专利名称：可用于治疗雄激素受体相关疾病的吲哚类化合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及吲哚衍生物、它们的制备和它们用于雄激素-受体相关性病症、障碍或疾病治疗和其他雄激素相关性治疗的用途。
具备产生雄性征活性的化合物可用于治疗内源性循环雄性激素水平低的男性或产生雄性征效应受抑制的男性。这类治疗适用于老年男性、性腺功能减退男性或为男性避孕而用孕激素类治疗的男性。另外，有力的雄激素抑制精子发生，能够用作男性避孕剂。
因而，获得对雄激素受体具有高亲和性的化合物是很重要的。对雄激素受体具有高亲和性的非甾族化合物是特别有用的，因为它们可能具有不同于甾族雄激素的组织分布特征，并且通过恰当地选择取代基，能够被设计成对某些组织具有更大或更小的选择性。例如，当化合物是强亲水性的或者携带离子电荷时，通常防止其对大脑的作用。
本发明提供对雄激素受体具有亲和性的非甾族化合物。这些化合物潜在地可用于治疗雄激素受体相关性障碍或能够用雄激素治疗的障碍。本发明化合物具有根据式I的结构 其中X是S、SO或SO2；R1是5-或6-元单环、杂环或碳环、饱和或不饱和的环结构，可选地被一个或多个取代基取代，所述取代基选自由卤素、CN、(1C-4C)氟代烷基、硝基、(1C-4C)烷基、(1C-4C)烷氧基或(1C-4C)氟代烷氧基组成的组；R2是2-硝基苯基、2-氰基苯基、2-羟甲基-苯基、吡啶-2-基、吡啶-2-基-N-氧化物、2-苯甲酰胺、2-苯甲酸甲酯或2-甲氧基苯基；R3是H、卤素或(1C-4C)烷基；R4是H、OH、(1C-4C)烷氧基或卤素；R5是H、OH、(1C-4C)烷氧基、NH2、CN、卤素、(1C-4C)氟代烷基、NO2、羟基(1C-4C)烷基、CO2H、CO2(1C-6C)烷基，或者R5是NHR6，其中R6是可选被一个或多个卤素取代的(1C-6C)酰基、S(O)2(1C-4C)烷基或可选被(1C-4C)烷基或一个或多个卤素取代的S(O)2芳基，或者R5是C(O)N(R8，R9)，其中R8和R9各自独立地是H、(3C-6C)环烷基或CH2R10，其中R10是H、(1C-5C)烷基、(1C-5C)烯基、羟基(1C-3C)烷基、羧基(1C-4C)烷基的(1C-4C)烷基酯、(1C-3C)烷氧基(1C-3C)烷基、(单或二(1C-4C)烷基)氨基甲基、(单或二(1C-4C)烷基)氨基羰基或3-、4-、5-或6-元单环、碳环或杂环、芳族或非芳族的环，或者R8和R9与N一起构成可选被(1C-4C)烷基取代的杂环5-或6-元饱和或不饱和的环；或者其盐或水合物形式。
在一种实施方式中，R1是5-或6-元单环、杂环或碳环、饱和或不饱和的环结构，可选地被一个或多个取代基取代，所述取代基选自由卤素、CN、CF3、硝基、甲氧基、三氟甲氧基或甲基组成的组；R2是2-硝基苯基、2-氰基苯基、2-羟甲基-苯基、吡啶-2-基、吡啶-2-基-N-氧化物、2-苯甲酰胺、2-苯甲酸甲酯或2-甲氧基苯基；R3是H、卤素或(1C-2C)烷基；R4是H或F。
在另一种实施方式中，R5是H、OH、(1C-4C)烷氧基、CN、卤素、(1C-4C)氟代烷基、NO2、羟基(1C-4C)烷基、CO2(1C-6C)烷基，或者R5是NHR6，其中R6是可选被一个或多个卤素取代的(1C-6C)酰基、S(O)2(1C-4C)烷基或可选被(1C-4C)烷基或一个或多个卤素取代的S(O)2芳基，或者R5是C(O)N(R8，R9)，其中R8和R9各自独立地是H、(3C-6C)环烷基或CH2R10，其中R10是H、(1C-5C)烷基、(1C-5C)烯基、羟基(1C-3C)烷基、羧基(1C-4C)烷基的(1C-4C)烷基酯、(1C-3C)烷氧基(1C-3C)烷基、(单或二(1C-4C)烷基)氨基甲基、(单或二(1C-4C)烷基)-氨基羰基或3-、4-、5-或6-元单环、碳环或杂环、芳族或非芳族的环，或者R8和R9与N一起构成可选被(1C-4C)烷基取代的杂环5-或6-元饱和或不饱和的环。
在另一种实施方式中，R3是H或卤素；R4是H；R5是H、OH、(1C-4C)烷氧基、CN、F、Cl、CF3、NO2、羟基(1C-4C)烷基、CO2(1C-6C)烷基，或者R5是NHR6，其中R6是可选被一个或多个卤素取代的(1C-3C)酰基，或者R5是C(O)N(R8，R9)，其中R8和R9各自独立地是H、(3C-5C)环烷基或CH2R10，其中R10是H、(1C-5C)烷基、(1C-5C)烯基、羟基(1C-3C)烷基、羧基(1C-2C)烷基的(1C-2C)烷基酯、(1C-3C)烷氧基(1C-3C)烷基、(单或二(1C-4C)烷基)氨基甲基、(单或二(1C-4C)烷基)氨基羰基、(3C-5C)环烷基或5-元杂环。
在另一种实施方式中，X是S或SO2；R2是2-硝基苯基、2-羟甲基-苯基、2-苯甲酰胺、2-甲氧基苯基、2-氰基苯基或吡啶-2-基；R3是H或F；R5是H、OH、(1C-2C)烷氧基、CN、F、Cl、CF3、NO2、羟基(1C-4C)烷基、CO2(1C-4C)烷基，或者R5是NHR6，其中R6是甲酰基、乙酰基、氟乙酰基、二氟乙酰基或三氟乙酰基，或者R5是C(O)N(R8，R9)，其中R8是H，R9是H、环丙基，或者R9是CH2R10，其中R10是H、(1C-2C)烷基、羟基(1C-2C)烷基、甲氧基(1C-2C)烷基、环丙基。
在另一种实施方式中，X是S；R1是3，5-二氟苯基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、嘧啶-5-基、嘧啶-4-基、吡嗪-2-基、3-氟苯基、3-氰基苯基或3-硝基苯基；R2是2-硝基苯基、2-羟甲基-苯基、2-甲氧基苯基、2-氰基苯基或吡啶-2-基；R3是H；R5是OH、(1C-2C)烷氧基、CN、CF3、NO2、羟基(1C-4C)烷基、CO2(1C-4C)烷基或NHR6，其中R6是甲酰基、乙酰基、氟乙酰基、二氟乙酰基或三氟乙酰基。
在另一种实施方式中，R1是3，5-二氟苯基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、嘧啶-5-基、嘧啶-4-基或吡嗪-2-基；R2是2-硝基苯基或2-羟甲基-苯基；R5是OH、(1C-2C)烷氧基、CN、羟基(1C-4C)烷基或NHR6，其中R6是甲酰基、乙酰基、氟乙酰基、二氟乙酰基或三氟乙酰基。
在另一种实施方式中，R1是3，5-二氟苯基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、嘧啶-5-基或嘧啶-4-基；R2是2-硝基苯基；R5是OH、(1C-2C)烷氧基、CN或NHR6，其中R6是甲酰基、乙酰基、氟乙酰基、二氟乙酰基或三氟乙酰基。
在具体的实施方式中，本发明提供化合物6-甲氧基-3-(2-硝基-苯硫基)-1-嘧啶-5-基甲基-1H-吲哚、3-(2-硝基-苯硫基)-1-吡啶-2-基甲基-1H-吲哚-6-甲腈、3-(2-硝基-苯硫基)-1-吡啶-2-基甲基-1H-吲哚-6-甲腈-盐酸盐、3-(2-硝基-苯硫基)-1-嘧啶-5-基甲基-1H-吲哚-6-甲腈、3-(2-硝基-苯硫基)-1-嘧啶-4-基甲基-1H-吲哚-6-甲腈、N-[1-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-基]-2-氟-乙酰胺和N-[3-(2-硝基-苯硫基)-1-嘧啶-5-基甲基-1H-吲哚-6-基]-甲酰胺。
在另一种实施方式中，X是S；R1是3，5-二氟苯基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、3-氟苯基、3-氰基苯基或3-硝基苯基；R2是2-硝基苯基、2-羟甲基-苯基、2-甲氧基苯基、2-氰基苯基或吡啶-2-基；R3是H；R5是C(O)N(R8，R9)，其中R8是H，且R9是H或CH2R10，其中R10是H、(1C-2C)烷基、羟基(1C-2C)烷基或甲氧基(1C-2C)烷基。
在另一种实施方式中，R1是3，5-二氟苯基、吡啶-2-基或吡啶-3-基；R2是2-硝基苯基或2-羟甲基-苯基；R5是C(O)N(R8，R9)，其中R8是H，R9是CH2R10，其中R10是H或(1C-2C)烷基。
在具体的实施方式中，本发明提供化合物1-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-羧酸甲基酰胺。
在另一种实施方式中，X是S；R1是3，5-二氟苯基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、3-氟苯基、3-氰基苯基或3-硝基苯基；R2是2-硝基苯基、2-羟甲基-苯基、2-甲氧基苯基、2-氰基苯基或吡啶-2-基；R3是H；R5是C(O)N(R8，R9)，其中R8和R9各自独立地是H或CH2R10，其中R10是H、(1C-5C)烷基、(1C-5C)烯基、羟基(1C-3C)烷基、(1C-3C)烷氧基(1C-3C)烷基或(单或二(1C-4C)烷基)氨基甲基。
在另一种实施方式中，R1是3，5-二氟苯基、吡啶-2-基或吡啶-3-基；R2是2-硝基苯基或2-羟甲基-苯基；R5是C(O)N(R8，R9)，其中R8和R9各自独立地是H或CH2R10，其中R10是H、(1C-5C)烷基、羟基(1C-3C)烷基或(1C-3C)烷氧基(1C-3C)烷基。
在具体的实施方式中，本发明提供化合物1-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-羧酸二甲基酰胺。
在本发明化合物含有碱性胺官能的情况下，化合物可以用作游离碱或药学上可接受的盐，例如盐酸盐、乙酸盐、草酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐、马来酸盐或富马酸盐。
根据本发明的化合物是如上所定义的化合物、其盐、其水合物或其前体药物。
用在本说明书中的术语具有下列含义烷基是分支或不分支的烷基，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、己基等；氟代烷基是被一个或多个氟原子取代的烷基；环烷基环状不分支的烷基，例如环丙基、环丁基、环戊基等；烯基是分支或不分支的烯基，例如乙烯基、2-丁烯基等；烷氧基是分支或不分支的烷基氧基，例如甲基氧基、乙基氧基、丙基氧基、异丙基氧基、丁基氧基、仲丁基氧基、叔丁基氧基等；氟代烷氧基是被一个或多个氟原子取代的烷氧基；芳基是单环或多环、碳环或杂环的芳族环系，例如苯基、萘基或吡啶基；具有6个原子的单环是优选使用的；酰基是(取代基-)羰基，例如芳酰基或烷酰基；芳酰基是芳基羰基，例如苯甲酰基；烷酰基表示甲酰基或烷基羰基，例如甲酰基、乙酰基和丙酰基；羧基是-COOH取代基，使化合物成为有机酸；羧酸盐是羧基取代基的盐；前缀(1C-4C)、(2C-4C)等具有通常的含义，限制所指示的基团具有1至4个、2至4个等的碳原子；卤素表示氟、氯、溴和碘。
