一种高含量腺苷蛹虫草子实体的生产方法与流程

文档序号:12855853阅读:285来源:国知局

本发明涉及蛹虫草子实体生产技术领域,具体为一种高含量腺苷蛹虫草子实体的生产方法。



背景技术:

蛹虫草又名北冬虫夏草、北虫草等,与冬虫夏草同属异种,是虫草属的模式种,属于子囊菌亚门虫草属,是其寄生在昆虫纲鳞翅目夜蛾科昆虫蛹体上所长出的子座与僵死蛹体的复合体。多年的研究表明蛹虫草具有免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、抗感染等多种药理活性,广泛用于肿瘤、免疫功能低下、包括艾滋病毒感染等多种疾病中。

腺苷是一种内源性嘌呤核苷酸,具有广泛的生理活性,蛹虫草中腺苷的含量与冬虫夏草相似,甚至更高,多在0.01%以上。至今已从虫草及发酵菌丝中分离鉴定有11个核苷类化合物,包括腺嘌呤、腺苷、尿嘧啶、尿苷、鸟嘌呤、鸟苷、次黄嘌呤、次黄嘌呤核苷、胸腺嘧啶、胸腺嘧啶脱氧核苷及尿嘧啶脱氧核苷等,现有技术中蛹虫草子实体提取腺苷效率低、提取率低,因此,如何在技术路线及加工工艺中改进现有加工方法,提高腺苷含量已是亟待解决,而又具有重要意义的课题。



技术实现要素:

本发明的目的在于提供一种高含量腺苷蛹虫草子实体的生产方法,以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:一种高含量腺苷蛹虫草子实体,所述蛹虫草子实体在培养基中培养,2000g培养基中组份按重量份计包括去壳花生80-120g、生黄豆80-120g、大米450-550g、西红柿40-60g、干蚕蛹粉40-60g、鱼粉40-60g、鲜牛肉40-60g、土豆40-60g、葡萄糖10-20g、酵母粉5-10g、蔗糖10-20g、琼脂20-30g、维生素b120-60mg、稻草浸出液450ml-550ml以及土壤浸出液450ml-550ml。

优选的,培养基优选的组份配比为:去壳花生100g、生黄豆100g、大米500g、西红柿50g、干蚕蛹粉50g、鱼粉50g、鲜牛肉50g、土豆50g、葡萄糖15g、酵母粉8g、蔗糖15g、琼脂2g、维生素b140mg、稻草浸出液500ml以及土壤浸出液500ml。

优选的,所述稻草浸出液制备方法包括以下步骤:

a、取稻草45-55g,加入粉碎机中粉碎,粉碎机转速为2000-3000转/分,粉碎时间为10min-20min,得到稻草末;

b、将步骤a得到的稻草末中加入600-800g水,将水煮沸50min-70min,得到混合液,之后冷却至常温;

c、将步骤b得到的混合液加入离心机中进行离心,即得到稻草浸出液。

优选的,所述土壤浸出液制备方法包括以下步骤:

a、取水分饱和的土壤80-120g,之后加入水500-600ml;

b、将土壤和水充分搅拌10-20min;

c、之后静置24h后取上清液,即为土壤浸出液。

优选的,所述蛹虫草子实体制备方法包括以下步骤:

a、将去壳花生、生黄豆、西红柿、干蚕蛹粉、鱼粉、鲜牛肉、土豆、葡萄糖、酵母粉、蔗糖、琼脂、维生素b1混合后加入粉碎机中粉碎,粉碎机转速为3000-4000转/分,粉碎时间为20min-40min,得到混合物a;

b、在混合物a中加入大米、稻草浸出液、土壤浸出液进行充分混合后倒入培养盆中,之后进行高温灭菌;

c、之后冷却至常温,在无菌环境下接入菌种;

d、将步骤c的培养基在无光环境下培养6-8天,直至培养基表面长出菌丝;

e、之后将步骤d得到的培养基在适光、温度20℃的环境下培养3天,完成转色,诱导菌蕾长出;

f、之后将培养基在中光、温度22℃的环境下培养6周,即得到蛹虫草子实体。

与现有技术相比,本发明的有益效果是:本发明制备工艺简单,制得的蛹虫草子实体腺苷提取率高;本发明提取蛹虫草腺苷含量高,腺苷的含量可达到每克原材料提取得到2.95mg的量,最终活性成分的提取率可高达0.23%,比其他的常规提取方法提取率都高,且质量可控,料损少,生产周期短,适合大规模生产,市场潜力巨大。

具体实施方式

下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。

发明提供如下技术方案:

实施例一:

一种高含量腺苷蛹虫草子实体,所述蛹虫草子实体在培养基中培养,2000g培养基中组份按重量份计包括去壳花生80g、生黄豆80g、大米450g、西红柿40g、干蚕蛹粉40g、鱼粉40g、鲜牛肉40g、土豆40g、葡萄糖10g、酵母粉5g、蔗糖10g、琼脂20g、维生素b120mg、稻草浸出液450ml以及土壤浸出液450ml。

