本发明涉及化合物Friedolanostanes的新用途，尤其涉及Friedolanostanes在制备抑制肝脏成纤维细胞增殖药物中的应用。
背景技术：
肝纤维化是慢性肝损伤向肝硬化发展的动态过程，过去的20年间，肝纤维化的研究取得了长足进展，证实肝纤维化与一定程度的肝硬化都是可逆的。近年来陆续出现了一些抗肝纤维化治疗方法，包括化学药、生物制剂、中药与基因疗法等，但是理想的临床治疗手段仍然缺乏，目前防治肝纤维的关键是针对与肝星状细胞激活相关的环节，主要是：减轻肝损伤；抑制星状细胞激活，减少细胞外基质产生；调节细胞因子紊乱，促进活化肝星状细胞凋亡。
本发明涉及的化合物Friedolanostanes是一个2013年发表(Saranyoo Klaiklay，et al.,Friedolanostanes and xanthones from the twigs of Garcinia hombroniana.Phytochemistry,85(2013)161–166..)的新化合物，该化合物拥有全新的骨架类型，目前的用途仅仅促进种子发芽，(Saranyoo Klaiklay，et al.,Friedolanostanes and xanthones from the twigs of Garcinia hombroniana.Phytochemistry,85(2013)161–166..)，本发明涉及的Friedolanostanes在制备抑制肝脏成纤维细胞增殖药物中的用途属于首次公开。
技术实现要素：
本发明的目的在于根据现有Friedolanostanes研究中未发现其具有抑制肝脏成纤维细胞增殖活性的报道的现状，提供了Friedolanostanes在制备抑制肝脏成纤维细胞增殖药物中的应用。
所述化合物Friedolanostanes结构如式(Ⅰ)所示：
本发明对Friedolanostanes抑制肝脏成纤维细胞增殖作用进行了药理试验。活化的肝星状细胞(HSC)具有成纤维细胞特征，NIH/3T3细胞是研究药物抗肝纤维化活性常用的细胞模型。本研究以NIH/3T3成纤维细胞为靶细胞，观察发明药物对其增殖的影响。用MTT法检测的抑制细胞增殖的试验结果表明，本发明药物对NIH/3T3的细胞增殖有显著的抑制活性。结果证明Friedolanostanes具有抗肝纤维化作用。
具体实施方式
本发明所涉及化合物Friedolanostanes的制备方法参见文献(Saranyoo Klaiklay，et al.,Friedolanostanes and xanthones from the twigs of Garcinia hombroniana.Phytochemistry,85(2013)161–166..)
以下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实施例的任何限制，而是由权利要求加以限定。
实施例1：本发明所涉及化合物Friedolanostanes片剂的制备：
取5克化合物Friedolanostanes，加入糊精195克，混匀，常规压片制成1000片。
实施例2：本发明所涉及化合物Friedolanostanes胶囊剂的制备：
取5克化合物Friedolanostanes，加入淀粉195克，混匀，装胶囊制成1000粒。
下面通过药效学实验来进一步说明其药物活性。
实验例一：采用MTT法评价化合物Friedolanostanes对肝纤维化的抑制作用
1、方法：NIH/3T3细胞株购自引自ATCC(American Type Culture Collection)的中科院上海细胞所细胞库。将对数生长期的亚融合的NIH/3T3细胞用0.25％胰酶消化，洗涤，离心后，用DMEM培养液(含10％FCS)制成1×104cell/ml的细胞悬液，台盼蓝染色鉴定存活率大于95％，按每孔100ul加入96孔板中，在37℃、5％CO2培养24h同步处理后，弃上清，加入含有不同稀释浓度药物的DMEM培养液(含10％FCS)200ul，培养48h，每孔加入MTT溶液孵育4h。弃去培养液，加入150ulDMSO，振荡10分钟，使结晶溶解，酶标仪490nm处读取OD值，结果以OD490表示。
2.结果：
2.1形态学观察
NIH/3T3在用药前伸展良好，折光性较弱，有方向性，呈放射状，细胞增殖的速度快；而加药物24h后，成纤维细胞数目减少，形状变得不规则，突起变短，细胞排列混乱，细胞内代谢产物增多。
表1：MTT法检测本发明药物对NIH/3T3增殖的抑制作用
注：与细胞阴性对照比较*P<0.05；**P<0.01
结果：本发明药物在10ug/ml-40ug/ml的浓度范围内对成纤维细胞NIH/3T3在10％小牛血清的刺激下的细胞增殖有显著的抑制作用。表明本发明药物体外对纤维细胞的增殖有显著抑制作用。
实验例2：本发明药物对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的成纤维细胞增殖的抑制作用
TGF-β1是促进细胞增殖和胶原生成的强活性因子，在细胞中加入TGF-β110ng/ml刺激细胞增殖，在检测药物对TGF-β1诱导的细胞增殖的抑制作用，以分析判断本发明药物的作用机理。
表2：MTT法检测本发明药物对TGF诱导NIH/3T3增殖的抑制作用
注：*，与细胞+TGF对照P<0.05；**，与细胞+TGF对照P<0.01
结果：本发明药物在10-40ug/ml两个浓度区间内对成纤维细胞NIH/3T3在TGF-β1的诱导下的细胞增殖有显著的抑制作用。表明本发明药物体外对纤维细胞增殖的抑制作用可能是通过干预TGF信号通路实现的。
由上述实施例表明，本发明对成纤维细胞NIH/3T3在10％小牛血清的刺激下的细胞增殖有显著的抑制作用；Friedolanostanes对成纤维细胞NIH/3T3在TGF-β1的诱导下的细胞增殖有显著的抑制作用。由此证明，Friedolanostanes可以明显抑制肝纤维化的发生和发展，可用于制备抗肝纤维化、防治肝硬化的药物。