根据本发明的化合物的雄激素受体亲和性和功效使它们适合用于治疗雄激素-受体相关性障碍、能够用雄激素治疗的障碍和用在集中于雄激素受体在各种组织中的量和/或位置的诊断方法中。就后者目的而言，可能优选的是制备经过标记的根据本发明的化合物变体。典型的雄激素-受体相关性治疗是雄性避孕和雄性或雌性激素替代疗法。因而，本发明也涉及雄激素不足的治疗方法，对男性或女性或者雄性或雌性动物给以有效量的任意本发明化合物。本发明也在于任意化合物制备治疗雄激素不足的药物的用途。在本发明的背景中，术语“雄激素不足”被理解为涉及所有这样的疾病、障碍和症状，其中雄性或雌性患有睾酮水平过低，例如性腺功能减退的男人或男孩。特别是，用本发明化合物治疗的雄激素不足是睾酮水平的减少，这是雄性个体衰老的结果(本发明化合物用于雄性激素替代疗法)，或者他接受了雄性避孕。在雄性避孕的背景中，本发明化合物尤其起到中和雄性激素避孕方案效应的作用，在这种方案中按规律、例如每日给以一种不育剂，例如孕激素类或LHRH(促黄体生成素释放激素)，或者它用作单一的雄性避孕物质。
因而，本发明提供用在疗法中的任何一种本发明化合物。
本发明进一步涵盖药物组合物，包含本发明化合物和药学上可接受的载体。在本发明的实施方式中，药物组合物用于治疗一种障碍，所述障碍选自由雄激素受体相关性障碍、雄激素相关性障碍和雄激素不足组成的组。
本发明进一步提供本发明化合物制造药物的用途，所述药物用于治疗雄激素受体相关性障碍、雄激素相关性障碍和雄激素不足。
本发明进一步涵盖治疗一种障碍的方法，所述障碍选自由雄激素受体相关性障碍、雄激素相关性障碍和雄激素不足组成的组，所述方法包含对需要的受治疗者给以药学上有效量的根据本发明的化合物。
本发明化合物可以进一步用于治疗骨质疏松，以及其他骨障碍、骨折修复(bone fraction repair)、sarcopenia、虚弱(frailty)、皮肤老化、男性性腺机能减退、女性性功能障碍、经绝后症状、动脉粥样硬化、再生障碍性贫血、肌肉萎缩、脂肪营养不良、肌肉强度与功能降低、化疗的副作用、慢性疲劳综合征、良性前列腺增生(BPH)、恶病质、慢性分解代谢状态、认知减损、男性避孕和其他。
本发明化合物可以与雌激素、孕激素和其他雄激素联合给药。
本发明化合物一般可以借助有机化学领域已知的各种方法制备。更具体地，可以采用如下方案和实施例所述的合成途径。在方案和实施例中，使用下列缩写DMF＝二甲基甲酰胺mCPBA＝间氯过苯甲酸THF＝四氢呋喃TBTU＝2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓四氟硼酸盐DIPEA＝二异丙基乙胺EDCI＝1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐HOBt＝1-羟基苯并三唑NMM＝N-甲基吗啉SPE＝固相提取RP-SPE＝反相固相提取DMSO＝二甲基亚砜DCM＝二氯甲烷DHT＝5α-二氢睾酮NMP＝1-甲基-2-吡咯烷酮DMS＝二甲基硫关于命名法，取代基R1和R2的下列俗名是可互换使用的俗名正名2-吡啶基 吡啶-2-基3-吡啶基 吡啶-3-基4-吡啶基 吡啶-4-基3，5-嘧啶基嘧啶-5-基2，4-嘧啶基嘧啶-4-基
2，5-吡嗪基吡嗪-2-基等等在方案I-VII中，符号的含义对应于在前面段落中所给出的定义。
结构3的取代的吲哚化合物是分两个步骤、从结构1的恰当取代的吲哚经由两种不同的途径制备的。在第一种途径中，将结构1的恰当取代的吲哚用R1CH2Y型卤化物N-烷基化，其中Y是卤素、甲磺酸酯或甲苯磺酸酯，以NaH或Cs2CO3作为碱，在DMF或NMP中和0℃至室温下进行，得到结构2化合物。然后通过与烃基硫化氯(sulfenylchloride)，在CH2Cl2或二乙醚中和室温下进行反应，硫化结构2吲哚环的C-3位，得到结构3。在第二种途径中，颠倒第一种途径的两个步骤首先硫化结构1的恰当取代的吲哚的C-3位，得到结构4，继之以用R1CH2Y N-烷基化，得到结构3(方案I)。
方案I
结构5的亚砜可以这样获得，通过与例如0.9当量mCPBA的反应，氧化对应的硫醚(结构3)。结构6的砜可以这样获得，通过与例如3当量mCPBA的反应，氧化对应的硫醚(结构3)(方案II)。
方案II方案III描述结构3化合物的合成，其中R2基团是在2-位上被下列基团取代的苯环CO2Me(结构7)、CH2OH(结构8)、CO2H(结构9)、CONHMe(结构10)、CONH2(结构11)或CN(结构12)。
方案III第一步，将结构6的取代的吲哚用2-(羧基甲基)-苯基硫化氯硫化3-位(后者是从硫代水杨酸甲酯和氯气制备的)，得到结构7化合物。将结构7化合物的甲基酯部分用LiAlH4还原，得到对应的结构8的羟甲基化合物。将结构7化合物的甲基酯部分用氢氧化锂皂化，得到对应的结构9的羧酸化合物。结构9化合物的羧酸部分可以这样转化为对应的甲酰胺与一种胺、TBTU和DIPEA在DMF中和室温下反应。利用这种方法，当使用甲胺作为胺时得到结构10，当使用NH3作为胺时得到结构11。将结构11的苯甲酰胺部分用Tf2O和三乙胺在CH2Cl2中脱水，得到对应的结构12的苄腈化合物(方案III)。
方案IV方案IV描述结构3化合物的合成，其中吲哚环在6-位被下列基团取代CO2Me(结构13)、CO2H(结构14)、CONR8R9(结构15)、CONH2(结构16)或CN(结构17)。将结构13的甲基酯部分用氢氧化锂皂化，得到对应的结构14羧酸。结构14的羧酸部分可以这样转化为对应的结构15和16的甲酰胺与一种胺或胺盐反应，在EDCI和HOBt的存在下、在NMM与DMF的混合物中，或者在TBTU和DIPEA的存在下、在CH2Cl2中于室温下进行。将结构16的苯甲酰胺部分用Tf2O和三乙胺在CH2Cl2中脱水，得到对应的结构17的苄腈化合物(方案IV)。
方案V方案V描述结构22化合物的合成，其中在吲哚环的6-位含有酰化胺官能度。这些化合物可以分4个步骤、从结构18的6-硝基吲哚合成。第一步，将结构18吲哚通过与R1CH2Y型卤化物反应在氮原子上烷基化，其中Y是卤素、甲磺酸酯或甲苯磺酸酯，以NaH作为碱，在DMF中进行，得到结构19化合物。第二步，将结构19的硝基用SnCl2还原为胺基团，得到结构20。随后将胺基团用ZCOCl型酰氯酰化，得到结构21，然后通过与烃基硫化氯在CH2Cl2或Et2O溶剂和室温下反应，硫化吲哚环的3-位，得到结构22化合物。将结构20化合物用烃基硫化氯直接硫化，得到结构23。
方案VI描述如何将结构24的甲基醚在THF中和室温下用例如BF3·DMS裂解为结构25的羟基化合物。
方案VI方案VII描述这样的化合物的合成，其中在吲哚环的6-位含有酰化胺官能度(结构28)或磺酰胺官能度(结构29)。这些化合物可以分6个步骤、从结构18的6-硝基吲哚制备。第一步，将结构18吲哚通过与R1CH2Y型卤化物反应在N-1上烷基化，其中Y是卤素、甲磺酸酯或甲苯磺酸酯，以NaH或Cs2CO3作为碱，在NMP或DMF中进行，得到结构19化合物。第二步，将结构19的硝基用Fe和NH4Cl还原为胺基团，在乙醇/水混合物中进行，得到结构20。随后将胺基团用二碳酸二叔丁酯酰化，得到结构26，然后通过与烃基硫化氯在CH2Cl2或Et2O中反应，硫化吲哚环的3-位，得到结构27化合物。然后，将吲哚6-位的酰胺官能度用三氟乙酸或HCOOH裂解，得到结构23胺。这些胺可以这样转化为结构28酰胺与三乙胺和酰氯在CH2Cl2中反应(方法a)，或者与酸、TBTU和DIPEA在CH2Cl2中反应(方法b)。通过结构23胺与磺酰氯的反应，可以制备结构29磺酰胺(方法c)。
方案VII本发明也涉及药物组合物，包含根据本发明的非甾族化合物，混合有药学上可接受的助剂，例如标准参考文献所述Gennaro et al，RemmingtonThe Science and Practice of Pharmacy，(20th ed.，Lippincott Williams & Wilkins，2000，尤其参见Part 5Pharmaceutical Manufacturing)。适合的助剂可获自例如theHandbook of Pharmaceutical Excipients(2ndEdition，Editors A.Wade and P.J.Weller；American Pharmaceutical Association；Washington；The Pharmaceutical Press；London，1994)。根据本发明的化合物与药学上可接受的助剂的混合物可以被压制成固体剂量单元，例如丸剂、片剂，或者被加工成胶囊剂或栓剂。借助药学上适合的液体，化合物也可以被用作溶液、悬液、乳液形式的注射剂或者喷雾剂，例如鼻用喷雾剂。就制备剂量单元而言，例如片剂，考虑常规添加剂的使用，例如填充剂、着色剂、聚合粘合剂等。一般而言，可以使用任何药学上可接受的添加剂，它不会干扰活性化合物的功能。本发明化合物也可以被包括在植入物、阴道环、贴剂、凝胶剂和任何其他缓释制剂中。
适合于组合物给药的载体包括乳糖、淀粉、纤维素衍生物等或其混合物，以适合的量使用。
本发明化合物的剂量将是药学活性化合物的正常水平，例如每次给药大约0.001至50mg/kg接受者体重。接受者可以是需要雄激素受体相关性治疗或雄激素治疗的人或动物。
借助下列实施例举例说明发明。
实施例实施例11-(3，5-二氟-苄基)-6-甲氧基-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚(化合物63，方案I的结构3，其中R1＝3，5-二氟苯基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H，R5＝OMe) 通用方法1结构1的(未)取代的吲哚的N-烷基化，得到结构2的N-烷基化的吲哚，继之以3-硫化，得到结构3的取代的吲哚(方案I)。
(a)1-(3，5-二氟-苄基)-6-甲氧基-1H-吲哚(方案I的结构2，其中R1＝3，5-二氟苯基，R3＝R4＝H，R5＝OMe)在氮气氛下历经3分钟向冷却(0℃)的6-甲氧基吲哚(863mg，5.86mmol)的DMF(40ml)溶液分小批量加入NaH(60％于油中；281mg，7.03mmol)。将所得绿色悬液在0℃下搅拌10min。然后加入3，5-二氟苄基溴(0.91ml，7.03mmol)。将混合物在0℃下搅拌1h，然后在室温下搅拌另外21h。加入乙酸乙酯(50ml)，将混合物用3％柠檬酸水溶液(3×50ml)和盐水(50ml)洗涤。将有机相干燥(MgSO4)，在真空中浓缩，得到绿色的油(1.43g)。粗产物经过20g二氧化硅SPE药筒纯化(乙酸乙酯/庚烷1∶9)，得到标题化合物，为无色的油(1.23g，收率＝77％)。
LCMS4.01min(96.3％，MH+＝274)；TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶4)Rf＝0.46；1H NMR(CDCl3)δ3.80(s，3H，OCH3)，5.24(s，2H，NCH2Ar)，6.51(dd，1H，J1＝3.5Hz，J2＝0.8Hz)，6.57-6.60(m，2H)，6.65(d，1H，J＝3.1Hz)，6.66-6.72(m，1H)，6.81(dd，1H，J1＝8.6Hz，J2＝3.1Hz)，7.01(d，1H，J＝3.5Hz)，7.53(d，1H，J＝8.6Hz).
