专利名称：：3-(d-吡喃葡萄糖基)噻唑衍生物及其制备方法和应用的制作方法3-(D-吡喃葡萄糖基)噻唑衍生物及其制备方法和应用(一)
技术领域：
.本发明涉及一种新的3-(D-p比喃葡萄糖基)噻唑衍生物和制备方法，及其在制备抗胂瘤药物中的应用。(二)
背景技术：
：糖类化合物是自然界存在的一大类具有广谱化学结构和生物学功能的有机化合物,在体内具有重要的和复杂的生理作用和生理活性。研究发现，许多糖类化合物本身具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤活性，但由于其在治疗疾病的同时也会给身体带来毒副作用，因而限制了其作为药物的应用。对糖及其衍生物进行化学修饰可以提高生物活性，降低毒副作用，因此引起了高度重视。许多天然化合物分子中含有嚷唑环，Lyngbyabe11inA,Do丄labellin等，从中筛选出具有生理活性的药物，含瘗唑环的化合物在有机合成和医药化学中的应用都引起了广泛关注，是近年来药物化学的一大热点。Masuda小组研究的噻唑啉衍生物是一类很好的抗HIV-1RT抑制剂。糖类化合物在生命过程中扮演着重要的角色纤维素到遗传物质如DNA等都体现出糖类广泛独特的生理功能。经^f务饰的糖基前体可用于合成具有生理活性和潜药效的糖基杂环化合物，并且具有制备方法简单、原料易得等优点。然而，天然存在的含噻唑环的糖基杂环化合物不仅种类少含量低，远远不能满足研究的需要，因此含噻唑环的糖基杂环化合物大多通过合成手段得到。在过去几十年中基糖基杂环化合物的研究有了一定的进步，并在有机合药物开发、大分子等领域显示出越来越广泛的前景。糖类药物的重要特点是具有较好的水溶性，可存在于细胞外围的水相中，较难进入脂溶性较强细胞内部，而杂环类化合物则具有较好的脂溶性，且多数杂环类化合物具有较好的生物活性。因此把一些具有生物活性的噻唑或吡啶片段与糖类化合物进行拼接，就有可能获得即可在细胞外又能进入细胞内发挥作用的新化合物。目前，国内外关于杂环药物的研究十分活跃，主要是一些具有新颖结构特征的含杂环化合物及其生物活性的研究。糖类药物涉及的临床适应症主要包括肺瘤、AIDS、流行性感冒、细菌感染及糖类疫苗等，具有重要的研究价值和实用潜力。
发明内容本发明的目的是4^共一种新的具有抗癌活性特征的3-(D-吡喃葡萄糖基)噻唑衍生物及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明所述3-(D-吡喃葡萄糖基)噻唑衍生物的结构式如式(VII)所示(VII)式(VII)中，Ri为苯酰基、甲酰基或乙酰基；W为曱基、乙基、乙酰基、氟苯基、氯苯基、碘苯基、甲氧基苯基或硝基苯基；W为氮、200910100893.6曱基、乙基或苯基。所述RS优选为氟苯基、氯苯基、碘苯基、甲氧基苯基或硝基苯基；R"尤选为氢。本发明还提供制备所述的3-(D-吡喃葡萄糖基).噻唑衍生物的方法，所述的方法为在质量体积浓度为0.1-0.4g/ml的;威的醇溶液中加入如式(VI)所示的3-(2,3,4,6-四-0-特戊酰基-D-吡喃葡萄糖基)p塞唑衍生物，在2CTC-8(TC温度下搅拌反应，TLC跟踪检测反应至反应完全，反应液分离处理得到如式(vn)所示的3-(D-吡喃葡萄糖基)，塞唑衍生物；所述的如式(VI)所示的3-(2，3，4,6-四-O-特戊酰基-D-吡喃葡萄糖基)噻唑衍生物和碱的物质的量比为1:18~75;本发明所述的制备方法中，所述的碱的醇溶液为下列之一KOH/EtOH溶液、MeNH2/MeOH溶液、Me2NH/MeOH溶液、NH3/MeOH溶液或NaOMe/MeOH溶液；优选为KOH/EtOH溶液或NaOMe/MeOH溶液。