益智叶提取物在制备预防、治疗肝损伤保健品或药物上的应用
【技术领域】[0001] 本发明属于中药技术领域，具体涉及一种益智叶提取物在制备预防、治疗肝损伤保健 品或药物上的应用。
【背景技术】
[0002] 肝脏疾病是影响人类健康的最为常见的疾病之一，从各种途径进入人体的外源性 化学物质和人体代谢产生的有毒有害物质最终都在肝内转化或贮留，这些均可引起急性、 慢性肝损伤，从而导致肝细胞不同程度凋亡、炎症、纤维化、甚至坏死等病理改变。肝损伤是 多种因素如毒物（cci4、ap、1C)的中间产物与大分子物质共价结合、缺氧、脂质过氧化、细胞 内钙稳态失调和内毒素相互作用的结果，而非单一的作用。
[0003] 对于肝脏疾病的治疗应包括：去除致病因素、保护肝脏正常结构和功能、纠正各种 病理生理的状态，以及改善和缓解临床症状等。目前，对肝脏疾病的防治已为全世界所关 注，如何进行有效地预防，不断地开发和寻找疗效肯定、价格低廉的保肝护肝药成为许多医 药工作者的普遍共识。从天然植物中筛选出具有保肝护肝的药物现已成为研究热点。
[0004]四氯化碳（CC14)肝损伤模型是化学性肝损伤的经典模型，能准确反映肝细胞的功 能、代谢及形态学变化，具有重复性好等特点，是研究化学性急性肝损伤动物模型中的常用 模型。公认的其诱导肝损伤的机制为：四氯化碳（CC14)在肝细胞内质网上细胞色素P450 的作用下转化为自由基，该自由基可以与细胞内的生物大分子如核酸、蛋白、脂质发 生共价结合，影响细胞重要的生理过程(如影响脂质代谢，与DNA的结合等)。在有氧环境 下，?CC13与氧结合生成活性更强的CC1 302 ?，后者可引发脂质的过氧化链式反应，破坏多 不饱和脂肪酸，尤其在含丰富磷脂的细胞膜和膜样结构如线粒体和内质网上，导致膜通透 性的改变，引起细胞内钙环境稳态的紊乱，从而加重细胞损伤。
[0005] 肝细胞损伤后，主要分布在肝细胞内的谷草转氨酶（GOT)和谷丙转氨酶（GPT)就 会流入血液，出现血清中的GOT和GPT活性升高的现象，且只要有1%肝细胞坏死，就可使血 清中GPT活性升高1倍。因此，血清GOT和GPT常作为急性或活动性肝病中最敏感的检测指 标，两者含量可用于肝病的筛查，也可用于判断、评价肝病的临床疗效。MDA是脂质过氧化终 产物，可严重破坏细胞膜结构，导致细胞肿胀、凋亡、甚至坏死，其含量高低可反应氧化的损 伤程度。S0D是细胞内主要清除自由基的抗氧化酶，其可抑制自由基启动脂质过氧化反应， 从而保护细胞膜。因此，MDA含量与S0D活性可作为衡量脂质过氧化程度的指标，间接反映 机体组织、细胞损伤的程度。通过检测小鼠肝组织匀浆中的S0D活性及MDA含量可反映出 药物对肝细胞的保护作用。因此，以血清GPT、G0T、肝组织S0D活性及MDA含量作为指标来 探讨药物对肝脏的保护作用是非常有意义的。
[0006]益智（WjOiWaMiq.)，系姜科（Zingiberaceae)山姜属（WjOiWa Roxb.)植物，主要分布于我国海南、广东、广西等地。其干燥成熟果实益智（Fructus AlpiniaeOxyphyllae)，被誉为四大南药之一，具有十分重要的药用价值，且属于药食同源 品种，因此具有十分广阔的开发前景。益智果实作为一门传统中药，被历版《中国人民共和 国药典》收载，其味辛、性温，归脾、肾经。有温脾止泻，摄唾涎，暖肾，固精缩尿的功能。主治 脾寒泄泻，腹中冷痛，口多唾涎，肾虚遗尿，小便频数，遗精白浊。