(b)1-(3，5-二氟-苄基)-6-甲氧基-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚(化合物63，方案I的结构3，其中R1＝3，5-二氟苯基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H，R5＝OMe)在室温下，历经2min向1-(3，5-二氟-苄基)-6-甲氧基-1H-吲哚(900mg，3.29mmol)的二乙醚(20ml)溶液滴加2-硝基苯基硫化氯(627mg，3.31mmol)的二乙醚(10ml)悬液。在室温下搅拌1h后，加入乙酸乙酯(50ml)，将混合物用饱和NaHCO3溶液(2×50ml)和盐水(50ml)洗涤。将有机相干燥(MgSO4)，在真空中浓缩，得到橙-红色油(1.54g)。使粗产物从甲苯/丙酮中结晶，得到标题化合物，为橙-红色结晶性固体(900mg，收率＝64％)。
LCMS4.25min(100％，MH+＝427)；HPLC4.86min(98.7％)；1H NMR(CDCl3)δ3.82(s，3H，OCH3)，5.32(s，2H，NCH2Ar)，6.63-6.69(m，2H)，6.72-6.79(m，1H)，6.75(d，1H，J＝2.7Hz)，6.85(dd，1H，J1＝8.2Hz，J2＝2.7Hz)，6.98(dd，1H，J1＝6.7Hz，J2＝1.2Hz)，7.16-7.20(m，1H)，7.26-7.30(m，1H)7.34(s，1H)，7.39(d，1H，J＝8.2Hz)，8.27(dd，1H，J1＝8.2Hz，J2＝1.6Hz).
按照通用方法1，制备了下列化合物
表1按照通用方法1合成的化合物
a)使用7min LCMS法，另有规定除外。
b)使用10min LCMS法。
c)M+Cl.nd＝未检测。
d)＝[M-S(PhNO2)]H+。
实施例21-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-羧酸甲基酯(化合物31，方案I的结构3，其中R1＝3，5-二氟苯基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H，R5＝CO2Me) (a)1H-吲哚-6-羧酸甲基酯(方案I的结构1，其中R3＝R4＝H，R5＝CO2Me)向1H-吲哚-6-羧酸(1.500g，9.31mmol)的甲醇(50ml)溶液加入浓H2SO4(550μL，10.24mmol)。将混合物在回流温度下搅拌过夜。然后向混合物加入饱和NaHCO3水溶液，中和至pH 7，混合物用乙酸乙酯萃取两次。合并有机层，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩，得到黄色粉末。使产物从庚烷/乙酸乙酯中重结晶，得到标题化合物，为绿色/黄色晶体(688mg，收率＝53％)。
1H NMR(CDCl3)δ3.94(s，3H，CH3OCO)，6.60(m，1H)，7.37(t，1H，J＝4.7Hz)，7.66(d，1H，J＝8.2Hz)，7.82(dd，1H，J1＝8.2Hz，J2＝1.0Hz)，8.18(s，1H)，8.73(s，1H，NH)(b)1-(3，5-二氟-苄基)-1H-吲哚-6-羧酸甲基酯(方案I的结构2，其中R1＝3，5-二氟苯基，R3＝R4＝H，R5＝CO2Me)在氮气氛下在室温下向1H-吲哚-6-羧酸甲基酯(367mg，2.09mmol)的DMF(10ml)溶液加入NaH(60％于油中，101mg，2.52mmol)。搅拌15min后，加入1-溴甲基-3，5-二氟-苯(325μL，2.51mmol)，将混合物在室温下搅拌4h。用3％柠檬酸水溶液(10ml)猝灭反应，加入乙酸乙酯(30ml)。将混合物用3％柠檬酸水溶液(3×20ml)和盐水(20ml)洗涤。将有机相干燥(MgSO4)，在真空中浓缩，得到淡黄色油(702mg)。粗产物经过20g二氧化硅SPE药筒纯化(乙酸乙酯/庚烷1∶9)，得到标题化合物，为无色的油，放置后缓慢结晶(530mg，收率＝84％)。
LCMS4.08min(99％，MH+＝302)；1H NMR(CDCl3)δ3.92(3，3H，CO2CH3)，5.37(s，2H，NCH2Ar)，6.54-6.60(m，2H)，6.64(d，1H，J＝3.1Hz)，6.67-6.74(m，1H)，7.27(d，1H，J＝3.1Hz)，7.68(d，1H，J＝8.6Hz)，7.83(d，1H，J＝8.6Hz)，8.01(s，1H).
(c)1-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-羧酸甲基酯(化合物31，方案I的结构3，其中R1＝3，5-二氟苯基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H，R5＝CO2Me)在室温下，向1-(3，5-二氟-苄基)-1H-吲哚-6-羧酸甲基酯(330mg，1.10mmol)的二氯甲烷(30ml)溶液加入2-硝基苯基硫化氯(210mg，1.11mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液。将混合物在室温下搅拌4天。浓缩反应混合物，粗产物经过20g二氧化硅SPE药筒纯化(乙酸乙酯/庚烷1∶5至1∶2)，得到标题化合物，为黄色固体(392mg，收率＝78％)。
HPLC4.60min(97.8％)；1H NMR(CDCl3)δ3.93(s，3H，CO2CH3)，5.45(s，2H，NCH2Ar)，6.63-6.69(m，2H)，6.74-6.80(m，1H)，6.88(dd，1H，J1＝8.2Hz，J2＝1.2Hz)，7.18-7.23(m，1H)，7.26-7.30(m，1H)，7.57(d，1H，J＝7.8Hz)，7.58(s，1H)，7.89(dd，1H，J1＝7.8Hz，J2＝1.2Hz)，8.12(s，1H)，8.28(dd，1H，J1＝7.8Hz，J2＝1.2Hz).
实施例3
1-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-羧酸(化合物30，方案IV的结构14，其中R1＝3，5-二氟苯基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H) 向1-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-羧酸甲基酯(150.0mg，0.33mmol)的二噁烷(20ml)与水(15ml)溶液加入LiOH.H2O(83.1mg，2.0mmol)的5ml水溶液。将反应混合物在60℃下搅拌过夜。然后向混合物加入15％HCl水溶液，酸化至pH 4，混合物用乙酸乙酯萃取两次。合并有机层，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩，得到黄色粉末。使产物从庚烷/乙酸乙酯中重结晶，得到标题化合物，为黄色/橙色晶体(129.3mg，y＝89％)。
1H NMR(DMSO)δ5.62(s，2H，CH2Ar)，6.85(dd，1H，J1＝8.6Hz，J2＝br)，7.05(m，2H，br)，7.20(m，1H，br)，7.32-7.38(m，1H)，7.40(d，1H，J＝8.2Hz)，7.44-7.50(m，1H)，7.68(dd，1H，J1＝8.6Hz，J2＝br)，7.97(s，1H，COOH)，8.20(s，1H)，8.26(s，1H)，8.28(d，1H，J＝8.2)实施例41-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-羧酸甲基酰胺(化合物47，方案IV的结构15，其中R1＝3，5-二氟苯基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝R8＝H，R9＝Me)
通用方法2结构14的6-羧基吲哚的酰胺化，得到结构15的6-甲酰胺吲哚(方案IV)。
在氮气氛下向1-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-羧酸(25.1mg，57.0μmol)的无水DMF(10ml)溶液加入NMM(1ml)、HOBt(9.60mg，62.7μmol)、EDCI(12.1mg，62.7μmol)和氯化甲基铵(19.2mg，285μmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后倒入冰水中。过滤所得沉淀，将残余物用过量水、继之以少量庚烷洗涤。在40℃真空中干燥产物，得到标题化合物，为黄色固体(15.2mg，y＝60％)。
LCMS4.31min(100.0％，MH+＝454)；1H NMR(DMSO)δ2.80(d，3H，J＝4.3，CH3NHCO)，5.63(s，2H，CH2Ar)，6.86(dd，1H，J1＝8.2Hz，J2＝1.0Hz)，7.04(m，2H)，7.20(m，1H)，7.33-7.37(m，1H)，7.41(d，1H，8.6Hz)，7.46-7.50(m，1H)，7.64(dd，1H，J1＝8.2Hz，J2＝1.0Hz)，8.15(s，1H)，8.25(s，1H)，8.27(dd，1H，J1＝8.6Hz，J2＝1.0Hz)，8.40(m，1H，MeNHCO).
按照通用方法2，制备了下列化合物
表2按照通用方法2合成的化合物
a)使用7min LCMS法，另有规定除外。
b)使用10min LCMS法。
实施例51-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-羧酸酰胺(化合物33，方案IV的结构16，其中R1＝3，5-二氟苯基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H)
按照通用方法2制备标题化合物，使用51.1mg(116μmol)羧酸、19.5mg(128μmol)HOBt、24.6mg(128μmol)EDCI和31.1mg(581μmol)氯化铵。得到标题化合物，为黄色固体(9.0mg；18％)。
LCMS4.16min(100.0％，MH+＝440)；1H NMR(CDCl3)δ5.46(s，2H，CH2Ar)，6.65(m，2H)，6.77(m，1H)，6.88(dd，1H，J1＝8.2Hz，J2＝1.0Hz))，7.21(m，1H)，7,29(m，1H)，7.51(dd，1H，J1＝7.8Hz，J2＝1.0Hz)，7.57(d，1H，J＝7.7Hz)，7.58(s，1H)，8.05(s，1H)，8.29(dd，1H，J1＝8.2Hz，J2＝1.0Hz).