所述的3-(2,3,4,6-四-O-特戊酰基-D-吡喃葡萄糖基)噻唑衍生物和石威的物质的量比优选为1:18。本发明所述反应温度为20~80°C，优选为6(TC。本发明釆用TLC跟踪检测反应，通常反应时间为45小时。所述的反应液分离处理步骤为反应结束后，反应液加入盐酸至pH值为6.5~8.5,减压蒸馏蒸干，剩余固体加入曱醇溶解完全，过滤，滤液浓缩成固体后，干法上样，以乙酸乙酯和甲醇体积比10:1的混合溶液为洗脱剂，柱层析分离得到如式(VII)所示的3-(D-吡喃葡萄糖基)瘗唑衍生物。本发明的所述的式(VI)所示的3~(2,3,4，6-四-O-特戊酰基-D-吡喃葡萄糖基)噻唑衍生物由式(V)所示的特戊酰基保护的糖基硫脲化合物与co-溴代酮环合得到，所述的式(V)所示的特戊酰基保护的糖基硫脲化合物由式(IV)所示的2,3，4,6-四-0-特戊酰基-D-吡喃葡萄糖胺与式(VIII)所示的异碌L氰酸酯类书f生物反应得到，所述的式(IV)所示的化合物由式(III)所示的2,3,4,6-四-0-特戊酰基-D-吡喃葡萄糖叠氮在甲醇中经Pd/C氢化得到；式(ffl)所示的化合物由式(II)所示的1,2,3,4,6-五-0-特戊酰基-D-吡喃葡萄糖与三曱基硅基叠氮和四氯化锡反应得到；式(II)所示化合物由式(I)所示葡萄糖为起始原料，在氯仿和吡啶混合溶剂中与特戊酰氯反应得到。上述式(I)式(VI)的制备路线已在*fy/i^es/s.2008,",1994-1996中公开。较为具体的，推荐本发明所述的3-(D-吡喃葡萄糖基)p塞唑衍生物的制备方法按照以下步骤进行在质量体积浓度为0.1-0.4g/ml的碱的醇溶液中加入如式(VI)所示的3-(2,3，4，6-四-O-特戊酰基-D-吡喃葡萄糖基)噻唑衍生物，在20。C-80。C温度下搅拌反应4~5小时，TLC跟踪检测反应至反应完全，反应液加入盐酸至pH值为6.58.5，减压蒸馏蒸千，剩余固体加入甲醇溶解完全，过滤，滤液浓缩成固体后，干法上样，以乙酸乙酯和曱醇体积比l(hl的混合溶液为洗脱剂，柱层析分离得到如式'(VII)所示的3-(D-吡喃葡萄糖基)瘗唑书f生物；所述的如式(VI)所示的3-(2,3,4,6-四-O-特戊酰基-D-吡喃葡萄糖基)口塞唑衍生物和碱的物质的量比为1:1875;所述的碱的醇溶液为下列之一KOH/EtOH溶液或NaOMe/MeOH溶液。本发明所述的3-(D-p比喃葡萄糖基)遙唑衍生物在制备抗肿瘤药物中的应用发明人将制备的3-(D-吡喃葡萄糖基)噻唑衍生物应用于Hela细胞(人宫颈癌细胞)、BEL-7402(人肝癌细胞)和HCT-8(人结肠癌细胞)，进行抗癌活性测试，用MTT法测定上述肺瘤细胞的增殖情况，结果表明对HCT-8细胞有较好的抑制作用，对Hda细胞、BEL-7402细胞有一定的抑制作用。本发明所述的3-(D-吡喃葡萄糖基)噻唑衍生物可应用于制备抗肿瘤药物中，所述的肿瘤为Hda细胞导致的宫颈癌、BEL-7402细胞导致的肝癌或HCT-8细胞导致的结肠癌。本发明的有益效果为提供一种新的具有抗癌活性的3-(D-吡喃葡萄糖基)噻唑衍生物，对HCT-8细胞有较好的抑制作用，可应用于制备抗肿瘤药物中。(四)说明书附图图1实施例1制得的1-苯酰基-4-甲基-3-(D-吡喃葡萄糖基)噻唑化合物的氢谱具体实施方式下面结合具体实施例对本发明所进一步说明，但本发明的保护范围并不限于此。