[0007]近年来，对益智（J力Miq.)的研究报道较多，也更系统，其中主要 是对益智果实的研究。益智果实的传统功效被我国历代中医药学家熟练地运用于临床，而 近年来对其又有了新的进展。现代药理学研究表明，益智果实还具有舒张血管、强心、抗癌、 抗过敏、抗氧化、抗衰老、抗溃疡、镇静、镇痛、提高免疫力以及神经保护等多方面药理活性。 益智果实中主要成分为倍半萜类、其次为黄酮类、二芳基庚烷类、留醇及其苷类化合物。
[0008] 查阅大量文献可发现，对益智的叶子研究报道较少。易美华等研究发现，经提取挥 发油后的益智果实及其茎、叶的提取物对猪油脂质均有较强的抗氧化作用；且均对超氧阴 离子自由基有清除作用，清除能力依次为：益智的叶、益智的茎、提取挥发油后的益智果实。 但目前关于益智叶提取物用于治疗肝损伤方面的研究并未见报道。
【发明内容】
[0009] 本发明目的在于提供一种益智叶提取物在制备预防、治疗肝损伤保健品或药物上 的应用。
[0010] 基于以上目的，本发明采用以下技术方案： 益智叶提取物在制备预防、治疗肝损伤保健品或药物上的应用。
[0011] 具体的，所述益智叶提取物为益智叶的乙酸乙酯部位萃取物和/或正丁醇部位萃 取物。
[0012] 具体的，所述益智叶提取物是由如下方法制得：取干燥益智叶，剪碎，然后加入到 乙醇中（使益智叶完全浸没于乙醇中），加热提取，提取液经浓缩干燥得乙醇总浸膏；将乙醇 总浸膏分散于水中，依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，萃取液挥干溶剂，分别得到乙酸乙酯部 位萃取物、正丁醇部位萃取物。
[0013] 上述制备乙醇总浸膏时，加入的乙醇浓度为75V%，加热温度不超过55°C(以55°C 为宜)，加热提取3次，每次3h。
[0014] 为证实上述益智叶萃取物的保肝作用，本发明采用了四氯化碳诱导小鼠急性肝损 伤模型，考查其对肝损伤的预防和/或治疗作用。试验结果表明：益智叶乙酸乙酯部位萃取 物及正丁醇部位萃取物均具有一定保肝活性。
【附图说明】
[0015] 图1为益智叶不同部位萃取物不同剂量对小鼠血清GPT与GOT活力的影响； 图2为益智叶不同部位萃取物不同剂量对小鼠肝组织中MDA含量的影响； 图3为益智叶不同部位萃取物不同剂量对小鼠肝组织中S0D活力的影响。
【具体实施方式】
[0016] 以下结合实施例对本发明的技术方案作进一步地详细介绍，但本发明的保护范围 并不局限于此。
[0017] 实施例1 益智叶的乙酸乙酯部位萃取物是由以下方法获得：取3400 g干燥益智叶，剪碎后，加 入75V%乙醇(每次加入的乙醇体积均以完全浸没益智叶为准)，55°C提取3次，每次3 h，过 滤，合并滤液，浓缩干燥即得益智叶乙醇总浸膏，得率见表1。将乙醇总浸膏分散于少量水 中，用等体积的乙酸乙酯溶剂进行萃取，收集萃取液，挥干溶剂乙酸乙酯，即得乙酸乙酯部 位萃取物，得率见表1。
[0018] 实施例2 益智叶的正丁醇部位萃取物由以下方法获得：取实施例1中乙酸乙酯萃取过后的剩余 溶液，再用正丁醇进行萃取，收集萃取液，挥干溶剂正丁醇，即得正丁醇部位萃取物，得率见 表1。
[0019] 表1益智叶不同部位萃取物的得率情况
效果实验：益智叶提取物的保肝护肝试验 1.1实验动物：成年昆明小鼠，雌雄各半，体重20 ± 2g。
[0020] 1. 2主要试剂：谷草转氨酶（GOT，批号20150709)、谷丙转氨酶（GPT，批号 20150709)、超氧化物歧化酶（S0D，批号20150717)、丙二醛（MDA，批号20150718);以上试 剂均为南京建成生物工程