专利名称：一种提纯苦马豆素的方法
技术领域：
本发明涉及一种提纯苦马豆素的方法，特别是涉及一种超临界(X)2萃取提纯苦马豆素的方法。
背景技术：
苦马豆素化学名是1，2，8-三羟基八氢吲哚兹啶，白色针状结晶，熔点 1440C _145°C，分子式C8H15O3N,易溶于水、甲醇、乙醇、丙酮等。苦马豆素是最初从灰苦马豆中分离出来一种毒性成分，是导致动物中毒的疯草的主要成分。现代医学研究表明，苦马豆素能激活动物腹腔吞噬细胞的细胞结合活性，从而可抑制肿瘤细胞，对治疗肿瘤、感染性疾病、免疫抑制性疾病有重要意义。苦马豆素作为一种新的天然抗肿瘤药物越来越受到重视。苦马豆素的来源主要有三类一是从微生物菌丝体或发酵液中进行提取；二是化学合成；三是从植物中提取。微生物发酵和化学合成反应条件苛刻和繁琐，很难批量生产。 从植物疯草中提取，疯草包括棘豆属和黄芪属两属有毒植物，国内外均有广泛分布，原料是易得，生产成本较低。现有从植物中提纯苦马豆素方法，一般采用常规试剂提取，氯仿萃取或树脂分离， 再硅胶柱层析或升华纯化。专利(申请号02114590. 3) “疯草中苦马豆素提取的提纯工艺”公开的方法是采用阳离子交换法提取出大极性生物碱粗品，再用碱性氯仿抽提，抽提部分经硅胶柱层析分离得到苦马豆素粗品，最后分步升华获得苦马豆素纯品。专利(申请号200610104918. 3) “从甘肃棘豆中分离提取苦马豆素的工艺方法” 该方法采用逆流萃取的方法在酸性条件下用氯仿脱脂除杂，然后在碱性条件下用正丁醇逆流萃取得到总生物碱粗品。将所得总生物碱粗品经硅胶柱层析分离得到苦马豆素粗品，然后重结晶获得苦马豆素纯品。专利(申请号200810018178. 3) “一种从豆科棘豆属或黄芪属植物中提纯苦马豆素的工艺”，该专利公开的方法是先纯水超声提取，再过大孔树脂分离粗品，最后用分步升华的方法得到纯品。专利(申请号200710017M2.X) “连续柱层析法提纯苦马豆素的工艺”，该专利公开的方法是(1)疯草的预处理；(2)疯草浸膏的获取；(3)粗品制备浸膏用极性大孔吸附树脂进行粗分，TLC检测，合并含有苦马豆素的洗脱液作为粗品备用；(4)纯化苦马豆素 将上述粗品过硅胶柱层析纯化，TLC检测，GC检测，分别收集苦马豆素相对含量> 10%的部分；^HPLC检测获得苦马豆素纯品将(4)中的收集部分通过HPLC检测，收集苦马豆素出峰时间段的流出液，挥干溶剂后，重结晶即得苦马豆素纯品。如上所述，现有方法存在着工艺步骤复杂，提取效率低，污染严重等技术缺陷。
发明内容
3
本发明的目的在于克服现有技术不足，提供一种提纯苦马豆素的方法。为实现上述目的，本发明的技术解决方案如下一种提纯苦马豆素的方法，其特征在于包含以下步骤将疯草原料粉碎，过40-80 目筛，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，收集萃取物，用二氯甲烷溶解，加适量氧化铝拌样烘干，装柱，二氯甲烷-甲醇混合溶液洗脱，TLC检测，收集高浓度流分，回收试剂，去离子水溶解过滤，冷冻干燥，即得白色苦马豆素产品。所述的超临界(X)2的条件为萃取温度为35_40°C，萃取压力为18_20MPa，分离釜 I温度为50-65°C，压力为7-9MPa，分离釜II温度为40_55°C，压力为5_7MPa。所述的氧化铝为120-300目的中性氧化铝。本发明优势在于采用超临界(X)2萃取，这是一种高效环保的萃取方法，能耗低，周期短，所得提取物含量高，易于纯化，简化后续纯化工艺；而且整个工艺无废液产生，减少了对环境的污染，是一种绿色生产工艺。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式