实施例1:1-苯酰基-4-曱基-3-(D-吡喃葡萄糖基)噻唑化合物的制备在一定温度(60°C)下，配制浓度为O.lg/ml的KOH/EtOH溶液10ml,然后加入716mg(lmmol)1-苯酰基-4-曱基-3-(2，3,4,6-四-O-特戊酰基-D-吡喃葡萄糖基)噻唑搅拌5小时，TLC点板检测，以乙酸乙酯和甲醇体积比10:l的混合溶液为展开剂，反应完全后，加入2N的盐酸至pH值为7,将溶剂用旋转蒸发仪除去溶剂，得到黄色固体，加入10ml曱醇完全溶解-,过滤，将滤液浓缩到固体后，干法上样，以乙酸乙酯和曱醇体积比10:l的混合溶液为洗脱剂，柱层析得到白色固体309mg,产率为81.4°/。；mp126—128。C.&NMR(CD3OD):57.96(d，J=8Hz，2H)，7.55-7.43(m，3H),6.73(d,J=4.8Hz,1H)，5.91(d，J=4.6Hz,1H),4,06(d,J=2.2Hz，1H)，3.76-3.62(m,5H),3,45(m,1H),2.38(s，3H).13CNMR(CD3OD):d=176.48,176.08,170.80,169.17，169.10,137.45,136.23,1301.56，129.21,127.71，104.16，82.12,77.23,72.23,69.45，65.92，61.16，15.28.Anal.CalcdforC17H20N2O6S:C,53.67;H,5.30;N,7.36,Found:C,53.61;H,5.33;N，7.30.实施例2:l-苯酰基-4-(4-硤苯基)-3-(D-吡喃葡萄糖基)瘗唑化合物的制备在一定温度(20°C)下，配制浓度为0.2g/ml的MeMVMeOH溶液10ml,然后加入904mg(lmmol)1-苯酰基-4(4-碘苯基)-3-(2，3,4，6-四-0-特戊酰基-D-p比喃葡萄糖基)p塞唑搅拌4小时，TLC点板检测，以乙酸乙酯和甲醇体积比10:l的混合溶液为展开剂，反应完全后，加入2N的盐酸至pH值为7,将溶剂用旋转蒸发仪除去溶剂，得到黄色固体，加入10ml曱醇完全溶解，过滤，将滤液浓縮到固体后，干法上样，以乙酸乙酯和曱醇体积比10:1的混合i容液为洗脱剂，柱层析得到白色固体352mg,产率为62.0%;mp179-181°C;HNMR(CD3OD):88.01(q,J=8.2Hz,2H)，7.68(t,J=6.0Hz,4H)，7.65(d,J=8.8Hz,1H),7.56(q，J=6.6Hz,2H),6.01(d,J=6.2Hz,1H),5.6(t,J=8.4Hz，1H),5.18-5.23(m，3H),4.253(d,J=6.2Hz,1H):4.18(q,J=10.2Hz,1H),3.92(t，J=6.4Hz,1H).13NMR(CD3OD):S178.98，176.80,176.74，135.79，132.32,132.29，131.82,129.36,127.76,116.32,116.69，114.74,114.66,77.06,77.19,76.32，74.72，79.12，62.28,60.27.Anal.CalcdforC22H21IN206S:C,59.14;H,4.62;N,7.94.Found:C，59.17;H，4.60;N,7.98.实施例3:1-苯酰基-4-(4-硝基苯基)-3-(D-吡喃葡萄糖基)噻唑化合物的制备在一定温度(40°C)下，配制浓度为0.3g/ml的Me2NH/MeOH溶液10ml，然后加入823mg(lmmol)1-苯酰基-4-(4-硝基苯基)-3-(2,3,4,6-四-O-特戊酰基-D-吡喃葡萄糖基)噻唑搅拌4小时，TLC点板检测，以乙酸乙酯和甲醇体积比10:l的混合溶液为展开剂，反应完全后，加入2N的盐酸至pH值为7，将溶剂用旋转蒸发仪除去溶剂，得到黄色固体，加入10ml甲醇完全溶解，过滤，将滤液浓缩到固体后，干法上样，以乙酸乙酯和曱醇体积比10:l的混合溶液为洗脱剂，柱层析得到白色固体334.5mg,产率为68.7%;mp101-103。