一种含有荧光增白剂cbs的药物组合物及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及医药领域，具体地，本发明设及一种含有巧光增白剂CBS的药物组合物 及其在抑制红色毛癖菌中的应用。
【背景技术】
[0002] 皮肤癖菌病(dermatop^toses)是由寄生在人体皮肤、毛发和指(趾）甲等角蛋白 组织的皮肤癖菌引起的浅部真菌病，老年人、糖尿病患者及免疫力低下的人群更易患皮肤 病。红色毛癖菌(Trichophyton rubrum)是引发皮肤癖菌病的主要致病菌，约占60% W上。 红色毛癖菌属毛癖菌属，主要感染人的皮肤、指(趾）甲，偶见侵犯毛发，常引起手足癖、体 癖、股癖及甲癖等。红色毛癖菌的流行病学特征，成为人类的丝状真菌感染生物学研究的理 想模型，但是至今却对其主要致病机制及可用于治疗的药物的作用祀点了解甚少。目前开 发出了多种不同的新型抗真菌药物，其中大多数的抗真菌剂都是针对真菌特异性代谢途 径一麦角酱醇生物合成途径开发的，但是抗真菌药物存在毒副作用大和致病菌耐药性问 题。因此，发现和研究W细胞壁的合成途径为药物祀标的药物及其衍生药物对临床治疗皮 肤癖菌引起的浅部真菌病W及克服真菌耐药性有重要的意义。2012年，Kingsbury等人研究 发现，二苯乙締类巧光增白剂对红色毛癖菌及白色念珠菌有抗菌活性，如卡尔科弗卢尔巧 光增白剂(Calcofluor怖ite，简称CFW)。
[0003] 巧光增白剂CBS全称二苯乙締联苯二横酸钢，是一种新型巧光增白剂。具有优良的 耐氯漂、耐酸碱、耐日晒性能，是轻工、纺织及日化行业的理想添加剂。巧光增白剂CBS广泛 用于纺织、洗涂剂和造纸工业中，具有一定的美白效果，全面的毒理学研究表明巧光增白剂 CBS对哺乳动物无毒害作用。目前尚没有将巧光增白剂CBS用于抑制真菌的报道。
【发明内容】
[0004] 本发明的发明人在研究中发现，巧光增白剂CBS对于真菌具有抑制作用，并且在进 一步的研究中发现巧光增白剂与抗真菌药物具有协同作用，与抗真菌药物联用可W起到显 著的抑制真菌的效果。本发明的目的之一就是提供一种含有巧光增白剂CBS的用于治疗皮 肤癖菌病的药物组合物，并且进一步提供了将巧光增白剂与抗真菌药物联用治疗皮肤癖菌 病的药物组合物。
[000引为实现上述目的，本发明提供如下的技术方案：
[0006] -种用于治疗皮肤癖菌病的药物组合物，所述药物组合物包含巧光增白剂CBS，任 选地包含药学上可接受的辅料。
[0007] 在根据本发明的一个实施方案中，所述药物组合物中巧光增白剂CBS的浓度为 0.02~lOmg/ml;优选为2.5mg/ml。
[0008] 本发明还提供了一种有效成分包含巧光增白剂CBS和抗真菌药物的药物组合物； 优选地，所述抗真菌药物选自盐酸特比糞芬和酬康挫中的一种或两种。
[0009] 在根据本发明的一个实施方案中，所述药物组合物的有效成分为巧光增白剂CBS 和酬康挫时，其中，酬康挫的浓度为化g/ml，巧光增白剂CBS的浓度为2.5mg/ml。
[0010] 在根据本发明的一个实施方案中，所述药物组合物的有效成分为巧光增白剂CBS 和盐酸特比糞芬时，其中，盐酸特比糞芬的浓度为〇.〇625μg/ml，巧光增白剂CBS的浓度为 5m邑/ml。
[0011] 在根据本发明的一个实施方案中，所述药物组合物的有效成分为巧光增白剂CBS、 酬康挫和盐酸特比糞芬时，其中，巧光增白剂CBS的浓度为0.5~5mg/ml，酬康挫的浓度为 1.5~化g/ml，盐酸特比糞芬的浓度为0.05~0.扣g/ml;优选地，所述药物组合物还包含十 二烷基横酸钢和氮酬，所述十二烷基横酸钢的浓度为2~20mg/ml，所述氮酬的浓度为6~ 24mg/ml;更优选地，所述药物组合物包含巧光增白剂CBS、酬康挫、盐酸特比糞芬，十二烷基 横酸钢和氮酬时，巧光增白剂CBS的浓度为1.861mg/ml，酬康挫的浓度为1.扣g/ml，盐酸特 比糞芬的浓度为0.17化g/ml，十二烷基横酸钢的浓度为0.0774mg/ml，氮酬的浓度为6mg/ ml O
[0012] 本发明还提供了巧光增白剂CBS在制备用于治疗皮肤癖菌病的药物中的应用。优 选地，所述皮肤癖菌病的致病菌为红色毛癖菌。
[0013] 本发明还提供了巧光增白剂CBS协同抗真菌药物在制备用于治疗皮肤癖菌病的药 物中的应用。优选地，所述抗真菌药物选自盐酸特比糞芬和酬康挫中的一种或两种;更优选 地，所述皮肤癖菌病的致病菌为红色毛癖菌
