一种壳聚糖多孔止血海绵的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于医用止血材料制备领域，具体是一种壳聚糖多孔止血海绵的制备方法。
【背景技术】
[0002]多年来，关于止血材料的研究越来越多，大都是天然产物可以体内降解的止血材料，比如纤维蛋白胶、粉末状胶原蛋白、明胶海绵，但是这些材料都存在一定的缺点，纤维蛋白胶来源于人或哺乳动物的血浆中，只限于局部应用，可能传染人或动物的血源性疾病;胶原蛋白作为一种异物，可能导致伤口发热和过敏；明胶海绵机械性能差，容易破裂。还有一些国外进口的止血材料，如速即纱，虽然止血效果好，但是价格昂贵，限制了其应用范围。因此，一种具有良好止血效果、较强抗菌性、较好的促伤口愈合能力以及可以在体内降解的止血材料十分重要。
[0003]目前，以壳聚糖为主要成分作为止血材料具有广泛的研究和应用前景，其具有止血、抑菌、抗癌、降脂、增强免疫力等多种生理功能和良好的组织相容性和较高的生物活性，且无毒，无刺激，可以自然降解。许多研究者选择壳聚糖制备多孔止血材料，一般利用较低浓度的醋酸溶液溶解壳聚糖，通过冷冻干燥的方法获得。但壳聚糖的溶解度相对较低，只有3%?4%。较低壳聚糖浓度的止血材料一方面影响止血材料的止血效果，另一方面影响止血材料的机械性能。除此之外，醋酸对人体有较大的刺激性，其作为溶解剂增加了材料使用的不安全性。为了提高材料的机械性能和生物安全性能，就需要选择合适的天然生物材料进行共混和选择无毒无害的交联剂进行交联，同时需要降低或者消除醋酸的在材料的含量。
[0004]作为有效的多孔止血材料，选择合适的材料还是不够的，还需要将材料制备成具有特定孔结构，具有较强的吸水功能。一般制孔的方法有粒子溶出法、相分离法、冷冻干燥法、气体发泡法、烧结微球法等，但是如何选择合适的制孔方法，制备具有均匀孔径大小，高孔隙率的孔结构，且具有很好的亲水性和一定强度的材料，仍然是一个技术难题。
【发明内容】
[0005]本发明所要解决的技术问题是提供一种制备简单，成品壳聚糖含量高、可自然降解、止血速度快、抗菌效果好、无毒、无刺激、机械性能和生物安全性能好、孔径大小均匀、高孔隙率的壳聚糖多孔止血海绵的制备方法。
[0006]本发明解决上述技术问题的技术方案如下:一种壳聚糖多孔止血海绵的制备方法，包括以下步骤:
[0007]步骤一，溶液的配制:
[0008]I)配制壳聚糖溶液，称取抗坏血酸加入到蒸馏水中，在40°C?50°C水浴条件下充分搅拌溶解，制得0.05mol/L?0.3mol/L的抗坏血酸溶液;量取醋酸加入到容量瓶中定容，制得体积百分浓度为0.1 %?0.5 %的醋酸溶液;称取壳聚糖加入到所述抗坏血酸溶液中，充分混合后，加入所述醋酸溶液，在40°C?50°C水浴条件下搅拌均匀，得到质量百分浓度为5%?8%的壳聚糖溶液，保存使用，其中加入的所述醋酸溶液占总溶液的0.2%?0.5% ;
[0009]2)配制明胶溶液，称取明胶加入到蒸馏水中，在40°C?85°C水浴条件中充分溶解，制得质量百分浓度为0.5 %?4 %的明胶溶液，保存使用；
[0010]3)配制甘油溶液，称取甘油加入到蒸馏水中，搅拌均匀，制得质量百分浓度为40%?50 %的甘油溶液，保存使用；
[0011]4)配制氯化钙溶液，称取氯化钙加入到蒸馏水中，制得质量百分浓度为10%?30 %的氯化钙溶液，保存使用；