C;!H画R(CD3OD):S7.96(q,J=4.4Hz,2H)，7.54(t，J=6.2Hz,4H)，7.38(d,J=10.2Hz,1H),7.29(q,J=18.6Hz,2H),6.55(d,J=2.8Hz，1H),5.55(t,J=7.8Hz,1H),5.10—5.22(m,3H)，4.28(d,J=8.6Hz,1H),4.20(q,J=46Hz,1H)，3.89(t,J=5.6Hz，1H),"NMR(CD3OD):S189.02，1787.39,177.82，176.75，176.45,167.58,157.30,143.42，137.56,131.55,130.61,129.71，129.13，128.09,125.35,122.76,83.92,75.16,71.68,71.31，67.69，60.62.Anal.CalcdforC22H21N308S:C,53.23;H,4.88;N,8.56.Found:C,53.27;H，4.79;N,8,56实施例4:4-乙酰基-l-苯酰基-3-(D-吡喃葡萄糖基)p羞唑化合物的制备在一定温度(80°C)下，配制浓度为0.4g/ml的NaOMe/MeOH溶液10ml,然后加入758mg(lmmol)4-乙酰基-1-苯酰基-3-(2,3,4，6-四-O-特戊酰基-D-吡喃葡萄糖基)瘗唑搅拌5小时，TLC点板才企测，以乙酸乙酯和甲醇体积比10:l的混合溶液为展开剂，反应完全后，加入2N的盐酸至pH值为7，将溶剂用旋转蒸发仪除去溶剂，得到黄色固体，加入10ml甲醇完全溶解，过滤，将滤液浓缩到固体后，干法上样，以乙酸乙酯和甲醇体积比10:1的混合溶液为洗脱剂，柱层析得到白色固体316.5mg,产率为75%;mp174-177。C。&画R(CDC13):S8.28(d，J=3.6Hz,2H),7,50—7.58(m,3H),7.07(t,J=4.6Hz,1H),5.64(t,J=4.4Hz,2H)，5.38(d,J=4.8Hz，1H),4,18~4.28(m，2H)，4.06(d，J=5.2Hz,1H),3.02(s,3H)，2.49(s,3H),0.87—1.2i3(m,36H).13C画R(CDC13):5190.41，'177.67，177.03,176邻，176.03,174.51，167.82,143.38,135.57，132.30,129.34，128.27，118.38，83.29,75,61,72.26，69.22,66.46，60.64，38.63—38.82,30.51,26.65—27.05,14.10.Anal.CalcdforC39H54N20S:C,61.72;H,7.17;N，3.69.Found:C,61.76;H,7.10;N，3.77.实施例5:1-苯酰基-4-(4-曱氧基苯基)-3-(D-吡喃葡萄糖基)噻唑化合物的制备在一定温度(50°C)下，配制浓度为O.lg/ml的NH3/MeOH溶液10ml,然后加入808mg(lmmol)1-苯酰基-4-(4-曱氧基苯基)-3-(2,3，4,^四-0-特戊酰基-D-吡喃葡萄糖基)瘗唑搅拌4小时，TLC点板检测，以乙酸乙酯和甲醇体积比10:l的混合溶液为展开剂，反应完全后，加入2N的盐酸至pH值为7，将溶剂用旋转蒸发仪除去溶剂，得到黄色固体，加入10ml曱醇完全溶解，过滤，将滤液浓缩到固体后，干法上样，以乙酸乙酯和曱醇体积比10:l的混合溶液为洗脱剂，柱层析得到白色固体339.8mg，产率为72。