的抗原结合部分。AMG 139还包括氨基酸序列，特别是可变区， 或其CDR(不过，也涵盖恒定区的变化）与AMG 139相同或类似的抗体（或其片段）。举例 来说，有用的AMG 139多肽的氨基酸序列与本文所公开的AMG 139多肽的氨基酸序列具有 85%、90%、92%、95%、98%、99%或100%同一性。在另一个实施方案中，有用多肽与八16 139的同一性介于80%与100%之间。
[0056] AMG139是特异性识别天然人IL-23异源二聚体，但与人IL-12异源二聚体无任何 显著结合的人类抗体。AMG139抑制IL-23诱导的促炎性细胞因子产生，例如全血细胞中 IL-23诱导的IL-22产生以及NK和全血细胞中IL-23诱导的IFNy表达。在一些实施方案 中，AMG 139是具有包含SEQ ID NO: 1中的⑶RU⑶R2和⑶R3的重链可变区以及包含SEQ ID N0:2中的⑶R1XDR2和⑶R3的轻链可变区的一种分离的IL-23特异性抗原结合蛋白。 在一些实施方案中，AMG 139是重链可变区与SEQ ID NO: 1具有至少90%同一性并且轻链 可变区与SEQ ID N0:2中的CDR1、CDR2和CDR3具有至少90%同一性的一种分离的IL-23 特异性抗原结合蛋白。参见2011年5月11日公开的WO 2011/056600。
[0057] 在提供值的范围时，应了解，在该范围的上限与下限之间的每一中间值（除非上 下文另作清楚规定，否则精确到下限单位的十分之一），以及在所陈述的范围中的任何其它 陈述值或中间值或较小范围都涵盖于本发明中。较小范围的上限和下限可以独立地包括在 该较小范围内，除非所陈述的范围中明确排除任何限值。当所陈述的范围包括一个或两个 限值时，排除这些所包括的限值中的任一个或两个的范围也包括在本发明内。
[0058] 除非本文另作定义，否则结合本发明使用的科技术语应当具有本领域普通技术人 员通常所了解的意义。另外，除非上下文另外需要，否则单数形式的术语应当包括复数形 式并且复数形式的术语应当包括单数形式。一般来说，与本文所描述的细胞和组织培养、 分子生物学、免疫学、微生物学、遗传学以及蛋白质和核酸化学及杂交学结合使用的命名法 及其技术是本领域中众所周知并且常用的那些。除非另作指示，否则本发明的方法和技术 一般是根据本领域中众所周知的常规方法并且如本说明书全篇所引用和论述的各种通用 和更具体的参考文献中所描述来进行。参见例如，Sambrook等人，Molecular Cloning:A Laboratory Manual， 第 3 片反，Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N. Y. (2001);和 Ausubel 等人，Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Associates(1992);以及 Harlow 和 Lane，Antibodies:A Laboratory Manual， Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N. Y. (1990)。酶促反应和 纯化技术是根据制造商的说明、如本领域中通常所实现或如本文中所描述进行的。与本文 所描述的分析化学、合成有机化学以及医学和药物化学结合使用的术语及其实验程序和技 术是本领域中众所周知并且常用的那些。可以使用标准技术来进行化学合成、化学分析、药 物制备、配制和递送以及患者的治疗。
[0059] 所标识的所有专利和其它出版物都通过引用的方式整体明确地并入本文中用于 描述和公开例如这些出版物中所描述的可能结合本文所描述的信息使用的方法的目的。
[0060] 提供的以下实际实施例和预示性实施例是出于说明本发明的具体实施方案或特 征的目的，而不是限制本发明的范围。
[0061] 实施例1
[0062] 本实施例描述了用以在健康受试者（HS)和患有中度到重度银肩病的受试者 (PSO)中评价抗IL-23抗体（AMG 139)的安全性、耐受性、药物动力学（PK)及药效学 (PD)的1期、随机化、安慰剂对照的递增单次剂量研究；ClinicalTrials. gov标识符： NCT01094093。
[0063] 将总计73位受试者随机分入该研究中；56位健康成人随机分入A部分中并且接 受单次 SC 剂量（7mg、21mg、70mg 或 210mg)或单次 IV 剂量（210mg、420mg 或 700mg)的 AMG 139,或者安慰剂，而17位患有中度到重度PsO的受试者随机分入B部分中并且接受单次SC 剂量（21mg、70mg或210mg)或单次IV剂量（700mg)的AMG 139,或者安慰剂，参看表1。
[0064] 表1.每一组的剂量和施用途径
[0065]
[0066] 对于A部分，在到第85天（对于Al组、A2组和A3组）以及到第169天（对于A5 组、A6组和A7组）的指定时间点取得连续血液样品。对于B部分，指定时间点对于Bl组 和B2组是到第113天（分别是21mg和70mg AMG139 SC)。对于B3组和M组是到第169 天（分别是 210 SC 和 700IV AMG139)。
