一种黄体酮缓释微囊制剂及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种黄体酮缓释微囊制剂及其制备方法，属于药物技术领域。本发明把油溶性的黄体酮粉末制备成油溶液，采用乳化—溶剂扩散法制备得到了黄体酮缓释微囊。本发明方法黄体酮粉末制成油溶液增加了其溶解性能，同时优选了壁材，改善了其体内体外的释放情况。本发明制备的黄体酮?乙基纤维素缓释微囊载药量可达10％，粒径小于150μm，胃肠道分布面积大，提高了黄体酮溶解性，可提高生物利用度，减少胃肠道刺激性，利于降低药物的毒副作用。
【专利说明】
一种黄体酮缓释微囊制剂及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及医药领域，具体地，涉及一种黄体酮微囊缓释制剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 黄体酮是由卵巢黄体分泌的一种人体天然孕激素，为维持妊娠所必需，具有孕激 素的一般作用。它往往在雌激素作用的基础上产生效用，能使子宫内膜从增生期转化为分 泌期，从而促进子宫内膜成熟、剥落并维持月经周期；还可使子宫做好接受胚胎植入的准 备，在妊娠早期可稳定子宫内膜并起保胎作用，是妊娠成功所必需的条件。在临床上主要用 于月经失调、闭经、功能失调性子宫出血、黄体功能不足、先兆流产和习惯性流产、经前期综 合征及围绝经期综合征的激素替代治疗等。
[0003] 黄体酮有肌内注射、口服及阴道用药。口服黄体酮依从性好，但黄体酮溶解度很低 (仅为2mg/L)，体内吸收差，且存在强的首过效应，生物利用度很低且患者个体差异较大;肌 内注射黄体酮是最传统的方式，价格便宜，疗效已被公认，但针剂为油性，肌内注射后容易 引起局部发生严重的变态反应。部分患者由于黄体酮注射剂累计使用较多，炎性反应、变态 反应逐渐加重，严重者可出现脓肿，需要外科手术，从而影响疗效;对于黄体酮的阴道用药， 主要为黄体酮阴道缓释凝胶（雪诺同）和黄体酮栓剂(cyclogest)。黄体酮栓剂为子弹头造 型，需要用手推入阴道，无给药器，污染风险增加，药物一旦漏出，外阴刺激、过敏等不良反 应可能增加。黄体酮阴道缓释凝胶因为具有独特子宫首过效应和生物黏附缓释系统，确保 药效稳定，有专为阴道使用的给药器，直接注入阴道即可，但阴道给药较不方便，尤其中国 女性较为保守，不宜被接受。
[0004] 微囊(microcapsules)是利用天然或合成的高分子材料将固体或液体药物包裹成 微型胶囊，简称微囊。制备微囊的过程为微型包囊技术(microcapsulat ion)，简称微囊化 (利用天然的或合成的高分子成膜材料(囊材)把液体或固体药物（囊心物)包嵌形成直径 15000μπι(通常为5-250μπι)微小胶囊的技术）。囊膜具有透膜或半透膜性质，囊心物可借压 力、pH值、温度或提取等方法释出。添加缓控释辅料使微囊长效化，可制得缓控释微囊。缓释 微囊制剂技术首先用天然的或合成的高分子材料作为囊膜壁壳将固体药物或液体药物包 裹制成缓释微囊，再将微囊与辅料均匀混合填装胶囊或者压制成片剂。与传统缓释剂型相 比，它具有多单位给药系统，每一个单位可以作为独立的扩散系统，弥补传统缓释制剂存在 的剂量突释缺点，提供平稳适宜的血药浓度。缓释微囊使药物安全性、有效性、适应性有了 很大提高，是一种极具开发潜力的新剂型。乙基纤维素(EC)是纤维素链中的部分羟基被乙 氧基取代的纤维素衍生物，是应用最广泛的水不溶性纤维素衍生物之一，在药剂中有多种 用途:可用作片剂粘合剂、薄膜包衣材料，亦可用作骨架材料制备多种类型的骨架缓释片， 缓释微丸，可用作包囊辅料制备缓释微囊，还可作为载体材料广泛地用于制备固体分散体。