实施例66-甲氧基-3-(2-硝基-苯硫基)-1-吡啶-2-基甲基-1H-吲哚(化合物9，方案I的结构3，其中R1＝2-吡啶基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H，R5＝OMe) 通用方法3结构1的(未)取代的吲哚的3-硫化，得到结构4的取代的吲哚，继之以吲哚-N-烷基化，得到N-烷基化吲哚结构3(方案I)。
(a)6-甲氧基-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚(方案I的结构4，其中R2＝2-硝基苯基，R1＝R3＝R4＝H，R5＝OMe)历经4分钟向6-甲氧基吲哚(1.5g，10.2mmol)的Et2O(100ml)溶液滴加2-硝基苯基硫化氯(1.93g，10.2mmol)的50ml Et2O溶液。将所得黄色溶液在室温下搅拌1h。蒸发溶剂，粗产物经过二氧化硅柱纯化(庚烷/乙酸乙酯9∶1)，得到标题化合物(3.054g，收率＝97％)。
HPLC3.72min.纯度96.7％，TLC(庚烷/乙酸乙酯1∶1)Rf＝0.6；1H NMR(CDCl3)δ3.87(s，3H，OCH3)，6,84(dd，1H，J1＝7.8Hz，J2＝3,13Hz)，6.97(m，2H)，7.16(t，1H，J＝7.8Hz)，7.25(t，1H，J＝7.8Hz)，7.36(d，1H，J＝7.8Hz)，7.44(d，1H，J＝2.0Hz)，8.26(d，1H，J＝7.8Hz)，8.45(s，1H，NH).
(b)6-甲氧基-3-(2-硝基-苯硫基)-1-吡啶-2-基甲基-1H-吲哚(化合物9，方案I的结构3，其中R1＝2-吡啶基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H，R5＝OMe)历经4分钟向6-甲氧基-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚(1.5g，5mmol)的DMF(150ml)溶液分小批量加入NaH(60％于油中；500mg，12.5mmol)。将所得深色溶液在室温下搅拌5min。然后历经2分钟分小批量加入2-吡啶甲基氯盐酸盐(984mg，6mmol)。在室温下搅拌期间(2h)，溶液的颜色从深色轻微变为黄色。加入乙酸乙酯(100ml)，将混合物用2％柠檬酸水溶液(2×100ml)和水(100ml)洗涤。将有机相干燥(MgSO4)，蒸发溶剂。粗产物经过结晶纯化(乙酸乙酯/庚烷)，得到标题化合物(1.437g，收率＝74％)。
HPLC10.3min，纯度99.6％，TLC(庚烷/乙酸乙酯1∶1)Rf＝0.3；1H NMR(CDCl3)δ3.80(s，3H，OCH3)，5.47(s，2H，NCH2)，6.82(m，2H)，6.88(d，1H，J＝7.8Hz)，7.01(dd，1H，J1＝7.8Hz，J2＝1,6Hz)，7.15-7.19(m，1H)，7.25(m，2H)，7.37(d，1H，j＝8.6Hz)，7.60-7.64(m，1H)，8.26(dd，1H，J1＝7.8Hz，J2＝1.6Hz)，8.63(d，1H，J＝5.88Hz).
按照通用方法3，制备了下列化合物
表3按照通用方法3合成的化合物
a)使用7min LCMS法，另有规定除外。
b)在HPLC系统上运行20min。
实施例71-(3，5-二氟-苄基)-6-甲氧基-3-(吡啶-2-基硫基)-1H-吲哚(化合物65，方案I的结构3，其中R1＝3，5-二氟苯基，R2＝2-吡啶基，R3＝R4＝H，R5＝OMe) 在氮气氛下在1分钟内向冷却(-10℃)的2-巯基吡啶(25mg，0.22mmol)的CCl4(2ml)溶液通入Cl2-气。蒸发溶剂，滴加1-(3，5-二氟-苄基)-6-甲氧基-1H-吲哚(25mg，0.09mmol)的Et2O(2ml)溶液。浓缩反应混合物，粗产物经过制备型LCMS纯化，得到标题化合物(7.77mg，收率＝23％)。
LCMS3.95min(100％，MH+383)；TLC(庚烷/乙酸乙酯1∶1)Rf＝0.6；1H-NMR(CDCl3)δ2.23(s，1H，NH)，3.82(s，1H，OCH3)，6.65(m，2H)，6.73(d，1H，J＝2.7Hz)，6.73-6.78(m，1H)，6.80(d，1H，J＝7.8Hz)，6.87(dd，1H，J1＝7.8Hz，J2＝1.6Hz)，7.00(ddd，1H，J1＝9.8Hz，J2＝4.7Hz，J3＝0.8Hz)，7.35(s，1H)，7.42(ddd，1H，J1＝J2＝7.8Hz，J3＝1.6Hz)，7.50(d，1H，8.6Hz)，8.46(d，1H，J＝4.7Hz).
实施例8{2-[1-(3，5-二氟-苄基)-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基硫基]-苯基}-甲醇(化合物16，方案III的结构8，其中R1＝3，5-二氟苯基，R3＝R4＝H，R5＝OMe)
a)2-[1-(3，5-二氟-苄基)-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基硫基]-苯甲酸甲酯(化合物19，方案III的结构7，其中R1＝3，5-二氟苯基，R3＝R4＝H，R5＝OMe)在-10℃下，向CCl4(5ml)通入氯气3min。然后加入硫代水杨酸甲酯(91μL，0.66mmol)的CCl4(2ml)溶液。将混合物在-10℃下搅拌5min，然后在室温下搅拌15min。浓缩混合物，重新溶于CH2Cl2(5ml)。向该溶液滴加1-(3，5-二氟-苄基)-6-甲氧基-1H-吲哚(121mg，0.443mmol)的CH2Cl2(3ml)溶液。将混合物在室温下搅拌2h，浓缩。粗产物经过柱色谱纯化(乙酸乙酯/庚烷1∶9)，得到标题化合物，为白色固体(161mg，83％收率)。
LCMS4.72min(MH+＝440)；1H-NMR(CDCl3)δ3.82(s，3H，ArOCH3)，3.99(s，3H，CO2CH3)，5.30(s，2H，CH2Ar)，6.62-6.69(m，2H)，6.71-6.77(m，2H)，6.83(dd，1H，J1＝8.6Hz，J2＝2.4Hz)，6.87(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝1.2Hz)，7.06-7.11(m，1H，7.15-7.20(m，1H)，7.30(s，1H)，7.44(d，1H，J＝8.6Hz)，8.02(dd，1H，J1＝8.0Hz，J2＝1.2Hz).
b)(2-[1-(3，5-二氟-苄基)-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基硫基]-苯基}-甲醇(化合物16，方案III的结构8，其中R1＝3，5-二氟苯基，R3＝R4＝H，R5＝OMe)在氮气氛下向2-[1-(3，5-二氟-苄基)-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基硫基]-苯甲酸甲酯(13.5mg，0.031mmol)的THF(2ml)溶液加入LiAlH4(1.0M THF溶液，0.040ml，0.040mmol)。将混合物在室温下搅拌3h。然后加入乙酸乙酯(25ml)，将混合物用3％柠檬酸水溶液(2×25ml)和盐水(25ml)洗涤。将有机相干燥(MgSO4)，浓缩，得到无色的油(15mg)。粗产物经过制备型HPLC纯化，得到标题化合物，为无色的油(5.6mg，44％收率)。
LCMS4.47min(95.6％，MH+＝412)；1H-NMR(CDCl3)δ3.49(s，1H，OH)，3.81(3，3H，OCH3)，4.92(s，2H，CH2OH)，5.28(s，2H，CH2Ar)，6.62-6.66(m，2H)，6.70-6.77(m，2H)，6.83(dd，1H，J1＝8.8Hz，J2＝2.4Hz)，6.89(dd，1H，J1＝8.0Hz，J2＝1.2Hz)，7.02-7.07(m，1H)，7.08-7.13(m，1H)，7.29(s，1H)，7.38(dd，1H，J1＝8.0Hz，J2＝1.2Hz)，7.44(d，1H，J＝8.8Hz).
实施例92-[1-(3，5-二氟-苄基)-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基硫基]-苯甲酰胺(化合物18，方案III的结构11，其中R1＝3，5-二氟苯基，R3＝R4＝H，R5＝OMe) a)2-[1-(3，5-二氟-苄基)-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基硫基]-苯甲酸(方案III的结构9，其中R1＝3，5-二氟苯基，R3＝R4＝H，R5＝OMe)向2-[1-(3，5-二氟-苄基)-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基硫基]-苯甲酸甲酯(97mg，0.221mmol)的THF(10ml)溶液加入LiOH·H2O(71mg，1.69mmol)的水(10ml)溶液。将混合物在室温下搅拌17h，然后在60℃下搅拌24h，然后用3％柠檬酸水溶液酸化。加入乙酸乙酯(50ml)，将混合物用3％柠檬酸水溶液(2×50ml)和盐水(50ml)洗涤。将有机相干燥(MgSO4)，浓缩，得到黄色固体(104mg)。使粗产物从乙酸乙酯/庚烷中重结晶，得到标题化合物，为黄色粉末(49mg，52％收率)。
LCMS4.37min(MH+＝426)；1H-NMR(CDCl3)δ3.77(s，3H，OCH3)，5.51(s，2H，CH2Ar)，6.69(d，1H，J＝8.0Hz)，6.76(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝2.4Hz)，6.98-7.04(m，2H)，7.11-7.15(m，1H)，7.16-7.25(m，4H)，7.83(s，1H)，7.92(dd，1H，J1＝8.0Hz，J2＝1.6Hz).
通用方法4胺与结构9的羧酸、TBTU和DIPEA的反应，得到结构3的酰胺，其中R2＝苯基-2-甲酰胺，以结构10和11化合物为例(方案III)。
b)2-[1-(3，5-二氟-苄基)-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基硫基]-苯甲酰胺(化合物18，方案III的结构11，其中R1＝3，5-二氟苯基，R3＝R4＝H，R5＝OMe)向2-[1-(3，5-二氟-苄基)-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基硫基]-苯甲酸(36mg，0.085mmol)、TBTU(28mg，0.087mmol)与DIPEA(30μL，0.172mmol)的DMF(1ml)溶液通入NH3气10min。然后将混合物在室温下搅拌3天。然后加入3％柠檬酸水溶液(0.4ml)，粗反应混合物经过RP-SPE药筒纯化(2g吸附剂；25％甲醇水溶液至100％甲醇)，得到白色固体(34mg)。粗产物经过柱色谱纯化(乙酸乙酯)，得到标题化合物，为无色的油，放置后固化(31mg，收率86％)。
LCMS4.20min(MH+＝425)；1H-NMR(CDCl3)δ3.81(s，3H，OCH3)，5.39(s，2H，CH2Ar)，6.05(s，br，1H，NH)，6.28(s，br，1H，NH)，6.61-6.67(m，2H)，6.70-6.72(m，1H)，6.73-6.77(m，1H)，6.83(dd，1H，J1＝8.8Hz，J2＝2.0Hz)，6.92(dd，1H，J1＝8.0Hz，J2＝1.2Hz)，7.07-7.17(m，2H)，7.31(s，1H)，7.45(d，1H，J＝8.8Hz)，7.60(dd，1H，J1＝8.0Hz，J2＝1.2Hz).
实施例10
2-[1-(3，5-二氟-苄基)-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基硫基]-N-甲基-苯甲酰胺(化合物17，方案III的结构10，其中R1＝3，5-二氟苯基，R3＝R4＝H，R5＝OMe) 按照通用方法4，从甲胺合成化合物17。LCMS4.07min(MH+＝439).