具体实施例方式实施例1 将疯草原料粉碎，过40目筛，称取Ikg加入萃取釜中，开启机器，调节下列参数 萃取温度为40°C，萃取压力为20MPa，分离釜I温度为65°C，压力为9MPa，分离釜II温度为 55°C，压力为5MPa。参数正常后，以20kg/h的流速动态萃取2小时，解析萃取物，用二氯甲烷回流溶解，滤过，回收试剂，加适量氧化铝(120-300目的中性氧化铝)拌样烘干，装柱，二氯甲烷-甲醇03 1 混合溶液洗脱，TLC检测，收集高浓度流分，回收试剂，适量去离子水加热溶解，过滤，冷冻干燥，得白色苦马豆素产品32mg，含量98. 5%。实施例2 将疯草原料粉碎，过80目筛，称取Ikg加入萃取釜中，开启机器，调节下列参数 萃取温度为35°C，萃取压力为18MPa，分离釜I温度为55°C，压力为7MPa，分离釜II温度为 40°C，压力为5MPa。参数正常后，以25kg/h的流速动态萃取1小时，解析萃取物，用二氯甲烷回流溶解，滤过，回收试剂，加适量氧化铝(120-300目的中性氧化铝)拌样烘干，装柱，二氯甲烷-甲醇03 14)混合溶液洗脱，TLC检测，收集高浓度流分，回收试剂，适量去离子水加热溶解，过滤，冷冻干燥，得白色苦马豆素产品35mg，含量98. 3%。实施例3 将疯草原料粉碎，过60目筛，称取Ikg加入萃取釜中，开启机器，调节下列参数 萃取温度为40°C，萃取压力为18MPa，分离釜I温度为55°C，压力为8MPa，分离釜II温度为 50°C，压力为5MPa。参数正常后，以25kg/h的流速动态萃取1小时，解析萃取物，用二氯甲烷回流溶解，滤过，回收试剂，加适量氧化铝(120-300目的中性氧化铝)拌样烘干，装柱，二氯甲烷-甲醇05 19)混合溶液洗脱，TLC检测，收集高浓度流分，回收试剂，适量去离子水加热溶解，过滤，冷冻干燥，得白色苦马豆素产品3aiig，含量99. 1%。实施例4 将疯草原料粉碎，过40目筛，称取2kg加入萃取釜中，开启机器，调节下列参数萃取温度为40°C，萃取压力为19MPa，分离釜I温度为55°C，压力为8MPa，分离釜II温度为 40°C，压力为5MPa。参数正常后，以25kg/h的流速动态萃取2小时，解析萃取物，用二氯甲烷回流溶解，滤过，回收试剂，加适量氧化铝(120-300目的中性氧化铝)拌样烘干，装柱，二氯甲烷-甲醇07 21)混合溶液洗脱，TLC检测，收集高浓度流分，回收试剂，适量去离子水加热溶解，过滤，冷冻干燥，得白色苦马豆素产品68mg，含量98. 7%。
权利要求
1.一种提纯苦马豆素的方法，其特征在于包含以下步骤将疯草原料粉碎，过40-80目筛，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，收集萃取物，用二氯甲烷溶解，加适量氧化铝拌样烘干，装柱，二氯甲烷-甲醇混合溶液洗脱，TLC检测，收集高浓度流分，回收试剂，去离子水溶解过滤，冷冻干燥，即得白色苦马豆素产品。
2.如权利要求1所述提纯苦马豆素的方法，其特征在于所述的超临界CO2萃取条件为 萃取温度为35-40°C，萃取压力为18-20MPa，分离釜I温度为50-65°C，压力为7_9MPa，分离釜II温度为40-55°C，压力为5-7MPa。
3.如权利要求1所述提纯苦马豆素的方法，其特征在于所述的氧化铝为120-300目的中性氧化铝。
全文摘要
本发明涉及一种提纯苦马豆素的方法，方法是将疯草原料粉碎，过40-80目筛，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，收集萃取物，用二氯甲烷溶解，加适量氧化铝拌样烘干，装柱，二氯甲烷-甲醇混合溶液洗脱，TLC检测，收集高浓度流分，回收试剂，去离子水溶解过滤，冷冻干燥，即得白色苦马豆素产品。本发明采用超临界CO2萃取苦马豆素，提取效率高，而且无污染。
文档编号C07D471/04GK102241677SQ20111011799
公开日2011年11月16日 申请日期2011年5月6日 优先权日2011年5月6日
发明者苏刘花 申请人:南京泽朗农业发展有限公司