[0005] 据调查，目前国内外尚无黄体酮相关缓释口服制剂上市，但有少数相关报道将此 技术应用于黄体酮，例如黄体酮聚乳酸微球，类似研究较少。专利方面，申请号 201410116471.9的中国专利公布了 一种由黄体酮、赋形剂、薄膜包衣材料、润湿剂、和粘合 剂组成的黄体酮缓释胶囊，但该胶囊内容物为小丸剂，体表面积较大，所需辅料种类繁多， 工艺处方复杂。又如文献《黄体酮聚乳酸微球制备及其体外释药特性研究》中报道了一种黄 体酮聚乳酸微球的制备方法。所制备的微球光滑、圆整、均匀、分散性好。其载药量为（10.63 ±0.05) %，但在7d内累积释药率仅有53.41 %，若制成制剂，每日服用剂量很大，不宜为患 者接受。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的之一是针对现有技术中服用剂量大、溶出度低、作用时间短、生物利 用度低和不良反应严重的缺陷，提出一种溶出度高、作用时间长的黄体酮微囊缓释制剂及 其制备方法，以实现服用剂量小、服用次数少、溶出度高、生物利用度高和不良反应少。
[0007] -种黄体酮缓释微囊的制备方法，包括如下步骤：（1)将黄体酮粉末溶于非极性溶 剂中得到黄体酮油溶液，（2)将缓释骨架基质溶解在挥发性溶剂中，得到混悬液a; (3)将黄 体酮油溶液加入到混悬液a，得到混悬液b; (4)将表面活性剂溶解在非挥发性高沸点液体 中，得到溶液c; (5)将混悬液b缓慢加入到溶液c中，搅拌，制成乳浊液即黄体酮微囊缓释制 剂；（6)将乳浊液缓慢加至一定量蒸馏水中，连续搅拌1-2小时，然后抽滤，固体用水洗涤，干 燥。
[0008] 所述缓释骨架基质为甲基纤维素、乙基纤维素、醋酸纤维素、羟丙甲基纤维素的一 种或几种。
[0009] 所述步骤(1)中还加入有增溶剂。
[0010] 按重量份计，各成分的用量优选为： 黄体酮粉末 5-20份 增溶剂 1-3份
[0011] 非极性溶剂 40-50份 缓释骨架基质 6-10份 挥发性溶剂 100-250份 表面活性剂 6-20份
[0012] 非挥发性高沸点液体 600-1200份 蒸馏水 6000-10000份
[0013]更优选的，各成分的用量为： 黄体酮粉末 5份 增溶剂 2份 非极性溶剂 45份 缓释骨架基质 6份
[0014] 挥发性溶剂 100份 表面活性剂 6份 非挥发性高沸点液体 600汾 蒸馏水 6000份
[0015]所述缓释骨架基质为甲基纤维素、乙基纤维素、醋酸纤维素、羟丙甲基纤维素的一 种或几种。
[0016] 所述缓释骨架基质为乙基纤维素，其粉末的粒径为40-100目，粘度规格为10CP。
[0017] 所述非极性溶剂为植物油或动物油。
[0018] 所述植物油为花生油、大豆油、菜籽油、玉米油、橄榄油、葵花籽油、芝麻油、亚麻籽 油、棉籽油、米糠油、椰子油、油茶籽油、低芥酸菜籽油、花椒油、辣椒油等中的一种或几种。
[0019] 所述动物油为猪油、牛油、羊油、鸡油、鸭油等动物脂肪油中的一种或几种。
[0020] 所述挥发性溶剂为醋酸乙酯或丙酮的一种。
[0021] 所述表面活性剂为十二烷基硫酸钠、聚山梨酯-80、泊洛沙姆、聚乙二醇辛酸甘油 酯、聚乙二醇葵酸甘油酯、聚乙二醇月桂酸甘油酯或聚乙二醇硬脂酸甘油酯。
[0022]所述非挥发性高沸点液体为水或液体石蜡。
[0023]所述增溶剂优选为大豆卵磷脂或蛋黄卵磷脂。
[0024]上述方法制备得到的黄体酮缓释微囊。
[0025] 一种黄体酮缓释微囊制剂，包含有上述黄体酮缓释微囊。