/o;mp190-94。C。]HNMR(CDC13):58.05(q，J=11.4Hz,2H),7.97(t，J=4.2Hz，4H),7.53(d,J=6.8Hz,1H),7.50(q,J=9,6Hz,2H)，7.27(d,J=5.4Hz,1H)，5.22(t，J=11.6Hz,1H),5.19—5.22(m,3II),4.21(d，J=7.6Hz,1H),3.84(q,J=9.0Hz,3H)，0.77—1.25(m，36H)。l3CNMR(CDC13):S197.35,跳20，143.20，133.15，137.97,136.38,133.31，129.54,128,87,128.39，128.25,126.33,122.4,77.31,76.98,76.67,76.48，44.32,40,83,29.32—31.88,22.65,14.0.Anal.CalcdforC43H56N2OuS:C,63.84;H,6.98;N,3.46.Found:C,63.81;H,6.70;N,3.49生物活'性测i式对于该药物的生物学活性,发明人发现该化合物能明显抑制某些肺瘤细胞的生长。发明人以Hela细胞(人宫颈癌细胞)，BEL-7402(人肝癌细胞)，HCT-8(人结肠癌细胞)为研究对象，在该化合物的作用下观察细胞的生长情况,并用MTT法测定肺瘤细胞的增殖情况。选取具有代表性的化合物并对其进行体抗肿瘤药物筛选体外纯品筛选，分别进行Hela细胞(人宫颈癌细胞)，BEL-7402(人肝癌细胞)，HCT-8(人结肠癌细胞)测试，MTT法步骤如下细胞悬液接种96孔板90jiL/孔，细胞密度2x104个/mL丄-37°C,C02浓度5。/。的培养箱中过夜i加药加药组加10pL/孔相应浓度药物，如下表1,对照组加1OfiL/孑LPBS37°C,(302浓度5%的培养箱，培养44h力口MTT:lOjxL/孔丄37°C,C02浓度5。/。的培养箱，培养4hi从培养箱中取出，倒板，力口DMSO:100pL/孔i震摇，570nm酶标4义下测OD值<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>实验结果1.Hela细胞:Table1Hela细胞(人宫颈癌细胞)测试实验细胞名称编号IC50(呼01/1)(x±s)HI546.51±28.58HelaH2420.73±48.73H3276.50±40.662.BEL-7402细胞:Table2BEL-7402细胞(人肝癌细胞)测试实验细胞名称编号IC5o(,ol/l)(X±s)HI262.34±45.44BEL-7402H2262.94±10.88H3309.02±33.563.HCT-8细胞Table3HCT-8(人结肠癌细胞)测试实验细胞名称编号IC50(拜01/1)(;±s)HI43.66±15.76HCT-8H234.02±11.75H3101.51±25,7中阳性药Cisplatin的Hela细胞(人宫颈癌细胞)，BEL-7402(人肝癌细胞)，HCT-8(人结肠癌细胞)数据如下阳性药IC50(>mol/l)(5±s)~Bd-7402Cisplatin30.38±4.669.05±0,8020.01±1.36通过实验我们发现合成的葡萄糖基三唑类化合物和葡萄糖基噻唑类化合物具有的抗Hela细胞(人宫颈癌细胞)，BEL-7402(人肝癌细胞)，HCT-8(人结肠癌纟田胞)鲁肿瘤细胞的功能，与抑制该三类肿瘤细胞的目前通用的阳性药Cisplatin有一定的差距，但也可以反应出我们设计的葡萄糖基杂环化合物在抗肿瘤细胞方面存在抑制功能，具有一定的应用前景。