[0012]5)配制交联剂，称取单宁酸加入到蒸馏水中，制得质量百分浓度为0.5%?5%的单宁酸溶液，保存使用；
[0013]步骤二，壳聚糖多孔止血海绵的制备:
[0014]取所述壳聚糖溶液、明胶溶液和甘油溶液按照3: 3: I的体积比在25°C?50°C水浴条件中充分搅拌混合，得到混合乳白色凝胶液，而后取所述氯化钙溶液加入，在25°C?50°C水浴条件中充分搅拌30min?120min，再取所述单宁酸溶液加入，在25°C?50°C水浴条件中继续搅拌20min?50min，得到混合丹红色凝胶液，在得到的所述混合丹红色凝胶液中所述氯化钙溶液和单宁酸溶液分别占比0.5 %?4%和0.01 %?0.1 % ;取所述混合丹红色凝胶液，倒入模具中，预冻12h以上呈冰块状，再真空冷冻干燥48h?72h后得到壳聚糖多孔止血海绵。
[0015]本发明的有益效果是:制备简单，成品壳聚糖含量高、可自然降解、止血速度快、抗菌效果好、无毒、无刺激、机械性能和安全性能好、孔径大小均勾(孔径为lOOwn?200μηι)、高孔隙率。
[0016]优选地，步骤一所述容量瓶为IOOml的容量瓶，便于少量所述醋酸溶液定容。
[0017]优选地，步骤一所述壳聚糖溶液、甘油溶液、氯化钙溶液和单宁酸溶液的保存使用温度环境均为30°C?40°C，确保所述壳聚糖溶液、甘油溶液、氯化钙溶液、单宁酸溶液的分子结构稳定性，利于壳聚糖多孔止血海绵的制备。
[0018]优选地，步骤一所述明胶溶液的保存使用温度环境为30°C?50°C，确保所述明胶溶液的分子结构稳定性，利于壳聚糖多孔止血海绵的制备。
[0019]优选地，步骤二所述混合丹红色凝胶液的预冻温度环境为-20°C?_80°C，确保所述混合丹红色凝胶液被冻结呈冰块状，利于得到壳聚糖多孔止血海绵。
【具体实施方式】
[0020]以下对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
[0021]实施例1，一种壳聚糖多孔止血海绵的制备方法，包括以下步骤:
[0022]步骤一，溶液的配制:
[0023]I)配制壳聚糖溶液，称取抗坏血酸加入到蒸馏水中，在40°C?50°C水浴条件下充分搅拌溶解，制得0.05moVL?0.3mol/L的抗坏血酸溶液;量取醋酸加入到10ml容量瓶中定容，制得体积百分浓度为0.1 %?0.5 %的醋酸溶液;称取壳聚糖加入到抗坏血酸溶液中，充分混合后，加入醋酸溶液，在40°C?50°C水浴条件下搅拌均匀，得到质量百分浓度为5%?8%的壳聚糖溶液，保存使用，其中加入的醋酸溶液占总溶液的0.2%?0.5% ;
[0024]2)配制明胶溶液，称取明胶加入到蒸馏水中，在40°C?85°C水浴条件中充分溶解，制得0.5 %?4%的明胶溶液，30°C?50°C下保存使用；
[0025]3)配制甘油溶液，称取甘油加入到蒸馏水中，搅拌均匀，制得40%?50%的甘油溶液，30 %?40°C下保存使用；
[0026]4)配制氯化钙溶液，称取氯化钙加入到蒸馏水中，制得10%?30%的氯化钙溶液，30%?40°C下保存使用；
[0027]5)配制交联剂，称取单宁酸加入到蒸馏水中，制得0.5%?5%的单宁酸溶液，30%?40°C下保存使用；
[0028]步骤二，壳聚糖多孔止血海绵的制备:
[0029]取所述壳聚糖溶液、明胶溶液和甘油溶液按照3: 3:1的体积比在25°C水浴条件中充分搅拌混合，得到混合乳白色凝胶液，而后