[0026] 本发明采用室温下乳化一溶剂扩散法制备微囊。乳化一溶剂扩散法是将难溶性药 物或挥发性药物分散在囊材的有机溶剂中，再加至加有乳化剂的连续相中乳化，得到乳浊 液，再将此乳浊液缓慢倾入过量的水中，有机溶剂扩散萃取，由于囊材的溶解度降低，引起 相分离而形成微囊。本发明把油溶性的黄体酮粉末制备成油溶液，增加了其溶解性能，改善 了其体内体外的释放情况。本发明制备的黄体酮-乙基纤维素缓释微囊载药量可达10%，粒 径小于150μπι，胃肠道分布面积大，提高了黄体酮溶解性，可提高生物利用度，减少胃肠道刺 激性，利于降低药物的毒副作用。
[0027] 缓释骨架基质的种类及用量的选择直接关系到药物释放的速率乃至制剂的稳定 性，发明人通过大量的试验最终确定，缓释骨架基质由乙基纤维素组成，尤其是乙基纤维素 粉末的粒径为40-100目，粘度规格为10CP组成的缓释骨架基质，药物释放最为平稳，血药浓 度波动最小，能够在24小时内平稳的释放，具有最佳的缓释效果。
[0028 ]上述制备方法制得的黄体酮缓释微囊可进一步制成胶囊剂、片剂等药物制剂。其 可以通过本领域常规的药物制剂制备方法获得。
[0029]与现有技术相比，本发明的优越性体现在以下三个方面：
[0030] (1)微囊的壁材不同，可以直接影响药物释放的速率乃至制剂的稳定性，发明人采 用不同壁材进行实验，包裹黄体酮油溶液制成微囊，例如：以最常用的海藻酸钠、氯化钙、壳 聚糖为壁材，将黄体酮油溶液溶于海藻酸钠溶液，滴入或喷入氯化钙溶液，固化后包裹壳聚 糖，以该种方式制备的微囊，囊形圆整无黏连，粒度分布均匀，但均存在不同程度的漏油情 况，且随着放置时间的增长，漏油情况愈加严重。体外释放性实验表明：不同浓度的壁材制 备的微囊，均在3小时内释放完毕，不能达到缓释效果。说明海藻酸钠不适合作为黄体酮微 囊的壁材。
[0031] (2)微囊的制备方法有多种，本发明采用乙基纤维素为囊材，以极性适宜的醋酸乙 酯或丙酮的一种作囊材的溶剂，将药物溶解于载体材料有机溶剂中，可制得理想的微囊。采 用该方法制备的微囊，囊形圆整无粘连，粒度分布均匀，重现性好，所得的微囊具有较高的 载药量和包封率;此外该方法操作简便，成本低廉，易于成型，适合于工业化生产。
[0032] (3)有专利或文献报道直接采用黄体酮粉末加赋形剂或缓释骨架基质制成小微 丸，这种形式的微丸存在的一个缺点是:黄体酮在水中极难溶解，造成黄体酮的释放缓慢， 而患者对黄体酮的吸收仍然较小，不能增加生物利用度。本发明将难溶性的黄体酮粉末预 先溶于卵磷脂、植物油/动物油中，一方面采用非极性溶剂溶解黄体酮，采用卵磷脂增加黄 体酮溶解度，可以增加黄体酮在患者体内的溶出度；另一方面采用乳化一溶剂扩散法包封 黄体酮油溶液使液体制剂固体化，可以增加黄体酮的稳定性，延长作用时间，同时也有利于 提高药物的生物利用度和治疗指数，提高患者对黄体酮的吸收度和减少肝脏代谢多余黄体 酮的负担，从而实现服用剂量小、作用时间长、生物利用度高和不良反应少的优点。
【附图说明】
[0033]图1本发明所述微囊的制备流程图。
[0034]图2以海藻酸钠、聚乳酸为壁材的黄体酮缓释微囊体外溶出度。
[0035]图3黄体酮-乙基纤维素缓释微囊制剂体外的溶出度。
[0036]根据实验结果，说明该微囊有明显的缓释性能，能使药物在24小时缓慢释放，达到 了缓释目的。
[0037]图4本发明所述黄体酮缓释微囊(左)及乙基纤维素空白微囊(右)的光学显微镜图 [0038]图5黄体酮-乙基纤维素缓释微囊制剂与对照组安琪坦在比格犬的药时曲线。
【具体实施方式】
[0039] 下面结合实施例对本发明作进一步说明。
[0040] 本发明黄体酮-乙基纤维素缓释微囊的粒径小于150μπι，微囊中黄体酮含量为 1.0 % -10 % (重量百分比），在水中持续释放时间为12-48小时。
[0041 ]所述黄体酮-乙基纤维素缓释微囊由下述方法制得：
[0042] 实施例1 黄体酮 .5份 大豆卵磷脂 2汾 大豆油 45份 乙基纤维素 6份
[0043] 丙酮 100份 吐温-8Q 后份 液体石蜡 600份· 蒸馏水 6000份