实施例112-[1-(3，5-二氟-苄基)-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基硫基]-苄腈(化合物20，方案III的结构12，其中R1＝3，5-二氟苯基，R3＝R4＝H，R5＝OMe) 向冷却(0℃)的2-[1-(3，5-二氟-苄基)-6-甲氧基-1H-吲哚-3-基硫基]-苯甲酰胺(8mg，0.019mmol)与Et3N(10μL，0.072mmol)的CH2Cl2(1.5ml)溶液加入Tf2O(6μL，0.036mmol)。将混合物在0℃下搅拌2h，然后在室温下搅拌22h。加入水(25ml)，混合物用CH2Cl2萃取(2×25ml)。合并有机相，干燥(Na2SO4)，浓缩，得到褐色的油(25mg)。粗产物经过柱色谱纯化(乙酸乙酯/庚烷1∶2)，得到标题化合物，为淡粉色油(3mg，收率39％)。
LCMS4.57min(MH+＝407)；1H-NMR(CDCl3)δ3.82(s，3H.OCH3)，5.30(s，2H，CH2Ar)，6.62-6.67(m，2H)，6.71-6.73(m，1H)，6.74-6.78(m，1H)，6.86(dd，1H，J1＝8.8Hz，J2＝2.0Hz)，6.91(d，1H，J＝8.4Hz)，7.11-7.15(m，1H)，7.26-7.30(m，1H)，7.37(s，1H)，7.46(d，1H，J＝8.8Hz)，7.57-7.60(m，1H).
实施例121-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-甲腈(化合物26，方案IV的结构17，其中R1＝3，5-二氟苯基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H) 向冷却(0℃)的1-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-羧酸酰胺(15mg，0.034mmol)与Et3N(10μL，0.072mmol)的CH2Cl2(1.5ml)悬液加入Tf2O(13μL，0.077mmol)。将混合物在0℃下搅拌2h，然后在室温下搅拌20h。加入水(25ml)，混合物用CH2Cl2萃取(2×25ml)。合并有机相，干燥(Na2SO4)，浓缩，得到标题化合物，为黄色固体(13mg，收率91％)。
LCMS4.55min(MH+＝不可检测)；1H-NMR(CDCl3)δ5.42(s，2H，CH2Ar)，6.63-6.69(m，2H)，6.78-6.85(m，2H)，7.21-7.25(m，1H)，7.28-7.33(m，1H)，7.44(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝1.2Hz)，7.62(d，1H，J＝8.4Hz)，7.66(s，1H)，8.29(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝1.6Hz).
实施例131-(3，5-二氟-苄基)-6-甲氧基-3-(2-硝基-苯亚磺酰基)-1H-吲哚(化合物64，方案II的结构5，其中R1＝3，5-二氟苯基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H，R5＝OMe) 向1-(3，5-二氟-苄基)-6-甲氧基-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚(40mg，0.09mmol)的CH2Cl2(4ml)溶液加入间-氯过苯甲酸(14.5mg，0.08mmol)。将溶液在室温下搅拌2h。蒸发溶剂，粗产物经过制备型LC-MS纯化，得到标题化合物(14.3mg，收率＝34％)。
HPLC4.13min，纯度100％；TLC(庚烷/乙酸乙酯1∶1)Rf＝0.4；1H NMR(CDCl3)δ3.66(s，3H，OCH3)，5.12(s，2H)，6.57(m，3H)，6.75(m，2H)，7.47(d，1H，J＝7.8Hz)，7.52(s，1H)，7.66-7.70(m，1H)，8.28-8.32(m，1H)，8.23(dd，1H，J1＝7.8Hz，J2＝1.9Hz)，8.80(dd，1H，J1＝7.8Hz，J2＝3.1Hz).
实施例141-(3，5-二氟-苄基)-6-甲氧基-3-(2-硝基-苯磺酰基)-1H-吲哚(化合物62，方案II的结构6，其中R1＝3，5-二氟苯基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H，R5＝OMe)
向1-(3，5-二氟-苄基)-6-甲氧基-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚(40mg，0.09mmol)的CH2Cl2(4ml)溶液加入间-氯过苯甲酸(46.5mg，0.27mmol)。将溶液在室温下搅拌6h。蒸发溶剂，粗产物经过制备型LC-MS纯化，得到标题化合物(14.5mg，收率＝34％)。
HPLC4.38min.纯度100％；TLC(庚烷/乙酸乙酯1∶1)Rf＝0.6；1H NMR(CDCl3)δ3.71(s，3H，OCH3)，5.25(s，2H)，6.58(d，1H，J＝3.1)，6.62(m，1H)，6.07-6.11(m，1H)，6.88(dd，1H，J1＝7.8Hz，J2＝3.1Hz)，7.63(m，4H)，7.72(d，1H，J＝7.8Hz)，7.83(s，1H)，8.37(dd，1H，J1＝7.8Hz，J2＝1.9Hz).
实施例156-甲氧基-3-(2-硝基-苯硫基)-1-吡啶-2-基甲基-1H-吲哚一盐酸盐(化合物10).
向6-甲氧基-3-(2-硝基-苯硫基)-1-吡啶-2-基甲基-1H-吲哚的二氯甲烷溶液通入HCl-气，直至有机盐结晶出来。过滤分离标题化合物。
LC-MS4.04min(MH+＝392)；1H NMR(DMSO)δ3.78(s，3H，OCH3)，5.78(s，2H，NCH2)，6.77(dd，1H，J1＝7.8Hz，J2＝2.0Hz)，6.93(dd，1H，J1＝7.8Hz，J2＝0.8Hz)，7.22(d，1H，J＝7.8Hz)，7.26(d，1H，J＝2.0Hz)，7.34(m，2H)，7.48-7.52(m，1H)，7.59(t，1H，J＝7.0Hz)，7.96(s，1H)，8.08(t，1H，J＝7.0Hz)，8.27(dd，1H，J1＝7.8Hz，J2＝1.6Hz)，8.74(d，1H，J＝6.7Hz).
实施例161-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-基胺(化合物57，方案V的结构23，其中R1＝3，5-二氟苯基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H) a)1-(3，5-二氟-苄基)-6-硝基-1H-吲哚(方案V的结构19，其中R1＝3，5-二氟苯基，R3＝R4＝H)向6-硝基吲哚(162mg，1.0mmol)的DMF(4ml)溶液加入NaH(油中60％分散体；80mg，2.0mmol)。将所得深色溶液在室温下搅拌15分钟。加入3，5-二氟苄基溴(129μL，1.1mmol)。将反应混合物搅拌过夜，倒入酸化水中，用乙酸乙酯萃取两次。合并有机层，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩。产物经过SiO2柱纯化(庚烷/乙酸乙酯9∶1)，得到标题化合物，为黄色固体(270mg，收率＝94％)。
LCMS5.54min(100.0％，MH+＝289)；1H NMR(CDCl3)δ5.40(s，2H，CH2Ar)，6.58(m，2H)，6.71(d，1H，J＝3.5Hz)，6.75(m，1H)，7.26(s，1H)，7,41(d，1H，J＝3.5Hz)，7.71(d，1H，J＝8.3Hz)，8.05(dd，1H，J1＝8.3Hz，J2＝2.0Hz)，8.21(d，1H，J＝2.0Hz).
b)1-(3，5-二氟-苄基)-1H-吲哚-6-基胺(方案V的结构20，其中R1＝3，5-二氟苯基，R3＝R4＝H)向1-(3，5-二氟-苄基)-6-硝基-1H-吲哚(144mg，0.5mmol)的乙醇(20ml)溶液加入37％盐酸(80μL)和SnCl2.2H2O(600mg)。将反应混合物在60℃下搅拌40h，然后在真空中浓缩。将残余物倒入乙酸乙酯中，加入浓NaHCO3-溶液。将两-层相系统经过decalite过滤，以除去锡盐，滤液用乙酸乙酯萃取两次。合并有机层，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩。产物经过SiO2柱纯化(庚烷/乙酸乙酯9∶1)，得到标题化合物，为无色的油(89mg，收率＝69％)。
LCMS3.20min(97.7％，MH+＝259)；1H NMR(CDCl3)δ5.12(s，2H，CH2Ar)，6.52(m，2H)，6.56(d，1H，J＝3.5Hz)，6.63(m，1H)，7.97(dd，1H，J1＝8.3Hz，J2＝2.0Hz)，7.13(d，1H，J＝3.5Hz)，7,17(d，1H，J＝2.0Hz)，7.55(d，1H，J＝8.3Hz).
c)1-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-基胺(化合物57，方案V的结构23，其中R1＝3，5-二氟苯基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H)向1-(3，5-二氟-苄基)-1H-吲哚-6-基胺(25mg，0.1mmol)的DCM(4ml)溶液加入2-硝基苯硫化氯。将所得黄色溶液在室温下搅拌1小时。在真空中浓缩混合物，经过SiO2柱纯化(庚烷/乙酸乙酯9∶1)，得到标题化合物，为橙色固体(11.6mg，收率＝28％)。
LCMS5.11min(100.0％，MH+＝412)；1H NMR(CDCl3)δ5.22(s，2H，CH2Ar)，6.56(m，2H)，6.65(m，1H)，6.84(dd，1H，J1＝8.2Hz，J2＝1.2Hz)，7.00(dd，1H，J1＝8.2Hz，J2＝1.2Hz)，7.19(m，1H)，7.30(d，1H，J＝1.2Hz)，7.31(s，1H)，7.37(d，1H，J＝8.2Hz)7.49(m，1H)，8.27(dd，1H，J1＝8.2Hz，J2＝1.2Hz).
实施例17N-[1-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-基]-乙酰胺(化合物58，方案V的结构22，其中R1＝3，5-二氟苯基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H，Z＝甲基) 通用方法5酸酐与结构20的6-氨基吲哚反应，得到结构21化合物，继之以吲哚3-位硫化，得到结构22化合物(方案V)。
a)N-[1-(3，5-二氟-苄基)-1H-吲哚-6-基]-乙酰胺(方案V的结构21，其中R1＝3，5-二氟苯基，R3＝R4＝H，Z＝甲基)向1-(3，5-二氟-苄基)-1H-吲哚-6-基胺(25mg，0.1mmol)的DCM(4ml)溶液加入吡啶(25μL)和乙酸酐(9.8μL，0.11mmol)，在室温下搅拌过夜。将反应混合物倒入10ml水中，用NaHCO3中和，用DCM萃取两次。合并有机层，经Na2SO4干燥，在真空中干燥，得到粗化合物，为灰白色固体(23.3mg，收率＝84％)。产物无需进一步纯化即可使用。
LCMS4.10min(97.4％，MH+＝301)；1H NMR(CDCl3)δ2.18(s，3H，CH3CON)，5.28(s，2H，CH2Ar)，6.53(d，1H，J＝3.1)，6.58(m，2H)，6.68(m，1H)，6.87(dd，1H，J1＝8.3Hz，J2＝1.6Hz)，7.07(d，1H，J＝3.1Hz)，7,55(d，1H，J＝8.3Hz)，7.90(s，1H).
b)N-[1-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-基]-乙酰胺(化合物58，方案V的结构22，其中R1＝3，5-二氟苯基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H，Z＝甲基)向N-[1-(3，5-二氟-苄基)-1H-吲哚-6-基]-乙酰胺(23.3mg，0.08mmol)的二乙醚(4ml)溶液加入2-硝基苯硫化氯(14.7mg，0.09mmol)。将所得黄色溶液在室温下搅拌过夜。在真空中浓缩混合物，经过SiO2柱纯化(庚烷/乙酸乙酯9∶1)，得到标题化合物，为黄色固体(35.0mg，收率＝96％)。
LCMS4.26min(98.6％，MH+＝454)；1H NMR(DMSO)δ2.03(s，3H，CH3CON)，5.51(s，2H，CH2Ar)，6.89(dd，1H，J＝8.3Hz，J2＝1.2Hz)，6.95(m，2H)，7.17(dd，1H，J1＝8.3Hz，J2＝2.0Hz)，7.19(m，1H)，7.27(d，1H，J＝8.3Hz)，7,34(m，1H)，7.49(m，1H)，7.97(d，1H，J＝1.2Hz)，8.02(s，1H)，8.27(dd，1H，J1＝8.3Hz，J2＝1.2Hz).