[0067] 为了测量受试者血清中AMG 139的量，将捕捉抗体（小鼠抗AMG 139 1F2 mAb)被 动吸附到Multi-Array'、? 96 孔 HighBind 微量板各孔（Meso Scale Discovery)中。在去 除过量的捕捉抗体之后，用Blocker? BLOTTO缓冲液阻断微量板的孔。通过在Blocker? BLOTTO缓冲液中稀释100倍来进行预处理，随后将通过外加已知量的AMG 139到100% 正常人血清池中所制备的标准品和质量对照样品装载到微量板的孔中，同时待测试样品 和基质空白作相同处理。利用固定的捕捉抗体捕捉样品中的任何AMG 139。通过洗涤微 量板的孔来去除未结合的材料。洗涤后，将偶联SULF0-TAGTM的检测抗体（抗AMG 139 1A4. ImAb)添加到微量板的孔中以结合捕捉的AMG 139。通过洗涤微量板的孔来去除未结 合的SULF0-TAGTM偶联捕捉抗体。
[0068] 在这次洗涤之后，添加 Read Buffer T (Meso Scale Discovery)以帮助检测结合 的SULF0-TAGTM偶联检测抗体。当用电刺激微量板时，在读取缓冲液中共反应物三丙胺 (tripropylamine，TPA)的存在下，SULF0-TAGTM标记在620nm下发射光。所发射的光量 与初始步骤中捕捉抗体所结合的AMG 139的量成比例。使用适当的板读取器，例如配备有 DiscoveryWorkbench软件的Sector Imager 6000检测发光。使用Watson实验室信息管理 系统数据缩减包，使用加权因子为1/Y2的5PL(自动估计）（5参数逻辑斯蒂（5-parameter logistic))回归模型来缩减数据。通过与标准品和质量对照样品形成的标准曲线相比较来 测定给定血清样品中AMG 139的量。
[0069] 在A部分中，如在除7mg SC剂量外的所有测试剂量中血清AMG 139的暴露量大致 随剂量成比例增加所指示，健康受试者（η = 42)的AMG 139血清浓度与时间曲线展现出线 性PK (图1和图2)。在单次SC施用之后，所有剂量的中值Tniax值在4到8天的范围内（表 2)。据估计，在单次SC剂量之后的相对生物利用率是68. 9%。对于所有剂量水平，在SC或 IV施用之后，终末半衰期的组平均估计值在26. 6到33. O天的范围内，这是IgG抗体典型 的。
[0070] 在B部分中，如本研究中测试的所有剂量中血清AMG 139的暴露量大致随剂量成 比例增加所指示，患有PsO的受试者（η = 12)的AMG 139血清浓度与时间曲线展现出线性 PK(图3和图4)。在单次SC施用之后，所有剂量的中值Tniax值在9到13天的范围内（表 1)。据估计，在单次SC或IV剂量之后的相对生物利用率是66. 9%。对于所有剂量水平，在 SC或IV施用之后，终末半衰期的组平均估计值在21. 6到31. 0天的范围内，这是IgG抗体 典型的。
[0071] 总的说来，A部分中的健康受试者与B部分中患PsO的受试者之间的AMG 139 PK 是相似的。一个例外是，健康受试者显示出比患有PsO的受试者高的AMG 139暴露量（AUC 和C_)。在SC施用之后，中值Tniax在健康受试者中比在患有PsO的受试者中早出现。健康 受试者与患有PsO的受试者的平均AMG 139半衰期值（分别是26. 6到33. 0天与21. 6到 31. 0天）以及生物利用率（分别是68. 9%与66. 9% )是类似的。在健康受试者（A部分） 间和在患有PsO的受试者（B部分）间，AMG 139的清除率（CL)和分布容积（Vz)对于所有 剂量水平是一致的。
[0072] 另外测试患者样品中抗体与AMG 139的结合。该检验利用了电化学发光 (electrochemiluminescence，ECL)MSD(Meso Scale Discovery)技术平台，该技术平台是 基于抗体结合的多价特征。测试策略涉及一种分层的双检验方法，该方法由筛选检验和特 异性检验组成。在特异性检验中，通过在测试前将样品与过量AMG 139-起温育来进一步 测试在筛选检验中信噪比（S/N)高于检验截止点的样品。
[0073] 为了能解离抗体复合物，在分析之前对样品进行酸处理。将酸处理过的血清样品 和对照物添加到由含等量生物素化AMG 139 (B-AMG 139)和钌化AMG 139 (Ru-AMG 139)的 IM Tris(pH 9. 5)组成的溶液中，并在环境温度下温育以使抗AMG 139抗体结合B-AMG 139 分子和Ru-AMG 139分子，由此形成复合物。
[0074] 温育之后，将所有样品和对照物转移到经过洗涤的涂有抗生蛋白链菌素的标准结 合MSD板中，用牛血清白蛋白阻断，并在环境温度下温育以允许捕捉B-AMG 139和在抗生蛋 白链菌素表面上形成的复合物。洗涤板孔，并且添加含三丙胺的MSD读取缓冲溶液。在MSD Sector Imager 6000板读取器上读取板。在该仪器内了参与在施加电压时触发的电化学 发光反应。被捕捉在板孔上的含Ru-AMG 139的复合物产生的ECL信号与样品中抗AMG 139 抗体的浓度成比例。
[0075] 在本研究中，73位受试者都未产生抗药物抗体。因此，无法评估免疫原性对AMG 139配置的可能影响。
[0076] 表2 :在SC或IV施用单次剂量之后，健康受试者（A部分）和患有PsO的受试者 (B部分）中AMG 139的平均PK参数，研究20080767
[0077]
[0078] AUCinf =从时间0到无穷大的浓度-时间曲线下面积；AUC last =从时间0到最后一 个可测量浓度的时间的浓度-时间曲线下面积；CL=清除率；C_ =给药后所观察到的最大 浓度；％ CV =变异系数；F =生物利用率；IV =静脉内；PsO =银肩病；SC =皮下；