[0044] 将黄体酮粉末、大豆磷脂溶于大豆油中，获得黄体酮油溶液，备用;将乙基纤维素 溶解在丙酮中，得到混悬液a;在搅拌状态下，将黄体酮油溶液，加入到混悬液a，得到混悬液 b。将吐温-80溶解在液体石蜡中，得到溶液c。将混悬液b缓慢加入到溶液c中，搅拌30min制 成乳浊液。将乳浊液缓慢加至一定量蒸馏水中，连续搅拌1-2小时，然后抽滤，固体用水洗 涤，干燥，装入胶囊壳。制备工艺过程见图1。
[0045] 该黄体酮-乙基纤维素缓释微囊粒径小于150μπι，微囊中黄体酮含量为2.0% (重量 百分比），在水中黄体酮24小时时的累积溶出度为92%。图4。
[0046] 实施例2 黄体酮 1Θ份 蛋黄卵磷脂 2份 花生油 45份 乙基纤维素 8份
[0047] 醋酸乙酯 100份 SDS 6 份 液体石蜡_ 800佾 蒸馏水 8000份
[0048]将黄体酮粉末、蛋黄卵磷脂溶于花生油中，获得黄体酮油溶液，备用;将乙基纤维 素溶解在醋酸乙酯中，得到混悬液a;在搅拌状态下，将黄体酮油溶液，加入到混悬液a，得到 混悬液b。将SDS溶解在液体石蜡中，得到溶液c。将混悬液b缓慢加入到溶液c中，搅拌30min 制成乳浊液。将乳浊液缓慢加至一定量蒸馏水中，连续搅拌1-2小时，然后抽滤，固体用水洗 涤，干燥，装入胶囊壳。
[0049] 该黄体酮-乙基纤维素缓释微囊粒径小于100μπι，微囊中黄体酮含量为5.0% (重量 百分比），在水中黄体酮24小时时的累积溶出度为97%。
[0050] 实施例3 黄体酮 1§份 蛋黄卵磷脂 3份 椰子油 50份 乙基纤维素 1Q #
[0051] 丙酮 200份 聚乙二醇月桂酸甘油酯 6份 水 700份 蒸馈水 10000份
[0052]将黄体酮粉末、蛋黄卵磷脂溶于椰子油中，获得黄体酮油溶液，备用;将乙基纤维 素溶解在丙酮中，得到混悬液a;在搅拌状态下，将黄体酮油溶液，加入到混悬液a，得到混悬 液b。将聚乙二醇月桂酸甘油酯溶解在水中，得到溶液c。将混悬液b缓慢加入到溶液c中，搅 拌30min制成乳浊液。将乳浊液缓慢加至一定量蒸馏水中，连续搅拌1-2小时，然后抽滤，固 体用水洗涤，干燥，装入胶囊壳。
[0053]该黄体酮-乙基纤维素缓释微囊粒径小于150μπι，微囊中黄体酮含量为4.0% (重量 百分比），在水中黄体酮24小时时的累积溶出度为82%。
[0054] 实施例4黄体酮缓释制剂体外溶出度
[0055] 研究不同制剂组分的体外释放情况。
[0056] 1、溶出介质的选择:本品中药物黄体酮难溶于水，在水、人工胃液、人工肠液中均 不符合漏槽条件。经过大量实验筛选，〇. 5 %十二烷基硫酸钠可以满足本实验要求。
[0057] 2、体外溶出释放实验。
[0058]溶出度数据见表1，图2、3所示。
[0059]表 1
[0061 ] A组微囊以1.5 %的海藻酸钠为壁材，将黄体酮油溶液与之混合喷入1.5 %氯化钙 溶液中取出、晾干，即得微囊。
[0062] B组微囊以聚乳酸-聚乙二醇共聚物为载体材料，醋酸乙酯为有机溶剂，采用乳 化一溶剂扩散法制备微囊。A、B组微囊制剂溶出速度快，实验3小时就释放完全，累积释放百 分率达到99 %以上，达不到缓释效果。
[0063] C、D、E组分别是本发明的实施例1、2、3，在体外溶出实验中24内小时释放平稳，可 一定程度反应该制剂在体内的释放过程。
[0064] 实施例5对黄体酮缓释制剂体内吸收药动学研究
[0065] 选取健康的雄性beagle犬共10只，随机分为2组，其中1组给予黄体酮软胶囊(安琪 坦，l〇〇mg)为对照组，另一组给予实施例l，100mg为实验组。给药前一天16小时后至给药后3 小时禁食不禁水，每个给药周期分别在不同时间点自犬前腿静脉抽取静脉血2ml于肝素抗 凝管中，30min内离心获取血浆，所获血浆-20 °C冷冻保存待测。采血点分别为服药前1小时 内及给药后 0.25,0.5，l，1.5,2,4,6,8，10，12，18,24h。
