它们在人类和动物消费领 域的制药、化学、养鱼业和农业中作为新功能性和生物学活性聚合物的引人注目的候 选者（RobicA,等，CarbohydratePolymers77(2009)206-216;LahayeMRobicA， BiomacromoleculesVol8No. 6,2007)。
[0005] 根据这些方面之一，本发明涉及一种从石莼目的藻类中的提取物，尤其是从石莼 种类的绿藻中的提取物，含有硫化和非硫化的聚阴离子聚多糖，其大小小于等于50KDa。
[0006] 具体地，本发明所述藻类提取物聚多糖含有甘露糖和/或阿拉伯糖。更具体地，所 述聚多糖含有至少〇. 005%的甘露糖和/或至少0. 005%的阿拉伯糖（以基于藻类提取物 干物质总重量的重量计），特别地，至少0. 01 %的甘露糖和/或至少0. 01 %的阿拉伯糖。更 进一步具体地，所述多聚体含有的甘露糖的量在〇. 01-0. 20%的范围内，和阿拉伯糖的量在 0. 01-0. 5%的范围内（以基于藻类提取物干物质总重量的重量计），特别地，甘露糖的量在 0.03-0. 15%的范围内，和阿拉伯糖的量在0.01-0. 2%的范围内。
[0007] 具体地，所述聚多糖还含有：
[0008]-半乳糖；
[0009]-葡萄糖；
[0010] -鼠李糖；
[0011 ] _木糖；和
[0012] _葡萄糖醛酸。
[0013] 更具体地，所述聚多糖含有：
[0014] -0? 05-0. 5%的半乳糖，特别为 0? 1-0. 4% ;
[0015] -0.005-0. 05 % 的葡萄糖，特别为 0.01-0. 03 % ;
[0016] -2-15%的鼠李糖，特别为5-10% ;
[0017] -0.1-1%的木糖，特别为0.3-0.7%;和
[0018] -1-7%的葡萄糖醛酸，特别为1-5% ;
[0019] 以基于藻类提取物干物质的总重量的重量计。
[0020] 因此，本发明藻类提取物的一个例子可含有：
[0021] -甘露糖；
[0022]-阿拉伯糖；
[0023] -半乳糖；
[0024] -葡萄糖；
[0025] -鼠李糖；
[0026] _木糖；和
[0027] _葡萄糖醛酸。
[0028] 对于本发明藻类提取物的一个更具体的例子可作如下描述，含有：
[0029] -0? 01-0. 20% 的甘露糖，特别为 0? 03-0. 15% ;
[0030] -0? 01-0. 5%的阿拉伯糖，特别为 0? 01-0. 2% ;
[0031] -0? 05-0. 5%的半乳糖，特别为 0? 1-0. 4% ;
[0032] -0? 005-0. 05 % 的葡萄糖，特别为 0? 01-0. 03% ;
[0033] -2-15%的鼠李糖，特别为5-10% ;
[0034] -0.1-1%的木糖，特别为0.3-0.7%;和
[0035] -1-7%葡萄糖醛酸，特别为1-5% ;
[0036] 以基于藻类提取物干物质的总重量的重量计。
[0037] 本发明藻类提取物的另一个更具体的例子可含有：
[0038]-0.09% 的甘露糖；
[0039] -0.1 %的阿拉伯糖；
[0040] -0.3 %的半乳糖；
[0041]-0.02% 的葡萄糖；
[0042] -8.1 %的鼠李糖；
[0043] -0.5 %的木糖；和
[0044] -2. 6 %的葡萄糖醛酸；
[0045] 以基于藻类提取物干物质的总重量的重量计。
[0046] 更具体地，本发明藻类提取物含有硫化和非硫化的聚阴离子聚多糖，其大小小于 40、30、20或15KDa。更具体地，本发明藻类提取物的硫化和非硫化聚阴离子聚多糖的大小 小于等于15KDa。
[0047] -道尔顿（Da)是一重量单位，其定义为等于碳12原子质量的十二分之一，该质量 大致通过数种同位素的混合物（主要为碳12和碳13,除了与任何碳原子一样的6个质子以 外，还各自具有6个和7个中子）估算。一道尔顿非常精准地等于一个氢原子的质量，其精 确值为1.〇〇794amu(原子质量单位）。千道尔顿（KDa)等于lOOODa.