实施例18N-[1-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-基]-2，2，2-三氟-乙酰胺(化合物59，方案V的结构22，其中R1＝3，5-二氟苯基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H，Z＝三氟甲基) 按照通用方法5，步骤a)使用1-(3，5-二氟-苄基)-1H-吲哚-6-基胺(17.7mg，69μmol)、吡啶(17μL)和三氟乙酸酐(9.68μL，70μmol)制备N-[1-(3，5-二氟-苄基)-1H-吲哚-6-基]-2，2，2-三氟-乙酰胺。化合物经过SiO2柱纯化(庚烷/乙酸乙酯9∶1)，得到标题化合物，为白色固体(10.9mg，收率＝61％)。
LCMS4.41min(82.1％，MH+＝355)按照通用方法5，步骤b)使用N-[1-(3，5-二氟-苄基)-1H-吲哚-6-基]-2，2，2-三氟-乙酰胺(10.9mg，31μmol)和2-硝基苯硫化氯(5.7mg，37μmol)制备N-[1-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-基]-2，2，2-三氟-乙酰胺。化合物经过HPLC柱纯化(MeCN/HZ2O)，得到标题化合物，为黄色固体(10.2mg，收率＝65％)。
LCMS4.65min(89.0％，MH+＝508)；1H NMR(DMSO)δ5.56(s，2H，CH2Ar)，6.87(dd，1H，J＝8.3Hz，J2＝1.2Hz)，7.01(m，2H)，7.20(m，1H)，7.35(m，1H)，7.37(dd，1H，J1＝8.3Hz，J2＝2.0Hz)，7.39(d，1H，J＝8.3Hz)，7.49(m，1H)，7,50(d，1H，J＝2.0Hz)，8.15(s，1H)，8.28(dd，1H，J1＝8.3Hz，J2＝2.0Hz).
实施例19化合物97N-[1-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-基]-2-氟-乙酰胺，方案VII的结构28，其中R1＝3，5-二氟苯基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H，Z1＝一氟甲基.
a)1-(3，5-二氟-苄基)-6-硝基-1H-吲哚，方案VII的结构19，其中R1＝3，5-二氟苯基，R2＝R3＝R4＝H.
在0℃下，向6-硝基-1H-吲哚(19.5g，120mmol)的NMP(500ml)溶液加入碳酸铯(39.1g，120mmol)。在0℃下搅拌30min后，加入3，5-二氟苄基溴(30.0g，144mmol)，使混合物温热至室温，搅拌18hr。将混合物倒入饱和氯化铵水溶液(1L)中，用乙酸乙酯萃取(2×500ml)。合并有机层，用H2O(2×500ml)和盐水(500ml)洗涤，干燥(Na2SO4)，浓缩，得到标题化合物(65g，黄色固体)，无需进一步纯化即可使用。
b)1-(3，5-二氟-苄基)-1H-吲哚-6-基胺，方案VII的结构20，其中R1＝3，5-二氟苯基，R2＝R3＝R4＝H.
将EtOH 96％(1L)加入到1-(3，5-二氟-苄基)-6-硝基-1H-吲哚中，将混合物在60℃下搅拌，直至全部原料溶解。加入37％HCl(37ml)，继之以氯化锡(II)二水合物(268g，1.19mol)，继续在60℃下搅拌18hr。将混合物冷却至室温后，在减压下除去溶剂。加入乙酸乙酯(800ml)，将混合物倒入饱和NaHCO3水溶液(1L)中，经过硅藻土过滤。分离各层，将有机层用H2O(2×500ml)和盐水(500ml)洗涤，干燥(Na2SO4)，浓缩，得到标题化合物(54g，褐色的油/固体)，无需进一步纯化即可使用。
c)[1-(3，5-二氟-苄基)-1H-吲哚-6-基]-氨基甲酸叔丁基酯，方案VII的结构26，其中R1＝3，5-二氟苯基，R2＝R3＝R4＝H.
将1-(3，5-二氟-苄基)-1H-吲哚-6-基胺溶于NMP(1L)，加入三乙胺(34ml，242mmol)，继之以二碳酸二叔丁酯(53g，242mmol)，将混合物在室温下搅拌18hr。将混合物倒入饱和NaHCO3水溶液(1.5L)中，用乙酸乙酯萃取(3×750ml)。合并有机层，用H2O(1L)和盐水(1L)洗涤，干燥(Na2SO4)，浓缩。粗产物用柱色谱纯化(庚烷/乙酸乙酯4∶1)，得到标题化合物(39g，109mmol，91％(三步)，白色固体)。
d)[1-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-基]-氨基甲酸叔丁基酯，方案VII的结构27，其中R1＝3，5-二氟苯基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H.
向[1-(3，5-二氟-苄基)-1H-吲哚-6-基]-氨基甲酸叔丁基酯(39g，109mmol)的二乙醚(750ml)溶液加入2-硝基苯硫化氯(20.4g，109mmol)，将反应混合物在室温下搅拌18hr。将混合物倒入饱和NaHCO3水溶液(1L)中，用乙酸乙酯萃取(2×300ml)。合并有机层，用H2O(400ml)和盐水(400ml)洗涤，干燥，浓缩，得到标题化合物(56g，黄色固体)，无需进一步纯化即可使用。
e)1-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-基胺，方案VII的结构23，其中R1＝3，5-二氟苯基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H.
将[1-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-基]-氨基甲酸叔丁基酯溶于CH2Cl2(1L)，在氮气氛下，在室温下滴加三氟乙酸(48ml，624mmol)。搅拌1h后，加入另一部分三氟乙酸(48ml，624mmol)，将反应混合物搅拌另外1小时。将混合物用CH2Cl2(500ml)和H2O(1L)稀释，加入3N NaOH，直至混合物的pH为11-12。分离各层，将有机层用H2O(500ml)和盐水(500ml)洗涤，干燥(Na2SO4)，浓缩，得到粗产物。产物用柱色谱纯化(庚烷/乙酸乙酯1∶1)，得到标题化合物(28g，68mmol，63％(两步)，红色/褐色固体)。
通用方法6酰氯(方法a)、羧酸(方法b)或磺酰氯(方法c)与结构23的6-氨基吲哚的反应，得到结构28和29的混合物(方案VII)。
方法a、b和c都可以利用相同的工艺进行，下面以方法a为例。
在0℃下，向1-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-基胺(300mg，0.73mmol)的CH2Cl2(7ml)溶液加入三乙胺(0.12ml，0.87mmol)。随后加入一氟乙酰氯(50μL，0.73mmol)，将混合物在室温下搅拌18hr。浓缩混合物，用快速柱色谱纯化(CH2Cl2/MeOH 99∶1)，得到化合物97(317mg，0.67mmol，92％，黄色固体)。
1H NMR(DMSO)δ4.82(s，1H)，5.03(s，1H)，5.52(s，2H)，6.89(dd，1H，J1-＝7.6Hz，J2＝1.1Hz)，6.98-7.01(m，2H)，7.20(tt，1H，J1＝9.5Hz，J2＝3.0Hz)，7.28-7.32(m，2H)，7.33-7.37(m，1H)，7.46-7.51(m，1H)，7.98(s，1H)，8.08(s，1H)，8.27(dd，1H，J1＝7.6Hz，J2＝1.1Hz)，10.15(s，1H).
按照通用方法6，制备下列化合物
实施例20按照通用方法3，制备下列化合物
实施例21化合物611-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-醇，方案VI的结构25，其中R1＝3，5-二氟苯基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H，R5＝OH.
在0℃下，向化合物63(240mg，0.56mmol)的CH2Cl2(10ml)溶液加入三氟化硼-二甲硫配合物(2.37ml，22.5mmol)。在0℃下搅拌2hr后，使反应混合物温热至室温，继续搅拌另外4hr。将反应混合物倒入冰水(20ml)中，加入乙酸乙酯(10ml)后，分离各层。将有机层用饱和NaHCO3水溶液(20ml)和盐水(20ml)洗涤，经Na2SO4干燥。浓缩，得到粗产物，用快速色谱纯化(庚烷/乙酸乙酯3∶2)，得到化合物61，为黄色的油(87mg，0.21mmol，38％)。
1H NMR(CDCl3)δ4.75(2，1H)，5.29(s，2H)，4.66(m，1H)，6.72-6.79(m，3H)，6.98(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝1.5Hz)，7.17-7.21(m，1H)，7.27-7.31(m，1H)，7.35-7.37(m，3H)，8.27(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝1.5Hz).
实施例22化合物1093-(2-硝基-苯硫基)-1-吡啶-2-基甲基-1H-吲哚-6-羧酸二甲基酰胺，方案IV的结构15，其中R1＝2-吡啶基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H，R8＝R9＝Me.
a)1-吡啶-2-基甲基-1H-吲哚-6-羧酸甲基酯.
在氮气氛下在0℃下，向1H-吲哚-6-羧酸甲基酯(合成参见实施例2a)，2.47g，14.1mmol)的NMP(140ml)溶液加入Cs2CO3(10.1mg，31mmol)。搅拌15min后，加入2-吡啶甲基氯盐酸盐(2.77g，16.9mmol)，将混合物在室温下搅拌18h。加入乙酸乙酯(200ml)，将混合物用饱和氯化铵水溶液(3×150ml)和盐水(200ml)洗涤。将有机相干燥(Na2SO4)，浓缩。粗产物用柱色谱纯化(乙酸乙酯/庚烷1∶3)，得到标题化合物，为无色的油，放置后缓慢结晶(2.72g，10.2mmol，72％)。
b)3-(2-硝基-苯硫基)-1-吡啶-2-基甲基-1H-吲哚-6-羧酸甲基酯，方案IV的结构13，其中R1＝2-吡啶基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H.
在室温下，向1-吡啶-2-基甲基-1H-吲哚-6-羧酸甲基酯(2.72g，10.2mmol)的二氯甲烷(75ml)溶液加入2-硝基苯硫化氯(1.93g，10.2mmol)的二氯甲烷(75ml)溶液。将混合物在室温下搅拌24hr。浓缩反应混合物，粗产物用柱色谱纯化(乙酸乙酯/庚烷1∶5至1∶2)，得到标题化合物，为黄色固体(3.21g，7.65mmol，75％)。
c)3-(2-硝基-苯硫基)-1-吡啶-2-基甲基-1H-吲哚-6-羧酸，方案IV的结构14，其中R1＝2-吡啶基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H.