[0014] 由于采用了上述技术方案，本发明具有如下的优点：
[0015] 本发明在研究中发现，巧光增白剂CBS能够有效的抑制皮肤癖菌病的致病菌，尤其 是对红色毛癖菌具有显著的抑制作用。本发明通过优化配方药物治疗的豚鼠治愈的时间较 单一用药治疗的豚鼠平均缩短6天左右，也可W初步反应出优化配方药物明显缩短了治疗 时间，提高了治愈率。同时，使用巧光增白剂与抗菌药物联用，可在减少抗菌药物用量的同 时，显著降低了抗菌药物的毒副作用，有助于提高用药安全。
【附图说明】
[0016] 图1为实施例1中红色毛癖菌纸片扩散法实验的结果，其中a为巧光增白剂CBS浓度 为5mg/ml时的抑菌效果;b为巧光增白剂CBS浓度为lOmg/ml时的抑菌效果。
[0017] 图2A~C显示单一药物对红色毛癖菌的抑制率;其中，图2A为巧光增白剂对红色毛 癖菌的抑制作用；图2B为酬康挫对红色毛癖菌的抑制作用；图2C为盐酸特比糞芬对红色毛 癖菌的抑制作用。
[0018] 图3为巧光增白剂CBS与酬康挫联合用药与两者分别单一用药时的抑菌效果柱形 图；其中，a为巧光增白剂单一用药抑制率;b为两者联合用药抑制率;C为酬康挫单一用药抑 制率。
[0019] 图4为巧光增白剂CBS盐酸特比糞芬联合用药与两者分别单一用药时的抑菌效果 柱形力；其中，a为巧光增白剂CBS单一用药的抑制率;b为两者联合用药的抑制率;C为盐酸 特比糞芬单一用药的抑制率。
[0020] 图5为豚鼠模型的表观变化；其中，a为剪毛并脱毛后的豚鼠；b为毛发生长10日后 的空白对照组豚鼠；C为毛发生长10日的阳性对照组豚鼠；d为联合用药10天后的实验组豚 赢D
[0021] 图6为对模型豚鼠的皮肤组织进行检测的结果图；其中，a为空白对照组豚鼠；b为 用配方药组豚鼠；C为阳性对照组豚鼠；空白对照组皿切片为正常皮肤组织形态，阳性对照 组皿切片可见真皮层细胞浸润，细胞间液体增加，使细胞间的间隙增宽，细胞间桥拉长，形 成海绵水肿，毛囊部位有菌丝及抱子存在；用配方药组的豚鼠皮肤的皿切片与空白对照组 的正常皮肤组织无异，未发现菌丝和抱子的存在。
【具体实施方式】
[0022] 为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，W下结合附图及实施例，对 本发明进一步详细说明。应当理解，此处说描述的具体实施例仅用W解释本发明，并不用于 限定本发明。
[0023] 一、试剂和材料
[0024] 红色毛癖菌等（重庆大坪医院皮肤科）；豚鼠（重庆市中药研究院）；二甲基亚讽、 SDS、氮酬等(成都市科龙化工试剂厂）；巧光增白剂CBS(河北=川化工公司）；盐酸特比糞芬 (沈阳日曜药业公司）；酬康挫(大连美仑生物技术公司）；地塞米松注射液(广西安康药业公 司）；曲安奈德注射液(西安南德药业股份公司）。
[0025] 实施例1CBS滤纸片扩散法实验检测巧光增白剂CBS的抗菌作用
[0026] 定性滤纸打孔为直径6mm的圆形纸片，灭菌后部分浸泡于巧光增白剂CBS药液 (5mg/ml、lOmg/ml)，部分浸泡于无菌生理盐水，备用。取菌悬液均匀涂抹于固体平板，人为 将平板分为四部分，浸药滤纸片贴于其中3部分，最后一部分作为空白对照贴上。在28°C下 培养7d后观察。如图1所示，浸药滤纸片的周围有一定程度的抑菌圈出现。空白对照滤纸长 满菌。由此可见，CBS对红色毛癖菌有抑制作用。
[0027] 实施例2单一用药对红色毛癖菌的抗菌作用
[0028] 准确称取适量盐酸特比奈芬，加入二甲基亚讽充分溶解，然后用沙±葡萄糖液体 培养基配制成0.5、0.25、0.125、0.062扣g/ml等10个梯度浓度备用；同理准确称取适量酬康 挫配制成16、8、4、2iig/ml等10个浓度梯度备用；准确称取适量巧光增白剂CBS，加入沙±葡 萄糖液体培养基配制成10、5、2.5、1.25mg/mL等10个浓度梯度备用。用移液枪吸取10化L的 样品溶液及阳性对照溶液(沙±葡萄糖液体培养基），菌悬液10化L，依次加入96孔板，W及 空白对照(沙±葡萄糖液体培养基)200化。恒溫培养9化后，加入20化的MTT，继续解育3h，每 孔吸出10化L上清液，再加入10化L二甲亚讽，酶标仪530nm检测吸光度值并记录。用下列公 式计算抑制率:抑制率=(1-测定孔OD值/阳性对照孔OD值）X 100%，即得到抑制率。如图2A ~C所示，单一用药时，巧光增白剂CBS在浓度2.5mg/ml时对红色毛癖菌的抑制作用最强;