本实施例中,稻草浸出液制备方法包括以下步骤:

a、取稻草45g,加入粉碎机中粉碎,粉碎机转速为2000转/分,粉碎时间为10min,得到稻草末;

b、将步骤a得到的稻草末中加入600g水,将水煮沸50min,得到混合液,之后冷却至常温;

c、将步骤b得到的混合液加入离心机中进行离心,即得到稻草浸出液。

本实施例中,土壤浸出液制备方法包括以下步骤:

a、取水分饱和的土壤80g,之后加入水500ml;

b、将土壤和水充分搅拌10min;

c、之后静置24h后取上清液,即为土壤浸出液。

本实施例中,蛹虫草子实体制备方法包括以下步骤:

a、将去壳花生、生黄豆、西红柿、干蚕蛹粉、鱼粉、鲜牛肉、土豆、葡萄糖、酵母粉、蔗糖、琼脂、维生素b1混合后加入粉碎机中粉碎,粉碎机转速为3000转/分,粉碎时间为20min,得到混合物a;

b、在混合物a中加入大米、稻草浸出液、土壤浸出液进行充分混合后倒入培养盆中,之后进行高温灭菌;

c、之后冷却至常温,在无菌环境下接入菌种;

d、将步骤c的培养基在无光环境下培养6天,直至培养基表面长出菌丝;

e、之后将步骤d得到的培养基在适光(450lx)、温度20℃的环境下培养3天,完成转色,诱导菌蕾长出;

f、之后将培养基在中光(600lx)、温度22℃的环境下培养6周,即得到蛹虫草子实体。

实施例二:

一种高含量腺苷蛹虫草子实体,所述蛹虫草子实体在培养基中培养,2000g培养基中组份按重量份计包括去壳花生120g、生黄豆120g、大米550g、西红柿60g、干蚕蛹粉60g、鱼粉60g、鲜牛肉60g、土豆60g、葡萄糖20g、酵母粉10g、蔗糖20g、琼脂30g、维生素b160mg、稻草浸出液550ml以及土壤浸出液550ml。

本实施例中,稻草浸出液制备方法包括以下步骤:

a、取稻草55g,加入粉碎机中粉碎,粉碎机转速为3000转/分,粉碎时间为20min,得到稻草末;

b、将步骤a得到的稻草末中加入800g水,将水煮沸70min,得到混合液,之后冷却至常温;

c、将步骤b得到的混合液加入离心机中进行离心,即得到稻草浸出液。

本实施例中,土壤浸出液制备方法包括以下步骤:

a、取水分饱和的土壤120g,之后加入水600ml;

b、将土壤和水充分搅拌20min;

c、之后静置24h后取上清液,即为土壤浸出液。

本实施例中,蛹虫草子实体制备方法包括以下步骤:

a、将去壳花生、生黄豆、西红柿、干蚕蛹粉、鱼粉、鲜牛肉、土豆、葡萄糖、酵母粉、蔗糖、琼脂、维生素b1混合后加入粉碎机中粉碎,粉碎机转速为4000转/分,粉碎时间为40min,得到混合物a;

b、在混合物a中加入大米、稻草浸出液、土壤浸出液进行充分混合后倒入培养盆中,之后进行高温灭菌;

c、之后冷却至常温,在无菌环境下接入菌种;

d、将步骤c的培养基在无光环境下培养8天,直至培养基表面长出菌丝;

e、之后将步骤d得到的培养基在适光、温度20℃的环境下培养3天,完成转色,诱导菌蕾长出;

f、之后将培养基在中光、温度22℃的环境下培养6周,即得到蛹虫草子实体。

实施例三:

一种高含量腺苷蛹虫草子实体,所述蛹虫草子实体在培养基中培养,2000g培养基中组份按重量份计包括去壳花生90g、生黄豆90g、大米480g、西红柿45g、干蚕蛹粉45g、鱼粉45g、鲜牛肉45g、土豆45g、葡萄糖12g、酵母粉6g、蔗糖12g、琼脂22g、维生素b130mg、稻草浸出液480ml以及土壤浸出液480ml。

本实施例中,稻草浸出液制备方法包括以下步骤:

a、取稻草48g,加入粉碎机中粉碎,粉碎机转速为2200转/分,粉碎时间为12min,得到稻草末;

b、将步骤a得到的稻草末中加入650g水,将水煮沸55min,得到混合液,之后冷却至常温;

c、将步骤b得到的混合液加入离心机中进行离心,即得到稻草浸出液。

本实施例中,土壤浸出液制备方法包括以下步骤:

a、取水分饱和的土壤90g,之后加入水520ml;

b、将土壤和水充分搅拌12min;

c、之后静置24h后取上清液,即为土壤浸出液。

本实施例中,蛹虫草子实体制备方法包括以下步骤:

a、将去壳花生、生黄豆、西红柿、干蚕蛹粉、鱼粉、鲜牛肉、土豆、葡萄糖、酵母粉、蔗糖、琼脂、维生素b1混合后加入粉碎机中粉碎,粉碎机转速为3200转/分,粉碎时间为25min,得到混合物a;

b、在混合物a中加入大米、稻草浸出液、土壤浸出液进行充分混合后倒入培养盆中,之后进行高温灭菌;

c、之后冷却至常温,在无菌环境下接入菌种;

d、将步骤c的培养基在无光环境下培养6.5天,直至培养基表面长出菌丝;

e、之后将步骤d得到的培养基在适光、温度20℃的环境下培养3天,完成转色,诱导菌蕾长出;

f、之后将培养基在中光、温度22℃的环境下培养6周,即得到蛹虫草子实体。

实施例四:

一种高含量腺苷蛹虫草子实体,所述蛹虫草子实体在培养基中培养,2000g培养基中组份按重量份计包括去壳花生110g、生黄豆110g、大米520g、西红柿55g、干蚕蛹粉55g、鱼粉55g、鲜牛肉55g、土豆55g、葡萄糖18g、酵母粉9g、蔗糖18g、琼脂28g、维生素b150mg、稻草浸出液520ml以及土壤浸出液520ml。

本实施例中,稻草浸出液制备方法包括以下步骤:

a、取稻草52g,加入粉碎机中粉碎,粉碎机转速为2800转/分,粉碎时间为18min,得到稻草末;

b、将步骤a得到的稻草末中加入750g水,将水煮沸65min,得到混合液,之后冷却至常温;

c、将步骤b得到的混合液加入离心机中进行离心,即得到稻草浸出液。

本实施例中,土壤浸出液制备方法包括以下步骤:

a、取水分饱和的土壤110g,之后加入水550ml;

b、将土壤和水充分搅拌18min;

c、之后静置24h后取上清液,即为土壤浸出液。

本实施例中,蛹虫草子实体制备方法包括以下步骤:

a、将去壳花生、生黄豆、西红柿、干蚕蛹粉、鱼粉、鲜牛肉、土豆、葡萄糖、酵母粉、蔗糖、琼脂、维生素b1混合后加入粉碎机中粉碎,粉碎机转速为3800转/分,粉碎时间为35min,得到混合物a;

b、在混合物a中加入大米、稻草浸出液、土壤浸出液进行充分混合后倒入培养盆中,之后进行高温灭菌;

c、之后冷却至常温,在无菌环境下接入菌种;

d、将步骤c的培养基在无光环境下培养7.5天,直至培养基表面长出菌丝;

e、之后将步骤d得到的培养基在适光、温度20℃的环境下培养3天,完成转色,诱导菌蕾长出;

f、之后将培养基在中光、温度22℃的环境下培养6周,即得到蛹虫草子实体。

实施例五:

一种高含量腺苷蛹虫草子实体,所述蛹虫草子实体在培养基中培养,2000g培养基中组份按重量份计包括去壳花生100g、生黄豆100g、大米500g、西红柿50g、干蚕蛹粉50g、鱼粉50g、鲜牛肉50g、土豆50g、葡萄糖15g、酵母粉8g、蔗糖15g、琼脂2g、维生素b140mg、稻草浸出液500ml以及土壤浸出液500ml。

本实施例中,稻草浸出液制备方法包括以下步骤:

a、取稻草50g,加入粉碎机中粉碎,粉碎机转速为2500转/分,粉碎时间为15min,得到稻草末;

b、将步骤a得到的稻草末中加入700g水,将水煮沸60min,得到混合液,之后冷却至常温;

c、将步骤b得到的混合液加入离心机中进行离心,即得到稻草浸出液。

本实施例中,土壤浸出液制备方法包括以下步骤:

a、取水分饱和的土壤100g,之后加入水550ml;

b、将土壤和水充分搅拌15min;

c、之后静置24h后取上清液,即为土壤浸出液。

本实施例中,蛹虫草子实体制备方法包括以下步骤:

a、将去壳花生、生黄豆、西红柿、干蚕蛹粉、鱼粉、鲜牛肉、土豆、葡萄糖、酵母粉、蔗糖、琼脂、维生素b1混合后加入粉碎机中粉碎,粉碎机转速为3500转/分,粉碎时间为30min,得到混合物a;

b、在混合物a中加入大米、稻草浸出液、土壤浸出液进行充分混合后倒入培养盆中,之后进行高温灭菌;

c、之后冷却至常温,在无菌环境下接入菌种;

d、将步骤c的培养基在无光环境下培养7天,直至培养基表面长出菌丝;

e、之后将步骤d得到的培养基在适光、温度20℃的环境下培养3天,完成转色,诱导菌蕾长出;

f、之后将培养基在中光、温度22℃的环境下培养6周,即得到蛹虫草子实体。

本发明制备工艺简单,制得的蛹虫草子实体腺苷提取率高;本发明提取蛹虫草腺苷含量高,腺苷的含量可达到每克原材料提取得到2.95mg的量,最终活性成分的提取率可高达0.23%,比其他的常规提取方法提取率都高,且质量可控,料损少,生产周期短,适合大规模生产,市场潜力巨大。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例,对于本领域的普通技术人员而言,可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型,本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

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