专利名称：一种具有极大Stoke位移的近红外荧光探针的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种具有极大Moke位移的近红外荧光探针，可以用于肿瘤标志物， 抗体等的特异性荧光检测，属于特异性分子识别诊断试剂技术领域。
背景技术：
恶性肿瘤已经成为人类死亡的第一位原因，每年约有1000万人以上死于各种癌 症，而且随着现代工业的快速发展和生活方式的变化，肿瘤发病率、死亡率呈明显上升趋 势。在当前肿瘤临床研究中，中、晚期肿瘤治疗尚未找到有效的根治方法，但是早期肿瘤不 伴转移，容易切除，可为患者赢得较多的存活机会，因此，人们将注意力集中在肿瘤的早期 诊断和预防研究。随着分子生物标记技术的不断发展，该技术在医学领域，尤其是在恶性肿 瘤细胞的早期识别和诊断方面逐渐受到人们广泛的关注。近红外荧光探针在生物体内分子的诊断识别中起着关键的作用。因为近红外波段 (60(T800nm)的光波避开了体内水、有氧及无氧血红蛋白等主要吸收组织的最佳吸收波长， 因而具有良好的生物组织穿透能力，且对生物组织无损伤。该类染料的类型比较多，摩尔消 光系数高，具有良好的水溶性，分子量比较小(一般小于1000)，这样就不会对被标记分子的 连接与功能产生空间位阻效应。但是荧光吸收峰和发射峰的位置比较接近，其Moke位移 较小，一般在l(Tl5nm左右。小的斯托克斯位移造成的问题，一是使染料自淬灭，也称为染 料的自吸收。这是因为小斯托克斯位移的染料的吸收光谱与发射光谱有很大的交盖，这样 染料有部分发射光能被其自身吸收，从而导致荧光强度下降。另一个问题是造成荧光分析 技术的测量误差。这是因为小的斯托克斯位移使激发波长与荧光检测波长太过接近，激发 波长易对荧光检测狭缝造成散射光干扰。因而开发具有大斯托克斯位移的荧光染料有着十 分重要的意义。藻胆蛋白(Phycobiliprotein)是一类纯天然荧光物质，包括藻红蛋白 (Phycoerythrin, PE)、藻蓝蛋白(Phycocyanin, PC)、另ll 藻蓝蛋白(Al lophycocyanin, APC)和藻红蓝蛋白(I^hycoerythrocyanin，PEC)，它们具有非特异性结合的程度高，所发 荧光不为其它生物物质自发淬灭，摩尔消光系数和荧光量子产率高等优点，作为荧光探 针正被广泛应用于免疫标记与肿瘤光动力治疗等领域。但是藻胆蛋白的分子量巨大，为 17000^18000,并且稳定性比较差，当温度超过40°C即会发生变性，从而在一定程度上影响 了使用。为能克服藻胆蛋白分子量巨大，不能标记小分子物质的不足，同时利用近红外荧 光探针对肿瘤标志物检测的灵敏度，提出本发明中的具有极大Stoke位移的荧光探针。
发明内容
本发明的目的是提供一种具有极大Stoke位移的近红外荧光探针，涉及特异性分 子识别诊断试剂领域中的近红外检测荧光探针。具体地讲，本发明涉及可以用于肿瘤标志 物，抗体等的特异性荧光检测的探针材料。
本发明的技术方案一种具有极大Stoke位移的近红外荧光探针，该探针由藻胆 蛋白中的藻蓝素和近红外荧光染料偶联而成，分子结构为
COOH
权利要求
1. 一种具有极大Stoke位移的近红外荧光探针，该探针由藻胆蛋白中的藻蓝素和近红 外荧光染料偶联而成，分子结构为
2.根据权利要求1所述具有极大Stoke位移的近红外荧光探针，其特征在于藻蓝素 是开链线性延展的四吡咯化合物，由藻蓝蛋白脱除载体蛋白后获得。
3.根据权利要求1-2所述具有极大Stoke位移的近红外荧光探针，其特征在于藻蓝 蛋白由钝顶螺旋藻、极大螺旋藻、多管藻、条斑紫菜、坛紫菜或红毛紫菜中分离得到。
4.根据权利要求1-3所述具有极大Stoke位移的近红外荧光探针，其特征在于近红 外荧光染料由以下两种分子结构组成
5.根据权利要求1-4所述具有极大Stoke位移的近红外荧光探针，其特征在于近红 外荧光染料的吸收波长在60(T700nm范围内。
6.根据权利要求1-5所述具有极大Stoke位移的近红外荧光探针，其特征在于藻蓝 素中的羧基官能团活化后通过共价偶联的方式与近红外荧光染料分子结构中的氨基连接。
7.根据权利要求1-6所述具有极大Stoke位移的近红外荧光探针，其特征在于该探 针用于肿瘤标志物，抗体的特异性荧光检测。
8.根据权利要求1-7所述具有极大Stoke位移的近红外荧光探针，其特征在于肿瘤 标志物选自叶酸、低密度脂蛋白或单克隆抗体。
全文摘要
一种具有极大Stoke位移的近红外荧光探针，属于特异性分子识别诊断试剂技术领域。本发明提供了一种具有极大Stoke位移的荧光染料，该染料由藻胆蛋白中的藻蓝素和近红外荧光染料偶联而成，既具有极大的Stoke位移，达到了300nm以上，又具有分子量较小的特点，可以标记叶酸等小分子量的物质，用于肿瘤标志物，抗体等的特异性荧光检测。
文档编号C07D403/06GK102127059SQ20101060028
公开日2011年7月20日 申请日期2010年12月22日 优先权日2010年12月22日
发明者邵建辉 申请人:无锡荣兴科技有限公司