[0066] 给药方法:将受试犬嘴部朝上用劲掰开，压舌板压住舌根，将药丸扔至喉部，闭合 嘴部，待受试犬将药丸咽下，观察口腔内部是否有残留的药丸。确定完全咽下后再将受试犬 放回笼中。采用液质联用测定不同时间血浆中的药物浓度，数据录入DAS软件，统计分析结 果，如表1所示及见图5。
[0067] 表1药动实验参数
[0069]由药动学参数可知，黄体酮缓释制剂可以明显降低血药浓度，延长作用时间，从而 减少患者不良反应。
【主权项】
1. 一种黄体酮缓释微囊的制备方法，包括如下步骤：（1)将黄体酮粉末溶于非极性溶剂 中得到黄体酮油溶液，（2)将缓释骨架基质溶解在挥发性溶剂中，得到混悬液a; (3)将黄体 酮油溶液加入到混悬液a，得到混悬液b; (4)将表面活性剂溶解在非挥发性高沸点液体中， 得到溶液c; (5)将混悬液b缓慢加入到溶液c中，搅拌，制成乳浊液即黄体酮微囊缓释制剂。 (6)将乳浊液缓慢加至一定量蒸馏水中，连续搅拌1-2小时，然后抽滤，固体用蒸馏水洗涤， 干燥;所述缓释骨架基质为甲基纤维素、乙基纤维素、醋酸纤维素、羟丙甲基纤维素的一种 或几种。2. 根据权利要求1所述的制备方法，所述步骤(1)中还加入有增溶剂。3. 根据权利要求2所述的制备方法，按重量份计，各成分的用量优选为： 黄体酮粉末 5-20份 增溶剂 1-3份 非极性溶剂 40-50份 缓释骨架基质 6-10份 挥发性溶剂 100-250份 ° 表面活性剂 6-20份 非挥发性高沸点液体 600-1200份 蒸馏水 6000-10000份4. 根据权利要求2所述的制备方法，各成分的用量为： 黄体酮粉末 5份 增溶剂 2份 非极性溶剂 4§份 缓释骨架基质 6份 挥发性溶剂 100份° 表面活性剂 6份 非挥发性高沸点液体 600份 蒸馏水 6000份5. 根据权利要求2所述的制备方法，所述缓释骨架基质为乙基纤维素，其粉末的粒径为 40-100目，粘度规格为10CP。6. 根据权利要求1所述的制备方法，所述非极性溶剂为植物油或动物油。7. 根据权利要求6所述的制备方法，所述植物油为花生油、大豆油、菜籽油、玉米油、橄 榄油、葵花籽油、芝麻油、亚麻籽油、棉籽油、米糠油、椰子油、油茶籽油、低芥酸菜籽油、花 椒油、辣椒油等中的一种或几种。8. 根据权利要求6所述的制备方法，所述动物油为猪油、牛油、羊油、鸡油、鸭油等动物 脂肪油中的一种或几种。9. 根据权利要求1所述的制备方法，所述挥发性溶剂为醋酸乙酯或丙酮的一种。10. 根据权利要求1所述的制备方法，所述表面活性剂为十二烷基硫酸钠、聚山梨酯-80、泊洛沙姆、聚乙二醇辛酸甘油酯、聚乙二醇葵酸甘油酯、聚乙二醇月桂酸甘油酯或聚乙 二醇硬脂酸甘油酯。11. 根据权利要求1所述的制备方法，所述非挥发性高沸点液体为水或液体石蜡。12. 根据权利要求2所述的制备方法，所述增溶剂优选为大豆卵磷脂或蛋黄卵磷脂。13. 权利要求1-12任一所述方法制备得到的黄体酮缓释微囊。14. 一种黄体酮缓释微囊制剂，包含有权利要求13所述的黄体酮缓释微囊。
【文档编号】A61K9/66GK106063783SQ201610435903
【公开日】2016年11月2日
【申请日】2016年6月16日 公开号201610435903.1, CN 106063783 A, CN 106063783A, CN 201610435903, CN-A-106063783, CN106063783 A, CN106063783A, CN201610435903, CN201610435903.1
【发明人】邓金明
【申请人】浙江爱生药业有限公司