向3-(2-硝基-苯硫基)-1-吡啶-2-基甲基-1H-吲哚-6-羧酸甲基酯(3.0g，6.58mmol)的二噁烷(65ml)悬液加入LiOH.H2O(1.66g，39.6mmol)的水(65ml)溶液。将反应混合物在60℃下搅拌过夜。然后向混合物加入15％HCl水溶液，酸化至pH 6，混合物用乙酸乙酯萃取(2×100ml)。合并有机层，经Na2SO4干燥，浓缩，得到黄色粉末。使产物从庚烷/乙酸乙酯中重结晶，得到标题化合物，为黄色/橙色晶体(2.47g，6.09mmol，93％)。
通用方法7结构14的6-羧基吲哚的酰胺化，得到结构15的6-甲酰胺吲哚(方案IV)。
在氮气氛下向3-(2-硝基-苯硫基)-1-吡啶-2-基甲基-1H-吲哚-6-羧酸(700mg，1.73mmol)的无水CH2Cl2(70ml)溶液加入DIPEA(0.9ml，5.2mmol)、TBTU(840mg，2.6mmol)和二甲胺盐酸盐(420mg，5.1mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后倒入饱和NaHCO3水溶液(100ml)中。将有机层用盐水(50ml)洗涤，干燥(Na2SO4)，浓缩。粗产物经过柱色谱纯化(乙酸乙酯/MeOH 95∶5)，得到化合物109(540mg，1.25mmol，72％，黄色固体)。
1H-NMR(CDCl3)δ2.97(s，3H)，3.11(s，3H)，5.53(s，2H)，6.90(dd，1H，J1＝7.6Hz，J2＝1.5Hz)，6.95(d，1H，J＝7.6Hz)，7.17-7.28(m，4H)，7.51(d，1H，J＝7.6Hz)，7.54(s，1H)，7.61-7.66(m，2H)，8.28(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝1.5Hz)，8.61(d，1H，J＝4.6Hz).
利用通用程序7制备下列化合物
实施例23化合物118N-[3-(2-硝基-苯硫基)-1-嘧啶-5-基甲基-1H-吲哚-6-基]-甲酰胺，方案VII的结构28，其中R1＝3，5-嘧啶基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H，Z＝H
a)6-硝基-1-嘧啶-5-基甲基-1H-吲哚将5-(羟甲基)嘧啶(16.2g，147mmol)溶于500ml CH2Cl2，冷却至-40℃。在-40℃下加入MsCl(16.0g，140mmol)。将混合物搅拌1小时，达到-20℃。原样使用溶液。
将6-硝基吲哚-1H-吲哚(35.6g，220mmol)溶于750ml DMF，分批加入NaH(50％，12g，250mmol)，将混合物搅拌1小时。将混合物冷却至-40℃，滴加甲磺酸酯的溶液。使混合物达到室温过夜。将混合物用水猝灭，用乙酸乙酯萃取(2x)。合并有机层，用水(2x)和盐水洗涤，经Na2SO4干燥。在真空中浓缩后，产物借助柱色谱纯化(二氧化硅，庚烷/乙酸乙酯(1∶1)→(1∶4))，得到标题化合物，为黄色固体(14g，55mmol，39％)。
b)1-嘧啶-5-基甲基-1H-吲哚-6-基胺.
将6-硝基-1-嘧啶-5-基甲基-1H-吲哚(4.1g，16.1mmol)溶于100ml THF和100ml异丙醇。加入Pd/C(2g)，将混合物在H2-气氛(气囊)下搅拌2小时。将混合物经过Celite过滤，用乙酸乙酯洗涤，浓缩后得到标题化合物(3.5g，15.6mmol，97％)。
c)1-嘧啶-5-基甲基-1H-吲哚-6-基)-氨基甲酸叔丁基酯将1-嘧啶-5-基甲基-1H-吲哚-6-基胺(5.5g，24.6mmol)溶于100ml NMP，加入三乙胺(3.5g，35mmol)和二碳酸二叔丁酯(7.0g，32mmol)。将混合物搅拌过夜，用饱和NaHCO3猝灭，用甲苯萃取(3x)。合并有机层，用水(4x)和盐水洗涤，经Na2SO4干燥。浓缩各层，得到标题化合物(3.1g，39％)。
d)[3-(2-硝基-苯硫基)-1-嘧啶-5-基甲基-1H-吲哚-6-基]-氨基甲酸叔丁基酯将1-嘧啶-5-基甲基-1H-吲哚-6-基)-氨基甲酸叔丁基酯(3.1g，9.6mmol)溶于150ml CH2Cl2，加入2-硝基苯硫化氯(1.86g，9.8mmol)。将混合物搅拌18小时，用饱和NaHCO3猝灭，用乙酸乙酯萃取(2x)。合并有机层，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥。产物借助柱色谱纯化(二氧化硅，庚烷/乙酸乙酯(1∶1))，得到标题化合物，得到黄色固体(3.8g，83％)。
e)N-[3-(2-硝基-苯硫基)-1-嘧啶-5-基甲基-1H-吲哚-6-基]-甲酰胺将[3-(2-硝基-苯硫基)-1-嘧啶-5-基甲基-1H-吲哚-6-基]-氨基甲酸叔丁基酯(3.8g，8.0mmol)溶于150ml甲酸，搅拌4小时。在真空中浓缩溶液。加入饱和NaHCO3，混合物用CH2Cl2萃取(2x)。合并有机层，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥。使溶液放置过夜。过滤所生成的固体，得到化合物118与方案VII结构23的混合物，其中R1＝3，5-嘧啶基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H(2.4g)。
化合物1181H NMR(CDCl3+drop MeOD)δ5.47(s，2H)，6.91(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝1.1Hz)，6.99(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝1.9Hz)，7.19-7.23(m，1H)，7.27-7.31(m，1H)，7.33(s，1H)，7.42(d，1H，J＝8.4Hz)，7.49(s，1H)，8.22(d，1H，J＝1.9Hz)，8.27(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝1.1Hz)，8.66(s，2H)，9.16(s，1H).
实施例24化合物1193-(2-硝基-苯硫基)-1-吡啶-2-基甲基-1H-吲哚-6-甲腈，方案I的结构3，其中R1＝2-吡啶基，R2＝2-硝基苯基，R3＝R4＝H，R5＝CN.
a)在rt下，向1H-吲哚-6-甲腈(1.00g，7.04mmol)的二乙醚(50ml)溶液加入2-硝基苯硫化氯(1.34g，7.04mmol)，将反应混合物搅拌18hr。浓缩混合物，粗产物用柱色谱纯化(乙酸乙酯/庚烷1∶4→4∶1)，得到3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-甲腈(1.62g，5.49mmol，78％)。
b)在0℃下，向3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-甲腈(200mg，0.68mmol)的DMF(5ml)溶液加入Cs2CO3(442mg，1.36mmol)，将混合物搅拌20min。随后加入2-吡啶甲基氯盐酸盐(112mg，0.68mmol)，将混合物在室温下搅拌18hr。加入饱和NaHCO3水溶液，混合物用乙酸乙酯萃取(2x)。合并有机层，用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，浓缩。粗产物用柱色谱纯化，得到化合物119(223mg，0.58mmol，85％)。
1H NMR(CDCl3)δ5.54(s，2H)，6.86(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝1.1Hz)，7.04(d，1H，J＝8.4Hz)，7.19-7.23(m，1H)，7.26-7.31(m，2H)，7.40(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝1.1Hz)，7.59(d，1H，J＝8.4Hz)，7.70(td，1H，J1＝8.4Hz，J2＝1.9Hz)，7.76(s，1H)，7.78(s，1H)，8.29(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝1.1Hz)，8.63(d，1H，J＝3.0Hz).
按照通用方法3，制备下列化合物
实施例25化合物1203-(2-硝基-苯硫基)-1-吡啶-2-基甲基-1H-吲哚-6-甲腈一盐酸盐 将浓盐酸(0.0225ml)加入到化合物119(0.093g)的二噁烷溶液中。将混合物搅拌20min，然后在减压下浓缩，得到化合物120(0.096g)。
1H NMR(MeOD)δ6.01(s，2H)，6.98(dd，1H，J1＝7.6Hz，J2＝1.1Hz)，7.28-7.32(m，1H)，7.36-7.41(m，1H)，7.48(dd，1H，J1＝7.6Hz，J2＝1.1Hz)，7.53(d，1H，J＝8.4Hz)，7.60(d，1H，J＝8.4Hz)，7.93(t，1H，J＝6.1Hz)，8.08(s，1H)，8.10(s，1H)，8.27(dd，1H，J1＝8.4Hz，J2＝1.1Hz)，8.44(td，1H，J1＝8.4Hz，J2＝1.1Hz)，8.85(dd，1H，J1＝6.1Hz，J2＝1.9Hz).