权利要求1、一种如式(VII)所示的3-(D-吡喃葡萄糖基)噻唑衍生物；式(VII)中，R1为苯酰基、甲酰基或乙酰基；R2为甲基、乙基、乙酰基、氟苯基、氯苯基、碘苯基、甲氧基苯基或硝基苯基；R3为氢、甲基、乙基或苯基。2、如权利要求1所述的3-(D-吡喃葡萄糖基)噻唑衍生物，其特征在于所述的f为氟苯基、氯苯基、碘苯基、甲氧基苯基或硝基苯基。3、如权利要求1所述的3-(D-吡喃葡萄糖基)噻唑化合物，其特征在于所述的RS为氢。4、一种制备如权利要求1所述的3-(D-吡喃葡萄糖基)蓬唑衍生物的方法，其特征在于所述的方法为在质量体积浓度为0.1-0.4g/ml的碱的醇溶液中加入如式(VI)所示的3-(2,3,4,6-四-O-特戊酰基-D-吡喃葡萄糖基)噻唑衍生物，在2(TC-80。C温度下搅拌反应，TLC跟踪检测反应至反应完全，反应液分离处理得到如式(VII)所示的3-(D-吡喃葡萄糖基)瘗唑衍生物；所述的如式(VI)所示的3-(2,3，4,6-四-O-特戊酰基-D-吡喃葡萄糖基)瘗唑衍生物和石威的醇溶液中的石威的物质的量比为1:(VII)1875;<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>5、如权利要求4所述的制备方法，其特征在于所述的碱的醇溶液为下列之一KOH/EtOH溶液、MeNH2/MeOH溶液、Me2NH/MeOH溶液、NH3/MeOH溶液或NaOMe/MeOH溶液。6、如权利要求4所述的制备方法，其特征在于所述的碱的醇溶液为下列之一KOH/EtOH溶液或NaOMe/MeOH溶液。7、如权利要求4所述的制备方法，其特征在于所述的3-(2，3,4,6-四-O-特戊酰基-D-吡喃葡萄糖基)瘗唑衍生物和碱的物质的量比为1:18。8、如权利要求4所述的制备方法，其特征在于所述的反应液分离处理步骤为反应结束后，反应液力。入盐酸至pH值为6.5~8.5,减压蒸镏蒸干，剩余固体加入曱醇溶解完全，过滤，滤液浓缩到固体后，千法上样，以乙酸乙酯和甲醇体积比10:1的混合溶液为洗脱剂，柱层析分离得到如式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>(VII)所示的3-(D-吡喃葡萄糖基)漆唑化合物。9、如权利要求1所述的3-(D-吡喃葡萄糖基)瘗唑化合物在制备抗肺瘤药物中的应用。10、如权利要求9所述的应用，其特征在于所述的肺瘤为Hda细胞导致的宫颈癌、BEL-7402细胞导致的肝癌或HCT-8细胞导致的结肠癌。全文摘要本发明公开了一种如式(VII)所示的3-(D-吡喃葡萄糖基)噻唑衍生物；式(VII)中，R<sup>1</sup>为苯酰基、甲酰基或乙酰基；R<sup>2</sup>为甲基、乙基、乙酰基、氟苯基、氯苯基、碘苯基、甲氧基苯基或硝基苯基；R<sup>3</sup>为氢、甲基、乙基或苯基，并公开了3-(D-吡喃葡萄糖基)噻唑衍生物的制备方法，及其在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明的有益效果为提供一种新的具有抗癌活性的3-(D-吡喃葡萄糖基)噻唑衍生物，对HCT-8细胞有较好的抑制作用，可应用于制备抗肿瘤药物中。文档编号C07H19/24GK101613391SQ20091010089公开日2009年12月30日申请日期2009年7月18日优先权日2009年7月18日发明者章鹏飞,卿赵,辉郑申请人:杭州师范大学