专利名称：一种猪毛菜碱的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种猪毛菜碱的制备方法，特别是涉及一种应用超临界(X)2萃取和高速逆流色谱制备猪毛菜碱的方法。
背景技术：
猪毛菜为藜科植物猪毛菜的全草，分布于东北、华北、西北、西南及山东、江苏、安徽、河南等地，资源丰富。猪毛菜具有平肝潜阳、润肠通便的功效，主治主高血压病、眩晕、失眠、肠燥便秘等症。猪毛菜主要含有留醇、黄酮、生物碱等多种成分。全草含猪毛菜碱(鹿尾草碱，Salsoline)、猪毛菜定碱(Salsoiidine)，地上部大经分析含豆留醇(stigmasterol)， 菜油甾醇(campesterol)，胆甾醇(cholesterol) β-谷甾醇(β-sitosterol)，还含水仙甙 (narcissin),异鼠李素(isorhamnetin),小麦黄素(tricin)等。猪毛菜碱是其主要活性成分，为酰胺类生物碱，具有抑制延髓血管运动中枢致使血压下降，对原发性和内分泌型的高血压有效。与猪毛菜定碱有毒性减较低。在动物实验中有明显的降低血压作用，其降压原理为抑制血管运动中枢，并能直接扩张血管。猪毛菜碱能加强狗大脑皮层的抑制过程。猪毛菜碱有抗利尿作用，其抗利尿作用主要由于影响了下视丘-垂体系统，重吸收增强。现有技术中，猪毛菜碱主要采用树脂柱吸附法，所得产品含量低。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种猪毛菜碱的制备方法，该方法产品收率高、
含量高。为了解决上述技术问题，本发明的技术方案如下
(1)取猪毛菜原料细粉，加入碱性醇浸润4-8小时，加入萃取釜中，采用超临界(X)2萃
取；
(2)萃取物用2-3%的盐酸水溶液溶解，过滤，滤液用氯仿萃取，取氯仿层，回收氯仿干燥得到粗品；
(3)以正己烷-氯仿-甲醇-pH=8的氨水溶液为溶剂系统，采用高速逆流色谱仪分离粗品中的猪毛菜碱，收集猪毛菜组分，浓缩、干燥即得高含量猪毛菜碱。所述步骤(1)中碱性醇为90-99%甲醇，氨水调节pH8-l 1。所述步骤(1)中超临界CO2萃取条件为萃取温度为40_55°C，萃取压力为 28-40MPa, CO2流量为2_5ml/g生药/min，萃取时间为2_4h，分离釜I温度为40_45°C，压力为5-8MPa，分离釜II温度为30-40°C，压力为4_6MPa。所述步骤(4)中正己烷-氯仿-甲醇-pH=8的氨水溶液体积为2-4 7~9 4~6 2-4。所述步骤(4)中溶剂系统上相为流动相，下相为固定相。本发明的积极效果在于1)采用超临界ω2萃取，环保无污染，效率高，能耗较低；
2)采用高速逆流色谱分离，制备量大，样品损失少，制备周期短，产品含量高。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例1
取猪毛菜原料细粉1kg，加300mlpHll的90%甲醇浸润4小时，加入萃取釜中进行超临界萃取，萃取温度为55°C，萃取压力为32MPa，CO2流量为3ml/g生药/min，萃取时间为4h， 分离釜I温度为42°C，压力为7MPa，分离釜II温度为35°C，压力为5MPa，收集解析萃取物， 用3%的盐酸水溶液溶解萃取物，过滤，滤液用氯仿萃取，取氯仿层，回收氯仿干燥得到粗品；取正己烷、氯仿、甲醇、pH=8的氨水溶液，按体积比为2 8 4 3混合，静置，分出上下相， 以下相为固定相，上相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节750rpm，取上相溶解沉淀物注入色谱仪，控制流动相流速为2ml/min，收集猪毛菜碱流分，浓缩、干燥得猪毛菜碱 202mg,经HPLC检测，含量为96. 3%。实施例2:
取猪毛菜原料细粉1kg，加400mlpH9的95%甲醇浸润8小时，加入萃取釜中进行超临界萃取，萃取温度为50°C，萃取压力为35MPa，CO2流量为％il/g生药/min，萃取时间为池，分离釜I温度为40°C，压力为8MPa，分离釜II温度为30°C，压力为6MPa，收集解析萃取物，用 3%的盐酸水溶液溶解萃取物，过滤，滤液用氯仿萃取，取氯仿层，回收氯仿干燥得到粗品； 取正己烷、氯仿、甲醇、pH=8的氨水溶液，按体积比为4 9 6 3混合，静置，分出上下相，以下相为固定相，上相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节800rpm，取上相溶解沉淀物注入色谱仪，控制流动相流速为2. 5ml/min，收集猪毛菜碱流分，浓缩、干燥得猪毛菜碱 233mg,经HPLC检测，含量为94. 6%。实施例3:
取猪毛菜原料细粉3kg，加IOOOmlpHS的99%甲醇浸润7小时，加入萃取釜中进行超临界萃取，萃取温度为45°C，萃取压力为^MPa，CO2流量为2ml/g生药/min，萃取时间为2h， 分离釜I温度为40°C，压力为6MPa，分离釜II温度为35°C，压力为5MPa，收集解析萃取物， 用3%的盐酸水溶液溶解萃取物，过滤，滤液用氯仿萃取，取氯仿层，回收氯仿干燥得到粗品；取正己烷、氯仿、甲醇、pH=8的氨水溶液，按体积比为3 8 5 4混合，静置，分出上下相， 以下相为固定相，上相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节700rpm，取上相溶解沉淀物注入色谱仪，控制流动相流速为2ml/min，收集猪毛菜碱流分，浓缩、干燥得猪毛菜碱 60 Img,经HPLC检测，含量为95. 4%。实施例4:
取猪毛菜原料细粉^g，加1. SLpHlO的99%甲醇浸润4小时，加入萃取釜中进行超临界萃取，萃取温度为55°C，萃取压力为40MPa，CO2流量为5ml/g生药/min，萃取时间为池，分离釜I温度为45°C，压力为5MPa，分离釜II温度为40°C，压力为4MPa，收集解析萃取物，用 3%的盐酸水溶液溶解萃取物，过滤，滤液用氯仿萃取，取氯仿层，回收氯仿干燥得到粗品； 取正己烷、氯仿、甲醇、pH=8的氨水溶液，按体积比为2 8 6 :4混合，静置，分出上下相，以下相为固定相，上相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节900rpm，取上相溶解沉淀物注入色谱仪，控制流动相流速为2. 5ml/min，收集猪毛菜碱流分，浓缩、干燥得猪毛菜碱 882mg,经HPLC检测，含量为91. 8%。
实施例5:
取猪毛菜原料细粉10kg，加3LpH8的95%甲醇浸润5小时，加入萃取釜中进行超临界萃取，萃取温度为40°C，萃取压力为35MPa，CO2流量为3ml/g生药/min，萃取时间为4h，分离釜I温度为40°C，压力为8MPa，分离釜II温度为30°C，压力为6MPa，收集解析萃取物，用m 的盐酸水溶液溶解萃取物，过滤，滤液用氯仿萃取，取氯仿层，回收氯仿干燥得到粗品；取正己烷、氯仿、甲醇、pH=8的氨水溶液，按体积比为3 8 6 4混合，静置，分出上下相，以下相为固定相，上相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节850rpm，取上相溶解沉淀物注入色谱仪，控制流动相流速为3ml/min，收集猪毛菜碱流分，浓缩、干燥得猪毛菜碱2. 3g， 经HPLC检测，含量为95. 9%。
权利要求
1.一种猪毛菜碱的制备方法，其特征在于包括以下步骤(1)取猪毛菜原料细粉，加入碱性醇浸润4-8小时，加入萃取釜中，采用超临界(X)2萃取；(2)萃取物用2-3%的盐酸水溶液溶解，过滤，滤液用氯仿萃取，取氯仿层，回收氯仿干燥得到粗品；(3)以正己烷-氯仿-甲醇-pH=8的氨水溶液为溶剂系统，采用高速逆流色谱仪分离粗品中的猪毛菜碱，收集猪毛菜组分，浓缩、干燥即得高含量猪毛菜碱。
2.根据权利要求1所述一种猪毛菜碱的制备方法，其特征在于所述步骤(1)中碱性醇为90-99%甲醇，氨水调节pH8-ll。
3.根据权利要求1所述一种猪毛菜碱的制备方法，其特征在于所述步骤(1)中超临界 CO2萃取条件为萃取温度为40-55°C，萃取压力为^_40MPa，CO2流量为2_5ml/g生药/min， 萃取时间为2-4h，分离釜I温度为40-45°C，压力为5-8MPa，分离釜II温度为30_40°C，压力为 4-6ΜΙ^。
4.根据权利要求1所述一种猪毛菜碱的制备方法，其特征在于所述步骤(4)中正己烷-氯仿-甲醇_ρΗ=8的氨水溶液体积为2-4 7-9 4-6 :2_4。
5.根据权利要求1所述一种猪毛菜碱的制备方法，其特征在于所述步骤(4)中溶剂系统上相为流动相，下相为固定相。
全文摘要
本发明提供了一种猪毛菜碱的制备方法。工艺步骤为取猪毛菜原料细粉，加入碱性醇浸润4-8小时，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取；萃取物用2-3%的盐酸水溶液溶解，过滤，滤液用氯仿萃取，取氯仿层，回收氯仿干燥得到粗品；以正己烷-氯仿-甲醇-pH=8的氨水溶液为溶剂系统，采用高速逆流色谱仪分离粗品中的猪毛菜碱，收集猪毛菜组分，浓缩、干燥即得高含量猪毛菜碱。本发明操作简单、污染小，采用本发明制备的猪毛菜碱，产品纯度高，易于实现产业化放大。
文档编号C07D217/02GK102276529SQ20111026485
公开日2011年12月14日 申请日期2011年9月8日 优先权日2011年9月8日
发明者万冬梅, 刘东锋 申请人:南京泽朗医药科技有限公司