在反式活化测定法和结合测定法中测试化合物的雄激素受体活性。
供试化合物的(抗)雄激素活性(EC50和固有活性)是在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞的体外生物测定法中测定的，所述细胞是被人雄激素受体表达质粒和一种报道质粒所稳定转染的，在所述报道质粒中MMTV-启动子与萤光素酶报道基因连接。细胞系CHO-AR-pMMTV-LUC1G12-A5-CA在Schoonen et al.(2000)，Journal of SteroidBiochemistry and Molecular Biology 74(4)213-222中有所描述。供试化合物的抗雄激素活性是通过在1nM DHT(5α-二氢睾酮，17β-羟基-5α-雄甾烷-3-酮)的存在下，抑制萤光素酶经由雄激素受体的反式活化作用来测定的。抗雄激素活性的固有活性是在参照物抗雄激素2-羟基-2-甲基-N-(4-硝基-3-三氟甲基-苯基)-丙酰胺(羟基氟他胺)的存在下测定的，设为100％。就雄激素活性而言，在100nM DHT存在下的最大固有活性被设为100％。结果列在表4中。
表4雄激素受体活性
注1EC50等级+++＜5nM；++在5与100nM之间；+＜1000nM；±在1000与10000nM之间；-＞10000nM注2功效等级(最大固有活性，也就是在100nM DHT存在下所观察到的固有活性，被设为1.00)++≥0.80；+在0.50与0.80之间；±在0.20与0.50之间；-＜0.20表5化合物的雄激素活性(EC50、效力和功效)是在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞的体外生物测定法中测定的，所述细胞是被人雄激素受体表达质粒和一种报道质粒所稳定转染的，在所述报道质粒中MMTV-启动子与萤光素酶报道基因连接。细胞系CHO-AR-pMMTV-LUC 1G12-A5-CA在Schoonen et al.(J.Steroid Biochem.Molec.Biol.2002；74213-222)中有所描述。化合物的雄激素受体活性是在0.1μmol/lonapristone的存在下测定的。在100nmol/l DHT存在下的最大功效被设为100％。效力表示为DHT活性的百分比。
表5雄激素受体活性
注1效力等级++＞5％；+在1％与5％之间；±在0.1％与1％之间。
注2功效等级(最大固有活性，也就是在100nM DHT存在下所观察到的固有活性，被设为1.00)++≥0.80；+在0.50与0.80之间；±在0.20与0.50之间；-＜0.20与来自重组CHO细胞的胞质人雄激素受体的竞争性结合的测定用于估计供试化合物对存在于胞质溶胶中的雄激素受体的相对结合亲和性(RBA)，所述胞质溶胶是由重组CHO细胞系CHO-AR-pMMTV-LUC1G12-A5-CA制备的。在这种结合测定法中测试了化合物63和化合物92，发现这两种化合物都具有＞1％的相对结合亲和性，相对于DHT而言。
权利要求
1.下式化合物 其中X是S、SO或SO2；R1是5-或6-元单环、杂环或碳环、饱和或不饱和的环结构，可选地被一个或多个取代基取代，所述取代基选自由卤素、CN、(1C-4C)氟代烷基、硝基、(1C-4C)烷基、(1C-4C)烷氧基或(1C-4C)氟代烷氧基组成的组；R2是2-硝基苯基、2-氰基苯基、2-羟甲基-苯基、吡啶-2-基、吡啶-2-基-N-氧化物、2-苯甲酰胺、2-苯甲酸甲酯或2-甲氧基苯基；R3是H、卤素或(1C-4C)烷基；R4是H、OH、(1C-4C)烷氧基或卤素；R5是H、OH、(1C-4C)烷氧基、NH2、CN、卤素、(1C-4C)氟代烷基、NO2、羟基(1C-4C)烷基、CO2H、CO2(1C-6C)烷基，或者R5是NHR6，其中R6是可选被一个或多个卤素取代的(1C-6C)酰基、S(O)2(1C-4C)烷基或可选被(1C-4C)烷基或一个或多个卤素取代的S(O)2芳基，或者R5是C(O)N(R8，R9)，其中R8和R9各自独立地是H、(3C-6C)环烷基或CH2R10，其中R10是H、(1C-5C)烷基、(1C-5C)烯基、羟基(1C-3C)烷基、羧基(1C-4C)烷基的(1C-4C)烷基酯、(1C-3C)烷氧基(1C-3C)烷基、(单或二(1C-4C)烷基)氨基甲基、(单或二(1C-4C)烷基)氨基羰基或3-、4-、5-或6-元单环、碳环或杂环、芳族或非芳族的环，或者R8和R9与N一起构成可选被(1C-4C)烷基取代的杂环5-或6-元饱和或不饱和的环；或者其盐或水合物形式。
2.根据权利要求1的化合物，其特征在于R1是5-或6-元单环、杂环或碳环、饱和或不饱和的环结构，可选地被一个或多个取代基取代，所述取代基选自由卤素、CN、CF3、硝基、甲氧基、三氟甲氧基或甲基组成的组；R2是2-硝基苯基、2-氰基苯基、2-羟甲基-苯基、吡啶-2-基、吡啶-2-基-N-氧化物、2-苯甲酰胺、2-苯甲酸甲酯或2-甲氧基苯基；R3是H、卤素或(1C-2C)烷基；R4是H或F。
3.根据权利要求2的化合物，其特征在于R5是H、OH、(1C-4C)烷氧基、CN、卤素、(1C-4C)氟代烷基、NO2、羟基(1C-4C)烷基、CO2(1C-6C)烷基，或者R5是NHR6，其中R6是可选被一个或多个卤素取代的(1C-6C)酰基、S(O)2(1C-4C)烷基或可选被(1C-4C)烷基或一个或多个卤素取代的S(O)2芳基，或者R5是C(O)N(R8，R9)，其中R8和R9各自独立地是H、(3C-6C)环烷基或CH2R10，其中R10是H、(1C-5C)烷基、(1C-5C)烯基、羟基(1C-3C)烷基、羧基(1C-4C)烷基的(1C-4C)烷基酯、(1C-3C)烷氧基(1C-3C)烷基、(单或二(1C-4C)烷基)氨基甲基、(单或二(1C-4C)烷基)-氨基羰基或3-、4-、5-或6-元单环、碳环或杂环、芳族或非芳族的环，或者R8和R9与N一起构成可选被(1C-4C)烷基取代的杂环5-或6-元饱和或不饱和的环。
4.根据权利要求3的化合物，其特征在于R3是H或卤素；R4是H；R5是H、OH、(1C-4C)烷氧基、CN、F、Cl、CF3、NO2、羟基(1C-4C)烷基、CO2(1C-6C)烷基，或者R5是NHR6，其中R6是可选被一个或多个卤素取代的(1C-3C)酰基，或者R5是C(O)N(R8，R9)，其中R8和R9各自独立地是H、(3C-5C)环烷基或CH2R10，其中R10是H、(1C-5C)烷基、(1C-5C)烯基、羟基(1C-3C)烷基、羧基(1C-2C)烷基的(1C-2C)烷基酯、(1C-3C)烷氧基(1C-3C)烷基、(单或二(1C-4C)烷基)氨基甲基、(单或二(1C-4C)烷基)氨基羰基、(3C-5C)环烷基或5-元杂环。
5.根据权利要求4的化合物，其特征在于X是S或SO2；R2是2-硝基苯基、2-羟甲基-苯基、2-苯甲酰胺、2-甲氧基苯基、2-氰基苯基或吡啶-2-基；R3是H或F；R5是H、OH、(1C-2C)烷氧基、CN、F、Cl、CF3、NO2、羟基(1C-4C)烷基、CO2(1C-4C)烷基，或者R5是NHR6，其中R6是甲酰基、乙酰基、氟乙酰基、二氟乙酰基或三氟乙酰基，或者R5是C(O)N(R8，R9)，其中R8是H，R9是H、环丙基，或者R9是CH2R10，其中R10是H、(1C-2C)烷基、羟基(1C-2C)烷基、甲氧基(1C-2C)烷基、环丙基。
6.根据权利要求5的化合物，其特征在于X是S；R1是3，5-二氟苯基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、嘧啶-5-基、嘧啶-4-基、吡嗪-2-基、3-氟苯基、3-氰基苯基或3-硝基苯基；R2是2-硝基苯基、2-羟甲基-苯基、2-甲氧基苯基、2-氰基苯基或吡啶-2-基；R3是H；R5是OH、(1C-2C)烷氧基、CN、CF3、NO2、羟基(1C-4C)烷基、CO2(1C-4C)烷基或NHR6，其中R6是甲酰基、乙酰基、氟乙酰基、二氟乙酰基或三氟乙酰基。
7.根据权利要求6的化合物，其特征在于R1是3，5-二氟苯基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、嘧啶-5-基、嘧啶-4-基或吡嗪-2-基；R2是2-硝基苯基或2-羟甲基-苯基；R5是OH、(1C-2C)烷氧基、CN、羟基(1C-4C)烷基或NHR6，其中R6是甲酰基、乙酰基、氟乙酰基、二氟乙酰基或三氟乙酰基。
8.根据权利要求7的化合物，其特征在于R1是3，5-二氟苯基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、嘧啶-5-基或嘧啶-4-基；R2是2-硝基苯基；R5是OH、(1C-2C)烷氧基、CN或NHR6，其中R6是甲酰基、乙酰基、氟乙酰基、二氟乙酰基或三氟乙酰基。
9.根据权利要求8的化合物，选自下组6-甲氧基-3-(2-硝基-苯硫基)-1-嘧啶-5-基甲基-1H-吲哚、3-(2-硝基-苯硫基)-1-吡啶-2-基甲基-1H-吲哚-6-甲腈、3-(2-硝基-苯硫基)-1-吡啶-2-基甲基-1H-吲哚-6-甲腈-盐酸盐、3-(2-硝基-苯硫基)-1-嘧啶-5-基甲基-1H-吲哚-6-甲腈、3-(2-硝基-苯硫基)-1-嘧啶-4-基甲基-1H-吲哚-6-甲腈、N-[1-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-基]-2-氟-乙酰胺和N-[3-(2-硝基-苯硫基)-1-嘧啶-5-基甲基-1H-吲哚-6-基]-甲酰胺。
10.根据权利要求5的化合物，其特征在于X是S；R1是3，5-二氟苯基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、3-氟苯基、3-氰基苯基或3-硝基苯基；R2是2-硝基苯基、2-羟甲基-苯基、2-甲氧基苯基、2-氰基苯基或吡啶-2-基；R3是H；R5是C(O)N(R8，R9)，其中R8是H，R9是H或CH2R10，其中R10是H、(1C-2C)烷基、羟基(1C-2C)烷基或甲氧基(1C-2C)烷基。
11.根据权利要求10的化合物，其特征在于R1是3，5-二氟苯基、吡啶-2-基或吡啶-3-基；R2是2-硝基苯基或2-羟甲基-苯基；R5是C(O)N(R8，R9)，其中R8是H，R9是CH2R10，其中R10是H或(1C-2C)烷基。
12.根据权利要求11的化合物，它是1-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-羧酸甲基酰胺。
13.根据权利要求4的化合物，其特征在于X是S；R1是3，5-二氟苯基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、3-氟苯基、3-氰基苯基或3-硝基苯基；R2是2-硝基苯基、2-羟甲基-苯基、2-甲氧基苯基、2-氰基苯基或吡啶-2-基；R3是H；R5是C(O)N(R8，R9)，其中R8和R9各自独立地是H或CH2R10，其中R10是H、(1C-5C)烷基、(1C-5C)烯基、羟基(1C-3C)烷基、(1C-3C)烷氧基(1C-3C)烷基或(单或二(1C-4C)烷基)氨基甲基。
14.根据权利要求13的化合物，其特征在于R1是3，5-二氟苯基、吡啶-2-基或吡啶-3-基；R2是2-硝基苯基或2-羟甲基-苯基；R5是C(O)N(R8，R9)，其中R8和R9各自独立地是H或CH2R10，其中R10是H、(1C-5C)烷基、羟基(1C-3C)烷基或(1C-3C)烷氧基(1C-3C)烷基。
15.根据权利要求14的化合物，它是1-(3，5-二氟-苄基)-3-(2-硝基-苯硫基)-1H-吲哚-6-羧酸二甲基酰胺。
16.用在疗法中的权利要求1-15任意一项的化合物。
17.药物组合物，包含根据权利要求1-15任意一项的化合物和药学上可接受的载体。
18.根据权利要求17的药物组合物，用于治疗选自雄激素受体相关性障碍、雄激素相关性障碍和雄激素不足的障碍。
19.根据权利要求1-15任意一项的化合物制造药物的用途，所述药物用于治疗雄激素受体相关性障碍、雄激素相关性障碍和雄激素不足。
20.治疗一种障碍的方法，所述障碍选自由雄激素受体相关性障碍、雄激素相关性障碍和雄激素不足组成的组，所述方法包含对需要的受治疗者给以药学上有效量的根据权利要求1-15任意一项的化合物。
全文摘要
本发明提供非甾族化合物，它们具有雄激素受体亲和性，可用于雄激素－受体相关性治疗，具有根据式(1)的结构其中，X是S、SO或SO
文档编号C07D413/06GK1714078SQ200380103950
公开日2005年12月28日 申请日期2003年11月3日 优先权日2002年11月7日
发明者P·H·H·赫姆肯斯, H·T·斯托克, N·M·蒂尔辉斯, J·P·M·洛默斯, J·范德罗 申请人:阿克佐诺贝尔公司