[0048]在本发明范围内，以kDa提及的质量通过本领域技术人员通常采用的任何方法测 得，尤其是本发明藻类提取物中硫化和非硫化的聚阴离子多糖的质量可通过只允许预定大 小分子通过的膜超滤来辨别。
[0049] "石莼种类的绿藻"指的是来自于石莼目下石莼科家族石莼种组下的绿藻。尤其是 以下种类和亚种：鱼栖台石药（Ulvaacanthophora)、阿南德氏石药（Ulvaanandii)、窄叶 石药（Ulvaangusta)、阿氏石药（Ulvaarasakii)、阿莫里加石药（Ulvaarmoricana)、绿 石药（Ulvaatroviridis)，薄叶石药（Ulvaattenuata)，贝特石药（Ulvabeytensis)，双 面石药（Ulvabifrons)，短柄石药（Ulvabrevistipitata)，球石药（Ulvabulbosa)，缅甸 石药（Ulvaburmanica)，柔石药（Ulvabyssoides)，加州石药（Ulvacalifornica)，蝶形 石药（Ulvachaetomorphoides)，格石药（Ulvaclathrata)，渥红石药（Ulvacoccinea)， 扁石药（Ulvacompressa)，族石药（Ulvaconglobata)，羊角石药（Ulvacornucopiae)，角 石药（Ulvacornuta)，科夫龙石药（Ulvacovelongensis)，厚石药（Ulvacrassa)，厚膜石 药（Ulvacrassimembrana)，拱石药（Ulvacurvata)，常石药（Ulvadactylifera)，据齿石 药（Ulvadenticulata)，秀刚石药（Ulvaelegans)，艾米氏石药（Ulvaelminthoides)， 肠形石药（Ulvaenteromorpha)，直石药（Ulvaerecta)，宽石药（Ulvaexpansa)，带石 药（Ulvafasciata)，窗石药（Ulvafenestrata)，曲石药（Ulvaflexuosa)，胶石药（Ulva gelatinosa)，双生石药（Ulvageminoidea)，巨石药（Ulvagigantea)，大石药（Ulva grandis)，亨德石药（Ulvahendayensis)，勾石药（Ulvahookeriana)，霍克石药（Ulva hopkirkii)，印氏石药（Ulvaindica)，细长石药（Ulvaintestinalis)，类细长石药（Ulva intestinaloides)，绞石药（Ulvaintricata)，管状石药（Ulvaintybacea)，加 唾石药 (Ulvajavanica)，科林石药（Ulvakylinii)，萬石药（Ulvalactuca)，萬叶石药（Ulva lactucaefolia)，亮绿石药（Ulvalaetevirens)，朗吉石药（Ulvalaingii)，线石药（Ulva linearis)，舌石药（Ulva lingulata)，链石药（Ulva linkiana)，林氏石药（Ulva linza)， 里皮石药（Ulva lippii)，滨海石药（Ulva litoralis)，海岸石药（Ulva littorea)，裂 石药（Ulva lobata)，滑石药（Ulva lubrica)，镶边石药（Ulva marginata)，微球石药 (Ulva micrococca)，米亚塔石药（Ulva myriotrema)，那不勒斯1石药（Ulva neapolitana)， 线虫石药（Ulva nematoidea)，欧尼石药（Ulva ohnoi)，橄石药（Ulva olivacea)，橄榄 石药（Ulva olivaceum)，太平洋石药（Ulva pacifica)，匙形石药（Ulva papenfussii)， 奇形石药（Ulva paradoxa)，小石药（Ulva parva)，微小石药（Ulva parvula)，潘腾石 药（Ulva patengensis)，狭带石药（Ulva percursa)，孑L石药（Ulva pertusa)，菲氏石药 (Ulva phyllosa)，拍石药（Ulva popenguinensis)，韭叶石药（Ulva porrifolia)，阔石 药（Ulva procera)，深石药（Ulva profunda)，游石药（Ulva prolifera)，假曲石药（Ulva pseudocurvata)，假林氏石药（Ulva pseudolinza)，刚石药（Ulva pulchra)，紫丝石药 (Ulva purpurascens)，奎隆石药（Ulva quilone